本发明涉及制药领域，具体而言，涉及一种左乙拉西坦的注射液及其制备方法。
背景技术：
左乙拉西坦是一种吡咯烷酮衍生物，其化学结构与现有的抗癫痫药物无相关性。左乙拉西坦抗癫痫作用的确切机制尚不清楚。在多种癫痫动物模型中评估了左乙拉西坦的抗癫痫作用，发现：左乙拉西坦对电流或多种致惊剂最大刺激诱导的单纯癫痫发作无抑制作用，并在亚最大刺激和阈值试验中仅显示微弱活性；但其对毛果芸香碱和红藻氨酸诱导的局灶性发作继发的全身性发作具有保护作用。毛果芸香碱和红藻氨酸这两种化学致惊厥剂能模仿一些人伴有继发性全身发作的复杂部分性发作的特性。同时，左乙拉西坦对复杂部分性发作的大鼠点燃模型的点燃过程和点燃状态均具有抑制作用，这些动物模型对人体特定类型癫痫的预测价值尚不明确。此外，体外、体内试验显示，左乙拉西坦能够抑制海马癫痫样突发放电，而对正常神经元兴奋性无影响，提示左乙拉西坦可能选择性地抑制癫痫样突发放电的超同步性和癫痫发作的传播。
目前，左乙拉西组合物注射液为抗癫痫药，用于成人(16岁及以上)当口服左乙拉西坦治疗暂时不可行时并患有以下类型癫痫的患者：
(1)部分性发作：左乙拉西坦氯化钠注射液用于成人部分发作癫痫患者的辅助治疗。
(2)青年型肌阵挛性癫痫患者的肌阵挛性癫痫：左乙拉西坦氯化钠注射液用于成人青年型肌阵挛性癫痫患者的肌阵挛性癫痫发作的辅助治疗。
(3)原发性全身性强直阵挛发作(primarygeneralizedtonic-clonicseizures)：左乙拉西坦氯化钠注射液用于成人特发性全身性癫痫(diopathicgeneralizedepilepsy)患者的原发性全身性强直阵挛发作的辅助治疗。
然而，由于低浓度下左乙拉西坦注射液的稳定性差，而高浓度的左乙拉西坦注射液对血管的刺激性较强，容易出现多种副作用，故在临床使用过程中需要稀释。目前市场上的左乙拉西坦组合物注射液均为大规格制剂(即其中含有高浓度的左乙拉西坦)，例如国外上市的左乙拉西坦注射液(kepprainjection)，其中含有100mg/ml左乙拉西坦，每瓶5ml的注射液中含有500mg的左乙拉西坦。这类大规格的左乙拉西坦组合物注射液制剂在临床使用前，需要用稀释剂对其稀释后再滴注，即需要将100mg/ml的药液稀释成5-15mg/ml的稀释溶液，并要求稀释溶液在室温下储存不应超过4小时，而且要在15min中静脉注射完毕，方可保证用药安全性。由此可见，这种高浓度的左乙拉西坦注射液在稀释过程中，极易引出现交叉污染、并引起杂质左乙拉西坦酸的生成，影响其临床使用的安全性。
技术实现要素：
本发明的第一目的在于提供一种左乙拉西坦的注射液，这种注射液中左乙拉西坦的含量低且稳定性高，其可在临床上直接滴注使用，提高临床用药的安全性。
本发明的第二目的在于提供一种上述左乙拉西坦的注射液的制备方法，该方法制备工艺简单，且能避免引入其它杂质，增加药品的稳定性。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
一种左乙拉西坦的注射液，注射液中左乙拉西坦的浓度为2～8mg/ml，ph值为5.0～6.0。
一种上述左乙拉西坦的注射液的制备方法，其包括：
用注射用水溶解配方量的药学上可接受的辅料，得到辅料溶液，再用辅料溶液溶解配方量的左乙拉西坦，得到注射液母液，注射液母液中左乙拉西坦的浓度为2～8mg/ml，注射液母液的ph值为5.0～6.0；以及
依次用孔径为0.4～0.5μm和0.20～0.25μm的滤膜过滤注射液母液。
与现有技术相比，本发明的有益效果例如包括：
低浓度的左乙拉西坦注射液，在氧等物质影响下，会产生左乙拉西坦酸且总杂增加，从而导致左乙拉西坦注射液的稳定性差；而高浓度的左乙拉西坦注射液在使用过程中对患者血管的刺激性强，在临床使用过程中需要加以稀释来避免。目前市场上的左乙拉西坦注射液均为高浓度的左乙拉西坦溶液，在其稀释过程中，极易引出现交叉污染、并引起杂质左乙拉西坦酸的生成，影响其临床使用的安全性。
而本发明提供的这种左乙拉西坦的注射液，其中左乙拉西坦的含量低，且稳定性强，能够满足临床的正常使用，即无需稀释可直接滴注使用。由此可减少临床使用配伍过程中可能出现的交叉污染，并能有效避免由于引入氧气等氧化性物质而导致的杂质左乙拉西坦酸的生成，从而提高临床用药的安全性。
