IL-6拮抗剂制剂及其用途的制作方法

本申请要求了于2016年2月23日提交的美国临时专利申请序列号第62/298,774号的权益，其通过引用并入本文。发明领域本发明涉及例如用于白介素-6(il-6)拮抗剂的治疗组合物制剂。
背景技术：
：il-6是一种多效性细胞因子，据报道在炎症、造血、血管发生、细胞分化和神经元存活中有作用。技术实现要素：本文的特征在于包含il-6拮抗剂(例如，il-6抗体分子，例如，il-6抗体或其片段，如wo2014/074905中所述)的制剂(例如，药物组合物，例如，稳定的含水制剂)，其尤其可用于调节il-6家族细胞因子及其蛋白质复合物和/或它们各自的受体(例如，il-6受体)等以治疗疾病以及检测和/或结合il-6。本文中所述的是包含1mg/ml至100mg/ml的il-6拮抗剂(例如，抗-il-6抗体或其片段)的药物制剂。在实施方式中，药物制剂包括5mg/ml至50mg/ml的il-6拮抗剂(例如，il-6抗体或其片段)；以及以下中的一种或多种或全部：缓冲物(例如，缓冲剂)、表面活性剂和/或张度剂。在一个实施方式中，药物制剂包括5mg/ml至50mg/ml的il-6抗体或其片段、缓冲剂、表面活性剂和两种张度剂(例如，糖和盐)。制剂在一个方面，本公开特征在于制剂，例如，包括1-100mg/ml的il-6拮抗剂的药物制剂。在一个实施方式中，制剂包括5-50mg/ml的il-6拮抗剂。在一个实施方式中，制剂包括约5mg/ml的il-6拮抗剂。在一个实施方式中，制剂包括约50mg/ml的其il-6拮抗剂。在本文所述的任何制剂中，il-6拮抗剂是il-6抗体分子，例如，il-6抗体或其片段。在一个方面，本公开特征在于制剂，例如，包括1-100mg/ml的il-6抗体或其片段的药物制剂。在一个实施方式中，制剂包括5-50mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括1-10mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括2-3mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括3-4mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括4-5mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括5-6mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括6-7mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括7-8mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括8-9mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括9-10mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括5mg/ml±10％的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括5mg/ml±20％的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括5mg/ml±30％的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括5mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括10-100mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括20-80mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括40-60mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括20-30mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括30-40mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括40-50mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括50-60mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括60-70mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括70-80mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括80-90mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括90-100mg/ml的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括50mg/ml的il-6抗体或其片段。在本文中提供了示例性的il-6抗体分子，例如，il-6抗体及其片段。在一个实施方式中，制剂包括一定浓度的il-6抗体分子，例如，il-6抗体或其片段，所述浓度介于比本文所公开的il-6抗体分子浓度低至少10％到高至少10％之间。举例来说，在一个实施方式中制剂包括50mg/ml±10％的il-6分子，例如，il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括50mg/ml±20％的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂包括50mg/ml±30％的il-6抗体或其片段。在一个实施方式中，制剂还包括1-50mm的组氨酸缓冲液，例如，5-40mm的组氨酸缓冲液、10-30mm的组氨酸缓冲液或15-25mm的组氨酸缓冲液。在一个实施方式中，制剂还包括1-10mm的组氨酸缓冲液、10-20mm的组氨酸缓冲液、20-30mm的组氨酸缓冲液、30-40mm的组氨酸缓冲液、40-50mm的组氨酸缓冲液、5-10mm的组氨酸缓冲液、10-15mm的组氨酸缓冲液、15-20mm的组氨酸缓冲液、20-25mm的组氨酸缓冲液、25-30mm的组氨酸缓冲液、30-35mm的组氨酸缓冲液、35-40mm的组氨酸缓冲液、40-45mm的组氨酸缓冲液或45-50mm的组氨酸缓冲液。在一个实施方式中，制剂还包括1mm、5mm、10mm、15mm、20mm、25mm、30mm、35mm、40mm、45mm或50mm的组氨酸缓冲液。在一个实施方式中，制剂包括一定浓度的缓冲液，例如，组氨酸缓冲液，所述浓度介于比本文所公开的缓冲液浓度低至少10％和高至少10％之间。举例来说，在一个实施方式中制剂包括20mm±10％的组氨酸缓冲液。在一个实施方式中，制剂还包括20mm±20％的组氨酸缓冲液。在一个实施方式中，制剂还包括20mm±30％的组氨酸缓冲液。在一个实施方式中，制剂还包括0.01％至1％w/v的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188，例如，0.01％至0.5％、0.01％至0.1％、0.01％至0.05％、0.02％至0.04％w/v的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188。在一个实施方式中，制剂还包括0.01％至0.02％、0.02％至0.03％、0.03％至0.04％、0.04％至0.05％、0.05％至0.06％、0.07％至0.08％、0.08％至0.09％或0.09％至0.1％w/v的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188。在一个实施方式中，制剂还包括0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.1％、0.15％、0.2％、0.5％或1％w/v的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188。在一个实施方式中，制剂包括一定浓度的表面活性剂，例如，聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188，所述浓度介于比本文所公开的表面活性剂浓度低至少10％至高至少10％之间。举例来说，在一个实施方式中制剂包括0.03％±0.003％的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188。在一个实施方式中，制剂还包括0.03％±0.006％的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188。在一个实施方式中，制剂还包括0.03％±0.01％的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188。在本文所述的任何制剂中，聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)和泊咯沙姆188是可互换的。在一个实施方式中，制剂还包括1-150mm的氯化钠，例如，1-50mm、1-25mm、5-100mm、10-75mm、10-50mm、10-30mm或15-25mm的氯化钠。在一个实施方式中，制剂还包括1-10mm、1-20mm、5-15mm、5-25mm、10-20mm、10-30mm、15-25mm、15-35mm、20-30mm、30-40mm、40-50mm、50-60mm、70-80mm、80-90mm、90-100mm、100-110mm、110-120mm、120-130mm、130-140mm或140-150mm的氯化钠。在一个实施方式中，制剂还包括约1mm、5mm、10mm、15mm、20mm、25mm、30mm、50mm、100mm或150mm的氯化钠。在一个实施方式中，制剂包括一定浓度的氯化钠，所述浓度介于比本文所述的氯化钠浓度低至少10％至高至少10％之间。举例来说，在一个实施方式中制剂包括20mm±10％的氯化钠。在一个实施方式中，制剂还包括20mm±20％的氯化钠。在一个实施方式中，制剂还包括20mm±30％的氯化钠。在一个实施方式中，制剂还包括1-10％的山梨糖醇，例如，1-8％、1-6％、2-5％或3-5％的山梨糖醇。在一个实施方式中，制剂还包括1-10％的山梨糖醇、2％至12％、3％至13％、4％至14％、5％至15％、1％至2％、2％至3％、3％至4％、4％至5％、5％至6％、6％至7％、7％至8％、8％至9％或9％至10％的山梨糖醇。在一个实施方式中，制剂还包括约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％的山梨糖醇。在一个实施方式中，制剂包括一定浓度的山梨糖醇，所述浓度介于比本文中所公开的山梨糖醇浓度低至少10％至高至少10％之间。举例来说，在一个实施方式中制剂包括4％±0.4％的山梨糖醇。在一个实施方式中，制剂还包括4％±0.8％的山梨糖醇。在一个实施方式中，制剂还包括4％±1.2％的山梨糖醇。在实施方式中，制剂的ph为约5.5至约7.5，例如，约5.5至约7.0，约6.0至约7.0，约6.2至约6.8。在一个实施方式中，制剂的ph为约5.5、约5.6、约5.7、约5.8、约5.9、约6.0、约6.1、约6.2、约6.3、约6.4、约6.5、约6.6、约6.7、约6.8、约6.9或约7.0。在一个实施方式中，制剂的ph为约6.5。在一个方面，本公开特征在于制剂，例如，如下的药物制剂：其包括1-100mg/ml或5-50mg/ml的如本文中所公开的il-6抗体或其片段；10-50mm的组氨酸缓冲液；0.01％至0.1％的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188；1-150mm的氯化钠；以及1-10％的山梨糖醇；并且其ph介于5.5至7.5之间，例如，ph为6.5。在另一方面，本公开特征在于制剂，例如，如下的药物制剂：其包括5-50mg/ml的如本文中所述的il-6抗体或其片段；10-30mm的组氨酸缓冲液；0.01％至0.05％的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188；10-30mm的氯化钠；以及1-6％的山梨糖醇；其ph介于6至7之间，例如，其ph为6.5。在仍然另一方面，本公开特征在于制剂，例如，如下的药物制剂：其包括5-50mg/ml的如本文中所述的il-6抗体或其片段；15-25mm的组氨酸缓冲液；0.02％至0.04％的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188；15-25mm的氯化钠；以及3-5％的山梨糖醇；其ph介于6.2和6.8之间，例如，其ph为6.5。在另一方面，本公开特征在于制剂，例如，如下的药物制剂：其包括约5-50mg/ml的如本文中所述的抗-il-6抗体或其片段；20mm的组氨酸缓冲液，例如，组氨酸盐酸盐；0.03％的聚山梨酯-20(tween-20)；20mm的氯化钠；以及4％的山梨糖醇；其ph为5.5。在一个实施方式中，制剂包括约5mg/ml的抗-il-6抗体或其片段；20mm的组氨酸缓冲液，例如，组氨酸盐酸盐；0.03％的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188；20mm的氯化钠；以及4％的山梨糖醇，其ph为5.5。在一个实施方式中，制剂包括约50mg/ml的抗-il-6抗体或其片段；20mm的组氨酸缓冲液，例如，组氨酸盐酸盐；0.03％的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188；20mm的氯化钠；以及4％的山梨糖醇，其ph为5.5。在另一方面，本公开特征在于制剂，例如，如下的药物制剂：其包括约5-50mg/ml的如本文中所述的抗-il-6抗体或其片段；20mm的组氨酸缓冲液，例如，组氨酸盐酸盐；0.03％的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188；20mm的氯化钠；以及4％的山梨糖醇；其ph为5.5。在一个实施方式中，制剂包括约5mg/ml的抗-il-6抗体或其片段；20mm的组氨酸缓冲液，例如，组氨酸盐酸盐；0.03％的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188；20mm的氯化钠；以及4％的山梨糖醇，其ph为5.5。在一个实施方式中，制剂包括约50mg/ml的抗-il-6抗体或其片段；20mm的组氨酸缓冲液，例如，组氨酸盐酸盐；0.03％的聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)或泊咯沙姆188；20mm的氯化钠；以及4％的山梨糖醇，其ph为5.5。在本文所述的任何制剂中，制剂还可包括以下中的一种或多种或全部：螯合剂、防腐剂、粘度剂、渗透促进剂或生物粘合剂、稳定剂和/或抗氧化剂。在本文所述的任何制剂中，制剂还包括第二治疗剂。在一个实施方式中，第二治疗剂是抗-vegf剂、抗-pgdf剂或类固醇，例如，皮质类固醇。如本文所用的，抗-vegf剂或抗-pdgf剂可以是抑制或降低vegf通路活性的小分子、肽、抗体或核酸。在一个实施方式中，抗-vegf剂是抑制或降低vegf通路组成部分(例如，vegf或vegf受体)的活性的抗体。在一个实施方式中，抗-pdgf剂是抑制或降低pdgf通路组成部分(例如，pdgf或pdgf受体)的活性的抗体。在本文所述的任何制剂中，制剂在室温或以下是稳定的，例如，在约20℃或以下的温度。在一个实施方式中，制剂在20℃或以下、10℃或以下、8℃或以下、4℃或以下、2℃或以下、-20℃或以下、-65℃或以下、-80℃或以下、-100℃或以下是稳定的。在一个实施方式中，制剂在2-20℃之间是稳定的，例如，2-8℃。在一个实施方式中，制剂稳定至少1周、至少2周、至少1月、至少2月、至少4月、至少6月、至少12月、至少16月、至少20月、至少24月或至少36月。在一个实施方式中，制剂在-65℃或以下的温度稳定至少1或2年。在一个实施方式中，制剂在2-8℃的温度稳定至少6月。il-6抗体在本文所述的任何制剂中，il-6抗体分子，例如，抗体或其片段，包括在表1或者图1a或1b中提供的序列或其部分。在一个实施方式中，il-6抗体分子，例如，抗体或其片段包括：包含seqidno:19的序列的vhcdr1，包含seqidno:20的序列的vhcdr2，以及包含seqidno:21的序列的vhcdr3。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段还包括包含seqidno:22的序列的vlcdr1，包含seqidno:23的序列的vlcdr2，以及包含seqidno:24的序列的vlcdr3。在另一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括包含seqidno:19的序列的vhcdr1，包含seqidno:20的序列的vhcdr2和包含seqidno:21的序列的vhcdr3；以及包含seqidno:22的序列的vlcdr1，包含seqidno:23的序列的vlcdr2，和包含seqidno:24的序列的vlcdr3。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括(由以下组成)：与seqidno:28或seqidno:29具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的恒定区序列。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括(由以下组成)：包含seqidno:28或seqidno:29的恒定区序列。