专利名称：预防仔猪疾病的注射液及其制备方法
技术领域：
本发明涉及ー种注射液及其制备方法，特別是涉及一种预防仔猪疾病的注射液及其制备方法。
背景技术：
目前，我国的生猪养殖生产正面临着猪病多、难防治、死亡高、用药大、高投入、低回报的困境，养殖单位随时都会遭遇到因损失惨败而告终，人们为了预防仔猪的各种疾病， 例如阳性细菌引发的胸膜性肺炎、链球菌病、金黄色葡萄球菌等，大量使用抗生素及各种饲料添加剤，这与当前国民对肉食食品安全性的強烈要求和呼声相违背，又由于猪病的病原微生物，因长期同药物相接触，已经从耐药性向变异性方向过渡，导致现有的抗生素很难再达到有效的预防效果。
发明内容
本发明目的是为了解决上述技术的不足，提供一种预防仔猪疾病的注射液及其制备方法，本发明利用鸡卵黏蛋白作为载体，缓释和延长了盐酸林可霉素的排出时间，增强了盐酸林可霉素的血药浓度和作用时间。为了达到上述目的，本发明所提供的技术方案是一种预防仔猪疾病的注射液，它包括如下原料制成鸡卵黏蛋白IOOmg - 120mg、抗生素20mg-50mg、缓冲液lml_2ml和注射用水 1. 5ml-3. 5ml。进ー步的，所述缓冲液为PH7-7. 2的磷酸盐缓冲液。进ー步的，所述抗生素为盐酸林可霉素。进ー步的，所述抗生素为硫酸庆大霉素。一种预防仔猪疾病的注射液的制备方法，它包括如下步骤
(1)取适量注射用水将鸡卵黏蛋白稀释成鸡卵黏蛋白溶液后，与缓冲液混合，缓慢搅拌 15-35分钟；
(2)取适量注射用水将抗生素溶解后，与上述混合液混合，并缓慢搅拌3- 7分钟，即得所述预防仔猪疾病的注射液。进ー步的，所述缓冲液为lml。进ー步的，在步骤(2)中制成的抗生素溶液的体积为1. 2mL·进ー步的，所述预防仔猪疾病的注射液为細1。采用上述技术方案，本发明的技术效果有
(1)本发明用鸡卵黏蛋白作为载体，通过人工被动免疫，刺激猪体发生体液免疫和細胞免疫，从而利用自身的免疫力来杀灭侵入体内的靶細胞。(2)本发明利用鸡卵黏蛋白可缓释和延长了盐酸林可霉素的排出时间，增强了盐酸林可霉素的血药浓度和作用时间，实现小剂量发挥大疗效的作用。
具体实施例方式鸡卵黏蛋白在本发明中可利用自身的抗原性，刺激猪体，提高猪体自身的免疫抗体，增强自身抗御疾病的能力，且由于鸡卵黏蛋白为ー种胶体物，可缓释和延长盐酸林可霉素的排出时间，增强了盐酸林可霉素的血药浓度和作用时间，实现小剂量发挥大疗效的作
ο盐酸林可霉素作为窄谱抗生素，对革兰阳性球菌有较好作用，特别对厌气菌、金葡菌及肺炎球菌有高效，其作用机制和红霉素相似，属抑菌剂，主要用于敏感菌引起的各种感染，如肺炎、脑膜炎、心内膜炎、蜂窝织炎、扁桃体炎、丹毒、疖及泌尿系统感染等。硫酸庆大霉素作为氨基糖甙类广谱抗生素，对多种革兰阴性菌及阳性菌都具有抑菌和杀菌作用。对绿脓杆菌、产气杆菌、肺炎杆菌、沙门氏菌属、大肠杆菌及变形杆菌等革兰阴性菌和金葡菌等作用较强。缓冲液在本发明中可平衡酸碱度，避免注射本发明的猪仔出现应激反应。注射用水在本发明中作为ー种溶剂，调节各组份的浓度，有利于猪仔吸收。以下为本发明所提供的实施例，仅是进ー步说明本发明的应用，而不是限定。实施例1
一种预防仔猪疾病的注射液，它包括如下原料制成
鸡卵黏蛋白120mg;
盐酸林可霉素；
缓冲液Iml ；
注射用水3ml ；
其中，缓冲液为PH7. 2的磷酸盐缓冲液。一种预防仔猪疾病的注射液的制备方法，它包括如下步骤
(1)取1.2ml注射用水将120mg鸡卵黏蛋白稀释成鸡卵黏蛋白溶液后，与Iml缓冲液混合，缓慢搅拌30分钟，防止搅拌时混合液产生气泡；
