本发明属于生物医药领域，具体涉及一种结构脂OPO的应用。
背景技术：
：随着人们生活的富裕，过度肥胖者越来越多。肥胖一般是脂质代谢异常，脂类在体内过度累计造成的。肥胖容易诱发高血压、糖尿病、心脏病、冠心病、脂肪肝、肝硬化、癌症等多种疑难杂症以及较高的死亡率，目前已受到全球的普遍关注。肥胖通常是由于生理或生物化学功能改变而导致的体脂肪过剩。脂肪通常包括中性脂、磷脂和胆固醇。脂肪的增加是由于能量摄入大于能量的消耗。从发病原理上讲，肥胖有两种类型：(a)单纯性肥胖(simpleobesity)和(b)继发性肥胖(secondobesity)。单纯性肥胖可划分为先天性肥胖(idiopamicobesity)和后天性肥胖(acquiredobesity)，单纯性肥胖患者数量可占95％以上的总肥胖数目。先天性肥胖是由大量的脂肪细胞所致，且常见于儿童期肥胖。后天性肥胖是由更大尺寸的脂肪细胞所致，且常见于成年期肥胖。继发性肥胖又被称为症状性肥胖，其通常是由内分泌或新陈代谢疾病所致。目前有五种治疗肥胖的策略：节食、锻炼、行为治疗、药物治疗和康复手术。药物治疗是目前主要的临床治疗肥胖及其肥胖相关疾病(如糖尿病)的方法。药物治疗的机制包括抑制食欲、增加能量消耗、刺激脂肪移动、降低甘油三酯合成和抑制脂肪吸收。某些糖尿病人的高血糖通过饮食和/或锻炼疗法或使用上述治疗化合物仍然不能得到适当控制。对于这些病人，应使用外源胰岛素。对病人来说，使用外源胰岛素是很昂贵和痛苦的方法，还会给病人带来多种并发症。例如，由于没有吃饭或不正常锻炼，胰岛素剂量的计算错误会导致胰岛素响应(低血糖)。此外，使用药物还可能发生对药物的局部或全身过敏或免疫抗性。目前，市场上降脂药物甚多，但减肥效果较差，易反弹，且会产生诸多副作用。近年来，研究人员开始研究结构油脂来预防肥胖，这些功能性的油脂具有优越的营养，可广泛应用于医药、食品、特殊营养等领域。综上，本领域亟需一种营养丰富并有效预防肥胖的功能性的油脂。技术实现要素：本发明的目的在于提供结构脂OPO的应用。本发明提供一种结构脂OPO的用途，具体地，所述结构脂OPO用于制备预防和/或治疗肥胖的组合物、制剂或油脂，其中，所述的结构脂OPO中，Sn-2棕榈酸占总棕榈酸的70-75％，按摩尔比计算。在另一优选例中，所述的结构脂OPO中，Sn-2棕榈酸占总棕榈酸的72-73％，按摩尔比计算。在另一优选例中，所述的结构脂OPO中，Sn-2棕榈酸占总棕榈酸的72.4％，按摩尔比计算。在另一优选例中，所述的预防和/或治疗肥胖是指：(I)提高脂肪酸的吸收；和/或(II)提高钙的吸收。在另一优选例中，所述的预防和/或治疗肥胖是指：(i)调节血脂，使得脂肪细胞的脂滴减少，体积变小。在另一优选例中，所述的预防和/或治疗肥胖是指：(a)上调肾周脂肪组织中脂解作用关键因子的基因和蛋白表达；和/或(b)上调肾周脂肪组织中白色脂肪棕色化关键因子的基因和蛋白表达；和/或(c)上调肾周脂肪组织中β氧化关键因子的基因和蛋白表达。在另一优选例中，所述的组合物选自下组：药物组合物、保健品组合物、食品组合物、膳食组合物或其组合。在另一优选例中，所述的组合物、制剂或油脂通过食用的方法导入机体。在另一优选例中，所述的组合物或制剂配制为片剂、散剂、丸剂、胶囊剂或冲剂。在另一优选例中，所述组合物或制剂的剂型为溶液型。应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附图说明图1为棕榈油组SD大鼠、OPO70组SD大鼠以及OPO50组SD大鼠血液中甘油三酯的量。图2为棕榈油组SD大鼠、OPO70组SD大鼠以及OPO50组SD大鼠的肾周脂肪细胞形态。图3为棕榈油组SD大鼠、OPO70组SD大鼠以及OPO50组SD大鼠的肾周脂肪细胞数量。图4为棕榈油组SD大鼠、OPO70组SD大鼠以及OPO50组SD大鼠的肾周脂肪组织中脂解作用关键因子Adiposetriglyceridelipase(ATGL)和Hormonesensitivelipase(HSL)，白色脂肪棕色化关键因子Uncouplingproteins1(UCP1)，脂肪酸β氧化关键因子Carnitinepalmitoyltransterase1β(CPT1β)的相对mRNA表达。图5为棕榈油组SD大鼠以及OPO70组SD大鼠的肾周脂肪中蛋白Westernblot测定结果。图6为棕榈油组SD大鼠以及OPO70组SD大鼠的肾周脂肪组织中脂解作用关键因子Adiposetriglyceridelipase(ATGL)和Hormonesensitivelipase(HSL)，白色脂肪棕色化关键因子Uncouplingproteins1(UCP1)，脂肪酸β氧化关键因子Carnitinepalmitoyltransterase1β(CPT1β)的相对蛋白表达水平，其中β-actin是内参蛋白。