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括(由以下组成)：与seqidno:17具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的重链可变区序列。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括(由以下组成)：包含seqidno:17的重链可变区序列。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括(由以下组成)：与seqidno:13具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的重链序列。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括(由以下组成)：包含seqidno:13的重链序列。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括(由以下组成)：与seqidno:18具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的轻链可变区序列。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括(由以下组成)：包含seqidno:18的轻链可变区序列，或。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括(由以下组成)：与seqidno:14具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的轻链序列。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括(由以下组成)：包含seqidno:14的轻链序列。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括(由以下组成)：包含seqidno:17的重链可变区和包含seqidno:18的轻链可变区。在一个实施方式中，il-6抗体或其片段包括(由以下组成)：包含seqidno:13的重链序列和包含seqidno:14的轻链序列。在一个实施方式中，抗-il-6抗体是igg2抗体。在一个实施方式中，il-6抗体是全长抗体。如本文中进一步所述的，igg2抗体可以不同结构亚型存在，这可归因于抗体重链和轻链之间的替换的(alternative)二硫键，例如，亚型igg2-a、亚型igg2-a/b和亚型igg2-b，在本文中也称为a亚型、a/b亚型或b亚型。亚型的结构也在图11中示出。在一个实施方式中，制剂中存在的至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的抗体总体上为a亚型或a/b亚型。在一个实施方式中，制剂中存在的至少70％、75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％或90％的抗体为a亚型。在一个实施方式中，制剂中存在的不到5％、4％、3％、2％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％或0.1％的抗体为b亚型。在一个实施方式中，制剂基本不含以b亚型存在的抗体，例如，所存在的不到5％、不到4％、不到3％、不到2％、不到1％或不到0.5％的抗体为b亚型。制剂中以a亚型、a/b亚型和/或b亚型存在的抗体的百分数、量或数量(quantity)可通过以下方式测定：hplc，如，反相hplc(rp-hplc)；或者在非还原条件下作肽图，随后质谱(ms)分析。治疗用途本文还提供了治疗患有il-6相关疾病或病症的受试者的组合物和方法。所述方法包括对受试者施用治疗有效量的包含本文所述制剂的组合物。在实施方式中，所述方法包括鉴定如本文所述的患有il-6相关疾病或病症的受试者；以及对受试者施用治疗有效量的包含如本文所述制剂的组合物。本文中还描述了在受试者中抑制il-6活性的方法。所述方法包括对受试者施用如本文所述的制剂。在实施方式中，受试者患有如本文所述的il-6-相关的疾病或病症。本文中还公开了如本文所述的组合物在制备治疗或预防受试者的il-6相关的疾病或病症的药物中的应用，例如，在制备适于施用给受试者以治疗或预防受试者的il-6相关的疾病或病症的药物中的应用。在实施方式中，药物用于施用给眼，例如，眼部施用。例如用于通过施用如本文所述的组合物或制剂治疗的il-6相关的疾病或病症可与提高或升高的il-6表达或活性相关。在一个实施方式中，il-6相关的疾病或病症的一种或多种症状与提高或升高的il-6表达或活性相关。受试者的提高或升高的il-6表达可通过与疾病或疾病症状发作之前的il-6表达水平相比较来测定。受试者的提高或升高的il-6表达可通过与未患il-6相关的疾病或病症的另一受试者相比来测定。il-6相关疾病的实例包括但不限于，糖尿病黄斑水肿(dme)、糖尿病视网膜病变、干眼(例如，干眼疾病或干眼综合征)、变态反应性结膜炎、葡萄膜炎、年龄相关的黄斑变性(amd)(例如，湿性(渗出性)或干性(萎缩性)amd)、增殖性糖尿病视网膜病变(pdr)、孔源性视网膜脱离(rrd)、视网膜静脉阻塞(rvo)、视神经脊髓炎(nmo)、角膜移植、角膜擦伤、近视性脉络膜新生血管、眼部癌症(例如，影响眼或眼周区域(例如眼眶和/或眼睑)的癌症)或眼的物理损伤。在一些实施方式中，第二治疗剂与本文所述的制剂组合施用给受试者。在一个实施方式中，第二治疗剂作为与本文所述制剂分离的组合物施用。在一个实施方式中，本文所述的制剂包括第二治疗剂。合适的第二治疗剂包括市售或已知用于治疗本文所述il-6相关的疾病或病症的任何治疗剂。在一个实施方式中，第二治疗剂是抗-vegf剂、抗-pdgf剂或类固醇。通常，如本文所述的被治疗的受试者是人或其它哺乳动物，诸如，狗或猫。在一些实施方式中，受试者先前已用抗-vegf剂或类固醇治疗。在一些实施方式中，受试者对抗-vegf剂或类固醇治疗耐药或者难以用其治疗，例如，受试者对用抗-vegf剂或类固醇的治疗没有反应。在实施方式中，对给定治疗没有反应的受试者是以下那些：其中疾病或病症(例如，il-6相关的疾病)的一种或多种症状在施用给定治疗之后没有得到缓解或减轻。另一方面，本公开特征在于装置，例如，包括如本文所述的制剂的药物递送装置。在另一方面，本公开特征在于包括如本文所述的制剂的容器或装置。在一个实施方式中，所述容器是多剂量容器。在一个实施方式中，所述容器容纳0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml、0.7ml、0.8ml、0.9ml或1.0ml的体积。在另一方面，本公开特征在于包括如本文所述的制剂和任选地使用说明的药盒。在一个实施方式中，所述药盒包括一个或多个包括如本文所述的制剂的容器或装置和任选地使用说明。除非另外定义，本文所用的所有技术和科学术语具有本发明所属领域一般技术人员在本文中所通常理解的相同含义。术语“一/一个/一种”(a/an)是指一个或多于一个(即，至少一个)的该冠词的受词。举例来说，“一个要素”是指一个要素或多于一个要素。术语“约”在涉及可测量的值(诸如，量、时距等)时意图包含距所指定的值的±20％的变化，或者在一些情况中包含±10％的变化，或者在一些情况中包含±5％的变化，或者在一些情况中包含±1％的变化，或者在一些情况中包含±0.1％的变化，因为这样的变化适于实施所公开的方法。本文中引用的所有专利、公开的专利申请和公开的参考文献均通过引用并入用于所有目的。附图说明图1a描绘了fr1、cdr1、fr2、cdr2、fr3、cdr3、fr4、ch1、铰链、ch2和ch3在ebi-029(seqidno:1)、ebi-030(seqidno:13)和ebi-031(ebi-031在本文中也被称为ebi-030-h311a)(seqidno:25)的重链序列中的位置。图1b描绘了fr1、cdr1、fr2、cdr2、fr3、cdr3、fr4和ck在轻链序列(ebi-029、ebi-030和ebi-031具有相同的轻链序列)(seqidno:3)中的位置。图2a和2b是显示通过se-uplc分析测定的主峰纯度(％)与根据所测试的不同缓冲液的ph升高(图2a)或与所测试的不同赋形剂(图2b)之间关系的图表。图3a、3b、3c、3d和3e示出了在第7日进行的和如实施例3中所述的se-uplc分析的结果。图4是显示通过se-uplc分析测定的主峰纯度(％)与根据所测试的不同缓冲液的ph升高之间关系的图表。所测试的每种缓冲液在x轴上由96孔板布局的孔名称(welldesignation)代表，如图4中所示。图5是显示通过se-uplc分析测定的hmw峰与根据所测试的不同缓冲液的ph升高之间关系的图表。所测试的每种缓冲液在x轴上由96孔板布局的孔名称代表，如图4中所示。图6是显示关于包含组氨酸缓冲液的样品的不同盐浓度和赋形剂的主峰纯度(％)的图表。在x轴上，数字1-12代表存在于图4中所列出的第1-12栏中的盐浓度和赋形剂。图7总结了来自由实施例4中所述的第一次搅拌研究并且通过se-uplc分析测定的结果。图8a、8b和8c总结了来自实施例4中所述的第二次搅拌研究并且通过se-uplc分析测定的结果。图9a、9b、9c和9d是显示关于在所用的不同搅拌条件下的每种被测试的赋形剂的总峰面积(图9a)、igg主峰纯度(图9b)、高分子量(hmw)物种(图9c)和低分子量(lmw)物种(图9d)。图10示出了因二硫键改组(disulfideshuffling)所致的igg2抗体的三种不同结构亚型的示意图。图11示出了ebi-031样品的rp-hplc色谱图：未处理(上框)、5mmdtt(中框)、10mm半胱氨酸(下框)。图12示出了从不同的ebi-031细胞系收集的ebi-031样品的rp-hplc色谱图：克隆细胞系的200l规模培养物(上框)、亲本细胞系的10l规模培养物(中框)和细胞的稳定转染池(下框)。图13示出了从克隆细胞系的200l规模培养物收集的ebi-031的rp-hplc色谱图，并且指定和量化了色谱图中的每个峰代表哪种亚型。具体实施方式本文提供了可用于将il-6拮抗剂(例如，il-6抗体或其片段)提供给需要用此制剂治疗的受试者的制剂。在实施方式中，受试者患有或有风险患有il-6相关的疾病或病症，例如，与升高或提高的il-6表达和/或活性相关的疾病。本文中还公开了制备和施用这样的制剂的方法。本文所述的制剂已被调配和优化为适合施用给患者并且在不同温度下和延长的时间段内提供改进的稳定性。注意，在包括包含源于igg2抗体的恒定区(例如，如本文所述的igg2恒定区)的il-6抗体的本文所述的制剂中，所述制剂包括不同igg2结构亚型的最佳分布，例如，主要为a亚型和a/b亚型以及极少或可忽略量的b亚型。b结构亚型可与抗体的聚集、功能降低和稳定性降低相关。因此，包含本发明抗体的组合物和制剂与本领域已知的其他包含igg2抗体的组合物或制剂相比的异质性较低(lessheterogeneous)。il-6拮抗剂本公开提供了用于递送il-6拮抗剂(在本文中也称为il-6a)的制剂。通常，本文所述的il-6拮抗剂(il-6a)可结合到il-6，并且抑制或降低至少一种il-6活性。il-6活性可包括以下中的一种或多种：与gp130的结合；il-6信号通路的激活；jak激酶的激活，例如，jak激酶靶的磷酸化；stat蛋白的激活，例如，stat蛋白的磷酸化；和/或stat-靶基因的表达。在一个实施方式中，本文所述的il-6a特异性结合到il-6的位点ii(2位)，并且可用于治疗il-6相关的疾病，例如，il-6相关的眼病和本文所述的某些其它疾病。在一些实施方式中，il-6a的特征在于以下特性中的一种或多种：对游离il-6(例如，可溶性il-6)或结合il-6(例如，结合到il-6受体的il-6)或者游离和结合il-6二者具有高亲和性；在器官中相对稳定；能抑制gp130对与il-6r结合的il-6(在本文中名为il-6/il-6r复合物或il-6/il-6r)的结合；和/或能具有治疗作用。在一个实施方式中，il-6a是抗体或者是源于抗体的片段。例如，il-6a是能特异性结合到il-6的位点ii和有效阻断顺式-和反式-il-6信号的高亲和性人源化fab。在另一个实例中，il-6a是全长抗体，例如，igg1或igg2抗体。在一个实施方式中，il-6a选择性地结合到il-6的位点ii并且提供了对il-6信号的广泛抑制，这是因为这种分子能抑制gp130对il-6的结合，无论il-6是游离的还是结合到膜il-6r或sil-6r的。此外，靶向配体(il-6)而不是il-6受体能避免受体介导的清除和因adcc所致的毒性(抗体依赖型细胞介导的细胞毒性)。由于il-6在疾病中起致病和保护的双重作用，使用il-6拮抗剂(il-6a)治疗与提高的il-6相关的疾病能改善病况的某些方面，但是也会导致严重的副作用，例如，全身效应。il-6通路的这种二元性(即，具有理想和/或不理想作用的能力)可使得不希望用系统性抑制剂(systemicinhibitor)来治疗il-6相关病症。因此，本文所提供的组合物和方法可用于抑制至少一种il-6活性但不对il-6的正面活性(positiveactivity)有不适当影响的治疗，这部分是因为组合物可调配为用于局部递送，例如，用于局部递送到眼。例如，在某些方面，il-6a被设计为具有适合递送到特定位点的尺寸。在一些实施方式中，il-6a是全长抗体。在一些实施方式中，il-6a源于抗体并且为可具有在眼的特定腔室(compartment)(例如，眼玻璃体)中的更长停留时间和有限的全身泄露(systemicleakage)的形式。在一些实施方式中，il-6a是修饰抗体(例如，具有修饰的fc域的抗体)，其与对应的未修饰抗体相比具有在眼玻璃体中的更长停留时间和更有限的全身泄露。在一些实施方式中，il-6a是igg2抗体。在一些方面，il-6a是相对小的il-6a，诸如，il-6抗体的片段或者其它小于全长抗体的抗体衍生物，例如，源于il-6抗体的fab。在某些情况中，il-6a为与相应的全长il-6抗体相比能以提高的动力学从组织的一个部分通往另一个部分的形式。在一些实施方式中，il-6a是已被工程化为较大分子的fab，其与仅fab相比更可能在其所被递送到的位置中具有提高的停留时间，例如，通过fc域将il-6a二聚。在某些实施方式中，fc域已被工程化为使得fc部分具有被去除(ablated)或减少的fcrn结合，其与包含野生型fc的相同il-6结合实体相比能降低全身积累。工程化fc域可为，例如，igg1域或igg2域。通常，本文所述的il-6拮抗剂对其靶il-6具有足够高的亲和性以致能有效地减轻il-6的至少一种不理想的作用，并且足够稳定以致可用作治疗剂。通常，il-6a(例如，适合用于眼中的il-6a)的药代动力学(pk)在递送位点(例如，玻璃体)中具有足够长的半衰期以提供治疗作用。在非限制性实例中，pk可为至少8日、10日、14日、21日、28日或30日的半衰期。结合到位点ii的il-6拮抗剂的鉴定通常，可使用本领域已知的任何方法来产生能结合到il-6的分子，例如，可在多肽或化合物结合il-6能力的实验中筛选多肽库或分子库以得到候选化合物。一旦鉴定了这样的候选化合物，该化合物的结合位点可使用本领域已知方法测定。例如，可测试分子与野生型il-6结合的能力并且将结合与该化合物与在位点i、位点ii或位点iii处突变的il-6结合的能力相比较。在实施方式中，如本文所述的il-6a保留了与il-6/il-6rα复合物和与il-6结合的能力，并且阻止了il-6/il-6rα与gp130的结合。在实施方式中，如本文所述的il-6a能与gp130竞争结合到il-6/il-6rα复合物，例如，通过结合到il-6的位点ii。这样的结合活性可使用本领域已知方法来测定。il-6a候选物可例如使用hek-bluetmil-6测试系统(invivogen,sandiego)来检测。hek-bluetmil-6细胞是用人il-6r和stat3-诱导的seap报告基因稳定转染的hek293细胞。在il-6存在下，激活stat3并分泌seap。使用例如quanti-bluetm(invivogen,sandiego)来评估seap。向细胞添加il-6拮抗剂阻止了分泌或者降低了seap的水平，这是因为同时抑制了游离的和与可溶性受体结合的il-6。kd是指特定抗体-抗原相互作用或者抗体片段-抗原相互作用的结合亲和性平衡常数。在实施方式中，本文所述的抗体或抗原结合片段以如下的kd结合到抗原(例如，il-6)：小于或等于250pm，例如，小于或等于225pm、220pm、210pm、205pm、150pm、100pm、50pm、20pm、10pm或1pm。kd可使用本领域已知方法测定，例如使用表面等离子体共振，例如，使用biacoretm系统。koff是指特定抗体-抗原相互作用或抗体片段-抗原复合物的解离速率常数。解离速率常数可使用表面等离子体共振测定，例如使用biacoretm系统。相对慢的koff可有助于治疗剂的理想特征，例如，允许对需要这样的治疗的受试者以更低频率施用抑制剂。特异性在一些实施方式中，本文所述的il-6a特异性地与靶(例如，il-6)结合。通常，如本文所用的，"特异性结合”表示分子优先结合到所选定的分子，并且对一种或多种其它分子显示低得多的结合亲和性。在实施方式中，对另一种分子的结合亲和性比对靶的结合亲和性低1、2、3或更多个数量级。如上文所讨论的，il-6可作为游离il-6和作为与可溶性il-6rα结合的il-6存在。与结合到il-6的位点i的抑制剂相比，申请人已鉴定出il-6的位点ii作为il-6拮抗剂的最佳靶。位点i抑制剂可抑制游离il-6与il-6rα的结合。然而，这样的抑制剂不能阻止被预先存在的il-6/il-6r复合物引发(激发)的活性，除非通过复合物的koff来限制替代。另一种选择，结合到il-6rα的抑制剂是较不合适的，这是因为其阻止il-6活性的能力有限，除非其以饱和浓度存在。因为il-6受体的量与il-6的量相比通常非常高，这种方式可能需要施用不理想地大量的通过与受体结合抑制il-6活性的组合物。在实施方式中，本文所述的il-6拮抗剂(例如，本文所述的抗体及其片段和衍生物)甚至在il-6结合到il-6r时也能阻塞il-6的活性。因此，如本文所述的il-6a的优点是与靶向il-6受体的抑制剂相比需要施用相对较少的组合物以实现治疗作用。