本发明涉及中药制片技术领域，具体涉及一种冬虫夏草含片及其制备方法。
背景技术：
冬虫夏草是一种昆虫和真菌的结合体，人们通常将其简称为虫草。它是特产于青藏高原的一种珍贵稀少、营养成分和保健功能极佳的中药材，与人参、鹿茸一起被称为中国滋补品的三大宝。据现代药理学研究，青海冬虫夏草含有虫草酸约7％，蛋白质约25％，脂肪约8.4％，其中82.2％为人体不能合成而又必需的不饱和脂肪酸，含有人体必需从食物中供给的8种氨基酸，含有幼儿生长发育所必需的组氨酸。此外还含有综合维生素b12、麦角脂醇、六碳糖醇、生物碱等。其有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳等多种功效。据临床报道，冬虫夏草具有养肺阴、补肾阳、止咳化痰、抗癌防老的功效，而且药效温和，不似人参会使人产生燥热，有人参之益而无人参之害。为平补阴阳之品，诸无所忌。目前传统的冬虫夏草的食用方法有多种，常见的主要有虫草药酒，虫草泡水、煎水、虫草药膳和磨粉等，但仅都停留在简单、粗糙、原始的基础上，其利用率和服用效果均不佳，造成极大的浪费。把虫草纯粉制成含片，通过口腔含服时，因口腔黏膜分布着人体最密集的毛细血管，其精华成分能吸收充分，其吸收利用率极高。然而，目前虫草纯粉制成含片还存在诸多的问题：成型差，表面粗糙，容易掉粉，口含时会快速崩解。
cn1356116公开了一种虫草含片，以辅料糖粉、糊精为粘合剂进行压片成型，虽然制得的虫草含片表面光洁，但是虫草含量极低，不到1％，而且影响口感，糖尿病患者及肥胖者不宜使用，降低虫草品质和功效。
cn1439423公开了一种虫草含片，配比为虫草菌粉5-45％，西洋参1-20％，填充调味剂0-35％，制备工艺为将西洋参通过精选、清洗、干燥和超微粉碎后，把上述两种原料和填充调味剂混合均匀，最后压片成型。从其优选实施例1和2可以看出，虫草仅占到45％，填充调味剂占到30％以上，同样存在糖尿病患者及肥胖者不宜使用，降低虫草品质和功效的问题。
因此开发虫草纯粉含量高、剂型稳定、保持药效，改善口感的虫草含片是亟待解决的问题。
技术实现要素：
为了解决现有技术中存在的问题，本发明公开了一种冬虫夏草含片，包括：
冬虫夏草，蛹虫草。
在一个优选的实施方案中，所述冬虫夏草含片包括：
冬虫夏草：45％-95％；
蛹虫草：5％-55％。
在一个优选的实施方案中，所述冬虫夏草含片包括：
冬虫夏草：50％-95％；
蛹虫草：5％-50％。
在一个优选的实施方案中，所述冬虫夏草含片包括：
冬虫夏草：65％-95％；
蛹虫草：5％-35％。
在一个优选的实施方案中，所述冬虫夏草含片包括：
冬虫夏草：70％-91％；
蛹虫草：9％-30％。
在一个具体的实施方案中所述冬虫夏草与蛹虫草质量比为(3-5)：1。
采用本发明的配方，可以不同于传统的湿法制粒，在压片的工艺中可以不制颗粒直接压片，简化工艺步骤，制得的含片外观光洁、品质优良，并且可以延长口腔作用时间。增加虫草含片在口内的含服时间，即可以保护口腔黏膜、促进口腔黏膜微小损伤的修复以减少慢性损伤导致的不良病变，也可以极大的增加对冬虫夏草精华成分的吸收，减少胃肠道和肝脏的首过效应，精华成分直接进入血液循环，增强疗效。可以使身体对冬虫夏草的吸收率高达95％以上。
在一个具体的实施方案中，采用本发明的配比制备得到的冬虫夏草含片均能显著提高小鼠细胞和体液免疫能力、单核-巨噬细胞功能以及nk细胞活性，表明本发明制备得到的冬虫夏草含片均有显著增强正常小鼠免疫力的作用。
另一方面，本发明提供了一种所述冬虫夏草含片的制备方法，包括如下步骤：
取含水量不高于10％的冬虫夏草用粉碎机粉碎至粒径目数大于100目；
取含水量不高于10％的蛹虫草用粉碎机粉碎至粒径目数大于100目；
优选的取含水量不高于8％的冬虫夏草用粉碎机粉碎至粒径目数大于100目；取含水量不高于8％的蛹虫草用粉碎机粉碎至粒径目数大于100目；
优选的冬虫夏草含水量不高于5％，蛹虫草水量不高于5％。
将配比量的冬虫夏草粉和蛹虫草粉混合均匀；
用压片机根据需求进行直接压片，每片重量约0.2-0.6g。
在另一方面，本发明所述的冬虫夏草含片也可以采用如下制备方法：
a、取配比的含水量不高于10％冬虫夏草与含水量不高于10％的蛹虫草混合后用粉碎机粉碎；
b、压片。
为了证实本发明配比得到的冬虫夏草含片具有优异的效果，主要测试口含作用时间，本发明同时对片剂的外观、含量均匀度进行了综合考察，按照以下标准确定外观的好坏：外观主要从表面光洁度、碎脆度等来综合考虑：优为++++，良为+++、一般为++、差为+。
