含有壳聚糖和葡萄柚籽提取物作为活性成分的抗病毒用组合物的制作方法

文档序号:15063433发布日期:2018-07-31 22:15阅读:422来源:国知局
本发明涉及含有壳聚糖和葡萄柚籽提取物作为活性成分的抗病毒用组合物,更具体而言,本发明涉及含有壳聚糖和葡萄柚籽提取物作为活性成分的抗病毒用组合物及含有所述组合物的消毒用组合物。
背景技术
:流感病毒是一种可引起急性呼吸道疾病的传染性强的病毒,在全球引起集体感染或大面积流行,是诱发儿童、老年人和心肺疾病患者的严重呼吸道症状的病毒之一。2009年4月,一种新的a型流感病毒重组h1n1病毒首先被报告传播给墨西哥和美国的94人(cdc2009)。自那一年4月起,病毒继续在人群中传播,并于2009年6月11日被世界卫生组织分类为21世纪第一个大流行性流感(who2009)。作为抗流感药物,m2离子通道抑制剂金刚烷胺(amantadine)和金刚乙胺(rimantadine)、神经氨酸酶抑制剂奥司他韦(oseltamivir)和扎那米韦(zanamivir)以及肌苷单磷酸脱氢酶抑制剂利巴韦林(ribavirin)等3类抗流感治疗剂已被批准并正在使用。这些治疗剂对于减少临床症状是有用的,但是由于副作用和耐药性病毒变种的出现,其使用受到限制。因此急需一种对于流感有效的抗病毒治疗剂。人轮状病毒(rotavirus)引起的婴幼儿冬季腹泻是引起2岁以下婴幼儿发热、呕吐、腹泻、脱水的严重腹泻病。在日本,由于粪便呈现灰白色的特征,也被称为白色腹泻,但已经明确它是一种人轮状病毒感染。在美国,有350万5岁以下的儿童的腹泻被诊断为轮状病毒感染,5万5千人住院,20人死亡。在全世界,主要在发展中国家,每年约有60万婴儿死亡。从发达国家的流行病学调查可知,卫生条件的改善并不能减少轮状病毒的发病率,作为一种对策,全球性的轮状病毒疫苗的研发正在进行中。人副流感病毒是一种有包膜的日本链负义rna病毒,属于副粘病毒科(paramyxoviridae)副粘病毒(paramyxovirus)属。人副流感病毒(hpiv)被认为是1956年人类呼吸道感染的原因,并占儿童呼吸道疾病的4%至22%,这数值在儿童呼吸道疾病中除呼吸道合胞病毒外占第一位。hpiv是引起下呼吸道疾病如肺炎、支气管炎的重要原因,是婴幼儿咳嗽最常见的原因。在四种hpiv血清型1至4中,病毒3型(hpiv-3)是最恶性的,并且在婴儿出生的第一个月期间经常诱发支气管炎和肺炎。不幸的是,目前还没有可用于预防或治疗hpiv诱导的感染的有效疫苗或抗病毒疗法。用于产生灭活病毒的标准方法,例如病毒的热灭活或化学处理,在包括hpiv-3在内的所有hpiv菌株和血清型中均未获得成功。另外,产生减毒病毒的标准方法无法在随机位点形成突变并在特定位点修改hpiv基因组或通过基因组控制引入的突变数目。壳聚糖(chitosan)是在蟹、小龙虾、虾的壳中含有的甲壳素乙酰化获得的物质,已知可以将老化的细胞活性化、抑制衰老、增强免疫力、预防疾病,并且具有激活生命体的自然治愈能力的功能并调节生命体节律,但其机制尚未被完全查明。壳聚糖的作用有,首先,它起到吸收和排泄体内多余的有害胆固醇的作用,即抑制胆固醇在体内过度积累。其次,它抑制癌细胞的增殖,具有抗癌作用。第三,吸附促使血压升高的氯化物离子,抑制其在肠道内的吸收后向体外排出,具有抑制血压升高的作用、增加肠道内有益细菌并激活细胞的作用。另外,已知还有控制血糖、改善肝功能、排出体内重金属和污染物的作用。洗手的行为不仅可以预防有害微生物,也是预防病毒感染的最简单的方法之一,可以带来50%的预防效果。除作为个人卫生用品销售的洗手消毒剂以外,灭菌消毒剂主要以酒精来制备,通常酒精含量为60%以上。在这种情况下,因违反韩国消防法,需要通过将酒精浓度调整到60%以下来制备消毒剂,并且需要补充和改善由于降低酒精浓度而下降的抗菌能力的方法。