醋延胡索粉直接口服中药饮片的制作方法

本发明涉及一种醋延胡索粉直接口服中药饮片，属于医药技术领域。

背景技术：

延胡索为罂粟科植物延胡索corydali5yanhusuow.t.wang的干燥块茎。夏初茎叶枯萎时采挖，除去须根，洗净，置沸水中煮至恰无白心时，取出，晒干。

延胡索是一种常见的中药材，块茎为著名的常用中药，含20多种生物碱，用于行气止痛、活血散瘀、跌打损伤等。

延胡索所含有的化学成分主要为生物碱，从块茎中共提出生物碱10余种，其中经鉴定的有紫堇碱(corydaline)、dl-四氢掌叶防己碱(dl-tetra-hydropalmatine)、原阿片碱(protopine)、l-四氢黄连碱(l-tetrahy-drocoptisine，l-stylopin)、dl-四氢黄连碱、l-四氢非洲防己碱(l-tetrahy-drocolumbamine)、紫堇鳞茎碱(corybulbine)、β-高白屈菜碱(β-homoche-lidonine)、黄连碱(coptisine)、去氢紫堇碱(de-hydrocorydaline)，还有紫堇达明碱(corydalmine即紫堇鳞茎碱)、去氢紫堇达明碱。其药理研究表明：1)镇痛作用：延胡索乙素为镇痛主要有效成分，其镇痛作用较吗啡弱但优于复方阿司匹林，对钝痛的作用优于锐痛。与吗啡等麻醉性镇痛药相比副作用少而安全，没有成瘾性。镇痛时对呼吸没有明显抑制，也无便秘等副作用。2)镇静、催眠作用：延胡索、左旋四氢巴马汀有镇静催眠作用。左旋四氢巴马汀引起的睡眠浅而易醒，并具有一定的镇吐和降低体温作用，能对抗苯丙胺的中枢兴奋作用和毒性作用。镇静催眠作用机制主要与阻滞脑内da受体的功能有关。3)抗心肌缺血：延胡索还能扩张外周血管，降低外周阻力。4)抑制胃酸分泌、抗溃疡作用5)其他药理作用：抗心律失常、保护脑缺血再灌注损伤、平滑肌松弛作用。

《中国药典》2015版一部延胡索【炮制】项下的饮片产品为醋延胡索(粉)，即取延胡索，净制，醋炙，干燥，碾成细粉，其用法为吞服(直接口服)。细粉按《中国药典》的标准为95％通过六号筛(150μm±6.6μm，即100筛目)。

醋延胡索(粉)质量标准中的“浸出物”及含量测定样品的制备，往往都是使用醇或有机溶剂，因此，所测定的结果只能反映其本身的质量，不能说明指标成分或有效成分经口服后在体内能溶出或释放“量”的真实情况，使醋延胡索(粉)作为直接口服饮片的最佳生产工艺的设计和选择缺乏科学依据，由此，醋延胡索(粉)对心血管的恢复功能和临床疗效也受到很大影响或得不到保障。

中药粉末的灭菌历来是中药制药行业中一大难题。干热、高温高压蒸汽等物理灭菌法，环氧乙烷等化学灭菌法，以及钴-60等伽马射线灭菌法均存在重大缺陷，其灭菌方式有的灭菌效果欠佳，有的对不同质地中药中所含有的不同结构类型的有效成分产生破坏和部分化学性质改变，有的留有核物质残留，有的则存在污染因素等等。

直接口服中药饮片是近年来国家有关药品法规刚刚定义的一类新型的现代中药饮片，除了《中国药典》2015版四部对直接口服饮片列有微生物限度标准外，至今仍然没有国家统一的直接口服中药饮片质量执行标准，醋延胡索(粉)产品也不例外。此外，由于每味中药所含有的不同类型结构的化学成分非常复杂，加之产地不同，品质不一样，其含量质量要求往往是以其指标成分或有效成分的含量达到某一值以上(毒性成分除外)，加上有效成分大都储存其细胞内，如此种种原因，醋延胡索(粉)作为药品，至今仍未有数据性，科学性的“有效期”。

