本发明涉及猪疫药物
技术领域：
，尤其涉及一种用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液及其制备方法。
背景技术：
：皖北猪黑猪生产历史悠久，是安徽省优良地方品种之一，主要分布在阜阳，颍上县、亳州等是黄淮海黑猪(淮猪)的一个重要分支。皖北猪属肉脂兼用型品种，是黄淮海黑猪的一个类群，是华北型淮猪在淮北平原地区的一个重要分支。皖北猪主要特征是体型中等，偏于肉用型，全身被毛黑色，身腰较长，嘴筒长直，鼻吻特别发达，肉质好，肌纤维细、肌间脂肪沉积能力强，具有适应性强、耐粗饲、抗逆性和抗病性强、繁殖力高、母性好、胴体及肉品质好、耐高温、高湿和高寒天气等优点。在影响皖北黑猪生产的诸多疾病中，仔猪黄痢是重要的疫病之一，其是由大肠杆菌引起的多发性传染病，会导致病猪生长停滞或死亡，给养猪业带来巨大的经济损失。目前，临床上常用抗生素进行治疗，虽然具有一定的疗效，但存在易产生耐药性及畜产品药物残留等问题，不仅影响到治疗效果，而且还危害人类健康。近年来，中药因来源广泛、成本低廉、毒副作用小、不易产生耐药性等优点在兽医临床上受到重视，利用中药来代替抗生素的研究越来越受到关注。王俊丽等人对18种中药采用试管二倍稀释法和管碟法分别对猪致病性大肠杆菌进行体外抑菌活性研究，以便更加准确地筛选抑菌活性强的中草药，为其临床用药提供参考，也为后续研制开发中草药复方制剂提供依据。技术实现要素：基于
背景技术：
存在的技术问题，本发明提出了一种用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液及其制备方法，制备的注射液能够有效治疗仔猪黄痢，治愈率高且安全无毒副作用，促进仔猪康复。本发明提出的一种用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液，包括以下重量份的原料：大黄20-30份、蒲公英15-25份、艾草15-25份、乌梅7-15份、半枝莲20-30份、白术15-25份、蛇莓7-15份、五倍子10-20份。优选的，包括以下重量份的原料：大黄25-30份、蒲公英18-22份、艾草20-25份、乌梅9-13份、半枝莲22-26份、白术20-25份、蛇莓8-12份、五倍子12-17份。本发明还提出了上述用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液的制备方法，包括以下步骤：原料粉碎、醇提、醇沉、水沉、脱色、配制注射液。优选的，包括以下步骤：s1、粉碎：将大黄、蒲公英、艾草、乌梅、半枝莲、白术、蛇莓、五倍子进行粉碎，过筛，得粗粉；s2、醇提：向粗粉中加入60-70％乙醇溶液回流提取，得提取液；s3、浓缩：将提取液旋转蒸发浓缩，得浓缩液a；s4、醇沉：向浓缩液中加入90-95％乙醇溶液，搅拌，静置5-10h，过滤，得醇沉滤液，将醇沉滤液旋转蒸发浓缩，得浓缩液b；s5、水沉：向浓缩液b中加入去离子水，搅拌，冷藏，静置10-15h，离心，取上清液；s6、脱色：向上清液中加入活性炭，搅拌，静置3-5h，过滤，得脱色液；s7、配液：向脱色液中加入氯化钠注射液溶解，同时加入抗氧化剂和抑菌剂，抽滤，调节ph至6.0-6.5，加水定容，振荡混匀，无菌分装，灭菌，即得注射液。优选的，所述s1中，过40-60目筛。优选的，所述s2中，料液比(g/ml)为1：4-8，提取2-3次，每次提取时间为2-3h，每次提取完成后提取液用纱布进行过滤，合并提取液。优选的，所述s3中，将提取液旋转蒸发浓缩成干物质含量为500-550mg/g的浓缩液a。优选的，所述s4中，向浓缩液中加入1-2倍质量的90-95％乙醇溶液，搅拌，静置5-10h，过滤，得醇沉滤液，将醇沉滤液旋转蒸发浓缩成干物质含量为500-550mg/g的浓缩液b。优选的，所述s5中，向浓缩液b中加入3-6倍质量的去离子水。优选的，所述s7中，注射液中干物质含量为20mg/g。