抗-受体抗体已被报道为被受体介导的清除作用迅速清除，这显著影响了它们的pk，因此需要更大的剂量、更频繁的给药或者二者。另外地，抗-受体和抗-位点i的il-6抗体提出了以下问题：由于干扰了正常受体介导的配体清除通路，其显著提高了il-6的组织浓度，从而将受试者暴露于组织中可能不理想的il-6水平。此外，靶向il-6rα的抑制剂的使用可能必须要求在寻求抑制的位点和不需要抑制的位点附近均存在抑制剂，例如，全身性治疗。使用结合位点ii(gp130所结合的位点)的il-6a允许经由游离il-6以及结合到il-6r的il-6的抑制，但是仍不会通过gp130激活il-6通路。因此，不希望受理论所限，本文所述的il-6拮抗剂被设计为结合到两种形式的il-6(可溶性的和受体结合的)，具体而言，该il-6拮抗剂结合到il-6的位点ii，该位点在两种形式中均可访问。包含如本文所述的il-6a的组合物能抑制il-6的顺式和反式信号。在一些情况中，本文所提供的化合物和方法被设计为提供足以治疗il-6相关病症的至少一种迹象或症状的有效的il-6阻塞，例如，抑制新生血管和/或炎症。本文所述的化合物可用于治疗特征在于不理想的高il-6水平(例如，在玻璃体中)的眼部疾病，(参见，yuukietal.,jdiabetescompl15:257(2001)；funatsuetal.,ophthalmology110：1690,(2003)；ohetal.,curreyeres35:1116(2010)；nomaetal.,eye22:42(2008)；kawashimaetal.,jpnjophthalmol51:100(2007)；kauffmanetal.,investophthalmolvissci35:900(1994)；miaoetal.,molecvis18:574(2012))。通常，本文所述的il-6a是il-6信号的强效拮抗剂。在一些实施方式中，本文所述的il-6a具有对il-6的高亲和性，例如，在使用10pmil-60的hek-blueil-6测试中的ic50小于或等于100pm。il-6a的高亲和性可基于il-6a的kd来测定，例如，kd小于或等于1nm、小于或等于500pm、小于或等于400pm、小于或等于300pm、小于或等于240pm或者小于或等于200pm。为制备可用于治疗与提高的il-6表达或活性相关的病症的生物学il-6a(例如，蛋白或多肽，诸如，抗体、片段或其衍生物)，通常希望生物学il-6a具有高生产率。例如，合适的生产率大于或等于1g/l(例如，大于或等于2g/l，大于或等于5g/l，或大于或等于10g/l)。为有效施用il-6拮抗剂，抑制剂必须具有与其所被施用的浓度相容的溶解度。例如，在全长抗体il-6a的情况中，溶解度大于或等于20mg/ml，大于或等于10mg/ml，大于或等于5mg/ml，或大于或等于1mg/ml。此外，作为可行的治疗方法，抑制剂必须在递送和活性部位的体温下具有高稳定性以及存储稳定性。在实施方式中，抑制剂的tm大于或等于60℃(例如，大于或等于60℃，大于或等于62.5℃，大于或等于65℃，大于或等于70℃，大于或等于73℃，或大于或等于75℃)。在实施方式中，抑制剂的tonset大于或等于45℃，例如，大于或等于50℃，大于或等于51℃，大于或等于55℃，或大于或等于60℃。测定tm和tonset的方法可使用本领域已知方法测定。具有理想特征的拮抗剂可选自本领域已知的合适类型的分子，例如，抗体，包括通常保留或保持了亲本il-6抗体的足够特征(例如，理想的结合特性)的靶向il-6位点ii的抗体的片段和衍生物。这样的拮抗剂包括fab片段、scfvs、工程化为包含fc部分的fab片段和工程化为具有不同于靶向亲本il-6位点ii的抗体的框架的全长抗体。在一些方面，本文公开的il-6a包括能与结合到il-6的位点ii的抗体或其片段竞争或交叉竞争的人抗体抗原-结合位点。例如，该抗体或其片段可包括本文所公开的vh域和vl域，且vh和vl域包括本文所公开的il-6/位点ii结合抗体的一组cdr。任何合适的方法可用于测定il-6a所结合的域或表位，例如，通过突变il-6上的多个位点。其中突变阻止或降低了il-6a和il-6配体的结合的那些位点直接参与与il-6a的结合或间接影响结合位点，例如，通过影响il-6的构象。其它方法可用于测定il-6a所结合的氨基酸。例如，可使用肽-结合扫描，诸如，基于pepscan的酶联免疫分析法(elisa)。在这种类型的肽结合扫描中，源于抗原的重叠短肽进行系统性筛选以测定其与结合部件的结合。肽可共价连接到支持体表面以形成肽阵列。肽可为线性或限定构象。限定构象可使用具有在肽序列的每端具有末端半胱氨酸(cys)残基的肽来产生。cys残基可直接或间接共价连接到支持体表面以使得肽被保持在环形构象。因此，在该方法中使用的肽可具有被添加到在对应于抗原片段的肽序列的每端的cys残基。也可使用双环肽，其中cys残基额外位于肽序列中部或靠近中部处。cys残基可以直接或间接地共价连接到支持体表面以使得该肽形成双环构象，其中中心cys残基的每端上有一个环。肽可合成生产，并且因此可将cys残基工程化到所需位置，无论其是否天然存在于il-6位点ii序列中。任选地，线性和限定肽均可在肽-结合实验中筛选。肽-结合扫描可涉及鉴定(例如，使用elisa)结合部件所结合的一组肽，其中所述肽具有对应于il-6a片段的氨基酸序列(例如，包括il-6a的约5、10或15个连续残基的肽)并对齐肽以测定与结合部件结合的残基的足迹，其中所述足迹包括与重叠肽共有的残基。或者或另外地，肽-结合扫描方法可用于鉴定以至少所选的信号:噪声比与il-6a结合的肽。其它本领域已知方法可用于测定抗体所结合的残基和/或用于确认肽-结合扫描结果，包括例如，定点突变(例如，如本文所述)，氢氘交换，质谱，nmr，和x-射线晶体学。通常，如本文所述可用的il-6a是人抗体分子，人源化抗体分子或其结合片段。通常，抗体是单克隆抗体。这样的抗体的来源可以是人、小鼠、大鼠、骆驼、兔、绵羊、猪或牛，并且可根据本领域技术人员已知的方法产生。如本文所用的术语“抗体分子”是源于与抗原特异性结合的免疫球蛋白分子的蛋白或多肽序列。抗体分子可以是全长抗体或其片段，例如，其抗原结合片段。抗体可以是多克隆或单克隆的、多链或单链的或者完整的免疫球蛋白，并且可源于天然来源或重组来源。抗体可为免疫球蛋白分子四聚体。抗体片段或抗原结合片段是指完整抗体或其重组变体的至少一个部分和指抗原结合域，例如，完整抗体的抗原决定可变区，其足以给予抗体片段与靶(诸如，抗原)的识别和特异性结合。抗体片段的实例包括，但不限于，fab、fab'、f(ab')2和fv片段、scfv抗体片段、线性抗体、单域抗体(诸如，sdab(vl或vh)，骆驼vhh域)和由抗体片段形成的多特异性抗体(诸如，包括通过在铰链区的二硫桥连接的两个fab片段和分离的cdr或抗体的其它表位结合片段的二价片段)。抗原结合片段可也被加入到以下中：单域抗体、巨抗体(maxibodies)、微型抗体(minibodies)、纳米抗体、胞内抗体、双链抗体、三链抗体、四链抗体、v-nar和双-scfv(参见，例如，hollingerandhudson,naturebiotechnology23:1126-1136,2005)。抗原结合片段也可被接枝到基于多肽的支架上，诸如，iii型纤连蛋白(fn3)(参见，美国专利第6,703,199号，其描述了纤连蛋白多肽微型抗体)。示例性的il-6抗体通常，il-6a至少包括能特异性结合到il-6(例如，人il-6)(例如，能结合到il-6的位点ii)的抗体的cdr。携带本发明的cdr或cdr组的结构可以是抗体重或轻链序列或者其主要部分(substantialportion)，在其主要部分中cdr或cdr组位于对应于重排免疫球蛋白基因所编码的天然发生的vh和vl抗体可变域的cdr或cdr组处的。免疫球蛋白可变域的结构可位置可参考以下文献来确定：kabat,etal.,1983(nationalinstitutesofhealth)及其更新，这些可使用任何互联网检索引擎以“kabat”获得。本文所公开的il-6a通常是大体上包含抗体vh域和/或vl域的抗体分子。vh域包括重链cdr组(vhcdr)，且vl域包括轻链cdr组(vlcdr)。这样的cdr的实例在本文中在实施例中提供。抗体分子可包括包含vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3的抗体vh域以及框架(framework)。其可替代性地或者还可包括包含vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3的抗体vl域以及框架。本文中公开的是包括诸如本文中所公开的那些的vhcdr1和/或vhcdr2和/或vhcdr3以及/或者诸如本文中所公开的那些的vlcdr1和/或vlcdr2和/或vlcdr3的il-6拮抗剂。il-6a可包括本文所述的任何抗体、片段或衍生物的cdr中的一个或多个，例如，一个、两个或三个。il-6a可包括vhcdr组(例如，vhcdr1、vhcdr2和/或vhcdr3)，并且任选地其还可包括vlcdr组(例如，vlcdr1、vlcdr2和/或vlcdr3)。cdr可源于本文中所述的一种或多种抗体、片段或衍生物。例如，vlcdr可与vhcdr源于相同或不同的抗体。通常，vh域与vl域配对以提供抗体抗原-结合位点。例如，seqidno:1、seqidno:13或seqno:25的hc域与seqidno:3的lc域配对。在某些情况中，使用单独的vh或vl域作为il-6a。在一个方面本文提供的是包括重链可变区的分离的抗体或抗原结合片段，所述重链可变区包括(i)包括序列gyx1lx2nylie(seqidno:30)的vhcdr1，(ii)包括序列vx3tpgx4gtin(seqidno:31)的vhcdr2，和(iii)vhcdr3，其中以下中的一个或多个(例如，1、2、3或全部)为真：x1不是a，x2不是s，x3不是i，，和x4不是s。在实施方式中，x1不是a，x2不是s，x3不是i，，和x4不是s。在实施方式中，x1是v或v的保守性置换。在实施方式中，x2是p或p的保守性置换。在实施方式中，x3是t或t的保守性置换。在实施方式中，x4是g或g的保守性置换。在实施方式中，以下中的一个、两个、三个或全部为真：x1是v或v的保守性置换，x2是p或p的保守性置换，x3是t或t的保守性置换，和x4是g或g的保守性置换。在实施方式中，x1是v或v的保守性置换，x2是p或p的保守性置换，x3是t或t的保守性置换，和x4是g或g的保守性置换。在实施方式中，x1选自v、i、l和m。在实施方式中，x1选自v、i和l。在实施方式中，x2选自p、g和a。在实施方式中，x2选自p和g。在实施方式中，x3选自t和s。在实施方式中，x4选自g和p。在实施方式中，以下中的一个或多个(例如，1、2、3或全部)为真：x1是v，x2是p，x3是t，和x4是g。在实施方式中，x1是v，x2是p，x3是t，和x4是g。在实施方式中，vhcdr3包括seqidno:21的序列。在实施方式中，抗体分子，例如，抗体或抗原结合片段，具有提高的人il-6亲和性和/或提高的效价。在实施方式中，抗体或抗原结合片段与包括如下序列的抗体或抗原结合片段(例如，其它条件都相同的抗体或抗原结合片段)相比具有提高的人il-6亲和性和/或提高的效价：在所述序列中以下中的一个或多个(例如，1、2、3或全部)为真：x1是a，x2是s，x3是i，和x4是s。在一些实施方式中，分离的抗体分子，例如，抗体或其抗原结合片段，包括包含seqidno:7的序列的vhcdr1、包含seqidno:8的序列的vhcdr2和任选的包含seqidno:9的序列的vhcdr3。在一个实施方式中，分离的抗体或其抗体片段在一个、两个或全部cdr中的每个中的区别不多于3个、2个或1个氨基酸，例如，seqidno:7、seqidno:8或seqidno:9。在一些实施方式中，分离的抗体分子，例如，抗体或其抗原结合片段，包括包含seqidno:19的序列的vhcdr1、包含seqidno:20的序列的vhcdr2和任选的包含seqidno:21的序列的vhcdr3。在一个实施方式中，分离的抗体或其抗体片段在一个、两个或全部cdr中的每个中的区别不多于3个、2个或1个氨基酸，例如，seqidno:19、seqidno:20或seqidno:21。在一些实施方式中，分离的抗体分子，例如，抗体或其抗原结合片段，包括包含seqidno:9或22的序列的vlcdr1、包含seqidno:10或23的序列的vlcdr2和包含seqidno:11或24的序列的vlcdr3。在一个实施方式中，分离的抗体或其抗体片段在一个、两个或全部cdr中的每个中的区别不多于3个、2个或1个氨基酸，例如，seqidno:22、seqidno:23或seqidno:24。在实施方式中，重链可变区包括与seqidno:5具有至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的序列。在实施方式中，重链可变区由与seqidno:5具有至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的序列组成或者与seqidno:5的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸。在实施方式中，重链可变区与seqidno:5的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸，其中所述氨基酸变化不在任何cdr中。在实施方式中，重链可变区与seqidno:5的区别为1-5个氨基酸。在实施方式中，重链可变区包括与seqidno:17具有至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的序列。在实施方式中，重链可变区由与seqidno:17具有至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的序列组成。在实施方式中，重链可变区与seqidno:17的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸。在实施方式中，重链可变区与seqidno:17的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸，其中所述氨基酸变化不在任何cdr中。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括包含seqidno:17的重链可变区序列。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括由seqidno:17组成的重链可变区序列。在实施方式中，轻链可变区包括与seqidno:18具有至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的序列。在实施方式中，轻链可变区由与seqidno:18具有至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的序列组成或与seqidno:18的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸。在实施方式中，轻链可变区与seqidno:18的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸，其中所述氨基酸变化不在任何cdr中。在实施方式中，轻链可变区与seqidno:18的区别为1-5个氨基酸。在实施方式中，抗体分子，例如，抗体或抗原结合片段，包括与seqidno:15具有至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的序列。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括与seqidno:15的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸的序列。在实施方式中，抗体或抗原结合片段与seqidno:15的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸，其中所述氨基酸变化不在任何cdr中。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包含seqidno:15。在实施方式中，抗体或抗原结合片段是fab。在实施方式中，抗体分子，例如，抗体或抗原结合片段，包括与seqidno:16具有至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的序列。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括与seqidno:16的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸的序列。在实施方式中，抗体或抗原结合片段与seqidno:16的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸，其中所述氨基酸变化不在任何cdr中。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包含seqidno:16。在实施方式中，抗体或抗原结合片段是fab。在实施方式中，抗体分子，例如，抗体或抗原结合片段，是scfv。在实施方式中，抗体或抗原结合包括在seqidno:26或seqidno:27中提供的scfv序列或由该scfv序列组成。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括与seqidno:26或seqidno:27具有至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的序列。在实施方式中，抗体或抗原结合片段与seqidno:26或27的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸。在实施方式中，抗体或抗原结合片段与seqidno:26或27的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸，其中所述氨基酸变化不在任何cdr中。