此外,由于酒精气味是降低消费者偏好的根本原因,因此需要选择具有除臭活性效果的优异材料来抵消它们。因此,有必要开发一种对病毒的具有杀菌能力的低酒精度的手消毒剂。技术实现要素:因此,本发明的目的是提供一种含有壳聚糖和葡萄柚籽提取物作为活性成分的抗病毒用组合物。本发明的另一个目的是提供含有所述抗病毒用组合物的消毒用组合物。为了达到所述目的,本发明提供一种含有壳聚糖和葡萄柚籽提取物作为活性成分的抗病毒用组合物。为了达到本发明的另一个目的,本发明提供含有所述抗病毒用组合物的消毒用组合物。下面将对本发明进行详细说明。本发明提供一种含有壳聚糖和葡萄柚籽提取物作为活性成分的抗病毒用组合物。本发明的壳聚糖的性质不受限制,可以优选为具有85至99%的脱乙酰度和12至25cp的粘度的壳聚糖,更优选为具有95至99%的脱乙酰度,17至18cp的粘度的壳聚糖的壳聚糖。葡萄柚籽提取物在本发明组合物中的浓度不受限制,但可以优选为被添加到50至300ppm的浓度,更优选为100至200ppm的浓度。本发明的组合物可以含有壳聚糖和葡萄柚籽提取物,其重量比例可以为10至30:1,更优选为以15至25:1的比例含有壳聚糖和葡萄柚籽提取物,最优选地,以20:1的比例含有壳聚糖和葡萄柚籽提取物。若以重量%显示,对于全部组合物100重量%,壳聚糖和葡萄柚籽提取物可以占0.01至10重量%,更优选的,可以占0.05至0.3重量%。具体而言,优选地,可以含有0.01至0.5重量%的壳聚糖和0.005至0.1重量%的葡萄柚籽提取物。除壳聚糖和葡萄柚籽提取物之外,本发明的组合物可以进一步含有酒精。所述酒精优选为谷物发酵酒精。基于100重量%的本发明组合物,所述酒精的含量可以为30至50重量%,优选为34至45重量%。本发明的抗病毒用组合物的酒精含量明显低于市场在售产品的平均水平即60%,这对人体无害并且没有易燃性的风险。本发明确认,本发明的组合物不会由于酒精浓度降低而使抗病毒效果变差,反而其抗病毒效力显著优于其它产品。也就是说,本发明的组合物,基于100重量%的全部重量,可含有0.01至0.5重量%的壳聚糖、0.005至0.1重量%的葡萄柚籽提取物和30至50重量%的酒精。本发明的组合物,基于100重量%的全部组合物,可以含有0.01至0.5重量%的壳聚糖、0.005至0.1重量%的葡萄柚籽提取物、0.1至1重量%的柠檬酸、34至45重量%的酒精和55至64重量%的水。并且优选地,所述组合物可以由所述含量组成。可显示出本发明组合物的抗病毒作用的病毒优选为呼吸道病毒,如由腺病毒(adenovirus)、变型肺病毒(metapneumovirus)、犀牛病毒(rhinovirus)、副流感病毒(parainfluenzavirus)、流感病毒(influenzavirus)、呼吸道合胞病毒(respiratorysyncytialvirus)、冠状病毒(coronavirus)和轮状病毒(rotavirus)组合的群中选择的一种或多种。本发明的流感病毒可以是a型流感病毒、b型流感病毒、c型流感病毒,优选为a型流感h1n1、h3n2、h5n1或h9n2流感病毒。此外,所述流感病毒可引起流感、感冒、咽喉炎、支气管炎和肺炎,尤其可引起禽流感,猪流感或山羊流感。本发明的轮状病毒可以是人(human)、猪(pocine)、牛(bovine)或山羊(goat)轮状病毒。此外,所述轮状病毒可引起肠炎、腹泻、感冒、咽喉炎、支气管炎和肺炎。本发明的副流感病毒(hpiv)可优选为人副流感病毒。此外,副流感病毒可引起支气管炎、肺炎、流感、感冒和咽喉炎。在本发明的一个实施例中,确认了本发明的组合物对流感病毒a型h1n1,轮状病毒和副流感病毒都具有活性抑制效果,并且具有细胞存活能力,因此可以作为抗病毒用组合物而被有效地使用。