一种保湿乳及其制备方法与流程

本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及的是一种保湿乳及其制备方法。

背景技术：

植物蛋白、多糖、有机酸及多酚等植物活性成分是功能化妆品的功能原料。由于天然活性多糖的分子结构存在大量羟基或羧基等极性基团，可与水分子形成氢键，并常常相互交联成网状结构而表现出良好的吸水和保湿性能；并且多糖一般都具有一定的粘度和较好的成膜性，可在皮肤表面形成均匀的薄膜，从而减少皮肤表面的水分蒸发；某些多糖还具有抗菌、清除氧自由基、改善皮肤新陈代谢和抗辐射损伤等活性，使得天然活性多糖在功能化妆品领域的应用成为生物美容的热点方向。

生活于海洋中的海藻种类繁多、多糖含量高，是天然活性多糖的一种重要来源，提取并利用海藻多糖作为化妆品功能原料的研究一直备受青睐。裙带菜系褐藻门裙带菜属的一种温带性多年生大型可食褐藻，我国养殖产量仅次于日本和韩国，位居世界第三。研究发现裙带菜多糖具有良好的抗凝血、抗肿瘤、抗病毒等药用价值。文献尚未见裙带菜多糖应用于化妆品的报道。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种保湿乳，具有优异的保湿效果，同时具有美白、抗氧化的效果，是一种具有多重功效的保湿化妆品。

本发明的目的还在于提供上述保湿乳的制备方法。

为了达成上述目的，本发明的解决方案是：

一种保湿乳，按质量百分比计，包括如下用量的成分：

油相

水相

所述裙带菜多糖提取物的制备方法如下：

先将采集的裙带菜经过洗净沥干后冻干，粉碎过筛，得到裙带菜粉末；将裙带菜粉末加水，在40～45℃下超声辅助提取后，过滤取滤液；然后在滤液中加入无水乙醇，静置24h，醇沉，离心收集沉淀物；然后将沉淀物用无水乙醇反复漂洗脱色，再次离心收集沉淀物并冻干，得到水提醇沉物；然后将水提醇沉物加水充分溶解后，离心去除其中的不溶物，取上清液透析，真空旋转浓缩得浓缩液，最后将浓缩液真空冷冻干燥，即得所述裙带菜多糖提取物。

一种保湿乳的制备方法，包括如下步骤：

(1)将1～3％的蜂蜡、0.5～1.5％的十六醇、0.5～1.5％的羊毛脂、1～3％的硬脂酸、1～3％的液体石蜡、2～4％的硅油、0.5～1.5％的橄榄油、1～3％的单甘酯、2～4％的肉豆蔻酸异丙酯以及0.005～0.015％的尼泊金甲酯混合得到油相，加热至70～80℃，待所述油相完全融化后保温备用；

(2)将1～3％的裙带菜多糖提取物、2～4％的丙二醇、1～2％的三乙醇胺以及65.5～86.5％的蒸馏水混合得到水相，加热至70～80℃，待所述水相完全融化后保温备用；

(3)在高速搅拌下将步骤(2)得到的水相加入到步骤(1)得到的油相中，转速为2500-3000r/min，搅拌冷却至室温，即制得所述保湿乳。

采用上述技术方案后，本发明一种保湿乳，添加了裙带菜多糖提取物这种具有美白、抗氧化及保湿功效的护肤成分，赋予该保湿乳多重护肤功效，证明了裙带菜多糖提取物作为化妆品功能原料具有可行性。

附图说明

图1为本发明中裙带菜多糖提取物在干燥环境中的保湿性评价结果；

图2为本发明中各乳剂在干燥环境中的保湿性评价结果；

图3为本发明中各乳剂在相对湿度41％环境条件中的保湿性评价结果。

具体实施方式

为了进一步解释本发明的技术方案，下面通过具体实施例来对本发明进行详细阐述。

一、材料与仪器等

1、材料

新鲜裙带菜取自中国山东威海市。

2、药品

1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH，购自Sigma公司)；酪氨酸酶(Mushroom tyrosinase，购自美国Worthington公司)；多巴L-DOPA(Sigma公司提供)；甘油(化妆品级，广东光华化学厂有限公司)；蜂蜡(化妆品级，青岛优索化学科技有限公司)；十六醇、三乙醇胺(国药集团化学试剂有限公司)；羊毛脂(化妆品级，广东达濠精细化学品公司)；硬脂酸(化妆品级，上海白猫日化)；液体石蜡(化妆品级，山东优索化工科技有限公司)；橄榄油(食品级，西班牙TEXTRON)；肉豆蔻酸异丙酯(青岛优索化学科技有限公司)；单甘酯、尼泊金甲酯、丙二醇、硅油(山东优索化工科技有限公司)；其余试剂均为国产分析纯。

