一种提高免疫力、抗疲劳的中药组合物，参果片的制备方法与流程

本发明涉及中医药领域，具体而言，涉及一种提高人体免疫力、抗疲劳的中药组合物及参果片的制备方法。

背景技术：

随着社会的高速发展，人们工作、生活节奏越来越快，慢性疲劳综合征(chronicfatiguesyndrome,cfs)已经成为非常普遍的都市病症。cfs的发病率是aids的25倍，全球人口约35％患病，是一种较为普遍的公共健康问题。cfs使人们处于亚健康状态，严重影响人们的工作、学习和生活。根据1988年美国疾病控制中心的定义：cfs是以极度疲劳持续6个月以上，同时伴有注意力不集中、睡眠障碍、肌痛、头痛、抑郁等神经精神系统症状为特征的临床综合征。国外对cfs的关注和研究较多，但在国内仍未引起应有的重视。cfs发病机制复杂，病因尚不明确，学术界认为该病与心理应激、病毒感染、能源耗竭、免疫功能失调等因素有关。

中草药在我国有数千年的应用历史，其疗效在国内外均得到认可。将中草药的有效成分开发为具有一定功能的保健食品，是我国保健产业得天独厚的优势。目前市面上的用于增强机体免疫力、抗疲劳的保健品种类繁多，但作用效果参差不齐。抗疲劳提神方面，首选的是人参制品，西洋参、人参等中药具有抗疲劳、保健作用已普遍被人们认识，但单纯的参类制剂作用单一、价格高昂，适用人群范围小，实际抗疲劳效果不够理想。

有鉴于此，特提出本发明。

技术实现要素：

本发明的第一目的在于提供一种提高免疫力、抗疲劳的中药组合物，所述的中药组合物具有抗疲劳效果好，无明显的毒副反应等优点。

以重量份计，本发明的中药组合物包括如下组份：人参果2～4份、黄芪1～6份、茯苓1～7份以及白术0.5～3.5份。

通过以人参果、黄芪、茯苓和白术为主要中药材，通过相互的协同增效作用，以期提高抗病能力，增强免疫效果，缓解体力疲劳。

本发明的第二目的在于提供制备本发明中药组合物的方法。

在一种实施方式中，将各组分的原料粉碎，混合在一起。

在一种实施方式中，本发明还提供了上述中药组合物的片剂，即一种参果片的制备方法，包括以下步骤：

(a)将各组分的原料用水煎煮，得到煎液；

(b)用所述煎液制备片剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)药效好，纯中药配方，无明显的毒副反应；

(2)以中药制剂形式用药，服用方便，效果好；

(3)能有效提升免疫力，抗疲劳作用显著作用。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明实施例5制备得到的参果片对淋巴细胞增殖作用的影响；

图2为本发明实施例5制备得到的参果片对小鼠腹腔巨噬细胞释放no能力的影响。

具体实施方式

本发明一方面涉及提高免疫力、抗疲劳的中药组合物，由以下原料制成：人参果、黄芪、茯苓以及白术。

以重量份计，包括如下组份：

人参果2～4份、黄芪1～6份、茯苓1～7份以及白术0.5～3.5份

优选地，以重量份计，包括如下组份：

人参果2.5～3.5份、黄芪2～5份、茯苓2～6份以及白术1～3份。

优选地，以重量份计，包括如下组份：

人参果3份、黄芪3～4份、茯苓3～5份以及白术1.5～2.5份。

一、原料(组分)

(1)人参果

人参果又名人参子，是五加科植物人参(panaxginsengc.a.meyer)的果实，也是人参的重要组成部分，可单独入药，能够作为保健食品等产品的材料使用。据《本草纲目拾遗》记载，人参果具有疏表透疹的功效，可用于治疗气血不足、痘发不畅等症。现代医学研究表明人参果具有降血糖、抗衰老、免疫调节等功能。皂苷和多糖是其有效活性成分。人参果的抗疲劳活性已经被证实，并已有相关保健食品通过国家药监局审批，如赋尔康牌人参果胶囊、中科牌人参果胶囊等。

人参果的量可以为2～4重量份，优选2.5～3.5重量份，更优选3重量份。

(2)黄芪

黄芪是一类补虚的常用中药，味甘性温，具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、生津养血的功效。可用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷等症。

黄芪的量可以为1～6重量份，优选2～5重量份，更优选3～4重量份。

(3)茯苓

茯苓为多孔菌科真菌茯苓(poriacocos(schw.)wolf)的干燥菌核，多寄生于松科植物赤松或马尾松等树根上。野生或栽培，主产于云南、湖北、四川等地。茯苓味甘、淡，性平，用于水肿尿少，痰饮眩悸，具有利水渗湿，健脾宁心的功效。可用于水肿尿少，痰饮眩悸，脾虚食少，心神不安，惊悸失眠等症。

茯苓的量可以为1～7重量份，优选2～6重量份，更优选3～5重量份。

(4)白术

白术具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎等功效。可用于脾虚食少，腹胀泄泻，水肿，自汗等症。

