包含植物提取物的局部组合物的制作方法

本发明涉及包含植物提取物的局部组合物。特别地，本发明涉及包含埋入亲水性小囊(囊泡体(niosomes))中的植物提取物和至少一种局部可接受的赋形剂的局部组合物，所述亲水性小囊优选地具有小于500nm的尺寸。现有技术植物提取物是液体组合物(液体提取物)、固体组合物(干提取物)或中间稠度的组合物(软提取物)，通过用适合的溶剂(水、醇、丙酮等等)提取，从新鲜的或干的植物部分(叶、花、根等等)来制备的。干植物提取物是粉末制备物的形式，并且通过完全蒸发溶剂获得。干提取物通常具有不少于95％重量的干残余物。众所周知，植物提取物在药典中使用，其中它们因其治疗性质而被使用。其中，作为实例，我们可提及花青素提取物比如越桔的提取物，异黄酮提取物比如红三叶草的提取物，木脂素提取物比如挪威云杉的提取物，萜烯提取物比如银杏和积雪草的提取物，生物碱和多酚的提取物比如草木犀、柠檬香蜂草、西番莲和瓜拉那的提取物，以及生物类黄酮的提取物(芦丁和槲皮素，也是其糖苷形式)。挪威云杉的提取物，因为其木脂素含量高，在预防与氧化应激相关的炎症疾病、心血管疾病、以及预防或减缓与雌激素缺乏(特别是在绝经妇女中)相关的症状方面得到应用。越桔的干果实具有收敛性质，可用作止泻剂。所述果实中存在的一些物质被证明对于血液循环、微循环的功能性和眼睛有用，并且在退行性疾病比如糖尿病的存在下有用。特别地，强调花青素对视网膜毛细管的作用，因为它们可保护毛细血管壁，以及对微循环和在血管问题及血管内皮的营养方面发挥有益作用。自从约上个世纪中叶,从银杏植物叶得到的干提取物已经被用于药品中，治疗与脑病症和外周循环的损伤有关的疾病。银杏提取物可以潜在地用于治疗神经变性病症，特别地，其对于与阿尔茨海默病和老年痴呆相关的功能障碍具有有益作用。而且，已经发现其用于心血管病症(尤其用于减少血小板粘附)，处于感觉神经系统的水平(尤其在保护视网膜方面)，且更通常地用于心脏和外周内皮血管舒张。红三叶草干提取物基本上用于预防和/或治疗与绝经期和绝经后期有关的症状和危险因素。这是由于其异黄酮含量高，异黄酮模拟雌激素的结构和行为，但是没有激素替代治疗引起的副作用。已知植物提取物，尤其是干提取物，几乎不适用于局部制剂，尤其是用于应用在皮肤和粘膜上的化妆品产品和/或医疗装置，因为它们通常的水不溶性、它们相当不适合用于通常为白色的化妆品基质的颜色、它们对ph和/或在制备和贮存期间其变化的敏感性、以及它们对通常存在于霜剂、洗剂、凝胶或其它局部制剂中的高百分比的水的不稳定性或不相容性。发明简述本申请人认识到将植物提取物引入局部组合物，特别是用于皮肤和粘膜上的化妆品和/或医疗装置是感兴趣的。因此，本申请人面临制备克服了前述缺点和缺陷的包含植物提取物的局部组合物的问题。特别地，本申请人面临制备水基础的乳液形式的包含植物提取物的局部组合物的问题，所述局部组合物是随时间推移稳定的，并且其不会产生其组分分离和/或沉淀和/或改变的现象。同时，本申请人面临制备包含植物提取物的局部组合物的问题，所述局部组合物具有令人愉快的外观和颜色，并且在制备期间和随时间推移不会发生颜色变化。特别地，本申请人面临将浓缩的且高滴度的挪威云杉、红三叶草、银杏和越桔的植物提取物引入局部组合物的问题。本申请人令人惊奇地发现植物提取物可以被埋入亲水性小囊(囊泡体)，其优选地具有小于500nm的尺寸，得到稳定且无色的水性溶液/分散液。本申请人还令人惊奇地发现包含植物提取物的囊泡体的水性溶液/分散液可用于制备水基础的局部组合物，特别是水、胶束水、乳剂、洗剂、香膏剂、霜剂和凝胶剂，其随时间推移稳定且不具有特别的着色。而且，本申请人令人惊奇地发现当施用于皮肤上时，通过引入植物提取物的囊泡体得到的局部组合物具有意想不到的补水、抗老化和抗皱性质，另外，当施用于粘膜，尤其是阴道粘膜时，显示出营养和补水性质。本申请人观察到埋入亲水性小囊(囊泡体)的植物提取物的水基础的组合物显示出有效成分吸收穿过皮肤的性质，其令人惊奇地高于引入到甘油中的碱性植物提取物的吸收。本申请人出人意料地发现通过引入挪威云杉植物提取物的囊泡体得到的局部组合物对于对炎症性的或刺激现象敏感的皮肤具有惊奇的抗刺激和舒缓作用。而且，本申请人观察到通过引入红三叶草植物提取物的囊泡体得到的局部组合物在预防或减少皮肤变色和衰老典型的肤色(complexioncolour)均匀性丧失方面令人惊奇地有效。本申请人还观察到通过引入银杏植物提取物的囊泡体得到的局部组合物在刺激外周循环方面令人惊奇地有效。最后，本申请人观察到通过引入越桔植物提取物的囊泡体得到的局部组合物在减少与皮肤层(cutaneouscompartment)的微循环有关的发红和水肿方面令人惊奇地有效。因此，本发明的第一个方面涉及包含埋入亲水性小囊(囊泡体)中的植物提取物的水基础的组合物和至少一种局部可接受的赋形剂的局部组合物，所述亲水性小囊具有小于500nm的尺寸。本发明的第二方面涉及一种包含埋入亲水性小囊(囊泡体)中的水基础的组合物，特别是水性分散液或溶液，其中所述植物提取物优选地选自挪威云杉、红三叶草、银杏和越桔的植物提取物。更特别地，本发明涉及一种包含埋入亲水性小囊(囊泡体)中的植物提取物的水基础的组合物，其中所述亲水性小囊包括直链或支链的聚甘油与饱和的或单不饱和的直链脂肪酸的酯。本发明的第三个方面涉及一种用于制备包含含有植物提取物的亲水性小囊(囊泡体)的水基础的组合物的方法，其包括使用手动振荡(handshaking)或采用超声的技术。附图简述本发明将在下述详细说明中更好地阐述，如下参照附图呈现，其仅提供指导，因此是非限制性的，其中：图1示意性地显示囊泡体(10)的截面，并提供表面活性剂分子(20)的定向的表征，其中点表示亲水端(40)，线表示疏水端(50)，形成包括水性室(30)的双层的单片层状结构(25)。发明详述在第一个方面，本发明涉及一种局部组合物，其包含埋入亲水性小囊(囊泡体)中的植物提取物的水基础的组合物和至少一种局部可接受的赋形剂，所述亲水性小囊(囊泡体)为具有直径低于500nm的基本上球形。在本发明中使用的术语“局部可接受的”意在限定如果施用在皮肤和/或粘膜上公认没有不利的副作用(刺激、毒性等)的物质。有利地，本发明中使用的囊泡体具有的直径低于400nm，更优选地低于300nm，并且甚至更优选地低于200nm。优选地，本发明中使用的囊泡体具有的直径大于10nm，更优选地大于20nm，并且甚至更优选地大于40nm。有利地，本发明中使用的囊泡体具有的直径为50nm至180nm，优选地70nm至150nm。本发明中优选地使用的植物提取物选自挪威云杉、红三叶草、银杏和越桔的植物提取物。参照图1，用于本发明目的的囊泡体(10)为由围绕水性室(30)的双层两亲性分子(20)形成的非离子亲水性小囊。特别地，用于形成用于本发明目的的囊泡体的两亲性分子是非离子表面活性剂。所述表面活性剂分子趋向于以如下方式自组装成双层的单片层状结构(25)：非离子表面活性剂的亲水端(40)指向所述片层的外部，而疏水端(50)彼此面向所述片层的内部，形成双层(20)，如图1中图解的。植物提取物被埋入由双层两亲性分子(20)划界的水性室(30)中，形成非离子亲水性小囊(10)。