本发明中各中药的功效如下：大黄：性寒，味苦，归脾经、胃经、大肠经、肝经、心包经，具有泻热通便、凉血解毒、逐瘀通经的功效，现代药理学表明，大黄具有明显的抗菌作用，其成分中含有2-4％的蒽醌衍生物，包括大黄酸、大黄酚、大黄素和芦荟大黄素，这些蒽醌衍生物对某些细菌的核酸和蛋白质的合成有明显的抑制作用，从而具有较强的抗菌作用，体外试验最敏感的细菌为葡萄球菌、链球菌、其次为白喉杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、肺炎双球菌、痢疾杆菌等。蒲公英：性寒，味苦、甘，归肝经、胃经，具有清热解毒，利尿散结的功效，其主要成分含含蒲公英甾醇、胆碱、菊糖、果胶、蒲公英固醇、蒲公英素、蒲公英赛醇、咖啡酸等成分，临床认为蒲公英有健胃和轻泻作用，注射液在试管内对金黄色葡萄球菌耐药菌株、溶血性链球菌有较强的杀菌作用，对肺炎双球菌、脑膜炎球菌、白喉杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌及卡他球菌亦有一定的杀菌作用艾草：性温，味苦、辛，归肝经、脾经、肾经，具有散寒止痛、温经止血的功效，现代药理学表明，艾叶具有抗菌作用，其在体外对炭疽杆菌、α-溶血链球菌、b-溶血链球菌、白喉杆菌、假白喉杆菌、肺类双球菌、金黄色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌、白色葡葡球菌、枯草杆菌等10种革兰氏阳性嗜气菌皆有抗菌作用，艾叶油4×10(-3)浓度(试管法)，对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、甲型链球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、福氏痢疾杆菌等有抑菌作用。乌梅：性平，味酸、涩，归肝经、脾经、肺经、大肠经，具有敛肺、涩肠、生津的功效，对多种致病菌有抗菌作用，能抑制痢疾杆菌等肠道致病菌和乙种溶血性链球菌。半枝莲：味辛、苦，性寒，归肺经、肝经、肾经，具有清热解毒、活血化瘀、利尿的功效，有抗菌、增强免疫功能的作用，其50％煎剂用平板挖沟法，对金黄色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌、大肠杆菌有抑制作用白术：性温，味甘、苦，归脾经、胃经，具有健脾、益气、燥湿利水、止汗的功效，用治脾胃气弱、不思饮食、倦怠少气、虚胀、泄泻、痰饮、水肿、黄疸、湿痹、小便不利、头晕、自汗、胎气不安等，有明显且持久的抗利尿作用，对胃肠系统有双向调节作用，还有解痉、保肝、抗菌等药理作用，还能够促进肠胃蠕动、利胆、抗氧化、降血糖、抗凝血、抗菌、扩张血管、抑制心脏、镇静等作用。蛇莓：性寒，味甘、苦，归肝经、肺经、大肠经，具有清热、凉血、消肿、解毒的功效，药理研究表明，其具有抗癌作用，并能增强免疫力，尚具有抗菌作用；对心血管系统具有短暂的降压作用，并跟剂量有关；对平滑肌具有一定的影响，有部分雄激素样和组胺样作用。五倍子：性寒，味酸、涩，归肺经、大肠经、肾经，具有敛肺降火，涩肠止泻，敛肺，止血，收湿敛疮的功效，五倍子100％煎剂用平板打洞法，对绿脓杆菌、痢疾杆菌、变形杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、肠炎杆菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型链球菌及肺炎球菌均有抑制作用，其抑菌作用是由于鞣酸对蛋白有凝固作用。有益效果：本发明中各原料药物相互配伍，起到清热解毒、消炎利尿、解毒散结的作用，对大肠杆菌、痢疾杆菌有抑菌作用，从根本上抑制病原菌，帮助体内毒素和肠毒素排出，抗腹泻，提高仔猪的抵抗力，有效治疗仔猪黄痢，治愈率高且安全无毒副作用，促进仔猪康复。具体实施方式下面，通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。实施例1本发明提出的一种用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液，包括以下重量份的原料：大黄20份、蒲公英25份、艾草15份、乌梅15份、半枝莲20份、白术25份、蛇莓7份、五倍子20份。本发明还提出了上述用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液的制备方法，包括以下步骤：原料粉碎、醇提、醇沉、水沉、脱色、配制注射液。