技术实现要素：

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种醋延胡索粉直接口服中药饮片。

本发明的醋延胡索粉直接口服中药饮片，其制备工艺特征如下：

1)将延胡索原药材检验、净制、醋炙、干燥后粉碎，得到中间体；

2)检验中间体，包装后进行电子束辐照灭菌；

3)进行成品标准检验，包装后得到成品；

所述的步骤1)中，粉碎条件如下：在d级洁净区，应用吸尘式低温粉碎技术，将延胡索原药材粉碎成100目；

所述的步骤2)中，电子束辐照灭菌的照射剂量为3-10kgy。

优选地，

所述的步骤2)中，电子束辐照灭菌的照射剂量为3kgy。

本项发明是引用现代天然药物分析手段和方法，模拟人体体温37℃，对醋延胡索(粉)进行水浸实验(可较为真实地反映醋延胡索(粉)在体内溶出或释放可供吸收的成分情况)，在相同的10、30、60、90和120分钟的各时间段内，醋延胡索(粉)分别以灭菌前、灭菌后水浸出物的重量为指标，确定了『醋延胡索(粉)』的质量，以及利用快速、低温、高效、无污染、无残留和不会破坏有效成分的电子束辐照灭菌技术的最佳gmp生产工艺。同时，建立了符合现行国家相关药品标准的『醋延胡索(粉)』直接口服中药饮片的质量执行标准。本发明可使醋延胡索(粉)灭菌后产品较灭菌前产品的水浸出物重量提高10～30％，微生物限度检验结果则能完全符合相关直接口服饮片的标准，同时，通过新药加速考察实验方法，以『醋延胡索(粉)』中的延胡索乙素含量为指标，初步考察了其产品的【有效期】。

附图说明

图1为醋延胡索粉(100目，3克)灭菌前后(37±1℃)水浸出物的重量(毫克)比较；

图2为醋延胡索粉(100目，3克)灭菌前后(37±1℃)水提延胡索乙素含量(毫克)比较；

图3为醋延胡索粉(100目，3克)的加速稳定性考察；

表1为醋延胡索粉(100目，3克)灭菌前(37±1℃)水浸出物的重量(毫克)；

表2为醋延胡索粉(100目，3克)灭菌后(37±1℃)水浸出物的重量(毫克)；

表3为醋延胡索粉(100目，3克)灭菌前(37±1℃)水提延胡索乙素含量(毫克)；

表4为醋延胡索粉(100目，3克)灭菌后(37±1℃)水提延胡索乙素含量(毫克)；

表5为电子束照射剂量对100目醋延胡索(粉)的灭菌效果；

表6为醋延胡索(粉)100目微生物限度稳定性检查。

具体实施方式

本发明中，醋延胡索(粉)cuyanhusuofen说明如下：

【来源】本品为罂粟科植物延胡索corydali5yanhusuow.t.wang的干燥块茎。

【炮制】本品按延胡索【炮制】项下延胡索经净制、切制、干燥(离地)、醋炙、过筛、粉碎、干燥、包装制成的小包装醋延胡索(粉)(直接口服中药饮片)。

【成品性状】本品为绿黄色粉末。微具醋香气。

【装量差异】±7％[参照《中国药典》2015年版四部通则0115]。

【鉴别】(1)本品粉末绿黄色。糊化淀粉粒团块淡黄色或近无色。下皮厚壁细胞绿黄色，细胞多角形、类方形或长条形，壁稍弯曲，木化，有的成连珠状增厚，纹孔细密。螺纹导管直径16～32μm。

(2)取本品粉末lg，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液。再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验，吸取上述三种溶液各2～3μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶g薄层板上，以甲苯-丙酮(9:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中约3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