如此，植物提取物可以以在水性介质中的分散液/溶液转运且保持在其中，特别地在本发明的水基础的组合物中。特别优选地用于制备用于本发明目的的囊泡体的表面活性剂由以下组成：直链或支链的聚甘油与饱和的或单不饱和的直链脂肪酸的酯或其混合物。有用的直链或支链的聚甘油的实例由下述通式(i)和(ii)表示：(i)h-(och2-choh-ch2)n-oh(ii)h-(och2-ch(ch2oh))n-oh其中n为2至10的整数。由通式(i)和(ii)表示的优选的聚甘油实例为三聚甘油、四聚甘油、六聚甘油、八聚甘油和十聚甘油。适用于本发明的直链或支链的聚甘油为市售可获得的。市售产品的实例为由spiganords.p.a.公司以商品名vegetablepolyglycerine-3、vegetablepolyglycerine-4、vegetablepolyglycerine-6和vegetablepolyglycerine-10分配的聚甘油以及由solvaychemicals,inc公司以商品名polyglycerol-3和polyglycerol-4分配的聚甘油。饱和的直链脂肪酸的有用的实例包括具有4至32个碳原子的单羧酸，比如丁酸、缬草酸、己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、山嵛酸、二十四烷酸、蜡酸、二十九烷酸、蜂花酸和三十二烷酸(laceroicacid)。优选的饱和的直链脂肪酸包括具有12至22个碳原子的单羧酸，比如月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸和山嵛酸。单不饱和的直链脂肪酸的有用的实例包括具有14到24个碳原子的单羧酸，例如肉豆寇烯酸、棕榈油酸、油酸、二十碳-9-烯和芥酸。脂肪酸混合物的有用的实例为由通过挤压或提取种子或果实获得的植物油，例如橄榄油、花生油、椰子油、棕榈油和菜籽油。橄榄油和椰子油是优选的，特别是橄榄油，因为聚不饱和酸的含量更低。本发明中有用的直链或支链的聚甘油与饱和的或单不饱和的直链脂肪酸的酯可以由下述通式表示：其中n为0至8的整数，残基x表示氢原子或酰基基团r-co-，其中r为包含3至31个碳原子、优选地11至21个碳原子的饱和的或单不饱和的烷基链，并且其中所述残基x中的至少一个且不超过三个，优选地一个或两个由所述酰基基团r-co-表示。本发明中有用的直链或支链的聚甘油与饱和的或单不饱和的直链脂肪酸的酯或其混合物为市售可获得的。市售产品的实例为由naturaliss.r.l.公司以商品名soavirol，例如soavirolov6(橄榄油聚甘油基-6酯)、soavirolov4(橄榄油聚甘油基-4酯)和nikkochemicals公司以商品名nikkolhexaglyn，例如nikkolhexaglyn1-l(聚甘油基-6月桂酸酯)和nikkolhexaglynpr-15(聚甘油基-6聚蓖麻酸酯)生产和分配的聚甘油酯。在制备用于本发明目的囊泡体中，优选地使用适用于使囊泡体的水性溶液/分散液稳定和防腐的其他组分，比如例如甘油和水溶性天然抗氧剂，比如抗坏血酸及其衍生物、异黄酮、厚朴酚、四氢厚朴酚、和厚朴酚、以及厚朴新酚(obovatol)。特别地，用于制备本发明的局部组合物的植物提取物为挪威云杉、红三叶草、银杏和越桔的植物提取物。7-羟基罗汉松树脂酚(hmr)是木脂素的单组分，到目前为止，其在挪威云杉(piceaabies)的提取物中的含量最丰富，其中其浓度达到总木脂素重量的约60％。在挪威云杉中，粗根中木脂素的浓度为2-3％。大量木脂素存在于树枝(5-10％)和分枝(曲枝(twist))的心材中，特别是结节中，其中木脂素的含量可超过10％。这些浓度为磨碎的亚麻籽粉末(已知富含木脂素的物质)中的约一百倍。用于本发明的hmr可以通过压制挪威云杉木材(piceaabies)从大尺寸片段(含有枝条、曲枝和结节)的一部分分离。挪威云杉的整体提取物(tep，含有hmr和异构体)和纯化的hmr，hmrlignantm(主要含有hmr)都是从linneasa,riazzino,switzerland市售可获得的。越桔(vacciniummyrtillusl.)是一种杜鹃花科的灌木植物。越桔提取物，其从干躁的果实获得，如欧洲药典中给出的，含有36％的花青素(相当于25％花色素)及其它组分，比如黄酮类、儿茶素类、多酚类、糖类、果胶类、鞣酸类、维生素a、c和少量的维生素b。银杏是唯一存活的银杏科种类的植物。银杏提取物是从不同的植物部分获得的，但是用于医学目的的提取物主要是从叶获得的。如欧洲药典中所述的，从银杏叶获得的干提取物含有(i)22％至27％重量的黄酮类，选自槲皮酮、山奈酚(campherol)和异鼠李素的糖苷衍生物；(ii)2.8至3.4％重量的银杏苦内酯a，b和c；(iii)2.6至3.2％重量的白果内酯(biobalides)；和(iv)不超过5ppm的银杏酚酸。红三叶草(trifoliumpratense)是一种多年生草本植物，属于豆科(fabaceae)。红三叶草提取物是从叶和/或从该植物枝条末端生长的红花得到的。红三叶草提取物含有三种有效成分∶异黄酮、木脂素和拟雌内酯。主要量的有效成分表现为游离型苷元的(aglyconic)形式的异黄酮，其是天然的唯一实例，并且几乎全部表现为鹰嘴豆芽素a(biochanina)和芒柄花黄素(formononetin)，而染料木素和大豆黄素以较小量存在。反之，木脂素和拟雌内酯以非常小量存在，它们对于红三叶草活性的影响几乎无关紧要。特别地，用于本发明的提取物为具有总异黄酮36-44％滴度的红三叶草提取物，总异黄酮表示为鹰嘴豆芽素a、芒柄花黄素、染料木素和大豆黄素的总和。包含本发明的囊泡体的水基础的组合物可以通过本领域已知的技术制备，例如通过人工搅动(手动振荡)技术或超声技术。手动振荡包括在圆底玻璃烧瓶中进行的将各组分溶于挥发性有机溶剂例如乙醚、氯仿或甲醇中的第一步，在室温(20-25℃)下在旋转蒸发器中进行蒸发的第二步，其留下沉积在圆底烧瓶壁上的组分的薄层，和最后在温和搅拌下在0至60℃之间的温度下，用包含植物提取物的水相再水合的第三步。超声技术包括在0℃至60℃之间的温度下超声处理分散液，其通过混合包含表面活性剂的有机相和包含植物提取物的水相得到。用于制备包含囊泡体的组合物的这些方法和其他方法描述在文献中，例如madhav等人,"niosomes:anoveldrugdeliverysystem"；internationaljournalofresearchinpharmacyandchemistry,ijrpc2011,1(3),498-511的论文中。得到的囊泡体的分散液/溶液包含相对于囊泡体的分散液/溶液的总重量计30％至40％重量的量的水。聚甘油的酯构成相对于囊泡体的分散液/溶液的总重量计占35％至50％重量的主要部分。甘油的存在量为相对于囊泡体的分散液/溶液的总重量计10％至20％重量。植物提取物以相对于囊泡体的分散液/溶液的总重量计2％至5％重量的更有限的量加入。抗氧剂构成相对于囊泡体的分散液/溶液的总重量计1％至6％重量的较少部分。本发明的局部组合物可以是液体或半固体。