本发明涉及医药领域，具体为一种具有清除耵聍及抑菌功效的组合物、制剂及其应用。
背景技术：
：耵聍，俗称耳屎、耳垢，英文叫耳蜡，是人类和一些其他哺乳动物外耳道内部内垢腺体分泌的蜡状物质和外耳道皮肤混合后的产物，主要作用是保持耳道清洁，防止昆虫和细菌侵入。随着人们生活水品的提高，生活方式也逐渐多样化，紧凑化，难免会忘记清理耳内耵聍。耳内耵聍堆积过多如未及时清理，可能会导致耳鸣，听力减退，耳痛，外耳道炎，中耳炎等相关疾病。人们目前采用最高的几种清除耳内耵聍的方法为：①使用耳屎勺或棉签，②专业人员帮助清除。使用耳屎勺或棉签，容易挖破耳道而引起感染，甚至损伤鼓膜。此方法也仅限于去除耳内耵聍，达不到抑菌效果。专业人员帮忙清除，会变得比较麻烦和复杂，不符合现代人的生活节奏。目前现有产品的功能比较单一，往往只能对外耳道疾病例如耵聍栓塞起辅助治疗，通过液体制剂与耵聍的物理作用，例如水泡，软化耵聍后进行后续操作，而要解决外耳道疾病，仅具有这一单一的物理作用是明显不足的。技术实现要素：本发明的目的是提供一种有清除耵聍及抑菌功效的组合物、制剂及其应用。本发明提供的组合物可有效去除耳内耵聍，杀菌抑菌，具有安全快捷，无毒无副作用，可长期使用的的特点。为了解决上述问题，本发明提供一种具有清除耵聍及抑菌功效的组合物，包括以下重量份数的组分：白油40-60份、角鲨烷15-25份、过氧化脲4-8份、杏仁油4-6份。优选的，上述组合物，包括以下重量份数的组分：白油50-51份、角鲨烷22-23份、过氧化脲5-6份、杏仁油4.5-5份。本发明还提供一种上述组合物与药学上可接受的辅料制成的制剂。优选的，所述制剂的剂型为乳剂或喷剂中的一种或两种。本发明还提供一种上述制剂的制备方法，包括步骤：1)取下述重量份数组分：白油40-60份、角鲨烷15-25份、过氧化脲4-8份、杏仁油4-6份、司盘832-4份、水10-15份；2)获得过氧化脲水相；3)获得油相；4)获得乳剂。优选的，所述步骤2)为将过氧化脲溶于水中获得。优选的，所述步骤3)为将白油、角鲨烷、杏仁油与司盘83混合，获得油相。优选的，所述步骤4)为将水相缓慢倒入油相，获得乳剂。优选的，还包括步骤5)，所述步骤5)为将乳剂封装入喷瓶，获得喷剂。本发明还提供所述组合物在制备治疗外耳道疾病药物中的应用。优选的，所述外耳道疾病包括耵聍栓塞、外耳道炎、外耳道真菌病、外耳道湿疹。白油，通常是指白色矿物油。它是经过特殊的深度精制后的矿物油。白油无色、无味、化学惰性、光安定性能好，白油基本组成为饱和烃结构，芳香烃、含氮、氧、硫等物质近似于零。作为润滑剂使用，能使液体自主流出耳道，便于清洁。角鲨烷是从深海鲨鱼肝脏中提取的角鲨烯经氢化制得一种性能优异的烃类油脂，故又名深海鲨鱼肝油。科学研究发现，角鲨烷是少有的化学稳定性高，使用感极佳的动物油脂，对皮肤有较好的亲和性，不会引起过敏和刺激，并能加速配方中其他活性成分向皮肤中渗透；具有较低的极性和中等的铺展性，且纯净、无色、无异味；还可抑制霉菌的生长。在医药和制药工业上，过氧化脲可用作一种高效、安全、方便的固体消毒剂，亦可用水溶液。与双氧水、过氧乙酸比较具有明显的杀菌力强、杀菌谱广，使用浓度低，不留残毒等优点，还可抑制细菌与霉菌生长，残留无刺激。杏仁油富含矿物质、蛋白质及各种维他命，是一种保养皮肤及滋润效果极佳的植物油，适用于各种肤质。它能有效地减轻皮肤民痒现象，消除红肿、干燥和发炎。可刺激内分泌系统的脑下垂腺、胸腺和肾上腺的分泌，促进细胞更新。