具体实施方式本发明人经过长期而深入的研究，意外地发现Sn-2棕榈酸占总棕榈酸的72.4％的结构脂OPO，能够通过上调肾周脂肪组织中脂解、白色脂肪棕色化和脂肪酸β氧化因子的基因和蛋白表达，使得脂肪细胞的脂滴减少，体积变小，从而达到预防肥胖的作用，能够用作制备预防和/或治疗肥胖的组合物或制剂。在此基础上，发明人完成了本发明。术语除非另外定义，否则本文所用的全部技术与科学术语均具有如本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。如本文所述，在结构脂OPO中，Sn-2位棕榈酸占总棕榈酸的比例为70-75％，按摩尔比计算，优选地，所述的Sn-2位棕榈酸占总棕榈酸的比例为72-73％，按摩尔比计算，最优选地，所述的Sn-2位棕榈酸占总棕榈酸的比例为72.4％，按摩尔比计算。应用一种结构脂OPO的用途，具体地，所述结构脂OPO用于制备预防和/或治疗肥胖的组合物、制剂或油脂，其中，所述的结构脂OPO中，Sn-2棕榈酸占总棕榈酸的70-75％，按摩尔比计算。在另一优选例中，所述的Sn-2棕榈酸占总棕榈酸的72-73％，按摩尔比计算。在另一优选例中，所述的Sn-2棕榈酸占总棕榈酸的72.4％，按摩尔比计算。在另一优选例中，所述的组合物选自下组：药物组合物、保健品组合物、食品组合物、膳食组合物或其组合。在另一优选例中，所述的组合物、制剂或油脂通过食用的方法导入机体。在另一优选例中，所述的组合物或制剂配制为片剂、散剂、丸剂、胶囊剂或冲剂。在另一优选例中，所述组合物或制剂的剂型为溶液型。结构脂OPO用于制备预防和/或治疗肥胖的组合物、制剂或油脂，其中，所述的预防和/或治疗肥胖是指：(I)提高脂肪酸的吸收；和/或(II)提高钙的吸收。在另一优选例中，所述的预防和/或治疗肥胖是指：(i)调节血脂，使得脂肪细胞的脂滴减少，体积变小。在另一优选例中，所述的预防和/或治疗肥胖是指：(a)上调肾周脂肪组织中脂解作用关键因子的基因和蛋白表达；和/或(b)上调肾周脂肪组织中白色脂肪棕色化关键因子的基因和蛋白表达；和/或(c)上调肾周脂肪组织中β氧化关键因子的基因和蛋白表达。发明优点1、为预防肥胖相关症以及疾病开发药物提供新方向。2、预防肥胖的同时提供营养，本发明的结构脂OPO能够有效应用于脂肪酸消化不良和/或者钙吸收不良导致的肥胖患者。实施例1将36只雄性SpragueDawley大鼠(3周龄，体重为61.55±4.01g)随机分为3组，每组12只，每只笼子饲养3只大鼠。首先，对3组SpragueDawley大鼠进行为期1周的适应性喂养，随后分别对3组大鼠进行4周的实验饲料喂养，第一组大鼠喂棕榈油组饲料得到棕榈油组SD大鼠、第二组大鼠喂OPO50组饲料得到OPO50组SD大鼠、第三组大鼠喂OPO70组饲料得到OPO70组SD大鼠。实验饲料的组成见表1、在上述动物饲养期间，大鼠可自由摄食和饮水。每三天对大鼠的体重和食物消耗量进行记录。待实验饲料喂养SD大鼠4周后，将大鼠分别转移至代谢笼中(每只大鼠饲养在一个代谢笼中)，继续饲养3天。在此饲养期间，大鼠可自由摄食和饮水。每天收集大鼠的新鲜粪便，并将其冻存于-80℃下，合并3天收集的粪便，以待分析，分析结果如表1所示。表1采用索氏提取法收集粪便中的中性脂肪和皂化脂肪酸，并进行分析。具体操作如下，称取500mg冷冻干燥的粉末状粪便样品，通过石油醚(沸程：30-60℃)回流提取4小时，从样品中提取得到中性脂肪。然后将剩余样品用石油醚：乙酸(2:3，v/v，pH<3)回流提取4小时，得到皂化脂肪酸。将已知量的内标C19：0加入到提取的皂化脂肪酸中，使用三氟化硼-甲醇法合成脂肪酸甲酯，然后用GC-MS(7890A-5975C)进行分析。用原子吸收光谱仪测定了粪便中的钙浓度。采用实验饲料喂养SD大鼠粪便中皂化脂肪酸与钙含量的实验结果如表2所示。表2棕榈油组SD大鼠OPO50组SD大鼠OPO70组SD大鼠中性脂肪(g/3天)0.32b±0.100.25ab±0.080.20a±0.09总皂化脂肪酸(mmol/3天)17.07b±6.8813.61b±5.084.02a±2.90皂化C12:0(μmol/3天)14.46c±4.428.41b±3.261.68a±0.85皂化C14:0(mmol/3天)0.20c±0.080.10b±0.050.02a±0.02皂化C16:0(mmol/3天)13.51c±5.358.76b±2.991.48a±1.02皂化C18:0(mmol/3天)1.91±1.092.13±0.611.77±1.15皂化C18:1(mmol/3天)1.13±0.381.28±0.790.92±0.78皂化C18:2(mmol/3天)0.08b±0.030.08b±0.040.03a±0.03钙(mg/3天)76.54b±15.5866.49b±17.2247.45a±18.21注：表2中，a、b、ab表示各组间差异具有显著性(P<0.05)由表2可知：结构脂OPO可以促进SD大鼠对脂肪的吸收，减少脂肪酸皂的形成，并能改善对钙的吸收。