本发明的抗病毒用组合物可以以由呼吸道病毒引起的疾病的预防或治疗用药学组合物、预防或改善用食品组合物的形式提供。本发明的“由病毒引起的疾病”可以是由呼吸道病毒引起的疾病,可以是选自如流感、感冒、咽喉炎、支气管炎、肺炎、肠炎和腹泻组合的群中的一种或多种。这些疾病可优选为由流感病毒、轮状病毒或副流感病毒引起的疾病。本发明中,术语“预防”是指通过施用组合物来抑制呼吸道病毒感染或延迟其发作的任何行为。在本发明中,术语“改善”是指通过施用组合物而改善或减轻由呼吸道病毒感染引起的症状的任何行为。在本发明中,术语“治疗”是指延迟、中止或逆转疾病或病症的进展的任何行为。本发明的组合物可以通过为口服剂、经皮给药剂和吸入给药剂等药学组合物的形式,功能性食品、营养补充剂、健康食品和食品添加剂等食品组合物形式或化妆品组合物形式投入到人体内。本发明的药学组合物含有除所述活性成分以外的药学上可接受的载体。本发明的药学组合物中含有的药学上可接受的载体是常规用于制剂的载体,包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐,明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、糖浆、甲基纤维素、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石粉、硬脂酸镁和矿物油等,但不限于此。除所述组分之外,本发明的药学组合物还可以含有润滑剂、润湿剂、甜味剂、增香剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂等。在雷明登氏药学全书(remington'spharmaceuticalsciences)(第19版,1995)中详细描述了合适的药学上可接受的载体和制剂。本发明的组合物以药学有效剂量给药。本发明中术语“药学有效剂量”是指以适用于医学治疗的合理的益处/风险比例来治疗疾病的充分的量,有效剂量水平可根据个体类型和严重程度、年龄、性别、感染病毒的类型、药物活性、对药物的敏感性、给药时间、给药途径和释放速率、治疗持续时间、共同给药的因素以及医学领域中众所周知的其它因素来决定。然而,为了达到较好的效果,本发明的组合物可以以每天0.0001至100mg/kg,优选为以0.001至100mg/kg的剂量给药。本发明的组合物可以作为单独的治疗剂或与其他治疗剂组合施用,并且可以与常规治疗剂依次或同时施用。本发明组合物可以单次或多次施用。决定有效剂量时,重要的是要考虑所有所述因素并以无副作用的最小的量获得最大效果,这可以容易地由本领域所属人员来确定。本发明的药学组合物可以口服或非口服给药,非口服给药时,可以通过鼻腔内、静脉内注射、皮下注射、肌肉内注射、腹腔内注射或透皮给药。本发明的药学组合物可根据适用的疾病种类来确定给药途径。根据所述的给药途径,本发明的药学组合物可以配制成口服给药或非口服给药的剂型。当配制时,可使用一种或多种缓冲剂(例如盐水或pbs)、抗氧化剂、抑菌剂、螯合剂(例如edta或谷胱甘肽)、填充剂、增量剂、粘合剂、佐剂(如氢氧化铝)、悬浮剂、增稠剂、润湿剂、崩解剂或表面活性剂、稀释剂或赋形剂来制备。用于口服给药的固体制剂包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、液剂、凝胶剂、糖浆剂、浆剂、混悬剂或胶囊剂等。这些固体制剂可以通过将本发明的药学组合物与至少一种赋形剂如淀粉(包括玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉和马铃薯淀粉等)、碳酸钙(calciumcarbonate)、蔗糖(sucrose)、乳糖(lactose)、葡萄糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和羟丙基甲基纤维素或明胶等混合来制备。