3、仪器

FA-1A-80型冷冻干燥机(北京博医康实验仪器有限公司)；HWS-270型恒温恒湿箱(宁波新江南仪器有限公司)；F50酶标仪(上海帝肯贸易有限公司)；T6紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；TDL-5-A低速大容量台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；RE-2000B型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)；SHZ-DⅢ型循环水式真空泵(予华仪器有限责任公司)；BS-124-S型电子天平(德克赛斯)；DK-S26型恒温水浴锅(上海精密实验设备有限公司)；KQ-600E型超声波清洗器(江苏昆山舒美超声仪器有限公司)；WS.A1型温湿度计(北京康威仪表有限责任公司)。

二、裙带菜多糖提取物的制备

先将采集的裙带菜经过洗净沥干，除去盐分、泥沙等杂质后-80℃冻干，粉碎过筛，得到裙带菜粉末；以料液比3g：100mL的比例，将裙带菜粉末加水，在40℃、600W、40KHz的条件下超声辅助提取，提取30min后，过滤取滤液；然后在滤液中加入3倍体积的无水乙醇使体系的乙醇体积分数为75％，静置24h，醇沉，以4500r/min的转速离心收集沉淀物；然后将沉淀物用无水乙醇反复漂洗脱色，再次以4500r/min的转速离心10min后，收集沉淀物并冻干，得到水提醇沉物；然后将水提醇沉物加水充分溶解后，以4500r/min的转速离心10min后去除其中的不溶物，取上清液流水透析(透析袋3500Da)24h，55℃下真空(-0.09MPa)旋转浓缩得浓缩液，最后将浓缩液真空冷冻干燥，即得裙带菜多糖提取物。

三、保湿乳的制备

实施例1

一种保湿乳的制备方法，包括如下步骤：

(1)将2％的蜂蜡、1％的十六醇、1％的羊毛脂、2％的硬脂酸、2％的液体石蜡、3％的硅油、1％的橄榄油、2％的单甘酯、3％的肉豆蔻酸异丙酯以及0.01％的尼泊金甲酯混合得到油相，加热至75℃，待油相完全融化后保温备用；

(2)将3％的裙带菜多糖提取物、3％的丙二醇、1％的三乙醇胺以及余量的蒸馏水混合得到水相，加热至75℃，待水相完全融化后保温备用；

(3)在高速搅拌下将步骤(2)得到的水相加入到步骤(1)得到的油相中，转速为3000r/min，搅拌冷却至室温，即制得该保湿乳。

本实施例中各成分的用量比为质量百分比，总用量之和为100％。

实施例2

一种保湿乳的制备方法，包括如下步骤：

(1)将1％的蜂蜡、0.5％的十六醇、0.5％的羊毛脂、1％的硬脂酸、1％的液体石蜡、2％的硅油、0.5％的橄榄油、1％的单甘酯、2％的肉豆蔻酸异丙酯以及0.005％的尼泊金甲酯混合得到油相，加热至75℃，待油相完全融化后保温备用；

(2)将2％的裙带菜多糖提取物、2％的丙二醇、1％的三乙醇胺以及余量的蒸馏水混合得到水相，加热至75℃，待水相完全融化后保温备用；

(3)在高速搅拌下将步骤(2)得到的水相加入到步骤(1)得到的油相中，转速为3000r/min，搅拌冷却至室温，即制得该保湿乳。

本实施例中各成分的用量比为质量百分比，总用量之和为100％。

实施例3

一种保湿乳的制备方法，包括如下步骤：

(1)将3％的蜂蜡、1.5％的十六醇、1.5％的羊毛脂、3％的硬脂酸、3％的液体石蜡、4％的硅油、1.5％的橄榄油、3％的单甘酯、4％的肉豆蔻酸异丙酯以及0.015％的尼泊金甲酯混合得到油相，加热至75℃，待油相完全融化后保温备用；

(2)将1％的裙带菜多糖提取物、4％的丙二醇、2％的三乙醇胺以及余量的蒸馏水混合得到水相，加热至75℃，待水相完全融化后保温备用；

(3)在高速搅拌下将步骤(2)得到的水相加入到步骤(1)得到的油相中，转速为3000r/min，搅拌冷却至室温，即制得该保湿乳。

本实施例中各成分的用量比为质量百分比，总用量之和为100％。

四、裙带菜多糖提取物的性能评价

1、裙带菜多糖提取物的自由基清除能力与酪氨酸酶抑制作用

1.1DPPH自由基清除能力

具体操作如下：在96孔酶标板中，加20μL供试样液(浓度为1mg/mL，5mg/mL，10mg/mL)和150μmoL/L DPPH溶液(用无水乙醇配制)180μL作为试样孔，对照孔则加入180μL无水乙醇和20μL样液，空白孔则加入180μL DPPH溶液和20μL供试样液的溶媒，置于酶标仪中振动30s，室温避光静置30min后，517nm波长下读取吸光度。根据公式计算DPPH清除率:DPPH清除率C/％＝[1－(As－Ab)/Ac]×100％。式中：Ac为空白的吸光度；Ab为样液本底对照的吸光度；As为样液的吸光度。