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包含seqidno:26或seqidno:27。在实施方式中，抗体或抗原结合片段是scfv。在实施方式中，抗体分子，例如，抗体或抗原结合片段，包括与seqidno:13具有至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的重链序列。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括与seqidno:13的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸的重链序列。在实施方式中，重链序列与seqidno:13的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸，其中所述氨基酸变化不在任何cdr中。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括包含seqidno:13的重链序列。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括由seqidno:13组成的重链序列。在实施方式中，抗体分子，例如，抗体或抗原结合片段，包括与seqidno:14具有至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的轻链序列。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括与seqidno:14的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸的轻链序列。在实施方式中，轻链序列与seqidno:14的区别不多于20、15、10、5、4、3、2或1个氨基酸，其中所述氨基酸变化不在任何cdr中。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括包含seqidno:14的轻链序列。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括由seqidno:14组成的轻链序列。在实施方式中，抗体分子，例如，抗体或抗原结合片段，包括表1中提供的ebi-029、ebi-030或ebi-031中的一个或多个序列。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括图1中所示出的ebi-030或ebi-031中的一个或多个域(例如，重链序列的fr1、cdr1、fr2、cdr2、fr3、cdr3、fr4、ch1、铰链、ch2和ch3和/或轻链序列的fr1、cdr1、fr2、cdr2、fr3、cdr3、fr4和ck中的一个或多个)。在实施方式中，抗体或抗原结合片段包括重链和轻链。在实施方式中，重链和轻链通过一个或多个二硫键连接。在实施方式中，抗体或抗原结合片段是fab。在实施方式中，抗体或抗原结合片段是scfv。在实施方式中，抗体或抗原结合片段是fab、fab'、f(ab')2、scfv或fv片段。在实施方式中，抗体分子，例如，抗体或抗原结合片段，与包括一个或多个ebi-029的对应序列或者wo2014/074905(该文献通过引用整体并入本文)中所述抗体的序列的抗体或抗原结合片段相比，具有提高的人il-6亲和性和/或提高的效价。在实施方式中，抗体或抗原结合片段与托珠单抗(tocilizumab)相比具有提高的人il-6亲和性和/或提高的效价。表1ebi-029、ebi-030和ebi-031的序列的概述aa＝氨基酸；na＝核酸；hc＝重链；lc＝轻链；vh＝重链可变区；vl＝轻链可变区在一些方面，il-6a是包括以下的抗体分子、片段或其衍生物：(i)与本文所述的vh域(例如，seqidno:17)具有至少60、70、80、85、90、95、98或99％氨基酸序列同一性的vh域序列，或(ii)来自vh域序列的vhcdr组(例如，vhcdr1、vhcdr2和/或vhcdr3)。在实施方式中，抗体分子、片段或其衍生物包括seqidno:17的vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3。在实施方式中，抗体分子、片段或其衍生物包括总体上与seqidno:17的vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3的区别不多于1、不多于2、不多于3、不多于4或不多于5个氨基酸的vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3。抗体分子、片段或其衍生物还可任选包括(i)与本文所述的vl域(例如，seqidno:18的vl域)具有至少60、70、80、85、90、95、98或99％氨基酸序列同一性的vl域序列，或(ii)来自vl域的vlcdr组(例如，vlcdr1、vlcdr2和/或vlcdr3)。在实施方式中，抗体分子、片段或其衍生物包括seqidno:18的vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3。在实施方式中，抗体分子、片段或衍生物包括总体上与seqidno:18的vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3的区别不多于1、不多于2、不多于3、不多于4或不多于5个氨基酸的vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3。可用于计算两个氨基酸序列的同一性百分数的算法包括，例如，blast、fasta或smith-waterman算法，例如，采用缺省参数。如本文所述的il-6a可包括抗体恒定区或其部分，例如，人抗体恒定区或其部分。例如，vl域可在其c-末端连接到包括人ck或cl链的抗体轻链恒定域。类似地，基于vh域的il-6a可在其c-末端连接到源于任何抗体亚型(例如，igg、iga、ige和igm以及任何亚型子类，特别是igg1、igg2、igg3和igg4)的免疫球蛋白重链的全部或部分(例如，ch1域)。在实施方式中，抗体或抗原结合片段被工程化以降低或消除adcc活性。在一个实施方式中，本发明的抗体是igg2抗体。在一个实施方式中，本发明的抗体包括如本文所述的igg2框架、igg2恒定区或igg2fc区。igg2抗体可作为三个主要的结构亚型存在：igg2-a、igg2-b和igg2-a/b(wypychj.etal.journalofbiologicalchemistry.2008,283:16194-16205)。这种结构异质性可归因于将fab臂连接到重链铰链区的二硫键的不同构型。在igg2-a亚型中，没有将fab臂连接到铰链区的二硫键。在igg2-b亚型中，两个fab臂均具有将重链和轻链连接到铰链区的二硫键。igg2-a/b亚型是igg2-a和igg2-b亚型之间的杂化体，仅有一个fab臂具有将一个fab的重链和轻链连接到铰链区的二硫键。igg2抗体在两种或所有不同结构亚型之间的转化也被称为二硫键重组，通常对于天然和重组抗体在体内和体外自然发生。因此，本领域中的igg2抗体制剂包括igg2-a、igg2-b和igg2-a/b亚型的异质混合物。不同的igg2亚型可具有独特和不同的功能性，诸如，稳定性、聚集、粘性、fc受体结合或效价的不同。在igg2抗体制剂中存在多种亚型或者存在提高水平的特定亚型能不利地影响稳定性、聚集或效价。容易想到一些igg2抗体的片段仍能经历二硫键重组并以结构亚型a、a/b和/或b中任一种存在，例如，保留了参与二硫键重组的残基的片段(例如，如图10中所示)，例如，包括至少igg2铰链区的片段。本发明提供了优点在于包括主要以igg2-a或igg-a/b亚型存在的抗体或其片段的制剂。抗体或其片段不以igg2-b亚型存在或在大部分时间不以igg2-b亚型存在，从而得到在给定时间时，在组合物中非常低的igg2-b亚型水平。因此包含本文所述抗体的组合物和制剂与本领域已知的其他igg2抗体相比具有较低的异质性，因此对于在治疗用途中的应用来说更优选。包含所述抗体的组合物和制剂主要包括抗体的igg2-a和/或igg2-a/b亚型。在一个实施方式中，包含本文所述抗体的组合物包括至少50、60、70、80、90、95、96、97、98或99％的抗体的igg2-a或igg2-a/b亚型。在一个实施方式中，包含本文所述抗体的组合物总共包括至少60、70、80、90、95、96、97、98或99％的igg2-a和igg2-a/b亚型。在这样的实施方式中，包含本文所述抗体的组合物不包含显著量的抗体的igg2-b亚型。例如，组合物包括不到10％、5％、2％、1％、0.5％或0.1％的抗体的igg2-b亚型。在某些情况中，本发明的抗体使用本领域已知方法进一步修饰，产生具有特异性同种异型(allotype)的序列，例如，在具有特定地理来源的种群中占优势的同种异型。在某些情况中，对人重链恒定区进行修饰以用于此目的。il-6a可以是在抗体框架中具有一个或多个cdr(例如cdr组)的抗体分子、其结合片段或变体。例如，抗体(例如，如本文所述的抗体或其片段或衍生物)的一个或多个cdr或cdr组可被接枝到框架(例如，人框架(humanframework))中以提供抗体分子。框架区可源于人胚系基因序列或在来源上可为非胚系的。vh和/或vl框架残基可如本文中所讨论和例示地进行修饰，例如，使用定点突变。可使用本领域已知的方法和参数在源于靶向il-6的位点ii的抗体il-6a(在本文中称为“参比il-6抗体”)的一个或多个框架区和/或一个或多个cdr进行氨基酸改变。本文中还包括所得的il-6拮抗剂，其保留了与il-6的位点ii(例如，人il-6的位点ii)的结合并且与参比il-6抗体相比具有至少相同的结合或者提高的亲和性。在某些情况中，为改进参数(诸如，稳定性)，可引入导致衍生所得il-6a的结合亲和性与参比il-6a(例如，参比抗体)相比降低的变化以产生可用的il-6a。在一些实施方式中，例如，在其中参比物涉及fcrn结合或药代动力学(pk)参数(诸如，玻璃体中的半衰期或全身半衰期(例如，在血液、血浆、血清、淋巴液、肝、肾、其它组织或体液中))，参比抗体可为不会特异性结合il-6的抗体。il-6a多肽的氨基酸序列中的改变可包括用非天然发生或非标准氨基酸置换一个或多个氨基酸残基，将一个或多个氨基酸残基修饰为非天然发生或非标准形式，或者将一个或多个非天然发生或非标准氨基酸插入到序列中。本发明序列中数目和位置变化的实例在本文中的其它地方描述。天然发生氨基酸包括20种"标准的"l-氨基酸，通过其标准单字母编码将其确定为g、a、v、l、i、m、p、f、w、s、t、n、q、y、c、k、r、h、d、e。非标准氨基酸包括可能被插入到多肽骨架中或者可源于已有氨基酸残基的修饰的任何其它残基。非标准氨基酸可以是天然或非天然发生的。若干天然发生的非标准氨基酸在本领域中已知，诸如，4-羟基脯氨酸、5-羟基赖氨酸、3-甲基组氨酸和n-乙酰丝氨酸。在其n-α位置处被衍生化的那些氨基酸残基将仅位于氨基酸序列的n-末端。氨基酸通常为l-氨基酸。在一些情况中，氨基酸是d-氨基酸。因此改变可以包括将l-氨基酸修饰为d-氨基酸或者将其用d-氨基酸替代。氨基酸的甲基化、乙酰化和/或磷酸化形式也是已知的，并且本发明中的氨基酸可经历这样的修饰。本发明的抗体域和结合部件中的氨基酸序列可包括如本文中所讨论的非天然或非标准氨基酸。可使用本领域已知方法将非标准氨基酸(例如，d-氨基酸)并入到氨基酸序列中，例如在分子的合成中或者通过合成后的氨基酸修饰或置换。在某些情况中，使用d-氨基酸以提高il-6a的pk。可使用一个或多个所选vh和/或vl核酸序列的随机突变来产生带有本发明的cdr衍生序列的新型vh或vl区以在整个可变域中产生突变。例如，可使用易错pcr(chaoetal.,natureprotocols,1:755-768(2006))。在一些实施方式中，可在整个可变域或cdr组中进行一个或两个氨基酸置换。本领域中已知的其它方法可用于通常在一个或多个cdr中产生突变，例如定点突变。产生抗体il-6a的一种方法是通过添加、删除、置换或插入一个或多个氨基酸来改变vh域(诸如本文所公开的那些)。经改变的vh域可与vl域(例如，本文中所公开的vl域)组合，后者也可如本文所述和使用本领域已知方法改变。对这样的改变分子测试其与il-6的位点ii结合的能力以及任选的其它所需性质，诸如，与参比分子相比提高的亲和性。在某些情况中，变异vh或vl域可具有1、2、3、4或5个这样的改变(例如，1、2、3、4或5个氨基酸置换)。在实施方式中，本发明的il-6a是结合到il-6的位点ii并且包括抗原结合位点的抗体片段，例如，能结合到il-6的位点ii。本发明的抗体片段通常从参比(亲本)抗体分子(诸如，包含seqidno:13和seqidno:14的抗体分子)起始获得。可使用本发明已知方法产生抗体片段，诸如，抗体的重组dna、酶切(例如，使用胃蛋白酶或木瓜蛋白酶)、化学切割(例如，二硫键桥的化学还原)。包含抗体抗原-结合位点的抗体片段包括但不限于诸如以下的分子：fab、fab'、fab'-sh、scfv、fv、dab、fd和二硫键稳定的可变区(dsfv)。可也对包括一个或多个抗体抗原-结合位点的多种其它抗体分子工程化，包括，例如，f(ab’)2、f(ab)3、双链抗体、三链抗体、四链抗体和微型抗体。抗体分子及其构建方法和用途的实例在holligerandhudson,2005,natbiotechnol23:1126-1136中描述。结合片段的非限制性实例为：包括vl、vh、恒定轻链域(cl)和恒定重链域1(ch1)域的fab片段；包括vh和ch1域的fd片段；包括单一抗体的vl和vh域的fv片段；包括vh或vl域的dab片段；分离的cdr区；f(ab')2片段，包括两个相连的fab片段的二价片段；单链fv分子(scfv)，其中vh域和vl域通过允许两个域相关联以形成抗原结合位点的肽连接体连接；双特异性单链fv二聚物(例如，如wo1993/011161中所公开的)和双链抗体，其是使用基因融合构建的多价或多特异性片段(例如，如wo94/13804中所公开的)。fv、scfv或双链抗体分子可通过加入连接vh和vl域的二硫键桥来稳定。包括接合到ch3域的scfv的微型抗体也可用作il-6a。可用作il-6a的抗体的其它片段和衍生物包括fab'，其通过在重链ch1域的羧基末端添加数个氨基酸残基(包括一个或多个来自抗体铰链区的半胱氨酸)而区别于fab片段；以及和fab'-sh，其是其中恒定域的半胱氨酸残基带有游离硫醇基团的fab'片段。在某些情况中，il-6a为已进行化学修饰以改进或引入理想的特性的抗体片段，例如聚乙二醇化以提高半衰期或并入。dab(域抗体)是抗体的小型单体(monomeric)抗原-结合片段(抗体重或轻链的可变区)。vhdabs天然存在于骆驼科动物(例如，骆驼和无峰驼)中，并且可通过将骆驼科动物用靶抗原免疫、分离抗原特异性b细胞并直接从独立的b细胞直接克隆dab基因来制备。本发明的il-6a可以是包含基本如本文所述的vh或vl域或者包括基本如本文所述的cdr组的vh或vl域的dab。本发明的抗体包括其中在同一分子中组合了两个不同可变区的双特异性抗体。il-6a可被加入作为使用本领域已知方法制成的双特异性抗体的一部分，例如，通过化学或杂交杂交瘤制备。这样的分子可以是上面所讨论的类型的双特异性抗体片段。产生双特异性抗体的方法的一个非限制性实例是bitetm技术，其中可使用具有不同特异性的两种抗体的结合域并将其经由柔性短肽直接相连。这将两种抗体结合在短的单一多肽链上。双链抗体和scfv可构造为没有fc区，仅使用可变域，强效降低了抗独特型(anti-idiotypic)反应的作用。双特异性抗体可构建为整个igg，为双特异性fab'2，为fab'peg，为双链抗体或其它双特异性scfv。而且，两种双特异性抗体可使用本领域已知惯例方法连接以形成四价抗体。与双特异性全抗体不同，双特异性双链抗体是可用的，这部分是因为其可以在大肠杆菌中构建和表达。合适结合特异性的双链抗体(以及许多其它多肽，诸如抗体片段)可以使用来自文库的噬菌体展示(wo1994/13804)容易地选择。如果双链抗体的一个臂保持恒定，例如，具有指向il-6的位点ii的特异性，随后可构造其它臂可变的文库，并且选择合适特异性的抗体。双特异性全抗体可通过如以下文献中所述的另一种工程化方法制成：wo1996/27011、wo1998/50431和wo2006/028936。在某些情况中，本发明的il-6a包括在非抗体分子内的抗原-结合位点，例如，通过将一个或多个cdr，例如，cdr组，并入非抗体蛋白支架中，如下面所进一步讨论的。在某些情况中，将cdr并入到非-抗体支架中。il-6位点ii的结合位点可通过以下方式来提供：通过将cdr布置在非抗体蛋白支架(诸如纤连蛋白或细胞色素b)上，或者通过将蛋白支架内的环的氨基酸残基随机化或突变以为il-6位点ii提供结合特异性。用于将蛋白中新的结合位点工程化的支架在本领域中是已知的。例如，抗体模拟物的蛋白支架在wo200034784中公开，其描述了包含具有至少一个随机化环的纤连蛋白iii型域的蛋白(抗体模拟物)。可向其中接枝一个或多个cdr(例如，hcdr组)的合适的支架可通过免疫球蛋白基因超家族的任何域成员来提供。支架可以是人或非-人蛋白。非-抗体蛋白支架的优点是其可在与至少一些抗体分子相比较小和/或较易制备的支架分子中提供抗原-结合位点。结合部件的小尺寸可提供有用的生理学特性，诸如，进入细胞、深入渗透到组织中或到达其它结构内部的靶或结合到靶抗原的蛋白腔中的能力。典型的是具有稳定骨架和一个或多个可变环的蛋白，其中所述环或多个环的氨基酸序列被特异性或随机突变以产生结合靶抗原的抗原-结合位点。这样的蛋白包括来自金黄色葡萄球菌的蛋白a的igg-结合域、转铁蛋白、四连蛋白、纤连蛋白(例如，使用第十纤连蛋白iii型域)、脂质运载蛋白以及γ-结晶和其它affilintm支架(scilproteins,halle,germany)。其它方法的实例包括基于环肽——具有分子内二硫键小蛋白的微蛋白的合成微型抗体(例如，versabodiestm,amunixinc.,mountainview,ca)和锚蛋白重复蛋白(darpins，例如，得自molecularpartnersag,zurich-schlieren,switzerland)。