实施例2本发明提出的一种用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液，包括以下重量份的原料：大黄22份、蒲公英17份、艾草22份、乌梅8份、半枝莲22份、白术17份、蛇莓10份、五倍子15份。本发明还提出了上述用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液的制备方法，包括以下步骤：s1、粉碎：将大黄、蒲公英、艾草、乌梅、半枝莲、白术、蛇莓、五倍子进行粉碎，过筛，得粗粉；s2、醇提：向粗粉中加入60％乙醇溶液回流提取，得提取液；s3、浓缩：将提取液旋转蒸发浓缩，得浓缩液a；s4、醇沉：向浓缩液中加入90％乙醇溶液，搅拌，静置5h，过滤，得醇沉滤液，将醇沉滤液旋转蒸发浓缩，得浓缩液b；s5、水沉：向浓缩液b中加入去离子水，搅拌，冷藏，静置10h，离心，取上清液；s6、脱色：向上清液中加入活性炭，搅拌，静置3h，过滤，得脱色液；s7、配液：向脱色液中加入氯化钠注射液溶解，同时加入抗氧化剂和抑菌剂，抽滤，调节ph至6.0，加水定容，振荡混匀，无菌分装，灭菌，即得注射液。实施例3本发明提出的一种用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液，包括以下重量份的原料：大黄28份、蒲公英20份、艾草22份、乌梅11份、半枝莲24份、白术22份、蛇莓10份、五倍子15份。本发明还提出了上述用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液的制备方法，包括以下步骤：s1、粉碎：将大黄、蒲公英、艾草、乌梅、半枝莲、白术、蛇莓、五倍子进行粉碎，过40目筛，得粗粉；s2、醇提：向粗粉中加入60％乙醇溶液回流提取，料液比(g/ml)为1：4，提取2次，每次提取时间为2h，每次提取完成后提取液用纱布进行过滤，合并提取液；s3、浓缩：将提取液旋转蒸发浓缩成干物质含量为500mg/g的浓缩液a；s4、醇沉：向浓缩液中加入1倍质量的90％乙醇溶液，搅拌，静置5h，过滤，得醇沉滤液，将醇沉滤液旋转蒸发浓缩成干物质含量为500mg/g的浓缩液b；s5、水沉：向浓缩液b中加入3倍质量的去离子水，搅拌，冷藏，静置10h，离心，取上清液；s6、脱色：向上清液中加入活性炭，搅拌，静置3h，过滤，得脱色液；s7、配液：向脱色液中加入氯化钠注射液溶解，同时加入抗氧化剂和抑菌剂，抽滤，调节ph至6.0，加水定容，振荡混匀，无菌分装，灭菌，即得注射液，控制注射液中干物质含量为20mg/g。实施例4本发明提出的一种用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液，包括以下重量份的原料：大黄25份、蒲公英22份、艾草20份、乌梅13份、半枝莲22份、白术25份、蛇莓8份、五倍子16份。本发明还提出了上述用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液的制备方法，包括以下步骤：s1、粉碎：将大黄、蒲公英、艾草、乌梅、半枝莲、白术、蛇莓、五倍子进行粉碎，过50目筛，得粗粉；s2、醇提：向粗粉中加入65％乙醇溶液回流提取，料液比(g/ml)为1：6，提取2次，每次提取时间为2.5h，每次提取完成后提取液用纱布进行过滤，合并提取液；s3、浓缩：将提取液旋转蒸发浓缩成干物质含量为520mg/g的浓缩液a；s4、醇沉：向浓缩液中加入1.5倍质量的92％乙醇溶液，搅拌，静置8h，过滤，得醇沉滤液，将醇沉滤液旋转蒸发浓缩成干物质含量为530mg/g的浓缩液b；s5、水沉：向浓缩液b中加入5倍质量的去离子水，搅拌，冷藏，静置12h，离心，取上清液；s6、脱色：向上清液中加入活性炭，搅拌，静置4h，过滤，得脱色液；s7、配液：向脱色液中加入氯化钠注射液溶解，同时加入抗氧化剂和抑菌剂，抽滤，调节ph至6.0，加水定容，振荡混匀，无菌分装，灭菌，即得注射液，控制注射液中干物质含量为20mg/g。