结果如表1，与甘油相比，裙带菜多糖提取物具备一定的DPPH自由基清除能力，清除率随着样液浓度增加而提高，10mg/mL浓度时清除率约为25.38％。

表1裙带菜多糖提取物的DPPH自由基清除率

1.2羟自由基清除能力

具体操作如下：10mL试管中依次加入6mmoL/L的FeSO4溶液1mL、6mmoL/L的H2O2溶液1mL、样液1mL，摇匀，静置10min，再加入6mmoL/L的水杨酸溶液1mL，摇匀，静置30min后，离心取上清液于510nm处测定吸光度。按下式计算羟自由基清除率：清除率C/％＝[1－(A1－A2)/A0]×100％；式中：A0为空白对照的吸光度；A2为无H2O2时加入待测液的吸光度；A1为加入待测液的吸光度。

DPPH自由基是一种人工合成的自由基，与人体关系密切的则主要是羟自由基、超氧阴离子自由基、脂自由基等氧自由基。考虑样品对不同的自由基可能有不同程度的作用，并且羟自由基是人体内反应最强、毒性最大的氧自由基，会造成皮肤色斑、皱纹及衰老。因此，实验进一步测定裙带菜多糖提取物对羟自由基的清除作用，结果(见表2)发现裙带菜多糖提取物浓度与羟自由基清除能力呈现明显的量效正相关，1.0mg/mL浓度时的清除率能达到84.62％，具有较强的清除作用。

表2裙带菜多糖提取物的羟自由基清除作用

1.3裙带菜多糖提取物的酪氨酸酶抑制作用

具体操作如下：采用酶标法，在96孔酶标板中每孔依次加入210μL 0.05mol/L pH 6.8的PBS磷酸盐缓冲液，40μL 5mmol/L多巴L-dopa，10μL的样液以及40μL 100U/mL的酪氨酸酶tyrosinase，混匀，37℃温育10min后测475nm的吸光度值，即为样液OD值(ODs)，以10μL PBS代替样液测得ODA，同时测不加样液与tyrosinase的空白本底值ODB，不加tyrosinase的样液本底值ODc，按下式计算酶活抑制率I％＝[1－(ODS－ODC)/(ODA－ODB)]×100％。以PBS磷酸盐缓冲液为参比；同法测甘油的酪氨酸酶抑制活性。

皮肤黑色素合成过程中的关键酶是酪氨酸酶，该酶可催化L-酪氨酸生成多巴，多巴逐步氧化生成多巴醌，进而形成色素颗粒，酪氨酸酶过量表达能造成皮肤的色素沉着，加快皮肤与人体的衰老。因此，现代美白化妆品和皮肤用药的主要组成多为酪氨酸酶抑制剂。表3的实验结果表明裙带菜多糖提取物具备一定的酪氨酸酶抑制效能，尽管抑制率较低，但相比于甘油所不具有酪氨酸酶抑制活性，预示其在美白上会有一定的作用。

表3裙带菜多糖提取物的酪氨酸酶抑制作用

2、裙带菜多糖提取物的保湿性能

2.1测试方法

参照杜小豪等[杜小豪,徐卫,杜雪洁.护肤产品的保湿功能评价[J].日用化学工业,2000,33(3):47-52.]、秦允荣等[秦允荣,王昌涛,何聪芬,等.单一保湿剂体外保湿功能的评价[J].日用化学工业,2006,36(3):199-201.]的方法，略加修改。

在口径为300mm的干燥器放入200g经干燥的变色硅胶，保持环境温度为20℃。分别称取质量为0.2g的蒸馏水、甘油、干燥至恒质量的裙带菜多糖提取物于称量瓶中，记为蒸馏水组、甘油组与多糖提取物组，各组分别加入3倍量的蒸馏水，充分混匀后置于硅胶干燥器，测定不同时间段各组的水分减少量。则保湿率计算公式：保湿率/％＝M2/M1×100％，式中：M2为放置后(t时)水分质量(g)；M1为放置前(0时)水分质量(g)。

2.2保湿活性

在硅胶干燥环境中，裙带菜多糖提取物的保湿活性结果如图1所示。图1显示，随着时间的延长，各样品的保湿率持续减小。18h时，蒸馏水组的水已经完全蒸发，但裙带菜多糖提取物组和甘油组仍具有保湿性，保湿率分别为29.1％和19.12％；在22h内，历经相同的时间，保湿率大小依序为裙带菜多糖提取物组＞甘油组＞蒸馏水组，组间差异均达极显著水平(P＜0.01)；26h～39h，裙带菜多糖提取物组和甘油组的保湿率继续降低，但两者间的差异不显著(P＞0.05)；至39h后，裙带菜多糖提取物组和甘油组的水分含量均已极少。可见，在22h内裙带菜多糖提取物在硅胶干燥环境的保湿效果显著强于甘油的保湿效果。