这样的蛋白也包括小的工程化蛋白域，诸如，例如，免疫域(参见，例如，美国专利申请公开号第2003/082630号和第2003/157561号)。免疫域包含抗体的至少一个互补决定区(cdr)。il-6a可包括其它氨基酸，例如，以便为分子赋予除了结合抗原的能力之外的另一种功能特性。在某些情况中，il-6a带有可检测标记或者轭合到毒素或靶向部分或酶(例如，经由肽键或连接体)。例如，il-6a可包括催化位点(例如，在酶域中)以及抗原结合位点(例如，il-6的位点ii的结合位点)，使得抗原结合位点结合到抗原，并由此将催化位点靶向il-6或il-6/il-6r复合物。催化位点在某些情况中可进一步抑制il-6的生理功能，例如，通过il-6、il-6r或与il-6a/il-6复合物相关的其他分子的切割。在一些方面，本发明包括与参比抗体相比已被修饰为改变了(例如，提高、降低或消除了)抗体il-6a的生物作用功能的il-6a。在一个实例中，fc区经修饰或者亲本fc域被替换为经修饰的fc域以改变经修饰的il-6a与未经修饰的亲本相比的药代动力学。在一些实施方式中，il-6a被工程化为具有igg2框架。在其它实施方式中，il-6a是在igg1或igg2框架中，并且具有经修饰的fc，与亲本或其它参比il-6a相比所述经修饰的fc提高了il-6a在ph6.0下的结合亲和性，并且基本不改变ph7.0下的结合亲和性。在实施方式中，fc域是经修饰的，并且与亲本或其它参比il-6a相比，il-6a具有降低的全身积累、降低的半衰期和/或提高的系统清除率。在一些实施方式中，对抗体il-6a进行修饰以提高补体结合和补体依赖的细胞毒性。在其它方面，对抗体il-6a进行修饰以提高抗体与参比抗体相比激活效应细胞和参与抗体依赖的细胞毒性(adcc)的能力。在某些情况中，可对本文所公开的抗体进行修饰以同时提高其激活效应细胞和参与抗体依赖的细胞毒性(adcc)的能力和增强其结合补体以及参与补体依赖的细胞毒性(cdc)的能力。在一些实施方式中，对本文所公开的抗体进行修饰以降低其结合补体和参与补体依赖的细胞毒性(cdc)的能力。在其它实施方式中，对抗体进行修饰以降低其激活效应细胞和参与抗体依赖的细胞毒性(adcc)的能力。在仍然其它的实施方式中，可对如本文所公开的抗体进行修饰以同时降低其激活效应细胞和参与抗体依赖的细胞毒性(adcc)的能力和降低其补体结合和参与补体依赖的细胞毒性(cdc)的能力。制剂本文所述的制剂包括il-6拮抗剂(例如，il-6抗体或其片段)，所述il-6拮抗剂在制剂中以如下浓度存在：0.1mg/ml至100mg/ml，0.1-80mg/ml，0.1-50mg/ml，0.1mg/ml至20mg/ml，0.1mg/ml至5mg/ml，0.1mg/ml至1mg/ml，1mg/ml至100mg/ml；5mg/ml至100mg/ml；5mg/ml至30mg/ml；10mg/ml至100mg/ml；10mg/ml至30mg/ml；20mg/ml至100mg/ml；30mg/ml至100mg/ml；40mg/ml至100mg/ml；50mg/ml至100mg/ml；60mg/ml至100mg/ml；1mg/ml至80mg/ml；5mg/ml至80mg/ml；10mg/ml至80mg/ml；20mg/ml至80mg/ml；40mg/ml至80mg/ml；50mg/ml至80mg/ml；60mg/ml至80mg/ml；1mg/ml至60mg/ml；5mg/ml至60mg/ml；10mg/ml至60mg/ml；20mg/ml至60mg/ml；30mg/ml至60mg/ml；40mg/ml至60mg/ml；或50mg/l至60mg/ml。例如，制剂包含约1mg/ml、2mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、30mg/ml、40mg/ml、50mg/ml或55mg/ml的il-6拮抗剂，例如，本文中所述的il-6抗体或片段。il-6拮抗剂(例如，本文所述的il-6抗体或其片段)与其它药学上有效的赋形剂一起调配。在一个实施方式中，il-6拮抗剂(例如，本文中所述的il-6抗体或其片段)与以下中的一种或多种或全部一起调配：缓冲液、表面活性剂和张度剂(例如，糖和/或盐)。在一个实施方式中，制剂包括il-6a(例如，如本文中所述的il-6抗体或其片段)以及一种或多种缓冲液(例如，缓冲剂)。在一个实施方式中，制剂还包括一种或多种表面活性剂。在一个实施方式中，制剂还包括一种或多种张度剂。在一个实施方式中，制剂包括两种或更多种张度剂，例如，盐和糖。在一个实施方式中，制剂还包括一种或多种螯合剂、一种或多种防腐剂、一种或多种抗氧化剂和/或一种或多种氨基酸。在一个实施方式中，制剂还包括一种或多种其它治疗剂，例如，第二治疗剂。示例性的赋形剂和其它治疗剂在本文中进一步描述。缓冲液适合施用给受试者的不同缓冲液在本领域中是已知的。通常，合适缓冲液通过进行如下的稳定性研究来选择：其中所关注的多肽(例如，il-6a，例如，il-6拮抗剂或其片段)在不同ph、浓度、温度下以不同的时间暴露于不同缓冲液。缓冲液可例如通过如下方式来选择：将所关注的多肽(例如，il-6a，例如，il-6抗体或其片段)置于缓冲液中，并且使样品经受升高的温度(加速稳定性测试)，随后测试物理稳定性(视觉观察沉淀)或化学稳定性，例如，通过用弱阳离子交换色谱监控脱酰胺作用或者通过反相液相色谱监控氧化作用。其它的实验可包括监控a280、sds-page、ph和渗透压。选择提供最佳物理和化学稳定性的缓冲液。在实施方式中，缓冲液为液体组合物提供了理想的ph接近，而且还提供了增强的抗体稳定性和对聚集、氧化和片段化的抗性。缓冲剂的实例包括，但不限于，醋酸盐、琥珀酸盐、葡糖酸盐、柠檬酸盐、组氨酸、醋酸、磷酸盐、磷酸、抗坏血酸盐、酒石酸、马来酸、甘氨酸、乳酸盐、乳酸、抗坏血酸、咪唑、碳酸氢盐和碳酸、琥珀酸、苯甲酸钠、苯甲酸、葡糖酸盐、乙二胺四乙酸盐、醋酸盐、苹果酸盐、咪唑、tris(三甲基甘氨酸)、磷酸盐及其混合物。在一个实施方式中，缓冲剂选自醋酸盐、柠檬酸盐、组氨酸、磷酸盐和tris(三甲基甘氨酸)。在一些实施方式中，缓冲剂以如下量存在：约1mm至约50mm、约5mm至约40mm、约5mm至约30mm、约5mm至约20mm、约10mm至约50mm、约10mm至约40mm、约10mm至约30mm、约15mm至约50mm、约15mm至约40mm、约15mm至约30mm、约15mm至约25mm、约18mm至约22mm。在一些实施方式中，缓冲剂以如下量存在：约10mm、约15mm、约16mm、约17mm、约18mm、约19mm、约20mm、约21mm、约22mm、约23mm、约24mm、约25mm、约30mm、约35mm、约40mm、约45mm或约50mm。在一个实施方式中，制剂包括一定浓度的缓冲液，例如，组氨酸缓冲液，所述浓度介于比本文所公开的缓冲液浓度低至少10％至高至少10％之间。举例来说，在一个实施方式中制剂包括20mm±10％的缓冲液。在一个实施方式中，制剂还包括20mm±20％的缓冲液。在一个实施方式中，制剂还包括20mm±30％的缓冲液。在一个实施方式中，缓冲剂是组氨酸，其中组氨酸可包括l-组氨酸或d-组氨酸，组氨酸的溶剂化形式，组氨酸的水合形式(例如，一水合物)或者组氨酸的无水形式，或其混合物。在一个实施方式中，缓冲剂是组氨酸盐酸盐(hcl)。在一个实施方式中，组氨酸缓冲液以约的浓度存在。表面活性剂在另一方面，本文所提供的制剂中包括一种或多种表面活性剂。不希望受理论所限，表面活性剂的使用可以是有用的，例如，用于减少分子对容器的粘附，特别是在搅拌的条件下减少蛋白的聚集。合适的表面活性剂和这样的表面活性剂的浓度可通过如下方式确定：检测表面活性剂是否阻止了搅拌研究中的聚集。进行这样的研究的方法在本领域中是已知的。例如，可测定表面活性剂是否是阻止因搅拌应力沉淀所需的。在这样的实验中，通常使用搅拌和分析进行筛选。用于此项研究的浓度的实例是0.01％、0.02％、0.06％和0.1％w/v的表面活性剂，例如，泊咯沙姆188。在实施方式中，使用以下方式评价聚集和/或沉淀：分光光度计(a280)分析，视觉观察，尺寸排阻色谱(sec)、不透光度(例如，使用hiac装置)或micro-flowimagingtm(mfi,proteinsimple,santaclara,ca)。通常选择与最少量沉淀相关的表面活性剂用于制剂中，例如，无可见沉淀或颗粒数量符合注射液中颗粒物指导原则(参见，例如，usp<788>)或眼用溶液中颗粒物指导原则(参见，例如，usp<789>)。适合用于所公开的制剂中的表面活性剂可包括，但不限于：聚山梨酯(例如，聚山梨酯20、聚山梨酯21、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯61、聚山梨酯65、聚山梨酯80、聚山梨酯81、聚山梨酯85及其混合物)、泊咯沙姆(例如，泊咯沙姆p188)、拉通(tritons)(例如，tritonx100或tritonx405)、十二烷基硫酸钠、月桂基硫酸钠、辛基糖苷钠、月桂基-磺基甜菜碱、肉豆蔻基-磺基甜菜碱、亚油醇基-磺基甜菜碱、硬脂基-磺基甜菜碱、月桂基-肌氨酸、肉豆蔻基-肌氨酸、亚油醇基-肌氨酸、硬脂基-肌氨酸、亚油醇基-甜菜碱、肉豆蔻基-甜菜碱、鲸蜡基-甜菜碱、月桂酰胺丙基-甜菜碱、椰油酰胺丙基-甜菜碱、亚油酸酰胺丙基-甜菜碱、肉豆蔻酰胺丙基-甜菜碱、棕榈酰胺丙基-甜菜碱、异硬脂酰胺丙基-甜菜碱、肉豆蔻酰胺丙基-二甲胺、棕榈酰胺丙基-二甲胺、异硬脂酰胺丙基-二甲胺、甲基椰油酰基牛磺酸钠、甲基油烯基牛磺酸二钠、二羟基丙基peg5亚油基氯化铵、聚乙二醇、聚丙二醇、el、泰洛沙泊、辛苯聚醇-40和聚乙二醇硬脂酸酯40及其混合物。在一个实施方式中，表面活性剂选自聚山梨酯20(在本文中也称为tween20)、聚山梨酯80(在本文中也称为tween80)和泊咯沙姆p188。在某些实施方式中，制剂包含浓度在如下范围内的表面活性剂(例如，聚山梨酯20或tween20)：约0.001％至约10％、约0.005％至约5％、约0.01％至约1％、约0.05％至约0.5％、约0.05％至约0.1％、约0.01％至约0.8％、约0.01％至约0.05％、约0.02％至约0.08％、约0.02％至约0.05％或约0.02％至约0.05％w/v。在一个实施方式中，制剂包含如下浓度的表面活性剂：约0.01％、约0.02％、约0.03％、约0.04％、约0.05％、约0.06％、约0.07％、约0.08％、约0.09％、约0.1％、约0.2％、约0.3％、约0.4％、约0.5％或约1％w/v。在一个实施方式中，制剂包括一定浓度的表面活性剂，所述浓度介于比本文所公开的表面活性剂浓度低至少10％至高至少10％之间。举例来说，在一个实施方式中制剂包括0.03％±0.003％的表面活性剂。在一个实施方式中，制剂还包括0.03％±0.006％的表面活性剂。在一个实施方式中，制剂还包括0.03％±0.01％的表面活性剂。在实施方式中，表面活性剂是聚山梨酯20(例如，tween20)、聚山梨酯80(tween80)或泊咯沙姆188。在这样的实施方式中，聚山梨酯20、聚山梨酯-80或泊咯沙姆188以如下范围内的浓度存在于制剂中：约0.01％至约0.2％、约0.01％至约0.1％、0.01％至约0.05％、0.01％至约0.03％、0.02％至约0.8％、0.02％至约0.05％、0.02％至约0.04％w/v。在一个实施方式中，聚山梨酯20、聚山梨酯-80或泊咯沙姆188以如下浓度存在于制剂中：约0.01％、0.02％、0.03％、0.04％或0.05％w/v，例如，以0.03％w/v的浓度。在本文所述的任何制剂中，聚山梨酯-20(tween-20)、聚山梨酯-80(tween-80)和泊咯沙姆188是可互换的。张度剂在另一方面，本文所述的制剂包括一种或多种张度剂。例如，本文所述的制剂可包含两种。张度剂是指能将制剂的渗透压调节至使得制剂与受试者的体组织或器官的细胞生理相容的赋形剂。在实施方式中，张度剂可以是多元醇，诸如，糖(例如，糖类)、碳水化合物、盐或其混合物。不依托任何理论，这样的试剂可有助于il-6拮抗剂(例如，如本文中所述的il-6抗体或其片段)的稳定性。在一个实施方式中，张度剂是多元醇。如本文所用的多元醇是指具有多个羟基基团的赋形剂，其包括糖(还原糖和非还原糖)、糖醇和糖酸。在一个实施方式中，多元醇的分子量不足约600kd(例如，在约120kd至约400kd范围内)。合适的多元醇包括，但不限于、甘露醇、海藻糖、山梨糖醇、赤藓糖醇、异麦芽酮糖醇(isomalt)、乳糖醇、麦芽糖醇、木糖醇、甘油、乳糖醇、丙二醇、聚乙二醇、肌醇或其混合物。在实施方式中，合适的糖和碳水化合物包括单糖、二糖和多糖或其混合物。合适的糖(例如，糖类)或碳水化合物包括，但不限于，果糖、葡萄糖、甘露糖、蔗糖、山梨糖、木糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖、葡聚糖、支链淀粉、糊精、环糊精、可溶性淀粉、羟乙基淀粉、水溶性葡聚糖及其混合物。在实施方式中，制剂包括浓度在如下范围内的如本文所述的多元醇、糖或碳水化合物：约0.1％至约20％、约1％至约10％、约1％至约8％、约1％至约5％、约2％至约10％、约2％至约8％、约2％至约5％、约3％至约10％、约3至约8％、约3％至约5％。在一个实施方式中，制剂包含如下浓度的多元醇、糖或碳水化合物：约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％或约10％。在一个实施方式中，制剂包括如下浓度的多元醇：所述浓度介于比本文所公开的多元醇浓度低至少10％至高至少10％之间。举例来说，在一个实施方式中制剂包括4％±0.4％多元醇。在一个实施方式中，制剂还包括4％±0.8％山梨糖醇。在一个实施方式中，制剂还包括4％±1.2％多元醇。在一个实施方式中，制剂包括张度剂，其中所述张度剂选自山梨糖醇或海藻糖。在一个实施方式中，制剂包含山梨糖醇。在一个实施方式中，制剂中的山梨糖醇浓度为约1％至约10％、约1％至约5％、约2％至约5％或约4％。在某些实施方式中，张度剂是盐。不希望受限于任何理论，盐(例如氯化钠)的包含也可通过保护蛋白免于去酰胺化而改进抗体稳定性。合适的盐包括，但不限于，氯化钠，琥珀酸钠、硫酸钠、氯化钾、氯化镁、硫酸镁和氯化钙。在实施方式中，制剂包括浓度在如下范围内的盐：约1mm至约200mm、约10mm至约150mm、约20mm至约150mm、约50mm至约150mm、约100mm至约150mm、约10mm至约100mm、约10mm至约50mm、约10mm至约40mm、约10mm至约30mm、约15mm至约50mm、约15mm至约30mm或约15mm至约25mm。在一个实施方式中，制剂包含如下浓度的盐：约10mm、15mm、20mm、25mm、50mm或150mm，例如，20mm。在一个实施方式中，制剂包括一定浓度的盐，所述浓度介于比本文所公开的盐浓度低至少10％至高至少10％之间。举例来说，在一个实施方式中制剂包括20mm±10％的盐。在一个实施方式中，制剂还包括20mm±20％盐。在一个实施方式中，制剂还包括20mm±30％盐。在一个实施方式中，制剂包含盐，其中所述盐是氯化钠。在一个实施方式中，制剂包括如下浓度的氯化钠：约10mm至约150mm、约10mm至约50mm、约10mm至约30mm、约15mm至约25mm或约10mm、约15mm、约20mm或约25mm。在某些实施方式中，制剂包括两种张度剂，例如，多元醇(糖)和盐。在一个实施方式中，制剂包括山梨糖醇和氯化钠。在某些实施方式中，本文所提供的制剂与眼睛等渗(例如，具有约270-330mosm/kg的渗透压)。在一些实施方式中，制剂的渗透压为约250至约450mosm/kg、300-400mosm/kg、350-400mosm/kg、200-375mosm/kg或350-375mosm/kg。在实施方式中，制剂的渗透压为270-330mosm/kg，例如，约320mosm/kg。其它赋形剂本发明表征的制剂还可含有其它药学上可接受的赋形剂。参见，例如，gennaro(ed.),remington:thescienceandpracticeofpharmacy,20thed.,lippincott,williams&wilkins(2000)(isbn:0683306472)；anseletal.,pharmaceuticaldosageformsanddrugdeliverysystems,7thed.,lippincottwilliams&wilkinspublishers(1999)(isbn:0683305727)；kibbe(ed.),handbookofpharmaceuticalexcipients,3rded.(2000)(isbn:091733096x)；proteinformulationanddelivery,mcnallyandhastedt(eds.),informahealthcare(isbn:0849379490)(2007)。可添加的赋形剂中有螯合剂、氨基酸、防腐剂(防腐试剂)/渗透增强剂、生物粘合剂、稳定剂、抗氧化剂和粘度剂。制剂可包含一种或多种渗透增强剂和/或生物粘合剂。渗透增强剂和生物粘合剂可包括，例如，壳聚糖、细胞松弛素b、胺化明胶、聚-ε-己内酯(卡波普941p)；聚(氰基丙烯酸正丁酯)；聚-l-精氨酸；环糊精；结冷胶(gellan)；聚(丙烯酸)；玻尿酸；粘蛋白；藻酸盐；carbophil和泊咯沙姆(例如，参见nagarwaletal.,jcontrolledrelease,136:2-13(2009)；ding,pstt1:328-35(1998)；以及sahooetal.,drugdiscoverytoday,13:144-51(2008)。其它赋形剂可用作稳定剂，并且可包括，例如，甘油、氯化钾、磷酸钾、丙二醇、醋酸钠、亚硫酸氢钠、硼酸钠、十水合硼酸钠、氯化钠、柠檬酸钠、磷酸钠、磷酸钠(包括磷酸二氢钠和磷酸氢二钠)；氯化锌、苯酚、苯甲酸盐、蓖麻油衍生物和氧化乙烯以及(basfcorp.,germany)。制剂可包括一种或多种螯合剂。螯合剂可在本发明的组合物中降低被还原的氧物种的形成、减少酸性物种(例如，去酰胺)形成、减少抗体聚集和/或减少抗体片段化和/或减少抗体氧化。与没有螯合剂保护的抗体相比，这样的螯合剂可减少或阻止所调配的抗体的分解。合适的螯合剂包括，但不限于氨基聚羧酸、羟基氨基羧酸、n-取代甘氨酸、2-(2-氨基-2-氧代乙基)氨基乙磺酸(bes)、去铁胺(def)、柠檬酸、烟酰胺和去氧胆盐及其混合物。