特别地，本发明的局部组合物由化妆品组合物和/或医疗装置组成，用于施用在皮肤和粘膜上。本发明的局部组合物有利地包含液体或半固体组合物，其中囊泡体的水基础的组合物以相对于局部组合物的总重量计1％至5％重量的量分散。本发明的液体组合物包括溶液、乳剂、微乳剂、洗剂、泡沫、乳状物(milk)、油剂、起泡产品或具有宽粘度变化的混悬剂。液体组合物包括例如水溶液、水性醇溶液、油性溶液、乳剂、混悬剂，所述乳剂通过将油相分散在水相(水包油)中或反之亦然通过将水相分散在油相(油包水)中得到，所述混悬剂通过将由固体颗粒组成的分散相分散在通常由某一粘度的水性或油性液体表示的分散介质中得到。本发明的半固体组合物包括霜剂、凝胶、香膏剂、软膏剂、糊剂、乳霜凝胶(creamgels)、粘贴剂(sticks)和蜡状物。而且，用于本发明局部使用的组合物可以包括用于制备本领域技术人员已知的化妆品和/或医疗装置的各种局部可接受的添加剂或溶媒，例如乳化剂、水合试剂、溶剂、软化剂、稳定剂、粘度调节剂、防腐剂、润滑剂、螯合分散剂或螯合剂、填充剂、粉末、芳香剂、香料、吸收剂、染料和遮光剂、抗氧剂、维生素、筛选物质、uv过滤剂、精油、角蛋白-活性物质和氨基酸。适合的溶剂添加剂包括例如水、醇类、酮类(比如丙酮和甲基异丁基酮)、二醇类(比如乙二醇、丙二醇和丁二醇)、聚乙二醇类(比如peg-40、peg-50、peg-60)、烷基乙酸酯(比如乙酸戊酯、乙酸异丙酯、乙酸丁酯)、石蜡和异链烷烃、环烷基(比如环己烷)、甘油、天然油和合成油、天然甘油三酯和合成甘油三酯。有利地，本发明的局部组合物为水性组合物。在水性组合物中，水构成组合物的主要成分，甚至达到相对于组合物总重量计至多99％重量的量。水性组合物含有相对于组合物的总重量计优选地25％至95％重量、优选地50％至90％重量的量的水。本发明的水性组合物可以优选地包括相对于组合物的总重量计约0.1％至约60％、更优选地1％至40％、并且甚至更优选地5至35％重量的总量的非水性溶剂。适合的乳化剂的实例为非离子的、阳离子的、阴离子的和两性的表面活性剂、或其组合。本发明中有用的乳化剂的实例为脱水山梨醇、乙氧基化的长链醇、烷基聚葡糖苷、皂、烷基硫酸盐比如例如鲸蜡基硬脂基硫酸钠、单烷基和二烷基磷酸盐、烷基磺酸盐、氢化蓖麻油、酰基羟乙基磺酸盐、蔗糖酯、甜菜碱、卵磷脂、季铵盐、烷基油酸盐、甘油酯比如例如癸酰基己酰基聚氧甘油酯(caprylocaproylpolyoxyglycerides)(癸酰基己酰基聚乙二醇甘油酯)和来自橄榄油的乳化剂。优选地，本发明的组合物包含相对于组合物的总重量计约0.1％至约60％、更优选地0.5％至25％、并且甚至更优选地0.5％至10％重量的总量的乳化剂。用于本发明的典型的粘度调节添加剂为例如黄原胶、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、卡波普、角叉菜胶、泊洛沙姆和阿拉伯胶。有利地，本发明的组合物包含相对于组合物的总重量计约0.1％至约25％、更有利地0.5％至25％、并且甚至更有利地0.5％至5％重量的总量的粘度调节剂。本发明中有用的具有水合作用的添加剂的实例为例如脲、尿囊素、透明质酸及其衍生物、甘油、氨基酸、乙酰基单乙醇酰胺、丁氧基丙醇、丁二醇、低分子量的聚乙二醇(比如peg-40、peg-50、peg-60)、芦荟、锦葵、海藻糖和山梨醇。优选地，本发明的组合物包含相对于组合物的总重量计约0.05％至约25％、更优选地0.5％至10％、并且甚至更优选地0.1％至5％重量的总量的水合试剂。本发明中有用的适合的软化剂的实例包括例如羊毛脂、杏仁油、橄榄油、氢化蓖麻油、微晶蜡、聚二甲基硅氧烷(二甲基硅油)、聚甲基苯基硅醚、聚甲基苯基硅氧烷、二醇和硅氧烷的聚合物、矿物油、石蜡、地蜡(ozokerite)、地蜡(ceresin)、甘油三酯、甘油单酯乙酰化物、乙氧基化的甘油酯、脂肪酸的烷基酯、脂肪酸、长链醇、甾醇、蜂蜡、多元醇、聚酯和脂肪酸的酰胺。优选地，本发明的组合物包含相对于组合物的总重量计约0.1％至约25％、更优选地0.5％至10％、并且甚至更优选地0.5％至5％重量的总量的软化剂。本发明中有用的适合的防腐剂的实例包括例如醇类，比如乙醇、苯氧基乙醇和苯甲醇、甲基和丙基对羟基苯甲酸酯、羟基苯甲醚丁酸酯(bha)、山梨酸酯、尿素衍生物、和异噻唑啉酮。本发明的局部组合物中可用的染料的其它实例可以在2009年11月30日颁布的法规(ec)no.1223/2009的附录v中找到。优选地，本发明的组合物包含相对于组合物的总重量计约0.01％至约2.00％、更优选地0.05％至1.00％、并且甚至更优选地0.1％至0.5％重量的总量的防腐剂。本发明中有用的螯合分散剂添加剂或螯合剂添加剂的实例为edta、hedta、烷基草酸酯、草酸锂或草酸钾、焦磷酸钠或焦磷酸钾。优选地，本发明的组合物包含相对于组合物的总重量计约0.01％至约20％、更优选地0.05％至10％、并且甚至更优选地0.1％至5％重量的总量的螯合分散剂添加剂或螯合剂添加剂。本发明中有用的适合的稳定剂的实例为长链醇(比如鲸蜡醇、硬脂醇)及其混合物、高分子量的聚乙二醇(比如peg-9000和peg14000)和聚乙烯吡咯烷酮(比如聚维酮)。本发明的组合物优选地包含相对于组合物的总重量计约0.1％至约25％、更优选地0.5％至15％、并且甚至更优选地1％至10％重量的总量的稳定剂。本发明中有用的粉末形式的适合的添加剂的实例为弹性硅氧烷，比如二甲基硅油/乙烯基二甲基硅油交联聚合物(dc9506，dowcorning)、环甲硅油和二甲基硅油交联聚合物的混合物(dc9040,dowcorning)、用二氧化硅处理的二甲基硅油和乙烯基二甲基硅油的交联聚合物(dc9701,dowcorning)、环甲硅油和二甲基硅油/乙烯基二甲基硅油的交联聚合物的混合物(sfe839,gebayersilicones)。本发明的组合物优选地包含相对于组合物的总重量计约0.1％至约5％、更优选地0.2％至1％重量的总量的粉末形式的添加剂。本发明中有用的遮光剂的实例为氧化锌或氧化铝、二氧化钛或二氧化锌、氧化铝、云母、含有铝的脂肪酸盐和石膏。本发明中优选地使用的染料的实例是不会染色皮肤且不会留下残余物的更易可洗的水溶性染料，比如例如酸性蓝3c.i.42051、酸性蓝9c.i.42090、酸性蓝74c.i.73015、颜料蓝15c.i.74160、酸性黄3c.i.47005、食品黄3c.i.15985,、酸性黄23c.i.19140、酸性黄73c.i.45350、酸性红14c.i.14720、酸性红18c.i.16255、酸性红27c.i.16185、酸性红51c.i.45430、酸性绿1c.i.10020、酸性绿25c.i.61570及其混合物。本发明的局部组合物中可用的染料的其它实例可以在2009年11月30日颁布的法规(ec)no.1223/2009的附录iv中找到。优选地，本发明的组合物包含相对于组合物的总重量计约0.01％至约15％、更优选地0.05％至5％重量的总量的遮光剂和染料。优选地，本发明的组合物可以包括能够屏蔽皮肤受紫外线辐射的uv过滤剂。