(2)取1.2ml注射用水将盐酸林可霉素溶解后，与上述混合液混合，并缓慢搅拌5 分钟，再用0. 6ml注射用水进行稀释，即得所述预防仔猪疾病的注射液。实施例2
一种预防仔猪疾病的注射液，它包括如下原料制成 鸡卵黏蛋白120mg; 硫酸庆大霉素48mg ； 缓冲液Iml ； 注射用水3ml ；
其中，缓冲液为PH7. 2的磷酸盐缓冲液。一种预防仔猪疾病的注射液的制备方法，它包括如下步骤
(1)取1.2ml注射用水将120mg鸡卵黏蛋白稀释成鸡卵黏蛋白溶液后，与Iml缓冲液混合，缓慢搅拌30分钟；
(2)取1.2ml注射用水将48mg硫酸庆大霉素溶解后，与上述混合液混合，并缓慢搅拌5 分钟，再用0. 6ml注射用水进行稀释，即得所述预防仔猪疾病的注射液。实施例3一种预防仔猪疾病的注射液，它包括如下原料制成
鸡卵黏蛋白IOOmg;
盐酸林可霉素20mg ；
缓冲液2ml ；
注射用水1. 5ml ；
其中，缓冲液为Ph7的磷酸盐缓冲液。一种预防仔猪疾病的注射液的制备方法，它包括如下步骤
(1)取0.8ml注射用水将IOOmg鸡卵黏蛋白稀释成鸡卵黏蛋白溶液后，与2ml缓冲液混合，缓慢搅拌15分钟； (2)取0.7ml注射用水将20mg盐酸林可霉素溶解后，与上述混合液混合，并缓慢搅拌3 分钟，即得所述预防仔猪疾病的注射液。实施例4
一种预防仔猪疾病的注射液，它包括如下原料制成 鸡卵黏蛋白130mg; 硫酸庆大霉素40mg ； 缓冲液2ml ； 注射用水3. 5ml ；
其中，缓冲液为Ph7的磷酸盐缓冲液。—种预防仔猪疾病的注射液的制备方法，它包括如下步骤
(1)取1.5ml注射用水将130mg鸡卵黏蛋白稀释成鸡卵黏蛋白溶液后，与2ml缓冲液混合，缓慢搅拌35分钟；
(2)取2ml注射用水将40mg硫酸庆大霉素溶解后，与上述混合液混合，并缓慢搅拌7分钟，即得所述预防仔猪疾病的注射液。以下为本发明中鸡卵黏蛋白的氨基酸序列 GACATACAGCTAGAAAGCTGTATTGCCTTTAGCACTCAAGCTCAAAAGACAACTCAGAGTTCACCATGGGCTC
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1、采用方法有机溶剂沉淀法，经DEAE——纤维素柱层析纯化，获得合格产品。
2、试剂及器材
(1)丙醇(分析纯);
(2)0.5mol/L三氯乙酸溶液；
(3)0.02mol/LPH6. 5磷酸盐缓冲液；
(4)0. 3mol/L NaCL-O. 02mol/LPH6. 5 磷酸盐缓冲液；
(5)0.5mol/L NaCL-O. 02mol/LPH6. 5 磷酸盐缓冲液；(6)DEAE——纤维素(DE-32 或 52)；
(7)层析柱2.8X30cm; 3、操作
(1)制备过程
用进行禽流感抗原检测为阴性的鸡蛋，在无菌环境下收取其蛋清300g，置于烧杯中，将烧杯放入30°C水浴中，在不断搅拌下加入等体积的三氯乙酸——丙醇溶液(40ml0. 5mol/L 三氯乙酸与80ml丙醇混合而成，即1:2V/V)。再继续搅拌30min，然后放在4°C的条件下静置10-1 后，过滤取其浅黄色清亮过滤液。取Iml滤液于试管中放入水浴中，在80°C缓慢搅拌下，加入4°C预冷的丙醇500ml，出现沉淀后，在4°C的条件下静置池，抽滤，获得卵类黏蛋白滤饼。(2)卵类黏蛋白的纯化