通过实施本发明，制备得到的虫草含片表面光洁，成型性好，刚性强，在口内作用时间长，吸收充分，并且口感好，由于没有添加任何糖分含量高的粘合剂，对避免因长期过量的吃糖、致使人体发胖和诱发高血压、糖尿病、心血管病、肾病等疾病的人们具有良好的辅助疗效，其保健和治疗效果更为显著。
具体实施方式
下面结合具体的实施方式对本发明技术方案做详细的说明，但具体的实施方式并不是对本发明内容的限制。
实施例1(配比10：1)
取含水量不高于8％的冬虫夏草1000g和含水量不高于8％的蛹虫草10g用粉碎机粉碎至粒径小于100目，用压片机直接进行压片，压力控制在4.5kg-10kg，每片重约0.25g。
硬度：6.7kg
外观：++++
实施例2(配比3：1)
取含水量不高于8％的冬虫夏草750g用粉碎机粉碎至粒径小于100目，取含水量不高于8％的蛹虫草250g用粉碎机粉碎至粒径小于100目，混合均匀后，用压片机直接进行压片，压力控制在4.5kg-10kg，每片重约0.25g。
硬度：7.7kg
外观：++++
实施例3(配比5：1)
取含水量不高于3％的冬虫夏草1000g用粉碎机粉碎至粒径小于100目，取含水量不高于3％的蛹虫草200g用粉碎机粉碎至粒径小于100目，混合均匀后，用压片机直接进行压片，压力控制在4.5kg-10kg，每片重约0.25g。
硬度：7.1kg
外观：++++
实施例4(配比3：1)
取含水量不高于10％的冬虫夏草750g用粉碎机粉碎至粒径小于100目，粉碎全过程用温度低于8℃的冷却液冷却，取含水量不高于10％的蛹虫草250g用粉碎机粉碎至粒径小于100目，粉碎全过程用温度低于8℃的冷却液冷却，确保有效成分的释放和生物活性的稳定。
将蛹虫草超微粉与ph值为3的酸性水按料液比(g/ml)10倍进行混合，提取40min后，离心，取沉淀与ph值为7的中性水按料液比10倍进行混合，提取40min后，离心，取沉淀与ph值为12的碱性水按料液比10倍进行混合，提取40min后，离心，合并三次离心得到上清，20-30倍浓缩，得到虫草素提取液。
将蛹虫草超微粉与ph值为5的酸性水按料液比(g/ml)10倍进行混合，提取40min后，离心，取沉淀与ph值为7的0.1mol/l磷酸钠缓冲液按料液比10倍进行混合，提取40min后，离心，取沉淀与ph值为8.5的碱性水按料液比10倍进行混合，提取40min后，离心，合并三次离心得到的上清，20-30倍浓缩，得到含量0.4％以上的腺苷提取液。
将制备得到的虫草素提取液、腺苷提取液、95％食用酒精按照1:1:4的体积比混合均匀，制得软化剂。按照冬虫夏草：蛹虫草：虫草素：腺苷＝3:1:0.3:0.3折算后量取软化剂，以喷雾的形式缓慢加入使其均匀地与冬虫夏草和蛹虫草微粉，同时不断搅拌，使虫草聚合成团，形成大小一致的颗粒，即刻将混合好的半成品倒入湿法制粒机中，选择24目的筛网摇摆制粒。用消毒后的不锈钢盘收集虫草颗粒，轻微震荡使其均匀单层铺开，防止结块，之后放入烘箱中37℃继续烘干至水分含量低于5％，并除去颗粒中残留的酒精；烘干后置于制粒机中整粒得到虫草颗粒。将制备好的虫草颗粒加入压片机中进行压片，压力控制在4.5kg-10kg，每片重约0.25g。
硬度：4.2kg
外观：+++
实施例5(配比3：1)
取含水量不高于10％的冬虫夏草750g用粉碎机粉碎至粒径小于100目，粉碎全过程用温度低于8℃的冷却液冷却，取含水量不高于10％的蛹虫草250g用粉碎机粉碎至粒径小于100目，粉碎全过程用温度低于8℃的冷却液冷却，确保有效成分的释放和生物活性的稳定。
将蛹虫草超微粉与ph值为3的酸性水按料液比(g/ml)10倍进行混合，提取40min后，离心，取沉淀与ph值为7的中性水按料液比10倍进行混合，提取40min后，离心，取沉淀与ph值为12的碱性水按料液比10倍进行混合，提取40min后，离心，合并三次离心得到上清，20-30倍浓缩，得到虫草素提取液。
将制备得到的虫草素提取液、95％食用酒精按照1：3的体积比混合均匀，制得软化剂。按照冬虫夏草：蛹虫草：虫草素＝3:1:0.6折算后量取软化剂，以喷雾的形式缓慢加入使其均匀地与冬虫夏草和蛹虫草微粉，同时不断搅拌，使虫草聚合成团，形成大小一致的颗粒，即刻将混合好的半成品倒入湿法制粒机中，选择24目的筛网摇摆制粒。用消毒后的不锈钢盘收集虫草颗粒，轻微震荡使其均匀单层铺开，防止结块，之后放入烘箱中37℃继续烘干至水分含量低于5％，并除去颗粒中残留的酒精；烘干后置于制粒机中整粒得到虫草颗粒。将制备好的虫草颗粒加入压片机中进行压片，压力控制在4.5kg-10kg，每片重约0.25g。硬度：4.1kg
外观：+++
表1为采用实施例2相同的方法，采用不同配方得到的冬虫夏草口含片，每片重约0.25g。