例如可以通过将活性成分与固体赋形剂混合,然后研磨,加入合适的助剂,并将其加工成颗粒混合物来获得片剂或糖衣片剂。除简单的赋形剂之外,还可以使用润滑剂如硬脂酸镁、滑石粉等。用于口服给药的液体制剂包括混悬剂、内溶液剂、乳剂或糖浆剂等,除常用的简单稀释剂水或液体石蜡之外,还可以包括各种赋形剂如润湿剂、甜味剂、芳香剂或防腐剂。另外,根据情况,可添加崩解剂如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、藻酸或海藻酸钠等,还可以含有抗凝剂、润滑剂、润湿剂、香料、乳化剂和防腐剂。当非口服给药时,本发明的药学组合物可以根据本领域中已知的方法,与合适的非口服用载体一起被配制成注射剂、经皮给药剂、鼻腔吸入剂等剂型。所述注射剂,必须是灭菌的,并且必须防止微生物如细菌和真菌的污染。合适的载体包括但不限于水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)、它们的混合物和/或含有植物油的溶剂或分散介质。优选地,合适的载体为汉克斯液、林格氏溶液、含有三乙醇胺的pbs或注射用灭菌水、10%乙醇、40%的丙二醇及5%的葡萄糖等等渗溶液。为了保护好所述注射剂以免被微生物污染,可添加对羟基本甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等多种抗菌剂及抗真菌剂。同时,所述注射剂在大部分情况下可以添加糖或氯化钠等等渗剂。透皮给药剂型可包括软膏剂、霜剂、乳液剂、凝胶剂、外用液剂、贴片剂、擦剂和气喷剂。所述“透皮给药”是指将药学组合物在局部皮肤上施用,使药学组合物中所含的有效剂量的活性成分被传达到皮肤内。本发明的药学组合物可根据本发明所属
技术领域
具有通常知识的人容易实施的方法,利用药学上可接受的载体和/或赋形剂来配制,可以以单位剂量形式配制,或放入大容量容器内配制。此时,剂型可以是油或水性介质中的溶液、悬浮液或乳液形式,或者可以是浓缩剂、粉剂、颗粒剂、片剂或胶囊的形式,另外还可以是散剂或稳定剂。除含有壳聚糖和葡萄柚籽提取物作为活性成分外,本发明的药学组合物还可以与已知具有抗病毒作用的其它药理活性成分组合使用。例如,本发明的药学组合物可以进一步含有金刚烷胺(amantadine)、金刚乙胺(rimantadine)、奥司他韦(oseltamivir)、扎那米韦(zanamivir)、利巴韦林(ribavirin),或与其组合使用,从而进一步提高抗病毒功效。当本发明的组合物制备为食品组合物,不仅含有壳聚糖和葡萄柚籽提取物作为活性成分,还可以含有制造食品时通常添加的成分,例如蛋白质、碳水化合物、脂肪、营养素、调味剂及香味剂。所述碳水化合物可以包括单糖如葡萄糖、果糖等;二糖如麦芽糖、蔗糖、低聚糖等;还有多糖如糊精、环糊精等一般的糖,以及木糖醇、山梨糖醇、赤藓糖醇等糖醇。香味剂可以是天然的香味剂[索马甜,甜叶菊提取物(例如,瑞鲍迪甙a,甘草甜素等)]和合成香味剂(糖精,阿司帕坦等)。例如,本发明的食品组合物,如果制备成饮料,除了含有壳聚糖和葡萄柚籽提取物之外,还可以添加柠檬酸、液态果糖、砂糖、葡萄糖、醋酸、苹果酸、果汁、杜仲提取液、枣提取物、甘草提取物等。本发明的食品组合物可以用于预防或改善由病毒引起的疾病。根据本发明的食品组合物可以通过与上述药学组合物相同的方式配制用作功能性食物或用作各种食物中的添加剂和防腐剂。可以添加本发明的组合物的食物优选为饮料类、复合维生素和保健食品类等。