【检查】水分不得过15.0％。(《中国药典》2015年版四部通则0832第二法)。

总灰分不得过4.0％(《中国药典》2015年版四部通则2302)。

二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法(《中国药典》2015年版四部通则2331)测定，不得过150mg/kg。

【浸出物】照醇溶性浸出物测定法(《中国药典》2015年版四部通则2201)项下的热浸法测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于13.0％。

【含量测定】照高效液相色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1％磷酸溶液(三乙胺调ph值至6.0)(55:45)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备取延胡索乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含46μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，置平底烧瓶中，精密加入浓氨试液-甲醇(1:20)混合溶液50ml，称定重量，冷浸1小时后加热回流1小时，放冷，再称定重量，用浓氨试液-甲醇(1:20)混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过。精密吸取续滤液25ml，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，分别注入液相色谱仪，测定，即得。

本品按干燥品计算，含延胡索乙素(c21h25n04)不得少于0.040％。

微生物限度检查需氧菌总数可接受的最大菌数为10³cfu；霉菌和酵母菌总数可接受的最大菌数为10²cfu；不得检出沙门菌(10g)；耐胆盐革兰阴性菌应小于10⁴cfu(lg)。

【性味与归经】辛、苦，温。归肝、脾经。

【功能与主治】活血，行气，止痛。用于胸胁、脘腹疼痛，胸痹心痛，经闭痛经，产后瘀阻，跌扑肿痛。

【规格】每袋3克。

【用法与用量】3～10g；粉末吞服，一次1.5～3g。

【贮藏】置干燥处。防蛀。

【有效期】暂定三年。

编制依据：《中国药典》2015年版一部延胡索项下标准；

装量差异依据《中国药典》2015年版四部通则0115散剂项下标准，本品规格为每袋3克，根据散剂项下标示装量：1.5g以上至6g，装量差异限度应为±7％。

微生物限度检查依据《中国药典》2015年版四部通则1107非无菌药品微生物限度标准，非无菌药品的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法(通则1105)”检査；非无菌药品的控制菌照“非无菌产品微生物限度检査：控制菌检查法(通则1106)”检查。

实施例1

延胡索原药材120公斤，分3个实验批次(每批次40.0公斤)，按药品gmp规范，分别经净制、醋炙、干燥、粉碎(d级洁净区，应用吸尘式低温粉碎技术，分别粉碎成100目)、中间体(检验)、定量包装(3克/袋，d级洁净区)、电子束辐照灭菌(每批次剩下定量包装的30％不进行灭菌工序)，所得到的产品(供试品)供本发明的醋延胡索(粉)最佳gmp生产工艺及其质量标准实验研究用。

1﹑『醋延胡索(粉)』直接口服中药饮片产品的生产工艺：

电子束辐照灭菌工艺

电子束辐照灭菌技术已非常成熟，用电子加速器产生的高能电子束照射可使一些物质产生物理、化学和生物学效应，并能有效地杀灭病菌、病毒和害虫。这一技术已被广泛应用于工业生产中的材料改性、新材料制作、环境保护、加工生产、医疗卫生用品灭菌消毒和食品灭菌保鲜等。它同钴源辐照一样，具有常温、无损伤、无残毒、环保、低能耗、运行操作简便、自动化程度高、适宜于大规模工业化生产等特点。与钴源相比，其最大优点是辐照束流集中定向，能源利用充分，辐照效率高，不产生放射性废物。电子加速器辐照装置具有明显的价格和经济优势。为指导和规范辐照技术在中药灭菌中的正确应用，保证中药药品的安全、有效、质量稳定，国家食品药品监督管理总局于2015年11月制定了《中药辐照灭菌技术指导原则》，对中药辐照灭菌应进行中药个体的和针对性的辐照前后的对比研究，包括所含成分种类或含量的变化情况的对比研究等等。基于上述指导原则，本项发明对醋延胡索(粉)电子束辐照灭菌的照射剂量、灭菌效果、水浸出物重量、延胡索乙素含量的变化进行了详细的考察研究。

