用于调节免疫系统的组合物和方法与流程

文档序号:18742214发布日期:2019-09-21 01:54阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种蛋白质,其包含:

PD-1的胞外结构域;

跨膜结构域,其选自:4-1BB跨膜结构域、CD28跨膜结构域、CD27跨膜结构域和ICOS跨膜结构域;和

胞内信号转导结构域,其选自:4-1BB胞内信号转导结构域、CD28胞内信号转导结构域、CD27胞内信号转导结构域和ICOS胞内信号转导结构域,及其任何组合。

2.权利要求1的蛋白质,其中跨膜结构域是4-1BB跨膜结构域。

3.权利要求2的蛋白质,其中胞内信号转导结构域选自:4-1BB胞内信号转导结构域、CD28胞内信号转导结构域、CD27胞内信号转导结构域和ICOS胞内信号转导结构域。

4.权利要求2的蛋白质,其中胞内信号转导结构域是4-1BB的胞内结构域和选自CD28胞内信号转导结构域、CD27胞内信号转导结构域和ICOS胞内信号转导结构域的胞内结构域。

5.权利要求1的蛋白质,其中跨膜结构域是CD28跨膜结构域。

6.权利要求5的蛋白质,其中胞内信号转导结构域选自:4-1BB跨膜结构域、CD28跨膜结构域、CD27跨膜结构域和ICOS跨膜结构域。

7.权利要求5的蛋白质,其中胞内信号转导结构域是4-1BB的胞内结构域和选自CD28胞内信号转导结构域、CD27胞内信号转导结构域和ICOS胞内信号转导结构域的胞内结构域。

8.权利要求1的蛋白质,其中跨膜结构域是CD27跨膜结构域。

9.权利要求8的蛋白质,其中胞内信号转导结构域选自:4-1BB胞内信号转导结构域、CD28胞内信号转导结构域、CD27胞内信号转导结构域和ICOS胞内信号转导结构域。

10.权利要求8的蛋白质,其中胞内信号转导结构域是4-1BB的胞内结构域和选自CD28胞内信号转导结构域、CD27胞内信号转导结构域和ICOS胞内信号转导结构域的胞内结构域。

11.权利要求1的蛋白质,其中跨膜结构域是ICOS跨膜结构域。

12.权利要求11的蛋白质,其中胞内信号转导结构域选自:4-1BB胞内信号转导结构域、CD28胞内信号转导结构域、CD27胞内信号转导结构域和ICOS胞内信号转导结构域。

13.权利要求11的蛋白质,其中胞内信号转导结构域是4-1BB的胞内结构域和选自CD28胞内信号转导结构域、CD27胞内信号转导结构域和ICOS胞内信号转导结构域的胞内结构域。

14. 权利要求1的蛋白质,其中蛋白质包含SEQ ID NO: 21、23、25、27、29或31的序列。

15.权利要求1-14的任一项的蛋白质,其中蛋白质包含前导序列。

16.权利要求15的蛋白质,其中蛋白质包含CD8前导序列。

17. 权利要求16的蛋白质,其中CD8前导序列包含SEQ ID NO: 1。

18.一种编码任一项前述权利要求的蛋白质的核酸分子。

19. 一种包含SEQ ID NO: 22、24、26、28、30或32的序列的核酸分子。

20. 权利要求19的核酸分子,其还包含由SEQ ID NO: 2编码的前导序列。

21.一种重组细胞,其包含权利要求19或20的核酸分子。

22.一种重组细胞,其包含权利要求18的核酸分子。

23.一种重组细胞,其包含权利要求1-17的任一项的蛋白质。

24.权利要求21或22的细胞,其中所述细胞是淋巴细胞或T细胞。

25.权利要求21或22的细胞,其中所述细胞是肿瘤浸润淋巴细胞(“TIL”)。

26.权利要求21或22的细胞,其中所述细胞是骨髓浸润淋巴细胞(“MIL”)。

27.权利要求26的细胞,其中MIL是低氧性MIL。

28.一种制备重组细胞的方法,其包括用编码权利要求1-17的任一项的蛋白质的核酸分子转染或感染细胞。

29.权利要求28的方法,其中所述细胞是MIL。

30.权利要求28或29的方法,其还包括在用编码所述蛋白质的核酸分子转染或感染细胞之前,在低氧条件下培养MIL。

31.权利要求30的方法,其中低氧条件包括约0.5%-约5%氧气。

32.权利要求30的方法,其中低氧条件包括约1%-约2%氧气。

33.权利要求30-32的任一项的方法,其还包括在低氧培养后在常氧条件下培养细胞。

34.权利要求28-33的任一项的方法,其还包括使细胞与抗-CD3/抗-CD28珠接触。

35.一种增强受试者的免疫反应的方法,其包括给予受试者权利要求21-27的任一项的重组细胞。

36.权利要求35的方法,其还包括制备重组细胞,其中制备重组细胞包括用编码所述蛋白质的核酸转染细胞。

37.权利要求35的方法,其还包括从受试者分离细胞。

38.权利要求35的方法,其中受试者患有肿瘤。

39.权利要求35的方法,其中肿瘤是白血病、淋巴瘤或多发性骨髓瘤。

40.权利要求35的方法,其中受试者是人。

41.一种治疗受试者的肿瘤的方法,其包括给予受试者权利要求21-27的任一项的重组细胞。

42.权利要求41的方法,其还包括制备重组细胞,其中制备重组细胞包括用编码嵌合跨膜蛋白的核酸转染细胞。

43.权利要求41的方法,其还包括从受试者分离细胞。

44.权利要求41的方法,其中受试者患有肿瘤。

45.权利要求44的方法,其中肿瘤是多发性骨髓瘤、白血病或淋巴瘤。

46.权利要求41的方法,其中受试者是人。

47.权利要求41的方法,其还包括在给予细胞至受试者之前:

使细胞与抗-CD3/抗-CD28珠接触;

在低氧条件下培养细胞;和

在常氧条件下培养细胞。

48.权利要求47的方法,其中所述细胞在低氧条件下培养约0.5-约4天。

49.权利要求47的方法,其中所述细胞在常氧条件下培养约0.5-约4天。

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