uv过滤剂的实例为例如丙烯酸酯，比如2-氰基-3,3-二苯基丙烯酸2-乙基己基酯(parsol340)和2-氰基-3,3-二苯基丙烯酸乙酯，樟脑衍生物，比如樟脑4-甲基苯亚甲基(parsol5000)，樟脑3-亚苄基，和肉桂酸酯比如辛基甲氧基肉桂酸酯(parsolmcx)，乙氧基乙基甲氧基肉桂酸酯、二乙醇胺甲氧基肉桂酸酯(parsolhydro)、三嗪酮衍生物比如乙基己基三嗪酮(uvinult-150)、二乙基己基丁酰胺三嗪酮(uvasorbheb)、二苯酰甲烷衍生物比如4-叔丁基-4'-甲氧基二苯酰甲烷(parsol1789)、二甲氧基二苯酰甲烷、苯并三唑衍生物比如2,2'-亚甲基双(6-(2h-苯并三唑-2-基)-4-(1,1,3,3-四甲基丁基)-苯酚(tinosorbm)、三嗪衍生物比如双乙基己氧基苯酚甲氧基苯基三嗪(tinosorbs)。本发明的局部组合物中可用的uv过滤剂的其它实例可以在2009年11月30日颁布的法规(ec)no.1223/2009的附录vi中找到。优选地，本发明的组合物包含相对于组合物的总重量计约0.1％至约20％、更优选地0.5％至15％重量的总量的uv过滤剂。下述实施例将阐述本发明的至少一个实施方案，但是不以任何方式限制其附加权利要求书中限定的保护范围。实施例实施例1-囊泡体制备大量埋入亲水性小囊(囊泡体)中的植物提取物的制剂，具有下表1中给出的组成。得到的组合物具有均匀、透明的粘性凝胶的外观。给出每种组分相对于组合物总重量计的百分比重量。表1组分nio-hmrnio-rclnio-ginnio-mrtsoavirolov615-2515-2515-2515-25nikkolhexaglyn1-l20-2520-2520-2520-25甘油10-2010-2010-2010-20厚朴酚0.5-30.5-30.5-30.5-3和厚朴酚0.5-30.5-30.5-30.5-3挪威云杉提取物(hmr)3-5---红三叶草提取物(rcl)-3-5--银杏提取物(gin)--3-5-越桔提取物(mrt)---3-5水30-4030-4030-4030-40soavirolov6:橄榄油的聚甘油基-6酯nikkolhexaglyn1-l:聚甘油基-6月桂酸酯含有hmrlignan的挪威云杉(piceaabies)的提取物得自用乙醇进行热提取的树结节。然后，使提取的级分与乙酸钾在三元溶剂体系(乙醇、乙酸乙酯和水)中共结晶，直到得到沉淀物。然后，过滤沉淀物，并干燥，得到粉末形式的化合物。通过专门选择欧洲挪威云杉植物、在控制条件下收集木材和采用标准化提取和纯化工艺得到其活性物质的药理学组合物的重现性。红三叶草提取物得自用含水乙醇进行热提取的叶。然后，将提取的级分用水稀释，并通过液体/液体提取纯化。然后，浓缩纯化的液体以除去乙醇，最后进一步浓缩、过滤并干燥，得到粉末形式的最终提取物。通过专门栽培红三叶草植物(生长在欧洲)，其在控制条件下生长，并采用标准化提取和纯化工艺得到其活性物质的药理学组合物的重现性。银杏的提取物得自用含水乙醇进行热提取的叶。然后，在减压下浓缩提取的级分以除去萃取溶剂，并通过在基于树脂的柱上过滤和固体/液体提取来纯化。接着，用水替换有机溶剂，最后浓缩水相，并干燥，得到粉末形式的最终提取物。通过专门栽培银杏植物(生长在欧洲和北美洲)，其在控制条件下生长，并采用标准化提取和纯化工艺得到其活性物质的药理学组合物的重现性。越桔提取物得自用乙醇进行提取的果实。然后，在减压下浓缩提取的级分以除去提取溶剂，并通过在树脂柱上过滤纯化，以除去含糖组分。接着，用水替换有机溶剂，最后通过喷雾干燥技术冻干水相，得到粉末形式的提取物。通过选择越桔植物(采集在欧洲)，在控制条件下采集其果实，并采用标准化提取和纯化工艺得到其活性物质的药理学组合物的重现性。实施例2-乳剂制备一系列包含如上实施例1中所述得到的埋入亲水性小囊中的植物提取物制剂的乳剂。乳剂的组合物在下表2中给出。表2组分emu-comemu-hmremu-rclemu-ginemu-mrt硬脂酸甘油酯se3.503.503.503.503.50鲸腊硬脂醇4.004.004.004.004.00环戊硅氧烷8.008.008.008.008.00二甲聚硅氧烷0.300.300.300.300.30阿甘油(arganoil)2.002.002.002.002.00醋酸生育酚0.500.500.500.500.50卡波姆0.250.250.250.250.25丙二醇1.501.501.501.501.50苯氧乙醇&乙基己基甘油0.800.800.800.800.80香料(symrise)0.250.250.250.250.25氢氧化钠(30％溶液)0.250.250.250.250.25nio-hmr-2.00---nio-rcl--3.00--nio-gin---3.00-nio-mrt----3.00水补足至100100100100100本发明的每个代表性乳剂和比较乳剂的样品接受如下所述有效性试验。实施例3a-短期水合作用试验短期(一小时)水合作用和保护有效性以测量出的水合指数评价，使用具有多参数(multiparameter)元件(cortextechnologyaps-hadsunddenmark)、具有湿度探针(moisturepinprobe)的dermalabcombo，其通过测量角质层和装置探针的传感器之间的以微西门子(microsiemens)(μs)计的电导率使得可以评价皮肤水合作用。在尽可能平滑的面部皮肤区域上进行测量，注意由仪器本身施加恒压预定的一段时间。每次传感器都保持干净。水合指数是在约20℃的温度和约40-60％的环境湿度条件下测量的。根据其使用特征应用样品。采用持续1小时的短期试验评价其有效性。该试验所使用的面积为用外科胶带预先划界的前额皮肤区域，其中获得面积6cm2的正方形开口(cut-out)。在整个试验中，这样的粘性胶带原位保留。在时间t0(基线值)、和应用产品之后5(t5)、15(t15)、30(t30)和60(t60)分钟进行仪器评价。在试验之前，要求每名志愿者在试验前至少3小时不要洗涤面部。在试验之前，受试者保持在临床中30分钟，以使皮肤适应在其中进行试验的空调室的温度和湿度。在该时间结束时，进行水合基线值的测量。对12名两种性别(6名男性，6名女性)的受试者进行试验，所述受试者的年龄在26至53岁之间，平均年龄37.4岁。所选择的受试者不具有一些其它性质的皮肤病学病理或病状，他们没有接受任何药物治疗，并且没有声明对用于局部使用的产品不耐受。所有受试者都完成了整个疗程。首先，采用比较乳剂(emu-com)和包含挪威云杉(emu-hmr)和红三叶草(emu-rcl)提取物的乳剂进行试验。结果概括在下表3中，其显示对于试验乳剂和安慰剂在各个观察时间测量的12名受试者的水合指数平均值。将所有数据都进行反复测量的方差分析(anova)，接着进行图基(tukey)事后检验。表3*p<0.01**p<0.05***p>0.05两个月之后，使用相同的比较乳剂(emu-com)和采用银杏(emu-gin)和越桔(emu-mrt)的提取物制备的乳剂重复试验。结果概括在下表4中，其给出了对于试验乳剂和安慰剂在各个观察时间测量的12名受试者的水合指数平均值。