进一步优选地，螯合剂选自乙二胺四乙酸(edta)、二亚乙基三胺五乙酸5(dtpa)、次氮三乙酸(nta)、n-2-乙酰氨基-2-亚氨基二乙酸(ada)、二(氨基乙基)乙二醇醚、n,n,n,n-四乙酸(egta)、反式-二氨基环己烷四乙酸(dcta)、谷氨酸和天冬氨酸、n-羟基乙基亚氨基二乙酸(himda)、n,n-二-羟基乙基甘氨酸(bicine)和n-(三羟基甲基甲基)10甘氨酸(tricine)、甘氨酰基甘氨酸、去氧胆酸钠、乙二胺；丙二胺；二亚乙基三胺；三亚乙基四胺(trien)、乙二胺四乙酰基edta；edta二钠、edta草酸钙、苹果酸盐、柠檬酸、一水合柠檬酸和二水合柠檬酸三钠、8-羟基喹啉盐、氨基酸、组氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、肽、多肽和蛋白及其混合物。进一步优选地，螯合剂选自edta盐，包括依地酸二钾、依地酸二钠、依地酸二钠钙、依地酸钠、依地酸三钠和依地酸钾；并且合适的去铁胺(def)盐是去铁胺甲磺酸盐(dfm)或其混合物。本发明中所用的螯合剂根据情况可以作为化合物的游离酸或游离碱形式或者盐形式存在，也可以作为化合物或对应盐的无水、溶剂或水合形式存在。制剂可包括一种或多种氨基酸。合适的氨基酸包括，但不限于：精氨酸、谷氨酸、组氨酸或蛋氨酸。氨基酸通常选择为增强蛋白的稳定性和/或溶解度。鉴定这样的氨基酸的方法在本领域中是已知的。在一些实施方式中，制剂包含精氨酸。制剂可包括一种或多种粘度剂。粘度剂通常可被包含在眼部制剂中以增加眼部治疗的停留时间，否则其可能迅速被眨眼清除和通过结膜囊排干。合适的粘度剂包括，但不限于，甲基纤维素，包括羧甲基纤维素钠(在本文中也称为羧甲基纤维素或cmc)；羟基纤维素，包括乙基纤维素；羟丙基甲基纤维素(羟丙甲纤维素)；卡波姆，诸如，934p、971p和974p；聚乙烯醇；黄原胶；瓜尔胶；结冷胶；以及甘油。制剂可包括一种或多种抗氧化剂。合适的抗氧化剂包括，但不限于，蛋氨酸，硫代硫酸钠，过氧化氢酶和铂。制剂可包括一种或多种防腐剂(例如，以防止使用过程中的细菌和真菌污染)和/或一种或多种清洁剂(detergent)或表面活性剂(例如，以溶解蛋白)。合适的防腐剂包括，但不限于：苯扎氯铵、苄索氯铵、苯甲醇、氯丁醇、苯并十二烷基溴化铵、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、苯乙醇、苯氧基乙醇、苯酚、间甲酚、依地酸二钠、山梨酸和聚季铵盐-1，并且可以0.001％w/v至1.0％w/v的浓度被包含。通常，包含如本文所述的治疗蛋白的制剂即使无防腐剂也是无菌的。制剂还可包括用作润滑剂或湿润剂的其它化合物。这些包括粘度剂，诸如：单体多元醇，诸如，甘油、丙二醇、乙二醇；聚合多元醇，诸如，聚乙二醇；纤维素家族的多种聚合物：羟丙基甲基纤维素(“hpmc”)、羧甲基纤维素钠、羟丙甲纤维素(“hpc”)；葡聚糖，诸如，葡聚糖70；水溶性蛋白，诸如，明胶；以及乙烯基聚合物，诸如，聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚维酮和卡波姆，诸如，卡波姆934p、卡波姆941；卡波姆940、卡波姆974p。仍然其它的实例包括多糖，诸如玻尿酸及其盐和硫酸软骨素及其盐和丙烯酸聚合物。在某些实施方式中，制剂的粘度在1cp至400cp之间。ph在另一方面，本文所提供的制剂的ph为约5.0至约7.5、约5.5至约7.5、约6.0至约7.5、约6.5至约7.5、约5.0至约7.0、约5.5至约7.0、约6.0至约7.0或约6.2至约6.8。在一个实施方式中，本文所提供的制剂的ph为不到7.5、不到7.0、不到6.9、不到6.8、不到6.6、不到6.5、不到6.4、不到6.3、不到6.2或低于6.0。在一个实施方式中，本文所提供的制剂的ph为约6.5或6.5。本文所述的组合物或制剂的ph水平可在调配过程中使用任何本领域已知方法进行调整。在一个实施方式中，添加高浓度的酸(例如盐酸(hcl))或高浓度的碱(例如，氢氧化钠(naoh))直到达到理想的ph。稳定性正如在本领域中已知的，蛋白，例如抗体，与小分子相比对于搅拌和温度更为敏感。搅拌应力能导致沉淀，并且热应力能导致沉淀和化学分解。此外，在将化合物装载到递送装置中的过程中，有可能暴露于热应力。申请人已实现了在暴露于搅拌应力和热时成功地提供极好稳定性的制剂。在实施方式中，本文所述的制剂是稳定的。在实施方式中，制剂在本文所述的条件(例如于特定温度下存储或搅拌应力)下显示稳定性。在实施方式中，使用本文所述的一种或多种方法来评价稳定性(例如，基于视觉外观、由以下所得的含量：分光光度计(a280)、非还原性sds-page、还原性sds-page；尺寸排阻hplc(sehplc)或se-uplc；反相hplc(rp-hplc)；弱阴离子交换hplc(waex-hplc)；效价；不透光颗粒计数实验(例如，如usp<798>中所述的不透光颗粒数量检测)；或显微镜颗粒计数实验(例如，如usp<798>中所述的显微镜颗粒计数实验))和/或本领域已知方法。可基于视觉外观来评价稳定性。在实施方式中，如果制剂是透明或稍微不透明的无色溶液，基本不含可见颗粒，则其是稳定的。在实施方式中，制剂在如下温度：约25℃至约40℃，例如，约27℃、约28℃、约29℃,约30℃、约31℃、约32℃、约33℃、约34℃、约35℃、约36℃、约37℃、约38℃、约39℃或约40℃下稳定如下时间：至少2日；3日；5日；1周；10日、2周、3周、4周、5周、6周、8周、16周、20周、25周、30周、35周、40周、45周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月或更久。在实施方式中，制剂在如下温度存储时长时间稳定：约2℃至约8℃，诸如，约4℃、约5℃、约6℃、2℃-8℃、4℃、5℃或6℃。例如，制剂在这样的存储温度下稳定至少2周；4周；6周；2个月；3个月；6个月、1年、2年、3年或4年。可在例如于2-8℃存储至少2、4、6、8、12或18个月之后或者在于环境条件(例如，室温(rt)，例如，约25℃)下存储例如至少2周、1个月、2个月、3个月、5个月、6个月、12个月或18个月之后评价制剂稳定性。在实施方式中，制剂于2-8℃存储至少8个月之后稳定。在实施方式中，制剂在暴露于室温至少5个月之后稳定。在一些这样的实施方式中，制剂在bfs容器中存储至少5个月之后稳定。可基于本文所述的或者本领域中已知的方法和准则来评价稳定性。例如，可根据以下评价稳定性：物理纯度(例如，没有聚集，例如，使用尺寸排阻hplc(在本文中也称为尺寸排阻、sehplc或sechplc)评价)，化学纯度(例如，使用弱阴离子交换hplc、反相hplc和/或sdspage(例如，还原性或非还原性sdspage)评价)，和/或粒子水平(例如，通过视觉或通过使用hiac液体颗粒计数仪(beckmancoulter,brea,ca)进行颗粒技术来评价)。在实施方式中，通过与眼用溶液中颗粒物质指导原则(例如，如usp<789>(u.s.pharmacopeia,particulatematterinopthalmicsolutions)中所述)的一致性证实了稳定性。。在实施方式中，制剂具有小于或等于50颗粒/ml的≥10μm的颗粒和/或小于或等于5颗粒/ml的≥25μm的颗粒，例如，如使用不透光颗粒计数实验(例如，usp<789>中所述的不透光颗粒计数实验)来评价的。在实施方式中，制剂具有小于或等于50颗粒/ml的≥10μm的颗粒，小于或等于5颗粒/ml的≥25μm的颗粒，和/或小于或等于2颗粒/ml的≥50μm的颗粒，例如，如使用显微镜颗粒计数实验(例如，usp<789>中所述的显微镜颗粒计数实验)来评价的。在实施方式中，稳定性通过与注射液中颗粒物质的指导原则(例如，如usp<789>(u.s.pharmacopeia,particulatematterininjections)中所述)的一致性来证实。。在实施方式中，制剂具有小于或等于6000颗粒/容器(对于容积为100ml或以下的容器)的≥10μm的颗粒，和/或小于或等于600颗粒/容器(对于容积为100ml或以下的容器)的≥25um的颗粒，例如，如使用不透光颗粒计数实验(例如，如usp<789>中所述的不透光颗粒计数实验)来评价的。在实施方式中，制剂具有小于或等于3000颗粒/5ml的≥10μm的颗粒和/或小于或等于300颗粒/5ml的≥25um的颗粒，例如，如使用显微镜颗粒计数实验(例如，如usp<789>中所述的显微镜颗粒计数实验)来评价的。在实施方式中，制剂中的蛋白被保护免受搅拌应力的影响，如通过例如在将蛋白溶液于室温(rt)涡旋1-8小时(例如，于rt涡旋4小时)之后没有聚集所证实的(没有聚集可通过以下来证实：例如，如果制剂包含>90％、>91％、>92％、>93％、>94％、>95％、>96％、>97％、>98％或>99％的单体形式的蛋白(相对于聚集形式)。聚集可例如使用本文所述的方法或本领域已知方法来评价。例如，聚集可使用如下方法评价：超速离心、尺寸排阻色谱、凝胶电泳、动态光散射和/或浊度测量。在一些方面，稳定性通过本领域已知的物理或化学方法测量。例如，物理纯度或没有聚集可使用尺寸排阻hplc或测定制剂中单体多肽相对量的其它方法来测定。通常，相对于聚集形式的蛋白，具有可接受的稳定性的制剂包含>90％的单体形式的治疗蛋白(例如，il-6a，例如，如本文所述的il-6抗体或其片段)。在实施方式中，相对于聚集形式的蛋白，制剂包含>90％(例如，>91％、>92％、>93％、>94％、>95％、>96％、>97％、>98％或>99％)的单体形式的治疗蛋白(例如，il-6a，例如，如本文所述的il-6抗体或其片段)。化学纯度可，例如，使用弱阳离子交换hplc或反相hplc测定。通常，相对于化学修饰形式的分子，具有可接受的稳定性的制剂包含>80％的天然分子，例如，如使用弱阳离子交换hplc来评价的。在实施方式中，相对于化学修饰形式(例如，氧化或乙酰化形式)的分子，制剂包含>80％(例如，>85％、>87％、>90％或>95％)的天然分子。颗粒可通过视觉鉴定。在实施方式中，制剂是基本不含能通过视觉鉴定的粒子的那些。生物治疗的施用可能是有问题的，因为其会具有相对短的半衰期或者需要特殊的存储条件，这会产生存储、输送和患者施用以及确保生物治疗剂充足供应的障碍。本文所提供的某些制剂的优点在于该制剂令人惊讶地不仅在冷藏条件下而且在室温(例如，25℃)及以上(例如，40℃)的温度下稳定。因此，细胞因子蛋白或多肽制剂(例如，异质细胞因子蛋白或多肽制剂)，例如，本文所述的制剂，在一些实施方式中，以在室温(例如，at25℃)下稳定以下时间的液体形式提供：至少3日、5日、1周、10日、2周、3周、6周、8周、16周、20周、25周、30周、35周、40周、45周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、12个月或更久。在实施方式中，1个月是根据日期-日期确定的，例如，从当月第一日到次月第一日。在其它方面，制剂在如下温度：约25℃至约40℃，例如，约27℃、约28℃、约29℃,约30℃、约31℃、约32℃、约33℃、约34℃、约35℃、约36℃、约37℃、约38℃、约39℃或约40℃，稳定如下时间：至少2日；3日；5日；1周；10日；2周、3周、4周、5周、6周、8周、16周、20周、25周、30周、35周、40周、45周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月或更久。施用形式本文所述的药物组合物和制剂可调配为多种形式。这些包括，例如，液体、半固体和固体剂型，诸如，液体溶液(例如，可注射和可输注溶液)、分散液或悬浮液，包括纳米颗粒和脂质体。剂型通常取决于施用的预期模式和治疗用途。本文所述药剂的组合物通常为可注射或可输注溶液的形式，或者可调配为局部递送，例如，局部眼部递送。在一些实施方式中，本文所述的药物组合物是无菌的，并且在生产和存储条件下稳定。也可对药物组合物进行测试以确保其符合施用的监管标准和工业标准。组合物可调配为溶液、微乳液、分散液、脂质体或适合高药物(例如，生物药)浓度的其它有序结构。无菌可注射溶液可通过如下方式制备：将本文所述的药剂以所需量与上面所枚举的一种成分或成分组合(根据需要)加入到合适的溶剂中，随后过滤灭菌。通常，分散液通过如下方式制备：将本文所述的实际加入到包含碱性分散介质和来自上面所枚举的所需的其它成分的无菌载体中。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况中，示例性的制备方法包括真空干燥和冻干，其收获如本文所述的药剂加上来自其先前无菌过滤溶液的任何其它的所需成分的粉末。溶液的合适流动性可通过如下方式被保留：例如，通过使用涂层，诸如，卵磷脂，通过在分散液的情况中保留所需的粒径，以及通过使用表面活性剂。可通过加入延迟吸收的药剂(例如单硬脂酸盐和明胶)来工程化可注射组合物的延长吸收。这样的药剂特别可用于低剂量制剂。在实施方式中，在制剂中包含≤1mg/ml的治疗蛋白(例如，il-6a，例如，如本文所述的il-6抗体或其片段)，并且在制剂中包含明胶。在某些实施方式中，制剂与载体一起制备。在这样的实施方式中，制剂可例如作为受控释放制剂递送，通过植入体或微胶囊化递送系递送。可使用生物可降解、生物可相容的聚合物，诸如，乙烯-醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚正酯和聚乳酸。参见，例如，sustainedandcontrolledreleasedrugdeliverysystems,j.r.robinson,ed.,marceldekker,inc.,newyork,1978。眼药包装可用于提供眼部制剂与眼睛的延长接触。将棉拭子用制剂饱和，随后插入到结膜上穹(superiorfornix)或下穹(inferiorfornix)。制剂还可通过离子导入法施用。这种方法使溶液在带有电极的洗眼杯中保持与角膜接触。药物的扩散受电势差的影响。已使用的离子导入系统包括(iomedinc.,usa)；iideliverysystem1(eyegatepharma,usa)；以及(aciontinc.,usa)。参见amo和urtti,drugdiscoverytoday,13:143(2008)。用于持续眼部递送的另一种策略是使用凝胶化剂(gelifyingagent)。这些材料可以液体形式作为滴眼液或者眼内注射液递送。在滴注之后，聚合物经历相变，并形成在延长时间释放药物的半固体或固体基质。相转变可通过温度、离子浓度或ph的变化引发。对于局部眼部用途，在临床上已测试了形成凝胶的溶液，诸如，-xe1(merckandco.inc.,usa)，其包含(得自结冷胶的纯化阴离子杂多糖)；(alcon,inc.,switzerland)滴眼液包含聚(丙烯酸)；以及(insitevision,usa)。与常规滴眼液相比，这些材料增强了药物保留，并导致进入眼内的药物吸收提高和给药频率降低。参见amo和urtti,drugdiscoverytoday,13:135-143(2008)。本发明所表征的制剂可通过注射递送，例如，玻璃体内、眼周或结膜下注射。制剂可被注射到结膜下方，通过简单的扩散促进通过巩膜和进入眼睛。制剂也可被注射到结膜下方和眼睛更后部分的下层眼球囊下方以将药剂递送到睫状体、脉络膜和视网膜。制剂还可以通过球后注射施用。通常，本文所述的制剂可通过任何合适的方法施用给受试者，诸如，作为大丸药(bolus)静脉内施用或者通过在一段时间内连续输注，或者通过肌内、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心内、皮内、腹膜内、滑膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、椎管内、硬膜外注射、胸骨内注射和输注。其它适合施用的模式包括经局部(例如，经皮或经粘膜)或吸入(例如，鼻内或肺内)途径。对于某些应用，施用途径是以下之一：静脉内注射或输注，皮下注射或肌内注射。对于眼部施用，在一些实施方式中，所表征的制剂的施用模式是对眼睛的局部施用，例如，以滴眼液的形式。可包含制剂和/或用于制剂施用的装置的实例包括简单的滴眼器，带有或不带计量功能的塑料挤瓶，以及吹/灌/封(bfs)装置(诸如catalent(somerset,nj)生产的那些，其是使用斗尖密封技术(tip-sealtechnology)、银/微动力技术、无菌过滤器、折叠主容器(collapsingprimarycontainers)等的多用装置)。对于容器的其它考虑是当其被充满时提供可接受的保质期限，例如，可接受的低蒸发水平和/或制剂符合释放实验规格，例如，本文所述的规格。在实施方式中，容器适合于例如5℃提供如下的保存期限：至少2年，例如，至少3年，至少4年或至少5年。在实施方式中，容器适合于5℃提供至少3年的保质期限。在实施方式中，容器适合于rt提供如下的保存期限：至少2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、8个月、10个月或12个月。在实施方式中，容器适合于rt提供至少5个月的保质期限。各种合适的容器材料在本领域中是已知的，例如某些塑料，例如，低密度聚乙烯(ldpe)、高密度聚乙烯(hdpe)或聚丙烯。制剂可制备为在容器中单次使用，或者可制备为用于多次使用容器。本文所表征的制剂可在玻璃体内递送，例如以治疗与例如眼后段相关的疾病。玻璃体内施用方法在本领域中是已知的，并且包括，例如，眼内注射、可植入装置。在实施方式中，制剂使用可植入装置在玻璃体内施用。在实施方式中，制剂包括热稳定剂，例如，山梨糖醇。在实施方式中，山梨糖醇以≥5％w/v的浓度存在。可植入装置可以为，例如，不能生物降解的装置，诸如，聚乙烯醇-乙烯醋酸乙烯酯聚合物和聚砜毛细纤维；可生物降解的装置，诸如，聚乳酸、聚乙醇酸和聚乳酸-共-乙醇酸、聚己内酯和聚酐。装置可以诸如纳米颗粒、脂质体或微球方式递送。剂量本发明所表征的制剂可作为固定剂量、作为体重决定的剂量(例如，mg/kg)或作为年龄决定的剂量来施用。本文所述的制剂可如下施用：例如，一日4次；一日3次；一日2次；每日1次；隔日1次；每3、4或5日一次；每周；每2周；每3周；每4周；每5周；每月；每2个月；每3个月；每4个月；每6个月；或按照需要(随意)。药物组合物可包括“治疗有效量”的如本文所述的药剂。