将制得的卵类黏蛋白滤饼溶于蒸馏水中，调PH值为4. 5，装入透析袋，用蒸馏水透析， 除去三氯乙酸，再用0. 02mol/LPH6. 5磷酸盐缓冲液透析平衡(在4°C的条件下);再将已处理好的DEAE——纤维素离子交換剂用0. 02mol/LPH6. 5磷酸盐缓冲液浸泡1_5分钟，换洗3_6 次后，装入层析柱(2. 8X30cm)，以0. 02mol/LPH6. 5磷酸盐缓冲液继续流经层析柱，直到流出液的PH与进入的缓冲液PH6. 5相同。然后将透析好的卵类黏蛋白上层吸柱，先用0. 02mol/LPH6. 5磷酸盐缓冲液洗脱， 在检测仪上出现第一峰，此为杂蛋白，
而后改用5mol/LNaCL-0. 02mol/LPH6. 5磷酸盐缓冲液浸泡洗脱，此时出现第二峰，即为卵类黏蛋白，最后用0. 5mol/L NaCL-O. 02mol/LPH6. 5磷酸盐缓冲液，进行洗脱至无蛋白出现。合并卵类黏蛋白收集液，加入硫酸铵粉末，使饱和达到0. 8，盐析10-1 后，离心取得沉淀物，即为鸡卵黏蛋白。本发明预防仔猪疾病的注射液主要用于5日和22日龄的仔猪注射，临床试验证明，硫酸庆大霉素与鸡卵黏蛋白混合制成的注射液用于5日龄的仔猪，可以有效的预防阳性細菌引发的绿脓杆菌、产气杆菌、肺炎杆菌、沙门氏菌属、大肠杆菌及变形杆菌等疾病；盐酸林可霉素与鸡卵黏蛋白混合制成的注射液用于22日龄的仔猪，可以有效的预防阴性细菌引发的肺炎、脑膜炎、心内膜炎、蜂窝织炎、扁桃体炎、丹毒、疖及泌尿系统感染等；可以使仔猪的发病率下降到平时的50%，确实体现出仔猪活泼健康，无病无恙。用法猪仔5日龄时注射1支硫酸庆大霉素与鸡卵黏蛋白混合制成的注射液，在猪仔22日龄时注射1支盐酸林可霉素与鸡卵黏蛋白混合制成的注射液。下表为本发明对注射本发明的仔猪肌肉注射疗效实验
权利要求
1.一种预防仔猪疾病的注射液，其特征在于它包括如下原料制成鸡卵黏蛋白 IOOmg - 120mg、抗生素 20mg_50mg、缓冲液 lml_2ml 和注射用水 1. 5ml_3. 5ml。
2.根据权利要求1所述的预防仔猪疾病的注射液，其特征在于所述缓冲液为PH7-7.2 的磷酸盐缓冲液。
3.根据权利要求1所述的预防仔猪疾病的注射液，其特征在于所述抗生素为盐酸林可霉素。
4.根据权利要求1所述的预防仔猪疾病的注射液，其特征在于所述抗生素为硫酸庆大毒糸ο
5.根据权利要求1所述的预防仔猪疾病的注射液的制备方法，其特征在于它包括如下步骤(1)取适量注射用水将鸡卵黏蛋白稀释成鸡卵黏蛋白溶液后，与缓冲液混合，缓慢搅拌 15-35分钟；(2)取适量注射用水将抗生素溶解后，与上述混合液混合，并缓慢搅拌3- 7分钟，即得所述预防仔猪疾病的注射液。
6.根据权利要求5所述的预防仔猪疾病的注射液的制备方法，其特征在于所述缓冲液为1ml。
7.根据权利要求5或6所述的预防仔猪疾病的注射液的制备方法，其特征在于在步骤(2)中制成的抗生素溶液的体积为1. 2mL·
8.根据权利要求7所述的预防仔猪疾病的注射液的制备方法，其特征在于所述预防仔猪疾病的注射液为4ml。
全文摘要
本发明公开了一种预防仔猪疾病的注射液，它包括如下原料制成鸡卵黏蛋白100mg–120mg、抗生素20mg-50mg、缓冲液1ml-2ml和注射用水1.5ml-3.5ml；本发明利用鸡卵黏蛋白可缓释和延长了盐酸林可霉素的排出时间，增强了盐酸林可霉素的血药浓度和作用时间，实现小剂量发挥大疗效的作用。
文档编号A61K9/08GK102580093SQ201110458220
公开日2012年7月18日 申请日期2011年12月31日 优先权日2011年12月31日
发明者胡海玉 申请人:胡海玉