将所有数据都进行反复测量的方差分析(anova)，接着进行图基事后检验。表4t0t5t15t30t60emu-com153176158153155emu-gin152189***192*176**157***emu-mrt149201**191°176*162***°p<0.001*p<0.01**p<0.05***p>0.05实施例3b-长期水合作用试验重复实施例3b中描述的方法，要求相同受试者在早晨醒来时和就寝时每日两次应用试验产品和安慰剂，应用在用外科胶带预先划界的前额皮肤的两个不同的区域上，其中获得面积6cm2的正方形开口。在时间t0(基线值)和7(t7)、14(t14)和28(t28)天进行仪器评价。结果概括在下表5中，其给出了相对于试验乳剂和安慰剂的基线值在各个观察时间测量的12名受试者的水合指数百分比变化的平均值。使用用于成对数据的studentt-检验分析所有数据。表5°p<0.001*p<0.01**p<0.05***p>0.05实施例4-tewl长期水合作用试验通过测量经皮水分流失(transepidermalwaterloss,tewl)评价长期(28天)水合作用和保护有效性。tewl，即从真皮和表皮穿过角质层迁移到外界环境的水量，是皮肤屏障完整性的灵敏指示物。因为tewl随着年龄增长而增加，所以这也作为评价化妆品的抗衰老有效性的参考参数。对于所述评价，根据"standardizationgroupofeuropeansocietyofcontactdermatitis"的指南(经表皮水分流失(tewl)测量的指南)，使用通过"nilssonvapourpressuregradient"开放式方法测定tewl的skinlabcombo仪器(cortextechnologyaps-hadsunddenmark)。根据其使用特点应用样品。在持续4周的长期试验中评价其有效性。该试验所使用的面积为用外科胶带预先划界的右前臂内皮肤区域，其中获得面积6cm2的正方形开口。在整个试验中，这样的粘性胶带原位保留。在时间t0(基线值)和应用产品之后7(t7d)、14(t14d)和28(t28d)天进行仪器评价。在试验之前，要求每名志愿者在试验前至少3小时不要洗涤参与试验的前臂区域。在试验之前，受试者保持在临床中30分钟，以使皮肤适应在其中进行试验的空调室的温度和湿度。在该时间结束时进行tewl测量。对12名两种性别(6名男性，6名女性)的受试者进行试验，所述受试者的年龄在26至53岁之间，平均年龄37.4岁。所选择的受试者不具有一些其它性质的皮肤病学病理或病状，他们没有接受任何药物治疗，并且没有声明对用于局部使用的产品不耐受。所有受试者都完成了整个疗程。结果概括在下表6中，其给出了相对于试验乳剂和安慰剂的基线值在各个观察时间测量的12名受试者的tewl百分比变化的平均值。将所有数据都进行反复测量的方差分析(anova)，接着进行图基事后检验。表6t0t7t14t28emu-com100-4.68-4.94-5.11emu-hmr100-15.64*-17.03°-18.50°emu-rcl100-13.68*-14.24*-13.93**emu-gin100-9.16°-11.71°-13.89°emu-mrt100-7.84***-10.54*-11.12°°p<0.001*p<0.01**p<0.05***p>0.05实施例5-长期弹性试验使用具有皮肤-测量探针的skinlabcombo装置评价对皮肤弹性的长期改善(28天)的有效性。弹性的测量是基于两个不同的阶段：应用到皮肤表面上的吸入(aspiration)阶段和释放阶段。测量探针包括具有粘合胶带的真空室，以更好地粘附至皮肤褶痕。在吸入和释放阶段期间，仪器记录皮肤如何扩张(rises)然后回缩，测量描述皮肤弹性的三个物理参数，即(i)杨氏模量(e)，(ii)皮肤回缩时间r(皮肤从充分伸展的位置返回开始位置所花费的时间)，和(iii)皮肤粘弹性(ve)，其将涉及皮肤吸取(suction)/隆起(elevation)阶段和释放/回缩阶段的数据结合在一起。根据其使用特点应用样品。在持续4周的长期试验中评价其有效性。该试验所使用的面积为用外科胶带预先划界的右前臂内皮肤区域，其中获得面积6cm2的正方形开口。在整个试验中，这样的粘性胶带原位保留。在时间t0(基线值)和应用产品之后7(t7d)、14(t14d)和28(t28d)天进行仪器评价。在试验之前，要求每名志愿者在试验前至少3小时不要洗涤参与试验的前臂区域。在试验之前，受试者保持在临床中30分钟，以使皮肤适应在其中进行试验的空调室的温度和湿度。在该时间结束时，进行杨氏模量(e)、皮肤回缩时间(r)和皮肤粘弹性(ve)的测量。对12名两种性别(6名男性，6名女性)的受试者进行试验，所述受试者的年龄在26至53岁之间，平均年龄37.4岁。所选择的受试者不具有一些其它性质的皮肤病学病理或病状，他们没有接受任何药物治疗，并且没有声明对用于局部使用的产品不耐受。所有受试者都完成了整个疗程。结果概括在下表7-9中，其给出了对于试验乳剂和安慰剂的基线值在各个观察时间测量的12名受试者的e、r和ve百分比变化的平均值。将所有数据都进行反复测量的方差分析(anova)，接着进行图基事后检验。表7°p<0.001*p<0.01**p<0.05***p>0.05表8°p<0.001*p<0.01**p<0.05***p>0.05表9°p<0.001*p<0.01**p<0.05***p>0.05实施例6-抗衰老作用的长期试验使用具有高频率超声探针(20mhz)的skinlabcombo装置评价试验产品在产生皮肤厚度和真皮密度的长期增加(56天)中的有效性。使用高频率超声(20mhz)获得的高分辨率图像的分析允许皮肤中出现的生理学和病理学过程的体内研究。该方法是基于当在皮肤之内传播高频率声脉冲时获得的声波响应的测量。对于所有实际目的，当这冲击皮肤的各种结构时，部分脉冲反射，部分进一步传送。超声传感器收集反射信号，并且在处理之后，将其转变成声波冲击的皮肤截面的图像。这样的图像具有不同程度的发光强度，其作为颜色标度中反映的声信号强度的函数，其中深色代表具有低反射的皮肤区域(即，皮肤结构之间密度无变化或微小变化)，亮色(从绿色到白色，经黄色和红色)代表由于结构密度的显著变化能够产生高强度反射信号的区域。在皮肤老化过程期间出现的细胞外基质的变化可以根据皮肤厚度、真皮密度和回声反射性的变化来定量。后者确定为不同颜色的像素∶白色-黄色-红色-绿色-蓝色-黑色。在健康皮肤的图像中，表皮回声反射性呈现为白色带，相反，真皮呈现为具有从红色/黄色到绿色的有色像素的不同着色，和下皮呈现为黑色。根据其使用特点应用样品。在持续8周的长期试验中评价其有效性。该试验所使用的面积为用外科胶带预先划界的右前臂内皮肤区域，其中获得面积6cm2的正方形开口。在整个试验中，这样的粘性胶带原位保留。在时间t0(基线值)和应用产品之后28(t28d)和56(t56)天进行仪器评价。在试验之前，要求每名志愿者在试验前至少3小时不要洗涤参与试验的前臂区域。在试验之前，受试者保持在临床中30分钟，以使皮肤适应在其中进行试验的空调室的温度和湿度。在该时间结束时进行超声检查测量。