表1
表2为实施例1-16制备得到的片剂外观，崩解时间，口含时间，工艺可行性结果。
表2
表3为本发明实施例1-16制得的口含片观察到的指标差异。
表3
由表1至表3可以看出，实施例1-3制备得到的虫草含片外观，口感好，制备工艺简单稳定，崩解时间在14-22分钟内，口含时间在25-36分钟内，片面无明显阴斑，压片时片重稳定，rsd值小于4％，片重差异较小，片剂具有较好的含量均匀度，各项指标符合规定。
实施例17：冬虫夏草含片对小鼠免疫功能的影响
c57bl/6j小鼠，雄性，6-8周龄，体质量18-22g，饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心，按正常成年人每日推荐服用量[1.2g.(60kg)-1]的10倍设定剂量，为200mg.kg-1，另设正常对照组(给予生理盐水)，每组6只小鼠，适应性饲养3天，称重，按随机数字表法分组，分别进行下列实验。①冬虫夏草含片对小鼠细胞免疫的影响,包括cona诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖和dnfb诱导的小鼠迟发型变态反应实验；以加cona孔的吸光度(a)值与不加cona的a值表示小鼠脾淋巴细胞增殖能力，右耳与左耳质量差示dth；②冬虫夏草含片对小鼠体液免疫的影响：检测抗体生成细胞和血清溶血素，以各孔a值表示小鼠抗体生成细胞水平，按公式计算抗体积数表示小鼠血清抗体水平；③冬虫夏草含片对小鼠单核-巨噬细胞功能的影响：小鼠碳廓清和腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球实验；按公式计算吞噬指数，表示小鼠碳廓清能力，以吞噬百分率代表小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力。④冬虫夏草含片对小鼠nk细胞活性的影响，测得各孔a值，按公式计算各小鼠nk细胞活性。分别称取各实施例冬虫夏草含片制成10.0mg.ml-1混悬液，给予相应剂量灌胃，0.4ml.(20g)-1，正常对照组给予相同容量生理盐水，每天1次，共30天。参照《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)和《药理实验方法学》。采用cck8法检测cona诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力，耳肿胀法检测dnfb诱导的小鼠迟发型变态反应，定量溶血分光光度法检测小鼠抗体生成细胞数，血凝法测定小鼠血清溶血素水平，内眦静脉注射法检测小鼠碳廓清能力，按文献(张建楼等人，动物医学进展，2011，32(3)：86-90)。先用f4/80标记小鼠腹腔巨噬细胞，流式细胞仪测定吞噬荧光微球的巨噬细胞数，乳酸脱氢酶测定nk细胞活性。采用spss19.0版软件处理数据，实验数据均以均数±标准差(x±s)表示，两组间均数比较采用独立样本t检验，多组间均数比较采用单因素方差分析(one-wayanova)。以p<0.05为差异有统计学意义。
表4：冬虫夏草含片对小鼠细胞免疫功能试验结果
试验结果表明，与正常对照组比较，各实施例制备得到的冬虫夏草含片均能提高cona诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力(*p＜0.01)，其中实施例1-3制备得到的冬虫夏草含片能够明显改善小鼠迟发型变态反应(与正常对照组比较，p＜0.01)，出乎意料的与实施例4和5添加了虫草素提取液，虫草素提取液和腺苷提取液试验结果相当。
表5：冬虫夏草含片对小鼠体液免疫功能试验结果
试验结果表明，与正常对照组相比，各实施例制备得到的冬虫夏草含片均能提高小鼠抗体生成水平(*p＜0.01)，与正常对照组比较，实施例1-3制备得到的含片能够显著提高小鼠血清溶血素水平，出乎意料的与实施例4和5添加了虫草素提取液，虫草素提取液和腺苷提取液试验结果相当。
表6：冬虫夏草含片对小鼠单核-巨噬细胞功能试验结果
试验结果表明，与正常对照组相比，各实施例制备得到的冬虫夏草含片均能提高小鼠碳廓清水平(*p＜0.01)。并且小鼠腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球的能力均明显提高，实施例1-3制备得到的含片提高明显。
表7：冬虫夏草含片对小鼠nk细胞活性试验结果
试验结果表明，与正常对照组相比，各实施例制备得到的冬虫夏草含片均能提高小鼠nk细胞活性(*p＜0.01)，实施例1-3制备得到的含片提高明显。