①电子束辐照灭菌的照射剂量及灭菌效果:

分别使用3、5、10kgy的照射剂量对100目的醋延胡索(粉)(3克/袋)进行照射，并进行照射前后灭菌效果考察(见表5)。

结果表明，本项发明引用不同辐照剂量即3、5、10kgy的电子束照射剂量完全能达到《中国药典》2015版四部对直接口服饮片的微生物限度标准。为减少辐照对醋延胡索(粉)所含成分种类及含量变化可能造成的影响，根据本项发明灭菌数据表明并确定醋延胡索(粉)的电子束辐照灭菌的最佳制备工艺辐照剂量为3kgy。

②电子束辐照灭菌对醋延胡索(粉)水浸出物量及延胡索乙素含量的影响：

高能电子束辐照可使一些生物细胞体产生物理、化学和生物学效应，尤其是能使细胞壁产生留痕或破碎，促进细胞内容物溶出。

按《中国药典》2015年版一部延胡索项下含量测定方法，测定100目的醋延胡索(粉)(3克)电子束辐照灭菌前后水浸出物量(毫克)及水浸出物中延胡索乙素的溶出量(毫克)，本发明考察了电子束辐照灭菌对醋延胡索(粉)水浸出物量及延胡索乙素溶出量的影响(见表1-4，图1-2)。结果显示，应用本发明的电子束辐照(3kgy照射剂量)灭菌工艺，可显著提高相应的醋延胡索(粉)的水浸出物量及延胡索乙素溶出量。

③电子束辐照灭菌对醋延胡索(粉)有效期的影响：

为考察电子束辐照灭菌对醋延胡索(粉)所含成分种类或含量的变化、质量的长期稳定性等与产品的有效期有关因素的影响，本发明应用新药的加速稳定性的研究方法，在40±2℃温度及65％相对湿度的环境中存放9个月，每个月按质量标准中的含量测定方法，测定延胡索中的延胡索乙素的含量，同时，选择不同月份，依直接口服饮片微生物限度检查方法对醋延胡索(粉)微生物限度进行检验，测定结果说明(见表6)，电子束辐照灭菌工艺对『醋延胡索(粉)』产品的长期稳定性没有影响，应用本发明gmp生产工艺的生产的『醋延胡索(粉)』直接口服饮片产品的有效期可达10年。

2﹑『醋延胡索(粉)』直接口服中药饮片质量标准：

本发明旨在建立高于《中国药典》2015版一部延胡索项下、《中国药典》2015版四部相关直接口服中药饮片标准、有效期的『醋延胡索(粉)』直接口服中药饮片质量执行标准，以确保『醋延胡索(粉)』直接口服中药饮片质量。

在《中国药典》2015版一部延胡索项下的质量执行标准为普通饮片标准，依照该项下标准、《中国药典》2015版四部直接口服饮片微生物限度检查标准以及相关标准，制定了完全符合现行国家有关直接口服饮片药品标准的『醋延胡索(粉)』直接口服中药饮片的质量执行标准。

按『醋延胡索(粉)』直接口服中药饮片质量标准各项下要求，检验连续生产的三个批次的『醋延胡索(粉)』产品，均应符合规定。

表1、醋延胡索(粉)(100目，3克)灭菌前(37±1℃)水浸出物的重量(毫克)

表2、醋延胡索(粉)(100目，3克)灭菌后(37±1℃)水浸出物的重量(毫克)

表3、醋延胡索(粉)(100目，3克)灭菌前(37±1℃)水提延胡索乙素含量(毫克)

表4、醋延胡索(粉)(100目，3克)灭菌后(37±1℃)水提延胡索乙素含量(毫克)

表5、电子束照射剂量对100目的醋延胡索(粉)的灭菌效果

表6、醋延胡索(粉)100目微生物限度稳定性检查