治疗有效量的药剂可根据诸多因素而变，诸如，个体的疾病状态、年龄、性别和重量以及化合物在个体中引起所需反应的能力(例如，减轻至少一种病症参数(例如，迹象)或减轻病症的至少一种症状)(以及任选地所施用的任何其它药剂的作用)。治疗有效量也是如下者：其中组合物的治疗有益效果胜于任何毒性或有害作用。在一些实施方式中，“治疗有效量”在个体种群中确定，并且该量在感染种群中的至少5％、10％、25％、50％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％中有效减轻细胞因子相关病症(例如，il-6-相关病症)的至少一种症状或适应症。制剂通常以治疗有效量施用。在某些情况中，治疗有效制剂是媒介物制剂(vehicleformulation)。在某些情况中，治疗有效制剂包括治疗蛋白。药物组合物可使用如本文所述和如本领域中已知的医药装置施用，例如，植入物、输注泵、皮下注射针和无针皮下注射装置。装置可包括，例如，一种或多种用于存储药物组合物的外壳，并且可构造为递送单位剂量的il-6a，例如，如本文所述的il-6抗体或其片段和任选的第二治疗剂。剂量可为固定剂量，即，适合作为单位剂量用于待治疗受试者的物理上分离的单元；每个单元包含预定量的il-6a，例如，如本文所述的il-6抗体或其片段，所述预定量经计算在与药物载体和任选的另一种药剂(诸如可用作非处方药或处方药产品的那些)联合使用时产生所需的治疗作用。在一些实施方式中，为治疗本文所述病症，诸如，il-6-相关的病症，将制剂以足以引发病症的至少一种迹象或症状的持续改善的量和时间施用给患有该病症的受试者。如果受试者长时间(在相隔1-4周的至少2个时间上)表示改善，则改善被认为是“持续的”。改善的程度可根据迹象或症状来测定，还可以采用对受试者的问卷调查，诸如，生活质量问卷调查。可通过如下方式引起改善：反复施用一定剂量的制剂，直到受试者的所选择的迹象和/或症状显示高于基线的改善。在治疗慢性病况时，改善量可通过如下方式评价：在至少1个月或更长的时间(例如，1、2或3个月或更长或无限期)上反复施用。在治疗急性病况时，在1-6周或者甚至作为单次剂量施用药剂。尽管根据一种或多种迹象或症状来看病症在最初或间断治疗之后出现的改善程度，治疗可以相同水平或以较低剂量或频率无限期继续。治疗也可以是不连续的，例如，当迹象或症状改善或消失时。一旦减少或中断治疗，如果症状再次出现可将其恢复。治疗可使用本发明的il-6a治疗的疾病包括其中il-6表达(例如，升高的il-6表达)与疾病状态相关或者是疾病状态的先决条件的那些疾病。这样的疾病包括其中受il-6驱动的新生血管和炎症有助于疾病病理学的那些。这包括其中il-6与正常水平相比升高的疾病，例如，其中il-6在玻璃体(诸如，例如，糖尿病黄斑水肿、糖尿病视网膜病变和葡萄膜炎)或眼组织中升高的疾病。如wo2014/074905(该文献通过引用一起整体并入本文)中所述的，先前已显示在小鼠和大鼠脉络膜新生血管模型(其再现了许多il-6相关疾病(例如dme)之下的病理学过程)中通过施用il-6抗体阻断il-6通路导致新生血管降低到与抗-vegf阳性对照物相近似的水平。这些体内结果证实了il-6的局部一致可有用地治疗与il-6表达相关的眼部疾病和涉及血管渗漏的眼部疾病，例如，黄斑水肿。il-6相关疾病的实例包括某些眼部疾病，包括但不限于，干眼(例如，干眼疾病或干眼综合征)、变态反应性结膜炎、葡萄膜炎、年龄相关的黄斑变性(amd)(湿型(渗出性)amd或干型(萎缩性)amd)、增殖性糖尿病视网膜病变(pdr)、糖尿病黄斑水肿(dme)、孔源性视网膜脱离(rrd)、视网膜静脉阻塞(rvo)、视神经脊髓炎(nmo)或近视性脉络膜血管新生。可治疗的其它眼部病症包括因创伤(诸如，角膜移植、角膜擦伤或其它这样的眼部物理损伤)引起的那些。可治疗的其它眼部病症包括眼部癌症，例如，影响眼部和眼周(例如，眼眶或眼睑)的癌症。因此，本发明包括用本文所述的il-6a治疗患有il-6相关疾病的受试者。如本文所用的，术语“治疗”是指将本文所述的药剂以有效改善与病症(例如本文所述病症)相关的状况、症状或参数或者阻止病症发作或进展达到统计学显著的程度或者本领域技术人员可检测程度的量、方式和/或模式施用给受试者(例如，患者)。治疗可为治愈、痊愈、缓解、纾解、改变、纠正、减轻、缓和、改善或影响病症、病症症状或病症的先兆条件。有效量、方式或模式可取决于受试者而变，并且可被调整适应受试者。示例性的受试者包括人、灵长类动物和其它非-人哺乳动物。本发明所表征的制剂也可预防性给予以降低病症或其症状或迹象发作的风险。在一些实施方式中，il-6相关疾病是炎性疾病。在一些实施方式中，疾病是青光眼。在一些实施方式中，疾病是眼痛，例如与眼部疾病或病症相关的疼痛。在一些实施方式中，受试者的治疗还包括确定受试者是否患有il-6相关疾病，以及任选地，受试者是否对其它非-il-6抑制性治疗剂(诸如，类固醇或抗-vegf剂)有抗药性。本文所述的制剂可被施用给患有这样的il-6相关疾病或者处于该疾病风险中的受试者。il-6相关疾病或病症可以是诸如如下所述的炎性病症。本文所述的制剂可被施用给患有这样的il-6介导炎性病症或处于该疾病风险中的受试者。本发明所表征的制剂特别适合用于眼部病症，例如，其中需要将本文中所述的il-6拮抗剂(例如，il-6抗体或其片段)直接施用给眼睛或者局部施用给眼部区域的眼部病症。患有干眼症病症的受试者可表现出眼睛的炎症，并且可经历发痒、干涩(stingy)、瘙痒、烧灼或压迫感、刺激、疼痛和发红。干眼症病症可与眼液流失(eyewatering)过多和泪液产生不足相关。本发明所表征的制剂可被施用给这样的受试者以减轻或阻止一种或多种这样的症状的发作或恶化。本发明所表征的制剂也可用于抑制受试者的疼痛，例如，眼部疼痛，诸如，因神经炎症所致的疼痛。本文所述的实施方式包括治疗患有il-6相关病症(例如，干眼症病症)的动物的方法。干眼症可能是一种严重的病症，例如对于犬类而言。与干眼症相关的犬类病症的非限制性实例包括先天性病症、感染(例如，犬瘟热病毒)、药物引发(例如，通过磺胺类抗生素)和第三眼睑的泪腺脱出(“樱桃眼(cherryeye)”)。干眼症病症也常见于某些犬种，例如，可卡犬、西施犬、拉萨阿普索犬、斗牛犬、雪纳瑞犬和西部高地白梗犬。可治疗的动物的其它非限制性实例可包括猫和马。本发明的制剂可施用给患有影响眼睛的变态反应的受试者，例如，经历严重的变态反应(特应性)眼病(诸如，例如，变态反应性结膜炎)的受试者。例如，制剂可局部施用。也参见，例如，keane-myersetal.(1999)investophthalmolvissci,40(12):3041-6。本发明所表征的制剂可被施用给患有糖尿病视网膜病变或处于该疾病风险中的受试者。参见，例如，demircanetal.(2006)eye20:1366-1369和doganayetal.(2006)eye,16:163-170。葡萄膜炎。葡萄膜炎包括急性和慢性形式，并且包括虹膜、睫状体和脉络膜中一个或多个的炎症。慢性形式可能与系统性自身免疫性疾病有关，例如，白塞氏综合征、强直性脊柱炎、青少年类风湿性关节炎、赖特综合征和炎性肠病。在前葡萄膜炎中，炎症主要发生在虹膜中(也称虹膜炎)。前葡膜膜炎可以影响患有全身性自身免疫性疾病的受试者，也可以影响未患全身性自身免疫性疾病的受试者。中间葡萄膜炎涉及前玻璃体、周边视网膜和睫状体的炎症，通常具有很少的前部或脉络膜视网膜炎症。泛平坦部炎(panplanitis)是由虹膜和脉络膜之间的睫状体平坦部的炎症引起的。后葡萄膜炎涉及葡萄膜神经束和主要是脉络膜，也称为脉络膜炎。后葡萄膜炎可与全身感染或自身免疫疾病相关。它可以持续数月甚至数年。本发明所表征的制剂可以施用于受试者以治疗任何上述形式的葡萄膜炎。也参见，例如，tsaietal.(2009)molvis15:1542-1552和trittibachetal.(2008)genether.15(22):1478-88。在一些实施方式中，本发明所表征的制剂用于治疗患有年龄相关的黄斑变性(amd)(例如，湿型(渗出性)amd或干型(萎缩性)amd)或处于该疾病的风险中的受试者。制剂可局部应用到眼、注射(例如，玻璃体内)或全身提供。参见，例如，olsonetal.(2009)oculimmunolinflamm17(3):195-200。糖尿病黄斑水肿(dme)。糖尿病黄斑水肿(dme)涉及视网膜血管的阻塞和渗漏，导致视力减退和潜在的失明。dme的标准治疗包括局部施用类固醇或抗-vegf抗体。然而，许多患者难以用这些疗法治疗。糖尿病黄斑水肿的病原基因涉及血管新生、炎症和氧化应激的部分。il-6是由缺氧和高血糖引起的，并且可以增加血管炎症、血管通透性和病理性血管新生。il-6能直接诱导vegf表达，并且可在动物模型中促进脉络膜新生血管。在dme患者中，眼部il-6水平与黄斑厚度和疾病严重程度呈正相关。据报道，抗-vegf治疗失败的患者的il-6水平升高，而抗-vegf反应患者则降低。因此，施用如本文所述的il-6a可用于与抗-vegf治疗组合或作为抗-vegf治疗的替代用于糖尿病的治疗，包括用于对抗-vegf治疗无反应的患者。用il-6a治疗黄斑水肿还可以通过消除完全抑制抑制病理的任一机制的需要来提高安全性，从而保留每种细胞因子的一些所需的生理作用。因此，局部il-6a治疗与vegf抑制相结合可以降低剂量频率，减少治疗的不良反应。在dme中，玻璃体il-6水平与疾病严重程度和vegf难治性受试者之间存在正相关。因此，如本文所述的il-6a可用于治疗对类固醇疗法、抗-vegf疗法或此二者均难以受治的dme受试者。对给定疗法(例如，类固醇疗法或抗-vegf疗法或两者)难以受治的受试者均未表现出所选症状的改善、减轻或缓解。在某些情况中，il-6a(例如，如本文中所述的il-6抗体或其片段)与抗-vegf疗法或类固醇疗法联合使用，例如，用于治疗dme。因此，在一个实施方式中，本文所提供的制剂包含抗-vegf剂或类固醇。本文所述的制剂可通过任何模式施用以治疗眼部疾病。药剂可通过肠胃外模式递送。替代性地或者另外，制剂可直接递送到眼或眼周。例如，制剂可局部、眼内、玻璃体内(例如，通过玻璃体内注射)或结膜下施用。本文所述制剂(例如，包括如本文中所述的il-6抗体或其片段)也可用于治疗诸如以下的病症：癌症，例如，眼部癌症(眼或眼周的癌症)、前列腺癌、白血病、多发性骨髓瘤、炎症(诸如慢性炎性增殖性疾病)和自身免疫疾病，例如，类风湿性关节炎、卡斯特莱曼病(巨大或血管滤泡性淋巴结增生、淋巴错构瘤、血管滤泡性淋巴结增生)、青少年特发性关节炎(包括多关节青少年特发性关节炎和全身性青少年特发性关节炎)、斯蒂尔病(包括青少年特发性关节炎和成年发病斯蒂尔病)、成年发病斯蒂尔病、淀粉样蛋白a淀粉样变性、风湿性多肌痛、缓解血清阴性对称性滑膜炎伴凹陷性水肿、脊柱关节炎、白塞氏病(包括眼部表现的治疗)、动脉粥样硬化、牛皮癣、系统性红斑狼疮、多发性肌炎(炎性肌病)、复发性多软骨炎、后天性血友病a、多发性硬化、炎性贫血和克罗恩病。il-6拮抗剂也可用于治疗某些神经病学疾病。因此，在某些情况中，本文所述的制剂可用于治疗抑郁和阿尔茨海默病。能用本文所述制剂治疗的其它疾病包括但不限于系统性硬化症、takayasu动脉炎、巨细胞动脉炎、移植物抗宿主疾病和tnf-受体-相关的周期性综合征(traps)。等价范围所有技术特征可以这些特征的所有可能组合个别结合。本发明可以其它具体形式实施而不背离其精神或基本特征。因此前述实施方式在所有方面被认为是解释性的而不是限制本文所述发明。本文所引用的所有参考文献在此以其整体并入。以下非限制性实施例进一步说明本文所述发明。实施例实施例1：通过kd进行的制剂研究通过评价在每种制剂中抗体的kd来进行初始筛选以鉴定用于il-6抗体ebi-031的有希望的赋形剂和制剂。扩散相互作用参数kd使用wyattdyanproplatereader测定，该仪器测量纳米粒子在自由溶液(freesolution)中的扩散常数。将浓缩的ebi-031在制剂缓冲液中连续稀释以得到所需的浓度。ebi-031单体的扩散系数使用多个复制体测量。将平均扩散常数相对于ebi-031浓度绘图。通过将图表的斜率除以y-值得到扩散常数kd。所测试的制剂包含20mm选自柠檬酸盐、组氨酸或磷酸盐的缓冲液以及以下中的一种：5％蔗糖、5％海藻糖、5％山梨糖醇或150mmnacl。所测试的包含柠檬酸盐缓冲液的制剂的ph为6.0或6.5，且包含组氨酸或磷酸盐缓冲液的制剂的ph为6.0、6.5或7.0。下面所示的表2总结了kd制剂筛选的结果。基于该筛选的结果，溶解度在ph6.5时良好，但是在ph6.0或ph7.0时不那么好，这暗示了最佳ph是6.5。结果的概述在表2中示出。该筛选还显示诸如氯化钠的盐对于所有制剂是良好的。表2kd制剂筛选的概述实施例2：不同缓冲液和赋形剂的动态光散射(dls)筛选进行加速稳定性研究以筛选用于ebi-031的不同缓冲液和赋形剂。所测试的制剂包含1mg/ml的ebi-031、20mm缓冲液和所测试的赋形剂(诸如张度剂或氨基酸)。所用的缓冲液选自：ph7.5的tris缓冲液，ph6.5或ph7.5的磷酸盐缓冲液，ph6.5的组氨酸缓冲液，ph5.5的柠檬酸盐缓冲液，或ph5.5的醋酸盐缓冲液。所测试的赋形剂选自：5％山梨糖醇、10％蔗糖、5％海藻糖、5％木糖醇、150mm氯化钠、0.2m精氨酸或0.2m甘氨酸。所测试的具体制剂在下表3中显示。样品于38℃温育，并且在1周和6周之后评价稳定性。利用动态光散射(dls)作为蛋白分子在溶液中聚集形成的测量方法。将样品置于wyattminidawntreos中，该设备根据布朗运动测量扩散常数(dt)。流体动力学半径(rh)与扩散常数成反比，并且提高的流体动力学半径表明聚集。dls筛选的结果概述于下表3中。表3通过dls进行的ebi-031的加速稳定性研究。1mg/ml的应激ebi-031的rh测量结果实施例3：在第0日和第7日的产物纯度制剂研究在包含ebi-031抗体的不同制剂中测试不同的赋形剂。在第9日和第7日测试不同制剂的样品回收、产物纯度和外观。所测试的制剂包含：20mm基础缓冲液，其中缓冲液为醋酸盐(ph5.5)、柠檬酸盐(ph6.0或ph6.5)、组氨酸(ph6.5)、磷酸盐(ph6.5、ph7.0或ph7.5)和三甲基甘氨酸(ph8.5)；氯化钠，20mm或150mm；以及以下赋形剂之一：10％蔗糖、5％山梨糖醇，0.1％聚山梨酯-20、0.1％聚山梨酯-80、0.1％泊咯沙姆p188和0.2m精氨酸。所测试的制剂在96孔微透析板中制备。微透析板孔用储备缓冲液(20mm缓冲液)和2x最终浓度的赋形剂充满(例如，900μl2x缓冲液+900μl2x赋形剂溶液)。将板在板振荡仪上混合以确保在样品添加之前混合。将蛋白样品添加到合适的孔中。制剂在板上的组织显示在表4中。将样品在于室温在板振荡仪上透析2小时。将样品孔插入物转移到第二缓冲液/赋形剂板以在新鲜溶液中透析整夜。在整夜透析之后，回收每个样品并将其转移到透明的300μl玻璃小瓶中。所有样品透明无色。从每个透析盒(dialysiscassette)回收的体积根据特定缓冲液条件而不同(特别是在10％蔗糖缓冲液中)。随后使用分光光度计(thermoscientific)分析每个样品的浓度；然而测量结果可变，可能是因为高粘度/蛋白浓度。随后将每个样品的等分试样在体积排阻-uplc(se-uplc)移动相缓冲液中100-倍稀释到0.994mg/ml(基于初始浓度)，并用分光光度计分析。回收结果在表4中显示。表4在包含10％蔗糖的所有条件中均观察到提高的蛋白浓度，这最可能归因于回收体积的减少。通过se-uplc获得的色谱图的色谱图叠加的分析，样品之间无显著差异。使用分光光度计测定的和从se-uplc峰面积预测的蛋白浓度的比较与表5中所示完全一致。表5浓度测定在和se-uplc预测之间是兼容的通过se-uplc测定主igg峰纯度。当相对于ph分析主igg峰纯度时，主igg峰显示随着基础缓冲液的ph升高而稍微降低(图2a)。这些结果显示ebi-031在较低ph下保持更稳定，例如，在ph5.5下比ph8.5下更稳定。当相对于每种赋形剂分析主igg峰纯度时，赋形剂精氨酸对于产物纯度有积极影响(图2b)。在高和低盐浓度下都观察到这种作用。其它赋形剂可对产物稳定性有更长期的影响。在于40℃温育7日之后，对样品的外观、回收率、uv含量(通过分光光度计测定)、se-uplc和sds-page进行分析。外观分析显示大多数样品看起来透明无色。体积近似在15-100μl之间变化，大部分样品的回收体积接近预期值(25-40μl)(大多数样品回收了足够的体积，允许进行x100稀释分析)，少数样品过于粘稠无法进行进一步分析。第7日时样品的浓度以100倍稀释通过sec移动相a(分光光度计)分析。预期蛋白浓度在100-倍稀释之后＝0.994mg/ml。作为评价的结果，大多数产生的含量值稍微高于起始浓度。分光光度计分析的结果在表6中显示。表6在第7日还进行se-uplc分析。根据缓冲液对se-uplc色谱图进行叠加以评定不同盐浓度和赋形剂对样品纯度的作用。se-uplc分析的结果总结在图3a-3e中。数据也显示随着ph升高有主峰百分比降低和hmw峰提高的趋势。在低ph下，纯度也合理地一致(图4)。组氨酸缓冲液显示对于所有赋形剂为最佳缓冲剂。山梨糖醇也显示在ph6.5下在使用组氨酸缓冲液的制剂中为第二好的赋形剂(图5)。图6是显示含组氨酸缓冲液的样品中主峰纯度(％)相对于不同盐浓度和赋形剂的图表。在x轴上，数字1-12代表了表6中第1-12栏中例出的盐浓度和赋形剂。实施例4：搅拌研究进行搅拌研究以鉴定对于含ebi-031的制剂的最佳清洁剂条件。在第一项研究中，比较了聚山梨酯20、聚山梨酯80和泊咯沙姆188(于0.1％)。在第二项研究中，比较了不同浓度的聚山梨酯20和聚山梨酯80(0.1％和0.03％)。在第一项研究中，50和5mg/ml的ebi-031在20mm组氨酸、20mm氯化钠、4％山梨糖醇中，于ph6.5，并含有：0.1％聚山梨酯-20、0.1％聚山梨酯-80或0.1％泊咯沙姆188。在研究开始和结束时对小瓶进行视觉观察。在研究开始时，视觉观察所有样品看起来是透明的。将样品涡旋4小时。分光光度计和se-hplc分析显示清洁剂有效地阻止了搅拌引发的聚集。第一项搅拌研究的结果概述于图7中。通过se-uplc分析，聚山梨酯显示在缓冲液环境的低产物浓度下稍微好于泊咯沙姆。这些结果证实所有清洁剂看上去提供了对搅拌引发的聚集的防护，正如使用se-uplc所评价的。不使用清洁剂在低产物浓度下导致显著聚集。