白术的量可以为0.5～3.5重量份，优选1～3重量份，更优选1.5～2.5重量份。

本发明的中药组合物可以进一步包括普助药，例如辅料。

所述辅料为常规添加剂，如乳糖、白糖、蜂蜜等。

上述原料可以商购，也可以根据本领域的常规方法制备。

二、形式和剂型

在一种实施方式中，本发明的中药组合物为简单混合物。制备过程为将各药材(原料)简单混合即可，这种简单混合物适于煎服。

在另一种实施方式中，本发明的中药组合物还可以做成中成药的形式。中成药的剂型包括但不限于丸剂、散剂、膏剂、片剂、颗粒剂(冲剂)、锭剂、胶囊剂、水剂、酊剂。

三、制备方法

1、简单混合物的制备

可以将上述原料简单混合在一起，从而制备本发明的简单混合物。

在一种实施方式中，制备该中药组合物的方法包括以下步骤：将各组分的原料粉碎，混合在一起。

2、中成药的制备

在一种实施方式中，制备本发明中药组合物的方法包括以下步骤：

(a)将各组分的原料用水煎煮，得到煎液；

(b)用所述煎液制备所需剂型。

剂型可以是上述剂型，例如丸剂、散剂、膏剂、片剂、颗粒剂(冲剂)、锭剂、胶囊剂、水剂或酊剂。

本发明还提供了包含上述组合物的片剂，即一种参果片的制备方法，包括以下步骤：

(a)将各组分的原料用水煎煮，得到煎液；

(b)用所述煎液制备片剂。

优选的，如上所述的制备方法，在步骤(a)中，所述用水煎煮具体包括：

浸泡3～5小时，80℃～100℃加热提取1.5～2.5h，3～5层60～100目纱布过滤；将滤渣继续80℃～100℃加热提取1.5～2.5h，过滤后，合并两次所得滤液得到所述煎液。

优选的，如上所述的制备方法，在步骤(b)中，用所述煎液制备片剂的操作具体包括：

将所述煎液减压浓缩得到浓缩液后，制粒、压片；

所述人参果、黄芪、茯苓以及白术的总质量与所述液浓缩的体积比为1kg：0.1～0.3l。

优选的，如上所述的制备方法，在得到所述浓缩液后、进行所述制粒之前还包括：

每0.1～0.3l浓缩液中加入乳糖1～2kg。

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

实施例1(水剂)

人参果20g、黄芪10g、茯苓70g以及白术35g。

加入1.2升饮用水煲沸50分钟，浓缩至100ml，即得水剂。

实施例2(浓缩丸)

人参果40g、黄芪50g、茯苓20g以及白术10g。

加入1.5升饮用水煲沸60分钟，然后浓缩至膏状，制作成丸。

实施例3(煎膏剂)

人参果25g、黄芪20g、茯苓50g以及白术15g。

加入1.2升饮用水煲沸60分钟，然后浓缩，加入白糖，制得煎膏剂。

实施例4

本实施例提供了一种含有人参果的片剂的制备方法(参果片)：

清洗：按人参果与黄芪、茯苓、白术的质量比为2：5：6：1，挑选原料，清洗。

提取：清洗后的原料，蒸馏水浸泡5小时，80℃～00℃加热提取2.5h，四层60目纱布过滤，滤渣继续加热提取2.5h，过滤后，合并两次所得滤液。

浓缩：提取液70℃减压浓缩，原料质量与提取液浓缩体积比为1kg：0.3l。

制粒：向浓缩液中加入乳糖，每0.3l提取液加乳糖2kg，颗粒机制粒。颗粒于50-80℃烘干。

压片：将颗粒至于压片机进行压片。所得成品为原形片剂，片重0.33g±0.2g。

包装：制好的片剂装入包装瓶中，贴好标签，密封干燥保存。

实施例5

本实施例提供了一种含有人参果的片剂的制备方法(参果片)：

清洗：按人参果与黄芪、茯苓、白术的质量比为3：4：5：2，挑选原料，清洗。

提取：清洗后的原料，蒸馏水浸泡4小时，80℃～00℃加热提取2h，四层80目纱布过滤，滤渣继续加热提取2h，过滤后，合并两次所得滤液。

浓缩：提取液60℃减压浓缩，原料质量与提取液浓缩体积比为1kg：0.2l。

制粒：向浓缩液中加入乳糖，每0.2l提取液加乳糖1kg，颗粒机制粒。颗粒于50-80℃烘干。

压片：将颗粒至于压片机进行压片。所得成品为原形片剂，片重0.33g±0.2g。

包装：制好的片剂装入包装瓶中，贴好标签，密封干燥保存。

实验例1

抗疲劳活性：强迫游泳实验建立疲劳模型。操作方法为：每天10:00am～3:00pm，将小鼠单独放入盛有23-25℃，10cm高的水的塑料圆柱体(高25cm，直径10cm)中。每只小鼠被迫在水中6min，当小鼠终止挣扎，保持漂浮的状态(或仅有微小的动作以保持头部露出水面)则被认为是固定不动。总测试时间6min，前2min为适应期，后4min记录固定不动时间。每天给药后30min进行实验，连续15天，手动双盲法记录小鼠的固定不动时间和游泳时间。每只小鼠游泳结束后更换容器中的水。实验动物分组：将雄性icr小鼠随机分组，每组20只。分别为生理盐水组(强迫游泳同时给予生理盐水组)、给样组(强迫游泳同时给实施例4及实施例5制备得到的参果片组)、对照组。