对12名两种性别(6名男性，6名女性)的受试者进行试验，所述受试者的年龄在26至53岁之间，平均年龄37.4岁。所选择的受试者不具有一些其它性质的皮肤病学病理或病状，他们没有接受任何药物治疗，并且没有声明对用于局部使用的产品不耐受。所有受试者都完成了整个疗程。结果概括在下表10和11中，其给出了对于试验乳剂和安慰剂在各个观察时间测量的12名受试者的皮肤厚度(mm)和真皮密度(像素强度)的平均值。将所有数据都进行反复测量的方差分析(anova)，接着进行图基事后检验。表10°p<0.001*p<0.01**p<0.05***p>0.05表11°p<0.001*p<0.01**p<0.05***p>0.05实施例7-抗菌素耐药性试验(挑战试验)试验包括“挑战”具有限定的合适微生物接种物的制备物，将经接种的制备物保留在规定温度下，在特定时间间隔从容器抽取样品，并计算收集的样品中存在的生物体数量。该试验是按照意大利药典-第ix版中给出的建议，并使用下述微生物菌株的细菌培养物进行的。向如实施例1中所述制备的含有植物提取物的每个囊泡体制剂接种具有接种物的各种微生物，所述接种物包含在105至106之间的大量细菌和在104至105之间的大量真菌或霉菌。将经接种的产品贮存在室温下(20-25℃)，远离光亮。在时间t0(基线值)和2(t2)、7(t7)、14(t14)和28(t28)天采集产品的样品，用于确定存在的微生物数量。结果概述在下表12-16中，其给出了在各个观察时间每种产品和每种微生物的实测值，以对数底表示。表12表13表14表15表16基于所得到的结果，在研究中的所有囊泡体制剂都经过挑战试验，显示对于根据ctpa(cosmetic,toiletry，andperfumeryassociation)和ctfa(cosmetic,toiletry，andfragranceassociation)制定的验收标准的所有微生物有抑制活性，其预期(envisage)在从接种的7天之内接种的细菌减少等于99.9％且霉菌或真菌减少等于90％，并且随后进一步减少。实施例8-挪威云杉植物提取物的囊泡体的舒缓作用试验使用装有比色探针的skinlabcombo装置(cortextechnologydenmark))测定用挪威云杉提取物(nio-hmr)制备的囊泡体在测定皮肤敏化减少中的有效性，所述囊泡体配制为乳剂(emu-hmr)。skinlab比色探针由于"红斑"功能而能够特定地测量皮肤中的血红蛋白含量，因而提供了红斑指数(ei)值的精确定量。该值较高，则刺激度越大。为了诱发红斑反应的目的，在借助于国际标准芬兰小室(finnchambers)(具有20微升体积的小铝电解槽)的封闭(occlusion)中，用含有5％十二烷基硫酸钠(sls)的溶液预处理前臂皮肤的内部区域约12小时。在该处理结束时，除去含有小铝电解槽的封闭石膏。在12小时的时间间隔之后，将等于2.0mg/cm2样品量的样品应用到受刺激的皮肤区域上。采用产品emu-hmr进行试验，用产品emu-com作为比较，用基于0.1％的氢化可的松-17-丁酸酯的市售可获得的抗炎霜作为阳性对照(c+)，并用蒸馏水作为阴性对照(c-)。对于每名受试者，将每个产品应用到之前敏化的前臂的不同区域上。对12名两种性别(6名男性，6名女性)的受试者进行试验，所述受试者的年龄在26至53岁之间，平均年龄37.4岁。所选择的受试者不具有一些其它性质的皮肤病学病理或病状，他们没有接受任何药物治疗，并且没有声明对用于局部使用的产品不耐受。所有受试者都完成了整个疗程。在整个试验期间，受试者被告知：(i)在参与处理的区域上不应用产品和/或洗涤剂，(ii)不将石膏弄湿，(iii)不参加体育运动，和(iv)避免暴露于uva和uvb射线。在时间t0(基线值)和应用产品之后30(t30)、60(t60)和120(t120)分钟进行仪器评价。结果概括在下表17中，其给出了在各个观察时间测量用试验产品、安慰剂和阳性或阴性对照处理的区域中12名受试者的红斑指数(ei)的平均值。将所有数据都进行反复测量的方差分析(anova)，接着进行图基事后检验。表17*p≤0.0001实施例9-皮肤吸收试验(渗透试验)该试验包括在用合成膜模型接触用于局部使用的囊泡体制剂多个时间之后，评价前述囊泡体制剂中包含的有效成分的扩散动力学，所述合成模型模拟(只要其适合该模型)体内的使用条件。在不同的处理时间，寻找franz细胞的接收部分中任选地释放且能够穿过表皮屏障的囊泡体制剂的有效成分，并通过hplc-dad定量。根据usp1724(2015)semisoliddrugproducts中描述的方法，使用franz细胞模型和使用膜(emdmillipore)进行用于评价跨膜扩散的试验。膜是用于跨膜扩散试验的合成膜，其模拟各种类型的化合物和制剂在人类表皮中的扩散。对于具有红三叶草提取物的囊泡体制剂中包含的有效成分鹰嘴豆芽素a(casno.:491-80-5)和芒柄花黄素[casno.:485-72-3]、具有挪威云杉的提取物的囊泡体制剂中包含的7-hmr(7-羟基罗汉松树脂酚)、具有银杏的囊泡体制剂中包含的槲皮素和具有越桔的囊泡体制剂中包含的花色素苷，进行该试验。利用用于稠液的p100gilson专用容积式移液管，将如实施例1所述制备的含有植物提取物的每种囊泡体制剂应用到膜(1g/cm2)上。通过在应用前后使用分析天平称重franz细胞，可以精确地测量出样品。将囊泡体制剂原样应用到膜上。将提取物本身以3％悬浮在甘油中，然后应用到膜上。用这种方法，适当的进行样品中活性成分之间的比较。阴性对照由用磷酸盐缓冲液处理的膜表示。将样品和对照品在32℃、5％co2中培养，并使其暴露3和/或6和/或24和/或48小时。测试每种样品，一式三份。在不同的暴露时间，用注射器采集接收液体部分的样品。将如此收集的样品立即放入+4℃的冰箱中，然后采集用于定量色谱分析。在暴露结束时，用荧光素评价表皮屏障的完整性。结果概括在下表18-20中，其给出了在不同观察时间每种产品得到的值。表18*p值<0.05在strat膜上体外分析的产品(rcl3％甘油和nio-rcl)内鹰嘴豆芽素a和芒柄花黄素的跨膜扩散显示出，在时间t1，两种产品的两种有效成分的扩散低于分析检测限(＜0.50μg/cm2)。相反，在时间t2，对于两种产品，两种有效成分的跨膜扩散都可检测，但是在囊泡体制剂(nio-rcl)中两种有效成分的扩散量显著地大于从悬浮在甘油中的红三叶草提取物的样品(rcl3％甘油)扩散的量。表19*p值<0.05在strat膜上体外分析产品(hmrlignan2％甘油和nio-hmr)内7-羟基罗汉松树脂酚(7-hmr)的跨膜扩散显示出，在时间t1，两种产品的特性已经非常不同。在3小时之后，悬浮在甘油中的hmrlignan(hmrlignan2％甘油)的提取物样品显示扩散低于分析检测限(＜0.25μg/cm2)，而囊泡体制剂(nio-hmr)的扩散远高于检测阈值，可定量为23.5μg/cm2。在时间t2，对于两种产品，两种有效成分的跨膜扩散都可检测，但是在囊泡体制剂(nio-hmr)中的扩散量相对于从样品hmrlignan2％甘油的扩散量显著地更大，其仍然相当低(0.66μg/cm2)。