例如本发明的食品组合物用于制备饮品等饮料类的情况下,除了壳聚糖和葡萄柚籽提取物以外,还可以进一步含有柠檬酸、液体果糖、砂糖、葡萄糖、醋酸、苹果酸、果汁、各种植物提取物等。本发明提供一种健康功能食品,它含有用于预防或改善由所述病毒引起的疾病的食品组合物。健康功能食品是指通过将壳聚糖和葡萄柚籽提取物添加到饮料类、茶类等食品材料中,或者用胶囊化、粉末化或悬浮液等方式制备的食品。摄取所述食品,可以对健康带来特定的效果,但与一般药品不同,以食品为原料的优点是,不会有长期服用药品时产生的副作用。这样获得的本发明的健康功能食品是非常有用的,因为它可以在日常生活中摄取。根据健康食品的种类不同,所述健康食品中的壳聚糖和葡萄柚籽提取物的添加量也不同,因此不能一概而论,通常以食品对象为基准,添加量为0.01至50重量%,优选为0.1至20重量%在的范围内。在颗粒、片剂或胶囊形式的食物的情况下,其添加量通常为0.1至100重量%,优选为0.5至80重量%。根据本发明的一个实施例,本发明的健康功能食品可以是饮料的形式。另外,本发明的食品组合物可以用作食品防腐剂。可添加使用本发明中的防腐剂的食品是健康食品和饮料,含有所述抗病毒用组合物作为活性成分的液体状或粉末状食品防腐剂的添加量,基于所述食品100重量%,可以在0.1重量%至20重量%的范围内。本发明的抗病毒用液体状或粉末状食品防腐剂组合物也可以用于保健食品等多种用途。可添加所述组合物的食品有,保质期和耐贮性很重要的天然果汁和蔬菜饮料或以汁的形式销售的产品。另外,本发明还可以作为酸奶等乳酸菌饮料或糊剂等的混合剂来使用。对于所述耐贮性重要的饮料组合物,本发明的抗病毒用防腐剂为液体形态时,基于饮料100重量%,其添加量优选为0.01至2重量%,为粉末形态时,基于饮料100重量%,其添加量优选为0.1至2重量%,并含有各种香味剂和天然碳水化合物等作为附加组分。本发明提供含有所述抗病毒用组合物的消毒用组合物。含有本发明的抗病毒用组合物的消毒用组合物可以以液体状、固态状和气体状中的任何一种形式制备。本发明的消毒用组合物,可以适用于各种类型的人体或人类使用的器具和装置,当施用到人体时,可以以口服、非口服等任何方式来施用。所述灭菌消毒剂可以以各种能有效地应用到人体本身或各种器具和装置的剂型来制备,如片剂、丸剂、胶囊剂、粉末制剂等用于口服给药的药学剂型,或如喷雾剂、洗涤剂、凝胶剂、液体制剂、霜剂、软膏剂等外用制剂等适用于器具和装置的剂型。另外,用于本发明的消毒用组合物能够在消毒清洁剂、沐浴露、漱口水、湿纸巾、洗衣皂、洗手液、加湿器填料、口罩、软膏或过滤器填料的制造中使用。除了本发明的病毒消毒用组合物之外,这种消毒剂或洗涤剂还可以含有消毒剂或洗涤剂所需的已知成分。发明的效果:本发明的抗病毒用组合物和含有本发明的抗病毒用组合物的消毒用组合物,首次被证实对流感病毒、副流感病毒和轮状病毒具有显著优异的活性抑制效果,因无细胞毒性对人体无害,病毒抑制效果非常优秀。附图说明图1是显示本发明组合物、普瑞来(purell)和滴露(dettol)的流感病毒活性去除能力的示意图;图2是显示用本发明组合物、普瑞来和滴露处理mdck时的针对流感病毒的细胞存活能力的照片;图3是显示用本发明组合物、普瑞来和滴露按不同浓度处理ma104细胞时的细胞存活能力的图表;图4是用本发明组合物、普瑞来和滴露的20倍稀释溶液处理感染轮状病毒的ma104细胞时,显示各试验物质的轮状病毒活性去除能力的图表;图5是显示用本发明组合物、普瑞来和滴露按不同浓度处理mdck细胞时的细胞存活能力的图表;图6是用本发明组合物、普瑞来和滴露的160倍稀释溶液处理感染副流感病毒的mdck细胞时,显示各试验物质的副流感病毒活性去除能力的图表。具体实施方式下面将对本发明进行详细说明。但,下面说明的实施例,仅是本发明的示例性说明,本发明的内容并不限于下面的实施例。