五、保湿乳的保湿性能评价

1、参照实施例1的制备方法，分别制备出7种乳剂，分别为仅含化妆品基质的乳剂(用水代替裙带菜多糖提取物)作为空白对照，记为CK；甘油乳剂(用甘油代替裙带菜多糖提取物)作为阳性对照，记为GC；含1％、2％、3％裙带菜多糖提取物的乳剂，分别记为SC1、SC2、SC3；多糖提取物甘油复配的乳剂，其中裙带菜多糖提取物与甘油的配比分别为1:2与2:1，分别记为SGC1与SGC2。

2、测试方法：

各称取0.2g乳剂产品置于离心管盖，分别放置在硅胶干燥器和相对湿度为41％的密闭器内，按照杜小豪等[杜小豪,徐卫,杜雪洁.护肤产品的保湿功能评价[J].日用化学工业,2000,33(3):47-52.]、秦允荣等[秦允荣,王昌涛,何聪芬,等.单一保湿剂体外保湿功能的评价[J].日用化学工业,2006,36(3):199-201.]的方法进行保湿性能评价，结果以失水率计，失水率/％＝(1－Mt/M0)×100％，式中：Mt为放置t时的乳剂质量(g)；M0为0时的乳剂质量(g)。以中国产某商品化护手霜作为阳性对照(记为PC)，平行实验3次。

3、数据统计分析

实验数据采用Microsoft Excel 2007与SPSS Statistics 24.0等软件进行数据处理与统计分析；实验数据以平均值±标准差(X±SD)表示；采用t-检验与LSD多重比较分析组间差异。

4、乳剂在干燥环境中的保湿性能

实验以变色硅胶创设干燥环境，观察不同乳剂在硅胶干燥环境中的保湿性能，结果如图2。

在硅胶干燥环境下，不同乳剂的失水率均随着时间的延长而逐渐增加，但在0h～72h范围内失水率均小于15％，具有良好的保湿效果。在18h时，几种加有裙带菜多糖提取物的乳剂中，以2％多糖提取物乳剂(SC2)失水率最低，为8.39％，与其它多糖提取物乳剂、多糖提取物甘油(1：2)复配乳剂(SGC1)差异显著(P＜0.05)，但与多糖提取物甘油(2：1)复配乳剂(SGC2)(失水率8.62％)、甘油乳剂(GC)(失水率7.49％)无显著差异(P＞0.05)，与某商品化护手霜(PC)的失水率(7.11％)有显著性差异(P＜0.05)。在24h时，2％多糖提取物乳剂(SC2)与多糖提取物甘油(2：1)复配乳剂(SGC2)失水率分别为9.25％和9.39％，与某商品化护手霜(PC)的失水率(8.93％)均无显著差异(P＞0.05)；48h后，两者的失水率均小于某商品化护手霜(PC)的失水率，差异达到显著水平(P＜0.05)，显示其保湿效果好于某商品化护手霜(PC)。

5、乳剂在相对湿度41％的环境的保湿性能

在相对湿度为41％的环境条件下，不同乳剂的失水率均随着时间的延长而逐渐增加(见图3)，但在48h以后失水程度几乎都达到稳定，失水率均小于15％，显示良好的保湿效果。在24h时，几种加有裙带菜多糖提取物的乳剂中，2％多糖提取物乳剂(SC2)与多糖提取物甘油(2：1)复配乳剂(SGC2)失水率较低，分别为9.71％和9.06％，且两者间没显著差异(P＞0.05)。在48h，2％多糖提取物乳剂(SC2)与多糖提取物甘油(2：1)复配乳剂(SGC2)失水率分别为10.99％和10.16％，均极显著小于某商品化护手霜(PC)的失水率11.35％(P＜0.01)，说明2％多糖提取物乳剂(SC2)与多糖提取物甘油(2：1)复配乳剂(SGC2)的保湿效果强于某商品化护手霜(PC)。72h后，2％多糖提取物乳剂(SC2)的失水率与多糖提取物甘油(2：1)复配乳剂(SGC2)的失水率无显著差异(P＞0.05)。

六、结论

本发明一种保湿乳，添加了裙带菜多糖提取物这种具有美白、抗氧化及保湿功效的护肤成分，赋予该保湿乳多重护肤功效，证明了裙带菜多糖提取物作为化妆品功能原料具有可行性。

上述实施例和图式并非限定本发明的产品形态和式样，任何所属技术领域的普通技术人员对其所做的适当变化或修饰，皆应视为不脱离本发明的专利范畴。