同时，本发明提供的这种左乙拉西坦的注射液的制备方法中，直接采用微孔滤膜对注射液母液进行过滤，而非使用活性炭(供注射用)对注射液母液进行粗滤，有利于避免左乙拉西坦被活性炭吸附而导致其含量降低，并能避免引入其他杂质，增强注射液的稳定性。此外，采用这种方法制备的左乙拉西坦的注射液，经过加速和长期稳定性试验，其细菌内毒素检测与采用活性炭过滤的制剂，检测结果相同，均符合规定。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本实施方式提供左乙拉西坦的注射液，该注射液中左乙拉西坦的浓度为2～8mg/ml，或者为3～7mg/ml，或者为4～6mg/ml，或者为5mg/ml。这种小规格的左乙拉西坦的注射液，在临床使用过程中可以直接滴注，避免稀释时的交叉污染和杂质的引入，用药安全性高；同时还能提高患者的顺应性。
该左乙拉西坦的注射液的ph值为5.0～6.0，发明人研究发现，当注射液的ph值为5.0～6.0时，注射液在低浓度下依然具有较佳的稳定性，可长期保存。较为优选的，该注射液的ph值为5.3～5.7，或者为5.4～5.6。
进一步的，注射液的配方按重量份数计包括：
左乙拉西坦0.8～1.2份和药学上可接受的辅料1.6～11份。
其中，药学上可接受的辅料包括金属的无机盐和有机盐中的至少一种，无机盐包括氯化钠、氯化钾和氯化钙中的任一种，有机盐包括醋酸钠和/或乳酸钠。
进一步的，在较佳的实施例中，注射液的配方为：
按重量份数计，左乙拉西坦0.8～1.2份、氯化钠0.8～4.0份、醋酸钠0.02～1.2份。
或者为，按重量份数计的，左乙拉西坦0.8～1.2份、氯化钠0.8～1.2份、醋酸钠0.8～1.2份。
或者为，按重量份数计的，左乙拉西坦0.8～1.2份、氯化钠3.5～4份、醋酸钠0.01～0.03份。
或者为，按重量份数计的，左乙拉西坦0.8～1.2份、氯化钠1.6～1.7份、醋酸钠0.3～0.4份。
或者为，按重量份数计的，左乙拉西坦0.8～1.2份、氯化钠1.6～1.7份、醋酸钠0.8～1.2份。
或者为，按重量份数计的，左乙拉西坦0.8～1.2份、氯化钠1.6～1.7份、醋酸钠0.01～0.03份。
或者为，按重量份数计的，左乙拉西坦0.8～1.2份、氯化钠1.0～1.4份、乳酸钠0.6～0.7份、氯化钾0.05～0.07份、或者0.03～0.05份。
进一步的，在另一实施例中，注射液的配方为：
按重量份数计的，左乙拉西坦0.8～1.2份、葡萄糖9～11份。
这种左乙拉西坦的注射液的制备方法包括：
步骤s1：用注射用水溶解配方量的药学上可接受的辅料，得到辅料溶液，再用辅料溶液溶解配方量的左乙拉西坦，得到注射液母液，注射液母液中左乙拉西坦的浓度为2～8mg/ml，注射液母液的ph值为5.0～6.0；
进一步的，辅料包括氯化钠、氯化钾、氯化钙、醋酸钠、乳酸钠、冰醋酸和葡萄糖及其组合中的任意一种。
更进一步的，辅料包括醋酸钠、冰醋酸和氯化钠。该步骤包括：先用80％配方量的注射用水溶解配方量的醋酸钠和冰醋酸，再在所得溶液中分散配方量的氯化钠，得到辅料溶液；随后，用用辅料溶液溶解配方量的左乙拉西坦；最后再用剩余20％配方量的注射用水补足至配方全量。
步骤s2：依次用孔径为0.4～0.5μm和0.20～0.25μm的过滤注射液母液。
较为优选的，采用孔径为0.45μm和0.22μm的滤膜进行注射母液的粗滤和精滤，更进一步的，滤膜的材质为聚醚砜。采用滤膜进行过滤，有助于避免引入其他杂质，增强所得注射剂的稳定性。
进一步的，还包括：将过滤后得到的过滤液密封保存于氮气环境中并进行灭菌处理。保存于氮气环境中，有助于避免在长期储存过程中，空气中的氧气将左乙拉西坦氧化成左乙拉西坦酸，导致注射剂的杂质含量变大。
优选的，灭菌处理包括将过滤液于115～130℃下灭菌3～15min；或者为将过滤液于120～125℃下灭菌8～15min；或者为将过滤液于121～124℃下灭菌10～12min。这种灭菌方法，灭菌时间短，有助于避免左乙拉西坦在高温下分解或发生化学反应产生杂质，从而提高注射液的用药安全性。