表20*p值<0.05在strat膜上体外分析产品gin3％甘油内槲皮素的跨膜扩散显示，至多24小时，扩散低于分析检测限(＜0.40μg/cm2；时间t1、t2和t3)，仅在48小时之后(时间t4)可检测，可定量为7.1μg/cm2。有利地，囊泡体制剂(nio-gin)显示仅至多6小时(时间t1和t2)，扩散低于分析检测限(＜0.40μg/cm2)，而在24小时之后，其是可检测的(时间t3)，可定量为4.9μg/cm2，并且在48小时(时间t4)之后，可定量为12.4μg/cm2。有利地，尽管在时间t4，两种有效成分的跨膜扩散都可检测，但是在囊泡体制剂(nio-gin)中的扩散量相对于从悬浮在甘油中的银杏提取物的样品扩散的量(gin2％甘油)显著地更大。从含有越桔提取物的囊泡体组合物(nio-mrt)得到了基本上类似的结果。实施例10-毒性试验通过用mtt测定(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑鎓溴化物)测量的细胞毒性来确定，通过体外测定检验如实施例1所述制备的囊泡体制剂的使用安全性，用于评价在皮肤和粘膜水平(通常且特别地在眼腔(ocularcompartment)中)的刺激力。该测定测量了线粒体酶琥珀酸脱氢酶的活性，其仅在活细胞中具有活性，并且与mtt(黄色着色)反应，形成蓝色的盐，在570nm的波长下定量其光密度(odn)，其与活细胞的数量成比例。对重构的人表皮模型和重建的人角膜上皮模型进行试验。基于使用重构的人表皮的体外试验设计被evcam所批准(http://ecvam.jrc.ec.europa.eu)，并且被oecd/ocse439指南接受作为使用动物的可选择模型，如下所述。用25mg的囊泡体制剂处理在培养基(epi-100-nmm)中培养之后的组织。通过用30μl的5％sds(十二烷基硫酸钠)溶液处理所述组织制备阳性对照(pc)，和通过用30μl的dpbs(杜尔贝科(dulbecco's)磷酸盐缓冲盐水，euroclone)处理所述组织制备阴性对照(cn)。在处理之后，将组织培养60分钟(37℃，5％co2)，用磷酸盐缓冲液洗涤，并再次在干净的培养基中培养24小时(37℃，5％co2)，然后将其再次转移到新鲜培养基中，并再培养18小时(37℃，5％co2)。接着，将所述组织转移到mtt在dpbs中的1mg/ml溶液中，并培养3小时(37℃，5％co2)，然后转移到异丙醇，并在室温下避光培养2小时。在所述过程结束时，使用microplatespectrophotometerμquantbiotek-us在波长λ＝570nm下进行分光光度法读数。将从处理的样品和对照品得到的光密度值相对于从单独的异丙醇得到的值进行标准化。结果概括在下表21中，其给出了从用每种囊泡体制剂处理的组织和相关的阳性和阴性对照得到的odn(n＝6，2个等分试样，3个组织样品)和细胞活力百分比的平均值。由下式计算细胞活力度：％细胞活力＝[odn(570nm)测试化合物/odn(570nm)阴性对照]x100如果发现细胞活力小于或等于50％，则化合物必须被归类为刺激物(r38)，然而如果这超过50％，则其可以被归类为非刺激物。表21从在重构的人表皮上体外评价刺激力的试验中得到的结果可以得出结论，本发明的所有囊泡体制剂都可以归类为非刺激物(细胞活力>50％)。基于使用重构的人角膜上皮模型的体外试验设计被evcam所批准(http://ecvam.jrc.ec.europa.eu)，并且被oecdtg492指南接受作为使用动物的可选择模型，如下所述。用20μl的dpbs处理在基于dmem(杜尔贝科改良的伊格尔培养基(dulbecco'smodifiedeagle'smedium)；ocl-200-asy)的培养基中培养之后的组织，并培养30分钟(37℃，5％co2)。接着，加入50μl的囊泡体制剂。通过将50μl的乙酸甲酯加入组织中产生阳性对照(pc)，通过加入50μl的无菌去离子水产生阴性对照(cn)。在处理之后，将组织培养30分钟(37℃，5％co2)，用dpbs进行洗涤，并再次在干净的培养基中培养12分钟(37℃，5％co2)，然后将其转移到新的热培养基中，并再培养2小时(37℃，5％co2)。接着，将所述组织转移到mtt在dpbs中的1mg/ml溶液中，并培养3小时(37℃，5％co2)，然后转移到异丙醇，并在2-8℃的温度下在没有振摇下避光培养过夜。在该过程结束时，使用microplatespectrophotometerμquantbiotek-us，在波长λ＝570nm下进行分光光度读数。将从处理的样品和对照品得到的光密度值相对于从单独的异丙醇得到的值进行标准化。结果概括在下表22中，其得到了从用每种囊泡体制剂处理的组织和阳性和阴性对照得到的odn(n＝12,4个等分试样，3个组织样品)和细胞活力百分比的平均值。在用于眼部刺激试验的情况下，如果发现细胞活力小于或等于60％，则化合物必须被归类为刺激物(r38)，然而如果这超过60％，则其可以被归类为非刺激物。表22从在重构的人角膜上皮上体外评价刺激力的试验中得到的结果可以得出结论，本发明的所有囊泡体制剂都可以归类为非刺激物(细胞活力>60％)。实施例11-对于皮肤疱的长期作用试验使用visiaii装置(canfieldscientific,inc.)评价用红三叶草提取物制备的囊泡体(nio-rcl)在确定皮肤疱数量减少和改善面部皮肤光滑度方面的有效性，所述囊泡体配制为乳剂(emu-rcl)。visiaii(canfieldscientific,inc.)是为了研究面部皮肤的形态变化而特别优化的图像分析器。通过高清晰度相片扫描,visiaii借助于专用uv过滤剂、偏振光和荧光也能够获得关于进行分析的受试者面部皮肤情况的形态学信息。利用多光谱图像分析器，visia能够加工获得的相片信息，提供关于涉及皮肤健康状况和外观的八个特征的定性和定量资料，比如∶(i)皮肤的色素沉着，(ii)毛孔尺寸，和(iii)毛孔数量(iv)由于细菌活性(细菌试验)引起卟啉存在，(v)光诱发的皮肤疱，(vi)皮肤发红，(vii)皱纹数量，和(viii)皱纹强度。根据其使用特点应用样品。在持续4周的长期试验中评价其有效性。用于采用红三叶草囊泡体的乳剂(emu-rcl)试验的区域是左半边面部。用比较乳剂(emu-com)处理右半边。在时间t0(基线值)和应用产品之后7(t7)和28(t28)天进行仪器评价。在试验之前，要求每名志愿者在试验前至少3小时不要施用面部装饰性产品且不洗涤面部。在每个测量阶段之前，进行visia的相机和“白”平衡的校准。对15名两种性别(6名男性，9名女性)的受试者进行试验，所述受试者在22至56岁之间，平均年龄36.7岁。所选择的受试者不具有一些其它性质的皮肤病学病理或病状，他们没有接受任何药物治疗，并且显示ii-iv表型类型(fitzpatrick)。所有受试者都完成了整个疗程。结果概括在下表23-25中，其给出了对于检查中的乳剂(emu-rcl)和对于比较乳剂(emu-com)，在不同观察时间测量的，15名受试者的评分斑点(疱的定性评价)、疱数量和评分纹理(皮肤光滑度)相对于基线值(t0)的百分比变化的平均值。