在第二项研究中，制备以下样品：其包含在20mm组氨酸、20mm氯化钠、4％山梨糖醇中的50和5mg/ml的ebi-031，于ph6.5，含有：a)无清洁剂，b)0.1％tween-20，c)0.1％tween-80，d)0.03％tween-20，或e)0.03％tween-80。在研究开始和结束时对小瓶进行视觉观察。在研究开始时，视觉观察所有的样品看起来是透明的。对比物为处于2-8℃的未搅拌样品(200μl样品)。将样品(800μl)用恒温混匀仪(thermomixer)以400rpm于2-8℃搅拌，随后将等分试样稀释至1mg/ml以使用se-uplc分析。剩余的样品(500μl)在去除用于se-uplc和渗透压的材料之后，用恒温混匀仪以1000rpm于2-8℃再次搅拌4小时，随后将等分试样稀释至1mg/ml以通过se-uplc分析。剩余样品通过恒温混匀仪以1000rpm于25℃再次搅拌3小时，随后将等分试样稀释至1mg/ml以通过se-uplc分析。剩余样品通过恒温混匀仪以1000rpm于25℃再次搅拌整夜。第二次搅拌研究中se-uplc分析的结果概述于图8a-8c中。结果以图表形式表示为对以下的分析：总峰面积(图9a)，igg主峰纯度(图9b)，高分子量物种(图9c)和低分子量物种(图9d)。还通过比较来自solovpe(表7b)和分光光度计分析(表7c)的结果与从se-uplc总峰面积估算的含量对样品进行浓度分析。对从se-uplc总峰面积估算的含量进行比较以平均refstd，并乘以稀释因子以获得含量值(mg/ml)，如表7a中所示。se-uplc和uv含量测定结果的校正显示在320nm或600nm处没有任何显著的光散射，并且没有显著的产物含量损失，因此，暗示最小化的聚集。第二项搅拌研究的这些结果共同显示产品抗体证实了良好的稳定性以及含量、主峰纯度或hmw物种的最小变化。清洁剂的使用对所测试的条件无害。浓度为0.03％和0.1％的tween-20和tween-80同样适合加入到制剂中。表7a含量(mg/ml)*4.895.235.225.315.2752.0458.3855.2157.0254.88表7b表7c实施例5：示例性制剂的制备gmp生产在gmp生产中，将制备最终制剂缓冲液r(20mm组氨酸、20mm氯化钠、4％山梨糖醇、0.03％tween-20)以冲洗最终的0.2μm过滤器。为此，将制备9l缓冲液r并添加1l缓冲液q(细节见表8)。在gmp生产中所用的材料在错误！未找到引用源。9详述。表8用于制剂制备的缓冲液配方-缓冲液q和缓冲液r的ph用氢氧化钠的25％溶液调整。-表3的缓冲液的室温保质期是3日。-缓冲液q：需要1.7ml/l氢氧化钠(25％)。不允许反向滴定。最终缓冲液密度＝＝1.0132kg/l。等渗规格＝300-340mosm/kg。-缓冲液r：需要1.7ml/l氢氧化钠(25％)。不允许反向滴定。最终缓冲液密度＝1.01160kg/l。等渗规格＝300-340mosm/kg。-缓冲液u：该缓冲液通过将9份缓冲液r与1份缓冲液q混合制备。将制成指定体积的缓冲液r，随后添加所需体积的缓冲液q。表9原材料来源毒理学研究材料的稀释详细信息。起始材料为70.3g/l。将该材料用缓冲液r(20mm组氨酸，20mm氯化钠，4％山梨糖醇)稀释至55.5g/l的目标。随后将产物稀释，9份产物对1份缓冲液q(20mm组氨酸，20mm氯化钠，4％山梨糖醇，0.3％tween-20)以得到50.6g/l的最终ebi-031浓度和0.03％的最终tween-20浓度。将一部分50.6g/l样品稀释，1份产物对1份缓冲液u(20mm组氨酸，20mm氯化钠，4％山梨糖醇，0.03％tween-20)以得到25.3g/l的最终浓度。将一部分25.3g/l材料进一步稀释，1份产物对4份缓冲液u，得到5.1g/l的最终浓度。所有浓度均通过a280测定，以a320校正。实施例6：igg2il-6抗体结构亚型的表征ebi-031是igg2抗体(序列在表1中提供)。如先前所讨论的，igg2抗体以三种不同结构亚型结构亚型igg2-a、igg2-b和igg2-a/b亚型存在(图10)。在本实施例中，进行试验以鉴定来自不同样品来源并且在还原剂存在下的ebi-031样品中的结构亚型及其分布。rp-hplc分析反相高效液相色谱(rp-hplc)用于拆分ebi-031的不同结构亚型。对先前已用于拆分igg2二硫键介导的结构亚型的强化分析rp-hplc方法(参见，dillonetal.,journalofchromatographya,2006,1120:112-120)进行优化以拆分ebi-031。将包含约30μg的ebi-031样品加载到zorbax300sb-c8柱(150mm×2.1mm,5.0μm,)上。柱温设为75℃。移动相a为包含0.1％tfa的水，且移动相b为55％ipa、40％acn、4.9％水和0.1％tfa。流速为0.5ml/min。将柱初始用90％移动相a和10％移动相b平衡2min，然后是从10％到25％b的2min台阶梯度。用25-32％b的线性梯度经21分钟进行洗脱。在214nm和/或280nm下监测紫外吸收。为测定拆分是否为二硫键相关的，将样品用5mmdtt和10mm半胱氨酸于室温处理2min，随后用rp-hplc方法分析(图11)。用强效还原剂dtt处理导致igg2抗体的还原，导致洗脱出早期峰(峰0和峰1)(图11，中框)。用与dtt相比是较弱还原剂的半胱氨酸处理也将亚型分布向早期峰移动，尽管达不到在用dtt-处理的样品所看到的那样的程度(图11，下框)。数据证实rp-hplc方法拆分了具有不同二硫键连接性的结构亚型。不同的二硫键结合结构通过非还原性肽图谱和质谱分析确认：早期洗脱峰(峰1)包含igg2-a/b亚型，晚期洗脱峰(峰2)包含igg2-a亚型。重要地，在ebi-031样品中没有检测到igg2-b亚型(峰0)(图11，上框)。不同ebi-031样品中的亚型异质性使用上面所述的rp-hplc分析，分析从不同的表达ebi-031的细胞系收集的ebi-031样品以比较所产生的抗体的亚型分布。从克隆细胞系的200l规模培养物、来自亲本细胞系的10l规模培养物和细胞的稳定转染池收集ebi-031样品。使用三步色谱法从表达ebi-031的克隆和亲本细胞系提纯ebi-031。使用蛋白a提纯(proteinapurification)从细胞的稳定转染池提纯ebi-031。样品通过上面所述的方法分析。图12中所示的结果显示所有三种ebi-031样品均包含亚型igg2-a和igg2-a/b，但没有显著量的igg2-b。该数据证明与其他igg2抗体相比ebi-031igg2抗体在异质性较低的混合物中产生，无论生产是来自表达ebi-031的克隆细胞系、表达ebi-031的亲本细胞系还是来自稳定表达ebi-031的异质细胞种群。图13示出了来自表达ebi-031的克隆细胞系的200l规模培养物的ebi-031样品的亚型分布，例如，图12的上框。还测量了曲线下方的面积，亚型之间的分布在图下方的表中显示。其它实施方式也在本发明的范围内。序列表<110>sesenbio,inc.<120>il-6拮抗剂制剂及其用途<130>d2046-706800<160>31<170>patentinversion3.5<210>1<211>448<212>蛋白质<213>人工序列<220><223>ebi-029hc(igg2)<400>1glnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyser151015servallysvalsercyslysalaserglytyralaleuserasntyr202530leuileglutrpvalargglnalaproglyglnglyleuglutrpmet354045glyvalilethrproglyserglythrileasntyralaglnlysphe505560glnglyargvalthrilethralaaspgluserthrserthralatyr65707580metgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargserargtrpaspproleutyrtyrtyralaleuglutyrtrp100105110glyglnglythrthrvalthrvalserseralaserthrlysglypro115120125servalpheproleualaprocysserargserthrsergluserthr130135140alaalaleuglycysleuvallysasptyrpheprogluprovalthr145150155160valsertrpasnserglyalaleuthrserglyvalhisthrphepro165170175alavalleuglnserserglyleutyrserleuserservalvalthr180185190valproserserasnpheglythrglnthrtyrthrcysasnvalasp195200205hislysproserasnthrlysvalasplysthrvalgluarglyscys210215220cysvalglucysproprocysproalaproprovalalaglyproser225230235240valpheleupheproprolysprolysaspthrleumetileserarg245250255thrprogluvalthrcysvalvalvalaspvalserhisgluasppro260265270gluvalglnpheasntrptyrvalaspglyvalgluvalhisasnala275280285lysthrlysproargglugluglnpheasnserthrpheargvalval290295300servalleuthrvalvalhisglnasptrpleuasnglylysglutyr305310315320lyscyslysvalserasnlysglyleuproalaproileglulysthr325330335ileserlysthrlysglyglnproarggluproglnvaltyrthrleu340345350proproserarggluglumetthrlysasnglnvalserleuthrcys355360365leuvallysglyphetyrproseraspilealavalglutrpgluser370375380asnglyglnprogluasnasntyrlysthrthrproprometleuasp385390395400seraspglyserphepheleutyrserlysleuthrvalasplysser405410415argtrpglnglnglyasnvalphesercysservalmethisgluala420425430leuhisasnhistyrthrglnlysserleuserleuserproglylys435440445<210>2<211>448<212>蛋白质<213>人工序列<220><223>ebi-029hc-h311a<400>2glnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyser151015servallysvalsercyslysalaserglytyralaleuserasntyr202530leuileglutrpvalargglnalaproglyglnglyleuglutrpmet354045glyvalilethrproglyserglythrileasntyralaglnlysphe505560glnglyargvalthrilethralaaspgluserthrserthralatyr65707580metgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargserargtrpaspproleutyrtyrtyralaleuglutyrtrp100105110glyglnglythrthrvalthrvalserseralaserthrlysglypro115120125servalpheproleualaprocysserargserthrsergluserthr130135140alaalaleuglycysleuvallysasptyrpheprogluprovalthr145150155160valsertrpasnserglyalaleuthrserglyvalhisthrphepro165170175alavalleuglnserserglyleutyrserleuserservalvalthr180185190valproserserasnpheglythrglnthrtyrthrcysasnvalasp195200205hislysproserasnthrlysvalasplysthrvalgluarglyscys210215220cysvalglucysproprocysproalaproprovalalaglyproser225230235240valpheleupheproprolysprolysaspthrleumetileserarg245250255thrprogluvalthrcysvalvalvalaspvalserhisgluasppro260265270gluvalglnpheasntrptyrvalaspglyvalgluvalhisasnala275280285lysthrlysproargglugluglnpheasnserthrpheargvalval290295300servalleuthrvalvalalaglnasptrpleuasnglylysglutyr305310315320lyscyslysvalserasnlysglyleuproalaproileglulysthr325330335ileserlysthrlysglyglnproarggluproglnvaltyrthrleu340345350proproserarggluglumetthrlysasnglnvalserleuthrcys355360365leuvallysglyphetyrproseraspilealavalglutrpgluser370375380asnglyglnprogluasnasntyrlysthrthrproprometleuasp385390395400seraspglyserphepheleutyrserlysleuthrvalasplysser405410415argtrpglnglnglyasnvalphesercysservalmethisgluala420425430leuhisasnhistyrthrglnlysserleuserleuserproglylys435440445<210>3<211>218<212>蛋白质<213>人工序列<220><223>ebi-029lc<400>3aspilevalmetthrglnserproaspserleualavalserleugly151015gluargalathrileasncysargalasergluservalaspasntyr202530glyileprophemetasntrptyrglnglnlysproglyglnpropro354045lysleuleuiletyralaalaserasnargglyserglyvalproasp505560argpheserglyserglyserglythraspphethrleuthrileser65707580serleuglnalagluaspvalalavaltyrtyrcysglnglnserglu859095gluvalproleuthrpheglyglnglythrlysleugluilelysarg100105110thrvalalaalaproservalpheilepheproproseraspglugln115120125leulysserglythralaservalvalcysleuleuasnasnphetyr130135140proargglualalysvalglntrplysvalaspasnalaleuglnser145150155160glyasnserglngluservalthrgluglnaspserlysaspserthr165170175tyrserleuserserthrleuthrleuserlysalaasptyrglulys180185190hislysvaltyralacysgluvalthrhisglnglyleuserserpro195200205valthrlysserpheasnargglyglucys210215<210>4<211>230<212>蛋白质<213>人工序列<220><223>ebi-029(igg1)fabhc<400>4glnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyser151015servallysvalsercyslysalaserglytyralaleuserasntyr202530leuileglutrpvalargglnalaproglyglnglyleuglutrpmet354045glyvalilethrproglyserglythrileasntyralaglnlysphe505560glnglyargvalthrilethralaaspgluserthrserthralatyr65707580metgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargserargtrpaspproleutyrtyrtyralaleuglutyrtrp100105110glyglnglythrthrvalthrvalserseralaserthrlysglypro115120125servalpheproleualaproserserlysserthrserglyglythr130135140alaalaleuglycysleuvallysasptyrpheprogluprovalthr145150155160valsertrpasnserglyalaleuthrserglyv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