该制备方法，通过控制药液的ph值，且在灌装全过程中充氮气保护，不用活性炭过滤等方式，减少氧气和金属离子等对其的影响，以便控制该注射液在有效期内的质量。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述：
实施例1
本实施例提供一种左乙拉西坦组合物注射液，其配方组成如表1所示：
表1.实施例1中注射液的配方组成
其制备方法包括：
a.冰醋酸溶液的配制：取1ml冰醋酸用注射用水稀释至100ml，备用；
b.取注射用水1120ml，依次加入处方量的醋酸钠、氯化钠、左乙拉西坦搅拌溶解；
c.用冰醋酸溶液分别调节ph值至5.3；
d.用剩余的注射用水定容至总量，搅拌均匀；
e.用0.45μm和0.22μm滤膜依次滤过，定量灌装于100ml内包装中，充氮气并密封；
f.将密封好的滤液于121℃下灭菌10min，即得。
实施例2
本实施例提供一种左乙拉西坦组合物注射液，其配方组成如表2所示：
表2.实施例2中注射液的配方组成
其制备方法包括：
a.冰醋酸溶液的配制：取1ml冰醋酸用注射用水稀释至100ml，备用；
b.取注射用水1120ml，依次加入处方量的醋酸钠、氯化钠、左乙拉西坦搅拌溶解；
c.用冰醋酸溶液分别调节ph值至5.0；
d.用剩余的注射用水定容至总量，搅拌均匀；
e.用0.4μm和0.25μm滤膜依次滤过，定量灌装于100ml内包装中，充氮气并密封；
f.将密封好的滤液于115℃下灭菌15min，即得。
实施例3
本实施例提供一种左乙拉西坦组合物注射液，其配方组成如表3所示：
表3.实施例3中注射液的配方组成
其制备方法包括：
a.冰醋酸溶液的配制：取1ml冰醋酸用注射用水稀释至100ml，备用；
b.取注射用水1120ml，依次加入处方量的醋酸钠、氯化钠、左乙拉西坦搅拌溶解；
c.用冰醋酸溶液分别调节ph值至6.0；
d.用剩余的注射用水定容至总量，搅拌均匀；
e.用0.50μm和0.20μm滤膜依次滤过，定量灌装于100ml内包装中，充氮气并密封；
f.将密封好的滤液于130℃下灭菌3min，即得。
实施例4
本实施例提供一种左乙拉西坦组合物注射液，其配方组成如表4所示：
表4.实施例4中注射液的配方组成
其制备方法包括：
a.冰醋酸溶液的配制：取1ml冰醋酸用注射用水稀释至100ml，备用；
b.取注射用水1120ml，依次加入处方量的醋酸钠、氯化钠、左乙拉西坦搅拌溶解；
c.用冰醋酸溶液分别调节ph值至5.2；
d.用剩余的注射用水定容至总量，搅拌均匀；
e.用0.45μm和0.22μm滤膜依次滤过，定量灌装于100ml内包装中，充氮气并密封；
f.将密封好的滤液于125℃下灭菌8min，即得。
实施例5
本实施例提供一种左乙拉西坦组合物注射液，其配方组成如表5所示：
表5.实施例5中注射液的配方组成
其制备方法包括：
a.冰醋酸溶液的配制：取1ml冰醋酸用注射用水稀释至100ml，备用；
b.取注射用水1120ml，依次加入处方量的醋酸钠、氯化钠、左乙拉西坦搅拌溶解；
c.用冰醋酸溶液分别调节ph值至5.7；
d.用剩余的注射用水定容至总量，搅拌均匀；
e.用0.45μm和0.22μm滤膜依次滤过，定量灌装于100ml内包装中，充氮气并密封；
f.将密封好的滤液于118℃下灭菌12min，即得。
实施例6
本实施例提供一种左乙拉西坦组合物注射液，其配方组成如表6所示：
表6.实施例6中注射液的配方组成
其制备方法包括：
a.冰醋酸溶液的配制：取1ml冰醋酸用注射用水稀释至100ml，备用；
b.取注射用水1120ml，依次加入处方量的乳酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙和左乙拉西坦搅拌溶解；
c.用冰醋酸溶液分别调节ph值至5.5；
d.用剩余的注射用水定容至总量，搅拌均匀；
e.用0.45μm和0.22μm滤膜依次滤过，定量灌装于100ml内包装中，充氮气并密封；
f.将密封好的滤液于121℃下灭菌15min，即得。
实施例7