<测试材料>1.对照组为了比较本发明洗涤剂组合物的病毒活性抑制效果,将普瑞来(gojoindustries,inc.,美国)和滴露(reckittbenckisergroupplc,英国)作为对照组。表1简单整理了各产品的特点。表12.测试病毒2-1.流感病毒使用购自atcc的a型流感病毒(h1n1)a/pr/8/34株(atccvr-1468),mdck细胞用于病毒增殖和活性测定。2-2.人轮状病毒使用购自美国细胞株银行的人轮状病毒株(wastrain,atccvr-2108)进行实验,并在猪肾细胞株ma104细胞中培养增殖。用人轮状病毒株感染ma104细胞,测定细胞溶血现象和病毒活性去除能力。2-3.副流感3型病毒使用购自美国细胞株银行的副流感3型病毒(c243株,atccvr-93),用副流感3型病毒感染mdck细胞,测定细胞的溶血现象和病毒活性去除能力。<实施例1>制备本发明的组合物在本实施例中,使用壳聚糖、酒精和葡萄柚籽提取物来制备具有抗病毒作用的天然灭菌消毒洗涤剂。本实施例使用了(株)锦湖化学(kumhohwaseong)(位于韩国庆北蔚珍郡)生产的壳聚糖粉末。在40-50℃将40g壳聚糖(dd:98.79%,17.93cp)和100g柠檬酸溶于1l蒸馏水中直至壳聚糖完全溶解。加入2g葡萄柚籽提取物(df-100,foodadditivesbankco.,ltd.,韩国)用200目筛过滤。加入约10l纯化水至最终体积为11,400ml并充分混合。最后添加8,600ml的95%的酒精(wooriethanolsuppliescompany,韩国)后混合。表2显示了本发明组合物的成分含量(%)。表2组合物含量壳聚糖0.2%酒精40%水59.29%柠檬酸0.5%葡萄柚籽提取物0.01%本发明的抗病毒用组合物酒精含量低,为40%,对人体无害,不具有易燃性风险,利用天然物质壳聚糖,降低了皮肤刺激性,并由于壳聚糖本身的保湿性而可以保护皮肤,含有天然抗菌剂葡萄柚籽的提取物,不仅无皮肤刺激性和还具有稳定性,并且如下面的实施例所述,具有优异的抑制各种呼吸道病毒活性的效果。<实施例2>流感病毒活性去除能力用mem培养基分别将1ml试验物质[本发明组合物、普瑞来(p)和滴露(d)]稀释10倍,然后用0.22μm的分离膜过滤以消除微生物污染的可能性,并在连续稀释10倍的流感病毒溶液里,以1/10的比例混合。在试验对照组中,将不含灭菌消毒剂的mem溶液与连续稀释10倍的流感病毒溶液以1/10比例混合。将各混合溶液添加到培养了mdck细胞的96孔板的各孔中,各孔添加100μl并培养48小时。培养结束后,对于96孔板,根据专利方法(“抗病毒剂检测方法”,专利注册号:100682069)分析本发明组合物、普瑞来(p)和滴露(d)的病毒灭菌能力。其结果是,将病毒溶液稀释100万倍的条件下,进行试验的灭菌消毒剂即本发明组合物、普瑞来(p)和滴露(d)显示出100%的病毒的灭菌能力。其结果如图1所示,与未处理的感染对照组比较相对值,本发明组合物、普瑞来(p)和滴露(d)溶液的病毒灭菌能力数值分别显示为,本发明的洗涤剂组合物127.08±18.29%,普瑞来(p)132.04±38.13%,滴露(d)89.48±83.55%,确认本发明的组合物显示出与普瑞来(p)类似程度的流感病毒的灭菌效果,比滴露(d)显著优秀的流感病毒的灭菌能力。并且如图2所示,感染病毒的对照组,大部分的mdck细胞已被病毒破坏,而添加本发明组合物、普瑞来(p)和滴露(d)和病毒溶液的混合溶液的组几乎所有细胞都存活,由此可以确认本发明组合物对细胞即对人体无害并只对病毒具有特异性的灭菌能力。<实施例3>轮状病毒活性去除能力<实施例3-1>对ma104细胞株的安全性能与所述实施例2相同,分析了当把试验物质溶液添加到细胞培养液时,对ma104细胞株的细胞存活的影响。