耵聍通常呈淡黄色蜡样干片状物质，含有油、硬脂、脂肪酸、蛋白质和黄色素，溶于油脂，不溶于水、酒精或乙醚，与本发明所述的组合物混合后，可被杏仁油以及白油软化溶解，并且易于排出，对耵聍栓塞均有明显的治疗作用。角鲨烷由于其能加速配方中其他活性成分向皮肤中渗透，提高了组合物的作用效率，并且其对皮肤有较好的亲和性，不会引起过敏和刺激，对湿疹及炎性诱发的瘙痒症状具有缓解作用。此外组合物中，过氧化脲溶解后分解为尿素与过氧化氢，具有明显的杀菌作用，对细菌霉菌真菌等作用均较强，此外角鲨烷也具有一定程度的抑制霉菌生长的作用，现有技术中还表明，杏仁油主要成分杏仁苷分解产生的苯甲醛可抑制胃蛋白酶的活性，缓解炎性症状，而且苯甲醛经安息香缩合酶作用生成安息香，安息香具有镇痛作用，故本发明的组合物还具有非常显著的杀菌抑菌效果。可用于外耳道疾病的治疗，安全快捷，长期使用也不具有毒性，适宜临床推广使用。具体实施方式为了使本领域的技术人员更好地理解发明的技术方案，下面结合具体实施方式对本发明作进一步的详细说明。耵聍，为外耳道软骨部皮肤的耵聍腺所分泌的淡黄色黏稠液体，耵聍腺是一种特殊的汗腺，位于长有耳毛的外耳道皮肤处，耵聍在空气中干燥后成薄片状。耵聍具有保护外耳道皮肤和黏附外物(如尘埃、小虫子等)的作用。平时借咀嚼、张口等运动，耵聍可自行脱落排出。耵聍栓塞是指外耳道内耵聍分泌过多或排出受阻，使耵聍在外耳道内聚集成团，阻塞外耳道。耵聍栓塞形成后，可影响听力或诱发炎症，是耳鼻喉科常见病之一。治疗方法包括：1)耵聍钩取出法；2)外耳道吸引法：如耵聍较硬，不易取出，或耵聍与外耳道嵌顿紧密，取出过程中患者疼痛明显难以配合，可先用5％～10％的碳酸氢钠溶液滴耳，每天3～5次，每次滴药后患耳向上静置5～10分钟，连续3～4日后待其软化，然后于耳鼻喉科专科门诊，用吸引器将软化的耵聍取出。3)外耳道冲洗法；4)内镜下抽吸法。合并感染者应先控制感染，待感染控制后再取出耵聍。现有技术中，对外耳道耵聍可以使用5％～10％的碳酸氢钠溶液滴耳进行软化，但软化效果慢，并且只起辅助作用，还需要后续手段跟进治疗，并且溶液积蓄外耳道，增加了感染的几率。本发明提供一种具有清除耵聍及抑菌功效的组合物，包括以下重量份数的组分：白油40-60份、角鲨烷15-25份、过氧化脲4-8份、杏仁油4-6份。优选的，白油50-51份、角鲨烷22-23份、过氧化脲5-6份、杏仁油4.5-5份。本发明提供的组合物中，白油是经超深度精制脱除芳烃、硫和氮等杂质而得到的特种矿物油品,一般由分子量300-400的烷烃和环烷烃组成,属润滑油馏分。它具有无色、无味、无臭、化学惰性及优良的光、热安定性。在制药工业中主要用于轻泄剂、药片、胶囊加工的粘合剂,青霉素、抗生素用防泡剂,内服润滑剂、软膏、软化剂、麻醉剂以及医用胶带和药品生产用防潮剂等。角鳖烷是异三十烷的俗名,分子式c30h62、分子量422，化学名称叫2,6,10,15,19,23-六甲基二十四烷，其具有优良的稳定性、润滑性、绝缘性、渗透性、对皮肤有较好的亲和性，不会引起过敏和刺激，并能加速配方中其他活性成分向皮肤中渗透；具有较低的极性和中等的铺展性，且纯净、无色、无异味；还可抑制霉菌的生长。过氧化脲是双氧水与尿素的加成物,为白色结晶、无毒无气味、分子式为co(nh2)2〃h2o2,分子量94.07,理论活性氧含量17.02％,h2o2含量36.17％,易溶于水。