本实施例提供一种左乙拉西坦组合物注射液，其配方组成如表7所示：
表7.实施例7中注射液的配方组成
其制备方法包括：
a.冰醋酸溶液的配制：取1ml冰醋酸用注射用水稀释至100ml，备用；
b.取注射用水1120ml，依次加入处方量的葡萄糖和左乙拉西坦搅拌溶解；
c.用冰醋酸溶液分别调节ph值至5.4；
d.用剩余的注射用水定容至总量，搅拌均匀；
e.用0.45μm和0.22μm滤膜依次滤过，定量灌装于100ml内包装中，充氮气并密封；
f.将密封好的滤液于124℃下灭菌12min，即得。
对比例1
本对比例提供一种左乙拉西坦组合物注射液，其注射液配方与实施例1一致，不同之处在于其制备方法包括：
a.冰醋酸溶液的配制：取1ml冰醋酸用注射用水稀释至100ml，备用；
b.取注射用水1120ml，依次加入处方量的醋酸钠、氯化钠、左乙拉西坦搅拌溶解；
c.用冰醋酸溶液分别调节ph值至5.3；
d.用剩余的注射用水定容至总量，搅拌均匀；
e.溶液用0.5％活性炭吸附30分钟，静虑后，定量灌装于100ml内包装中，充氮气并密封；
f.将密封好的滤液于121℃下灭菌10min，即得。
第一实验例
考察左乙拉西坦组合物注射液过滤方式对其稳定性的影响
1.按照实施例1和对比例1的处方及工艺制备试制样品，分别置于40℃、60℃、光照(4500lx±500lx)条件下10天，并分别于0、5、10天取样观察其性状，测定ph值、有关物质。
(1)强光照射实验方法：取本品数支，置于光强度为4500lx±500lx的光照下进行强光照射实验，分别于0，5，10天取样，检测。
(2)高温实验方法：取本品数支，分别置于40℃、60℃恒温箱中进行实验，并分别于0，5，10天取样，检测。
检测结果见表8：
表8.不同过滤方式对注射液稳定性的影响
2.按照实施例1和对比例1的处方及工艺制备试制样品，开展稳定性试验。
在加速试验(40℃、rh25％)条件下放置6个月，分别于0、3、6月取样观察其性状，细菌内毒素、有关物质。
在长期试验(25℃、rh40％)条件下放置24个月，分别于0、6、12、18、24月取样观察其性状，细菌内毒素、有关物质。
检测结果见表9：
表9.不同过滤方式对注射液中细菌内毒素的影响
上述试验结果表明：通过活性炭的过滤，活性成分左乙拉西坦被活性炭吸附，导致含量降低，左乙拉西坦酸也存在相对增加。未进行活性炭过滤的制剂，经过加速和长期稳定性试验，其细菌内毒素检测与采用活性炭过滤的制剂，检测结果相同，均符合规定。
第二实验例
考察不同ph值对注射剂稳定性的影响：
按照实施例1的处方及工艺制备注射液，各实验组的制备方法中不同之处在于：用冰醋酸溶液调节注射液母液的ph值分别为：4.5、5.0、5.2、5.4、5.5、5.6、5.8、6.0、6.5。
将上述制备的不同ph值的注射液分别置于40℃、60℃、光照(4500lx±500lx)条件下10天，并分别于0、5、10天取样观察其性状，并测定ph值、有关物质。
(1)强光照射实验方法：取本品数支，置于光强度为4500lx±500lx的光照下进行强光照射实验，分别于0，5，10天取样，检测。
(2)高温实验方法：取本品数支，分别置于40℃、60℃恒温箱中进行实验，并分别于0，5，10天取样，检测。
检测结果见表10：
表10.不同ph值对左乙拉西坦注射液稳定性的影响
由表10可知：
(1)在光照、高温(40℃、60℃)条件下，所有ph值样品的ph值、性状均无明显变化。
(2)ph值筛选实验中，所有ph值的样品在光照条件下10天，左乙拉西坦酸变化不明显，并且总杂质无显著性变化；在高温40℃下10天，左乙拉西坦酸略有增加，总杂质无明显变化。
(3)ph值为4.5及6.5的样品在高温60℃条件下，左乙拉西坦酸变化明显，总杂质增加明显，说明ph值为4.5及6.5的左乙拉西坦氯化钠注射液对高温比较敏感。
上述实验结果表明：ph值在5.0至6.0之间的样品，性状、ph值、有关物质均无明显变化。进一步的，为严格控制产品质量，最优ph值范围应控制在5.3-5.7之间。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。