对照组给人参片，制备方法同实施例5，区别仅在于材料的组成及配比为按人参与黄芪、茯苓、白术的质量比为6.8：4：5：2；其中，人参的含量按照人参果中人参总皂甙的含量检测后进行换算得到(果肉中人参皂甙的含量比根部高得多)。对照组给药剂量为1g/kg/天，每天2次。给样组给药剂量为1g/kg/天，每天2次，每天固定时间进行强迫游泳实验，记录小鼠固定不动时间和游泳时间。结果表明，参果片能够显著降低疲劳小鼠的固定不动时间，与对照组相比具有显著差异。因此，参果片具有显著的缓解体力疲劳的功效。

表1小鼠强迫游泳实验固定不动时间统计表

实验例3

免疫活性：

(1)参果片小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

将小鼠随机分为2组，每组10只，分别为阴性对照组、参果片0.5g/kg和1g/kg组(实施例5制备得到)。对照组给予正常饮用水，实验组进行灌胃给药，每天2次，连续给药10天。末次给药的第二天，小鼠颈椎脱臼处死，75％酒精中浸泡消毒2min。在消毒通风的超净台中，用剪刀、镊子剔除小鼠的结缔组织和脂肪组织，无菌取出小鼠脾脏，置于含有5ml淋巴细胞分离液的的培养皿中。磨碎脾脏，过滤。收集单核脾细胞层，10％的nbcs-rpmi-1640(完全培养基)重悬脾单核细胞，显微镜下观察计数，rpmi-1640培养液调整细胞浓度到5×10⁶个/ml。

参果片实验组分别加入100μl10％nbcs-rpmi-1640完全培养基，丝裂原诱导组分别加入100μlt细胞丝裂原cona(终浓度5μg/ml)和100μlb细胞丝裂原lps(终浓度10μg/ml)。各实验孔终体积均为200μl，设3个复孔。将细胞培养板置于co2(浓度5％)恒温培养箱，37℃条件下培养44h。每孔加入20μl5mg/mlmtt溶液，继续恒温培养4h。使用灭菌后的移液器吸取并弃掉上清，加入150μldmso终止反应，静置避光10min。使用酶标仪在波长570nm处检测并记录吸光值。

(2)参果片对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

连续灌胃给药10天的小鼠，颈椎脱臼处死，无菌条件下打开腹腔并冲洗，收集腹腔液离心，rpmi-1640培养基重悬细胞。计算并调整细胞浓度至5×106个/ml，1ml/孔加入6孔板中。将培养板置于5％co2恒温培养箱37℃条件下培养4h，除去未贴壁或贴壁性不好的巨噬细胞，余下的即为纯化的贴壁巨噬细胞。

巨噬细胞吞噬中性红能力的检测：使用pbs配制浓度为0.075％的中性红溶液，过滤，除菌。向纯化的贴壁巨噬细胞中加入中性红溶液(100μl/孔)，培养1-2h。清洗培养板，加入100μl细胞裂解液(乙醇：乙酸＝1:1，v/v)，2h后，酶标仪检测波长为550nm时反应液的吸光值。

(3)参果片对小鼠腹腔巨噬细胞生成no的影响

亚硝酸盐含量标准曲线的制作：配置1mm/lnano2原液，按梯度浓度倍比稀释，分别配成0～100μm/l的nano2标准溶液。取100μl稀释液加入96孔细胞培养板中，设置3复孔重复实验，再向每孔依次加入等体积的griess试剂。避光反应10min，酶标仪检测540nm波长处的吸光值。以nano2的浓度为横坐标，540nm处吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。

小鼠腹腔巨噬细胞的制备方法同上。将巨噬细胞以1×10⁶个/孔的浓度加入到24孔板中。将细胞培养板置于5％co2、37℃恒温培养箱中培养48h，将细胞培养上清(100μl)转移到96孔培养板中，加入等体积的griess试剂后，避光反应10min。酶标仪检测540nm波长时的吸光值。根据吸光值和标准曲线来计算样品刺激孔所对应的no含量。

结果：

不同浓度的参果片对小鼠体内淋巴细胞增殖能力的影响结果如图1所示：给药浓度为0.5g/kg时，参果片能够显著刺激小鼠淋巴细胞的增殖，能够显著促进cona诱导的t淋巴细胞的增殖，对b淋巴细胞增殖没有影响；当给药浓度为1g/kg时，能够非常显著地刺激淋巴细胞增殖和t淋巴细胞增殖，也能显著促进b淋巴细胞增殖。

如图2所示，当给药量达到1g/kg时，参果片能够显著促进no的释放能力。

综合以上实验结果，分析得出以下结论：参果片具有一定的增强免疫力的作用，能够促进淋巴细胞增殖和巨噬细胞释放no的能力。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，但本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。