携带使用方便,易溶于水成尿素及h2o2,室温可得质量百分浓度15％h2o2,溶于水后尿素及h2o2都有抑菌作用,其杀菌谱广、杀菌力强,它以水溶液或无水甘油为溶剂更好。具有使用浓度低,消毒快,消毒后无残留毒性,无刺激的特点。又因为含有尿素,可溶解蛋白质及增加蛋白质水合能力和渗透性,可治人禽畜皮癣、止痒以及软组织炎症。杏仁油，微黄透明，味道清香，不仅是一种优良的食用油，还是一种高级的润滑油，主要是由油酸、亚油酸、软脂酸、棕榈烯酸、亚麻酸等高级脂肪酸组成的一种混合甘油酯，饱和脂肪酸含量很少，不饱和脂肪酸含量高达90％以上。杏仁油中还含有多种维生素、氨基酸和矿物质。它能有效地减轻皮肤民痒现象，消除红肿、干燥。现有技术中还证明，其主要成分杏仁苷分解产生的苯甲醛可抑制胃蛋白酶的活性，缓解炎性症状，而且苯甲醛经安息香缩合酶作用生成安息香，安息香具有镇痛作用。本发明还提供一种上述组合物与药学上可接受的辅料制成的制剂。所述制剂的剂型为乳剂或喷剂中的一种或两种。本发明还提供一种上述制剂的制备方法，包括步骤：1)取下述重量份数组分：白油40-60份、角鲨烷15-25份、过氧化脲4-8份、杏仁油4-6份、司盘832-4份、水10-15份；2)将过氧化脲溶于水中获得过氧化脲水相；3)为将白油、角鲨烷、杏仁油与司盘83混合，获得油相；4)将水相缓慢倒入油相，获得乳剂。5)为将乳剂封装入喷瓶，获得喷剂。本发明还提供所述组合物在制备治疗外耳道疾病药物中的应用。所述外耳道疾病包括耵聍栓塞、外耳道炎、外耳道真菌病、外耳道湿疹。下述为本发明的实施例，包括组合物制剂的制备方法、药效学实验、毒性实验以及临床观察，实验结果表明，本发明提供的组合物，具有良好的溶解耵聍的作用，并且具有极高的抑菌灭菌活性，在耵聍栓塞、外耳道炎、外耳道真菌病、外耳道湿疹上均有较好的疗效。上述为本发明的详细阐述，下面为本发明实施例。实施例一组合物乳剂的制备1)取下述重量份数组分：白油60份、角鲨烷25份、过氧化脲8份、杏仁油6份、司盘834份、水15份；2)将过氧化脲溶于水中获得，获得过氧化脲水相；3)将白油、角鲨烷、杏仁油与司盘83混合，获得油相；4)水相缓慢倒入油相，获得乳剂。实施例二组合物乳剂的制备1)取下述重量份数组分：白油40份、角鲨烷15份、过氧化脲4份、杏仁油4份、司盘832份、水10份；2)将过氧化脲溶于水中获得，获得过氧化脲水相；3)将白油、角鲨烷、杏仁油与司盘83混合，获得油相；4)水相缓慢倒入油相，获得乳剂。实施例三组合物喷剂的制备1)取下述重量份数组分：白油51份、角鲨烷23份、过氧化脲6份、杏仁油5份、司盘833份、水14份；2)将过氧化脲溶于水中获得，获得过氧化脲水相；3)将白油、角鲨烷、杏仁油与司盘83混合，获得油相；4)水相缓慢倒入油相，获得乳剂；5)将乳剂封装入喷瓶，获得喷剂。实施例四组合物喷剂的制备1)取下述重量份数组分：白油50份、角鲨烷22份、过氧化脲5份、杏仁油4.5份、司盘832.5份、水13份；2)将过氧化脲溶于水中获得，获得过氧化脲水相；3)将白油、角鲨烷、杏仁油与司盘83混合，获得油相；4)水相缓慢倒入油相，获得乳剂；5)将乳剂封装入喷瓶，获得喷剂。实施例五组合物药效试验1组合物耵聍清除实验原料：实施例一至实施例四的组合物、纯化水、5％碳酸氢钠方法：取耵聍0.2g，加入实施例一至实施例四提供的组合物2ml，进行浸泡，反应10min，观察是否剩余固体物质，观察流动性，测定液体粘度。以纯化水及5％碳酸氢钠作为对照。