将所有数据都进行反复测量的方差分析(anova)，接着进行图基事后检验。表23表24表25p值<0.001含有nio-rcl的乳剂被证明在改善面部皮肤的光滑度和面部的一般纹理方面相对于比较乳剂显著有效。用emu-rcl处理看来也产生了疱数量减少，如通过用偏振光分析证实的，其与黑斑病和老年雀斑的减少无关，而是与炎症后皮肤变色和着色过度(hyperchromia)的改善有关。实施例12-长期抗皱作用的试验使用实施例11中描述的visiaii装置(canfieldscientific,inc.)评价用红三叶草提取物制备的囊泡体(nio-rcl)对于产生面部皱纹数量减少和眼睛下面皱纹范围减少的有效性，所述囊泡体配制为乳剂(emu-rcl)。在持续4周的长期试验中评价其有效性。用于试验的区域是左半边面部(emu-rcl)。用比较乳剂(emu-com)处理右半边面部。在时间t0(基线值)、和应用产品之后7(t7)、14(t14)、21(t21)和28(t28)天进行仪器评价。在试验之前，要求每名志愿者在试验前至少3小时不要施用面部装饰性产品且不洗涤面部。在每个测量阶段之前，进行visia的相机和“白”平衡的校准。对15名两种性别(6名男性，9名女性)的受试者进行试验，所述受试者年龄在26至56岁之间，平均年龄36.7岁。所选择的受试者不具有一些其它性质的皮肤病学病理或病状，他们没有接受任何药物治疗，并且显示ii-iv表型类型(fitzpatrick)。所有受试者都完成了整个疗程。结果概述在下表26和27中，其给出了对于在研究中的乳剂和比较乳剂，在各个观察时间测量的，15名受试者的评分-皱纹(皱纹的定性评价)和皱纹数量相对于基线值(t0)的百分比变化的平均值。将所有数据都进行反复测量的方差分析(anova)，接着进行图基事后检验。表26p值<0.001表27皮肤救济分析的结果强调了相对于用比较乳剂处理的那些，用emu-rcl处理的受试者中visia的测量工具中存在的皱纹数量和总体积两者都显著减少。特别地，观察到皱纹总体积减少59％，皱纹数量减少22％。实施例13-关于微循环活性和抗脱发作用的试验如实施例10所述，通过研究用mtt测定(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑鎓溴化物(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide))测量的活性和平均活力评价银杏提取物制备的囊泡体(nio-gin)在减少和/或终止脱发方面的有效性，所述囊泡体配制成乳剂(emu-gin)。对年龄在18至65岁之间的受2级和3级休止期落发(根据hamilton-norwoodscale)影响的40名受试者进行双盲试验。在持续3个月的长期试验中评价有效性。用于试验的区域是左半边头盖骨，用在研究中的产品(emu-gin)处理。用比较乳剂(emu-com)处理右半边。在时间t0(基线值)和应用产品之后的30(t30)、60(t60)和90(t90)天进行评价。研究分成下述阶段：1.客观临床评价；2.采用细胞生物学技术进行毛发图像(trichographic)分析；采用led微型照相机获得与额垂直区域的毛发显微图像(microtrichographicimages)，随后利用mtt测定评价从每名受试者收集的毛发的生物活性和评价平均活力；3.由研究参与者利用调查问卷进行主观评价，所述调查问卷具有适于研究治疗有效性的感觉和产品喜好度的问题。将所有数据都进行反复测量的方差分析(anova)，接着进行图基事后检验。发现在改善毛发的客观和主观评价方面，相对于比较乳剂，含有nio-gin的乳剂显著有效。而且，毛发图像分析显示收集的毛发中的细胞活力提高。实施例14-针对眼睛下暗环和袋的长期作用的试验通过客观和仪器临床评价来评价用越桔提取物制备的囊泡体(nio-mrt)在减轻充血和减少皮下袋体积以及掩蔽和减少暗环方面的有效性，所述囊泡体配制为乳剂(emu-mrt)。通过偶联optocat软件的visio-3ddermatopblue技术(eotech,sa)分析皮下袋的减少，所述技术允许在不同分析时间精密测量同一区域的皮肤，所述optocat软件用于收集、显影和分析结果。该程序能够提供关于涉及浅表组织形态学变化、定量救济体积和80×75mm区域中其变化的参数的数据。通过使用chromametercr-200(minolta)和利用反射元件l*a*b(也已知名称cielab)的反射比色法定量暗环的减少。cielab是一种基于压缩的非线性颜色空间ciexyz的坐标的颜色-对立空间，其中颜色由三个值鉴别：亮度l，表示为百分比(0为黑色，100为白色)，和颜色-对立维度a和b，颜色范围分别为具有-120到+120的值的绿色到红色和蓝色到黄色。对于年龄在25岁至65岁之间显示皮下袋和/或暗环的20名受试者进行单盲研究。早晚每日两次应用具有越桔提取物的囊泡体的乳剂(emu-mrt)。在持续30天的长期试验中评价其有效性。用于该研究的区域为面部的左眼周区域，将其用越桔提取物的囊泡体乳剂(emu-mrt)处理。用比较乳剂(emu-com)处理右眼周区域。在时间t0(基线值)和应用产品之后15(t15)和30(t30)天进行评价。研究分成下述阶段：1.暗环和皮下袋减少有效性的客观临床评价；2.皮下袋减少的仪器评价；3.暗环减少的仪器评价。将所有数据都进行反复测量的方差分析(anova)，接着进行图基事后检验。发现含有nio-mrt的乳剂在减轻充血和减少皮下袋体积以及掩蔽和减少暗环方面，相对于比较乳剂显著有效。实施例15-针对粘膜干燥作用的试验在观察的临床研究中，对40名受试者评价用红三叶草提取物制备的囊泡剂(emu-rcl)在提供减少阴道粘膜(vaginalmucosae)干燥方面的有效性，所述囊泡体配制成乳剂，并用持续90天(t90)的长期试验评价。被认为是阴道粘膜病症改善的指示物的参数为∶-使用视觉模拟评分(vas-评分，等级从0＝没有疼痛到10＝最大疼痛，中间值的指示根据比率等于0.5)评价外阴阴道灼伤和干燥。-利用marinoff评分评价性交疼痛(0＝没有疼痛；1＝具有不适的疼痛，不会妨碍性交频率；2＝具有妨碍性交频率的疼痛；3＝疼痛阻止性交)(marinoffsc,turnermlc.vulvarvestibulitissyndrome.dermatolclin1992；10:435-44)。对于开始治疗的整个群体进行有效性分析(itt分析-意向性治疗)。使用分散液的平均值、中位数和相对量度或百分比描述进入研究的患者的一般特性和临床症状。根据需要，使用t检验或卡方分布检验(chi-squaredtest)比较这些特征。比较研究参数的频率，并使用双尾卡方检验来检验统计显著性，等于0.05被认为是显著性水平。疼痛评分(vas)和性交疼痛的结果在下表中给出。表28t0t30t90灼伤和干燥(vas)7.823.212.72性交疼痛2.961.181.15发现含有nio-rcl的乳剂在改善阴道干燥症状学方面显著有效。当前第1页12当前第1页12