结果,如图3所示,本发明的组合物分别在20、40、80和160倍稀释的溶液中的细胞存活率大于100%,不影响细胞存活。与此相反,普瑞来(p)和滴露(d),虽然细胞存活率随着溶液稀释比率增加而增加,但细胞存活率显著低于本发明组合物。也就是说,本发明的组合物与未处理的试验对照组和普瑞来(p)和滴露(d)相比,对ma104细胞存活的影响显著较小,表明与对照组相比本发明的组合物可用作对人体无害的抗病毒剂。<实施例3-2>人轮状病毒活性去除能力的分析试验物质溶液用0.22μm的分离膜过滤以消除微生物污染的可能性,并在稀释800倍的人轮状病毒溶液(tcid25)里,以1/20的比例分别进行混合。将各混合溶液添加到培养了ma104细胞的96孔板的各孔中,各孔添加100μl并培养48小时。培养结束后,对于96孔板,根据专利方法(“抗病毒剂检测方法”,专利注册号:100682069)分析本发明洗涤剂组合物、普瑞来(p)和滴露(d)的病毒灭菌能力。结果,如图4所示,本发明组合物被稀释20倍的溶液对人轮状病毒的活性去除能力为85.36±9.68%,显示出非常优异的效果。普瑞来(p)被稀释20倍的溶液对人轮状病毒的活性去除能力为4.24±3.44%,滴露(d)被稀释20倍的溶液对人轮状病毒的活性去除能力为5.58±0.90%,都几乎没有轮状病毒抑制能力。因此,证实了只有本发明的组合物在高浓度下不具有细胞毒性而对轮状病毒显示出优异的活性去除能力,可以用作对人体无害的抗病毒用灭菌消毒用组合物。<实施例4>副流感病毒活性去除能力<实施例4-1>对mdck细胞株的安全性能与所述实施例2相同,分析了当把试验物质溶液添加到细胞培养液时,对mdck细胞株的细胞存活的影响。结果,如图5所示,在本发明的洗涤剂组合物、普瑞来(p)和滴露(d)的20、40、80和160倍稀释的溶液中的细胞存活率中,本发明的组合物随着稀释倍数增加细胞存活率增加,而普瑞来(p)和滴露(d)随着稀释倍数增加细胞存活能力显著降低。因此,证实了本发明的组合物显示出最稳定的结果,确认了本发明的组合物作为对人体无害的轮状病毒消毒剂最具有实用价值。<实施例4-2>副流感病毒活性去除能力的分析试验物质[本发明组合物、普瑞来(p)和滴露(d)]溶液用0.22μm的分离膜过滤以消除微生物污染的可能性,并在稀释200倍的副流感病毒溶液(tcid25)里,以1/160的比例混合。将各混合溶液添加到培养了mdck细胞的96孔板的各孔中,各孔添加100μl并培养48小时。培养结束后,对于96孔板,根据专利方法(“抗病毒剂检测方法”,专利注册号:100682069)分析本发明洗涤剂组合物、普瑞来(p)和滴露(d)的病毒灭菌能力。其结果如图6所示,本发明的洗涤剂组合物被稀释160倍的溶液对副流感病毒的活性去除能力显示为115.14±2.16%,普瑞来(p)被稀释160倍的溶液对副流感病毒的活性去除能力显示为-1.58±0.20%,滴露(d)被稀释160倍的溶液对副流感病毒的活性去除能力显示为-2.08±0.10%。即,在试验产品中,本发明组合物的测试结果最出色,而普瑞来(p)和滴露(d)几乎没有副流感病毒的活性去除能力。因此,本发明组合物显示出最稳定的结果,由此确认,本发明的组合物作为对人体无害的副流感病毒消毒剂最具有实用价值。【产业利用可能性】根据以上所述内容,本发明的抗病毒用组合物和含有本发明的抗病毒用组合物的消毒用组合物,首次被证实对流感病毒、副流感病毒和轮状病毒具有显著优异的活性抑制效果,因无细胞毒性对人体无害,病毒抑制效果非常优秀,具有产业利用可能性。当前第1页12
当前第1页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1