实施例5本发明提出的一种用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液，包括以下重量份的原料：大黄30份、蒲公英15份、艾草25份、乌梅7份、半枝莲30份、白术15份、蛇莓15份、五倍子10份。本发明还提出了上述用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液的制备方法，包括以下步骤：包括以下步骤：s1、粉碎：将大黄、蒲公英、艾草、乌梅、半枝莲、白术、蛇莓、五倍子进行粉碎，过60目筛，得粗粉；s2、醇提：向粗粉中加入70％乙醇溶液回流提取，料液比(g/ml)为1：8，提取3次，每次提取时间为3h，每次提取完成后提取液用纱布进行过滤，合并提取液；s3、浓缩：将提取液旋转蒸发浓缩成干物质含量为550mg/g的浓缩液a；s4、醇沉：向浓缩液中加入2倍质量的95％乙醇溶液，搅拌，静置10h，过滤，得醇沉滤液，将醇沉滤液旋转蒸发浓缩成干物质含量为550mg/g的浓缩液b；s5、水沉：向浓缩液b中加入6倍质量的去离子水，搅拌，冷藏，静置15h，离心，取上清液；s6、脱色：向上清液中加入活性炭，搅拌，静置5h，过滤，得脱色液；s7、配液：向脱色液中加入氯化钠注射液溶解，同时加入抗氧化剂和抑菌剂，抽滤，调节ph至6.5，加水定容，振荡混匀，无菌分装，灭菌，即得注射液，控制注射液中干物质含量为20mg/g。对本发明实施例制备的用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液进行理化性能检测。1、抑菌性试验对本发明实施例1-5制备的用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液进行平板抗菌试验，均出现抑菌圈，且实施例3中的抑菌圈直径最大，说明本发明实施例1-5制备的用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液具有一定的抑菌作用，且实施例3中制备的注射液的抑菌效果较好。2、安全性试验选择体重在20-25g的健康小白鼠25只，均分为5组，每组5只，分别采用实施例1-5制备的注射液按照0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml的注射量进行腹腔接种注射，观察半月内小白鼠的饮食状况和精神状况，在观察时间内小白鼠生长发育良好，食欲及精神状况均正常，无一例死亡，结果表明本发明实施例1-5制备的注射液安全性良好。3、稳定性试验将本发明实施例1-5制备的注射液在室温下放置12个月，未见有明显沉淀，且抑菌效果未有明显变化。4、临床试验选择颍上一个规模化养猪场的患黄痢的127头仔猪进行治疗，病猪仔症状有：突发腹泻，粪便呈黄色浆糊状或黄色水样，并含有凝乳小片，病仔猪精神沉郁，不吃奶、脱水、昏迷而死；急者不见下痢，身体软弱，倒地昏迷死。治疗方法：将病猪仔分为两组，实验组和对照组，两组病猪仔的体重、体重无显著性区别；开始发病时立即给药，实验组采用本发明实施例3制备的用于治疗皖北黑猪仔猪黄痢的注射液对患黄痢仔猪进行肌肉注射治疗，注射量为0.1ml/kg，一日一次，重症一日二次，连续注射3日，对照组采用倍能注射液进行肌肉注射治疗，注射量为0.1ml/kg，一日一次，重症一日二次，连续注射3日；观察两组治疗效果和复发情况。疗效判断标准：治愈：连续用药1个疗程后，各种症状均消失，各项生理指标恢复正常，精神好，食欲佳；有效：连续用药1个疗程后，各种症状均缓解，各项生理指标基本恢复正常，精神转好，开始进食；无效：连续用药2个疗程后，各种症状均无好转，有的甚至病情加重、死亡；治疗效果：具体治疗效果见表1。表1仔猪黄痢治疗效果组别病猪数(头)治愈数(％)有效数无效数复发数实验组6459322对照组632821146从表1中可以看出，采用本发明实施例3制备的注射液对仔猪黄痢有明显治疗效果，其有效率可达96.88％，治愈率可达92.19％且复发率较低，对照组的治愈率仅为44.44％，且复发率高。以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本
技术领域：
的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。当前第1页12