实验结果：如下表所示上述结果表明，本发明组合物，可软化并溶化耵聍，使耵聍体积明显减小，其中，以实施例三和实施例四为优选方案实施例六组合物药效试验2组合物抑菌实验1试验微生物细菌：大肠杆菌(atcc8739或8099)、金黄色葡萄球菌(atcc6538)酵母菌：白色念珠菌(atcc10231)2操作程序①取菌种第3代～14代营养琼脂斜面新鲜培养物(18-24h)，用0.03mol/l磷酸盐缓冲液(pbs)清洗，稀释成含菌量为5×107cfu/ml～5×108cfu/ml的菌悬液。②取实施例四的喷雾剂，吸取10.0ml分别加入三支灭菌试管中，置20℃～25℃水浴5min，并且以角鲨烷、过氧化脲单独分别加入灭菌试管中，作为对照。③在试管中分别加入0.1ml菌悬液，使最终含菌量为5×105cfu/ml～5×106cfu/ml，混匀，并开始计时。④分别于4个不同作用时间(推荐最短消毒时间(t)1t、2/3t、1/2t、1/4t)，各取1.0ml菌药混合液移入9.0ml中和剂中，混匀。⑤中和10min后，吸取其原液或10倍系列稀释液1.0ml分别接种营养琼脂培养基(细菌)、沙堡琼脂培养基(酵母菌)或马铃薯葡萄糖琼脂培养基(霉菌)，每管接种二块平板，细菌与酵母菌分别于35℃～37℃培养48h(细菌)或72h(酵母菌)，霉菌于20℃～25℃培养10d～14d，作活菌计数，取其平均值。⑥以0.03mol/lpbs代替样品，按上述同样方法加菌进行活菌计数作为阳性对照。取pbs、中和剂各1.0ml分别接种营养琼脂培养基或沙堡琼脂培养基以及未接种的上述培养基作为阴性对照。⑦按下列公式计算每种菌每个作用时间点的抑菌率：⑧试验所选中和剂必须通过悬液定量中和剂鉴定试验，并且阴性对照必须无菌生长，否则重新测试。3.统计学处理所有数据采用sas进行分析，结果用(x)表示，比较组间差异。4.实验结果抑菌实验结果如下表所示上述结果表明，本发明提供的组合物，对金黄色葡萄球菌的杀菌效果最优，大肠杆菌其次，对白色念珠菌也有抑制作用。并且组合物的作用优于角鲨烷与过氧化脲的单独对照组。实施例七组合物毒副作用实验1皮肤刺激试验1.1目的检测组合物对试验动物皮肤的刺激/腐蚀作用和强度。1.2试验动物每次试验至少需4只皮肤完好的健康家兔或豚鼠。1.3操作程序1.3.1一次皮肤刺激试验(1)在试验前24h，将家兔或豚鼠背部脊柱两侧的毛剪掉，不得损伤表皮。去毛范围，左、右各约3cm×3cm。(2)次日将受试物(实施例四提供的组合物制剂)0.5ml滴于2.5cm×2.5cm大小的2层-4层纱布上并敷贴在一侧去毛皮肤表面，然后用一层无刺激塑料膜或油纸覆盖，再用无刺激胶布固定。另一侧去毛皮肤作为空白对照(或溶剂对照)。敷贴时间为4h。试验结束后，用温水或无刺激性溶剂除去残留受试物。(3)分别于去除受试物后1h、24h和48h，分别观察皮肤局部反应，并按表1进行刺激反应评分。1.3.2多次皮肤刺激试验(1)同一次皮肤刺激试验操作步骤1.3.1(1)。(2)次日将受试物(实施例四提供的组合物制剂)0.2ml涂在一侧皮肤上，另一侧涂溶剂作为对照，每天涂抹一次，连续涂抹14d。每次涂抹前，按表1评分。对照区和试验区同样处理。1.4评价规定1.4.1一次皮肤刺激试验按照表2，分别将各时间的动物皮肤红斑与水肿形成情况的评分相加，除以动物数，得各时间的皮肤刺激反应积分值(刺激指数)。取其中最高皮肤刺激指数，按表2评定该受试物对动物皮肤刺激强度的分级。1.4.2多次皮肤刺激试验按下列公式计算每天每只动物平均积分，以表2判定皮肤刺激强度。表1，皮肤刺激评分标准表2皮肤刺激强度分级1.5结果耵聍清除组合物(单次刺激)红斑形成水肿形成1号兔子002号兔子003号兔子004号兔子00耵聍清除组合物(多次皮肤刺激试验)上述实验结果显示，本发明组合物一次皮肤刺激实验，结果为皮肤刺激指数为0。多次皮肤刺激实验，结果为皮肤刺激指数为0。表明对皮肤无刺激性。实施例八组合物毒副作用实验2急性眼刺激试验2.1目的检测组合物对试验动物眼睛的急性刺激和腐蚀作用。2.2试验动物使用3只家兔。试验前检查家兔双眼，有异常者不得用于试验。2.3操作程序(1)将本实施例四提供的组合物作为受试物。吸取受试物0.1ml，滴入家兔一侧眼结膜囊内，另一侧眼以生理盐水作为正常对照。(2)滴受试物后使眼被动闭合1s，30s后用生理盐水冲洗。于滴眼后24h、48h、72h、7d、14d和21d，肉眼观察家兔眼结膜、虹膜和角膜的损伤与恢复情况。如果第7d或第14d，眼睛刺激反应评分降至0，即可终止试验。必要时,用2％荧光素钠溶液或裂隙灯检查角膜及虹膜变化。2.4评价规定按表3对家兔眼角膜、虹膜和结膜的急性刺激反应进行评分，并分别计算每只动物在三个不同观察时段(24h、48h和72h)角膜、虹膜和结膜充血、水肿四方面的平均评分(即24h、48h和72h评分之和除以时段数3)。分别以动物眼角膜、虹膜和结膜充血、水肿的平均评分和恢复时间进行综合评价，按表4，表5眼刺激反应分级标准判定受试物对眼睛的刺激强度。表3家兔急性眼刺激反应的评分标准表4眼刺激性反应分级标准表5眼刺激性反应分级标准*:恢复时间:为全部动物四个方面的急性刺激反应评分恢复至0的时间。2.5结果耵聍清除组合物的急性眼刺激实验结果角膜浑浊虹膜受损结膜充血结膜水肿1号兔子00002号兔子00003号兔子0000上述结果表明，本发明提供的组合物无急性眼刺激性。实施例九组合物临床疗效观察预实验方法：耵聍栓塞患者10例，利用实施例四提供的组合物滴耳，每次三滴，每天3次，连续5天10例受试者临床观察结果如下检测指标试验前试验后耳内耵聍(mg)2±0.30.3±0.1耳内感觉痒、疼、异物感强烈舒适耳内是否有炎症有无，或者减轻耳鸣症状有无，或者减轻上述预实验效果良好，可进一步进行临床扩大疗效观察。实施例十组合物临床疗效观察一般资料：外耳道疾病患者300例，其中男161例，女139例，年龄8-65岁。300例患者中，耵聍栓塞185例，外耳道炎55例，外耳道真菌病35例，外耳道湿疹25例。排除标准：合并其他中耳、内耳疾病；耳部已行手术治疗者；由全身性疾病伴发者。方法：耵聍栓塞与外耳道真菌病：实施例四提供的组合物滴耳，每次三滴，每天3次，连续5天。外耳道炎与外耳道湿疹，实施例四提供的组合物滴耳，每次三滴，每天3次，连续治疗5-7天。结果：治疗结果如下表所示分组治愈(例)缓解(例)无效(例)耵聍栓塞174101外耳道炎4285外耳道真菌病3131外耳道湿疹2032本发明提供的组合物，对耵聍栓塞的有效率99.46％，对外耳道炎的有效率为91％，对外耳道真菌病的有效率为97.14％，对外耳道湿疹的有效率为92％。有效率的计算方法为：(治愈(例)+缓解(例))/病例总数*100％。不良反应统计如下表上述结果表明，本发明提供的组合物，应用于临床，无明显不良反应。以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页12