同时，对脂肪的吸收效果与Sn-2棕榈酸相对含量呈正相关趋势，Sn-2棕榈酸相对含量越高，对脂肪的吸收效果越好。实施例2用试剂盒检测棕榈油组SD大鼠、OPO70组SD大鼠以及OPO50组SD大鼠血液中甘油三酯的量，检测结果如图1所示，其中a、b表示各组间差异具有显著性(P<0.05)。实施例3脂肪组织细胞形态学观察(苏木精—伊红染色法染色)。分别取棕榈油组SD大鼠、OPO70组SD大鼠以及OPO50组SD大鼠的肾周脂肪，制成脂肪组织切片，并在脱蜡后进行苏木精—伊红染色法染色。在相同放大倍数的显微镜下观察脂肪细胞形态，并进行脂肪细胞计数。具体步骤如下：取动物新鲜组织块(厚度不超过0.5厘米)投入预先配好的固定液中(10％福尔马林)；用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份；再将组织块置于二甲苯中替换出组织块的中酒精，将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，待石蜡完全浸入组织块后进行包埋，待冷却凝固成块即成；将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片；染色前，须用二甲苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，最后加入蒸馏水复水。将已加入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中进行染色，染色数分钟。酸水及氨水中分色，各数秒钟。流水冲洗1小时后加入蒸馏水片刻。用70％和90％酒精中脱水各10分钟。用酒精伊红染色液染色2—3分钟。染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲苯使切片透明。将已透明的切片滴上加拿大树胶，盖上盖玻片封固。待树胶略干后，贴上标笺，切片标本即完成。棕榈油组SD大鼠、OPO70组SD大鼠以及OPO50组SD大鼠的肾周脂肪形态如图2所示。棕榈油组SD大鼠、OPO70组SD大鼠以及OPO50组SD大鼠的肾周脂肪数量如图3所示，其中a、b、ab表示各组间差异具有显著性(P<0.05)。实施例4脂肪组织mRNA表达水平采用实时定量荧光PCR，考察结构脂OPO对肾周脂肪组织中不同mRNA表达的影响。分别称取棕榈油组SD大鼠、OPO70组SD大鼠以及OPO50组SD大鼠的脂肪组织各80mg于匀浆管中，加入700μLTrizoL，放入均质机中，液氮低温均质后加入200μL氯仿，充分震荡混匀后，冷冻离心机10000rpm，离心15min。取上清液后按照QiagenRNeasyMiniKit操作说明，取mRNA。取mRNA后在微量分光光度计上测定260/280吸光度值来显示纯度，统一定量为0.2μg/μL，然后统一反转录20μL体系，按照BioRadiScriptcDNA反转试剂盒说明操作。其中10μLmRNA样品，5μLmix，1μL酶和4μL去离子水。采用SYBRGREEN染料法实时荧光定量PCR。其中10μLSYBRGreenMasterMix，0.3μL正向PCR引物，0.3μL反向PCR引物反向PCR引物，5μLcDNA模版，4.4μLDEPC水。反应条件如下：50℃2分钟，95℃10分钟，95℃15秒，60℃1分钟。溶解曲线：95℃15秒，60℃1分钟，95℃15秒。扩增循环数为46个，使用2-ΔΔCt计算目的基因的相对表达量。棕榈油组SD大鼠、OPO70组SD大鼠以及OPO50组SD大鼠的肾周脂肪组织中脂解作用关键因子Hormonesensitivelipase(HSL)和Adiposetriglyceridelipase(ATGL)，白色脂肪棕色化关键因子Uncouplingproteins1(UCP1)，脂肪酸β氧化关键因子Carnitinepalmitoyltransterase1β(CPT1β)的相对mRNA表达如图4所示，其中，a、b、ab表示各组间差异具有显著性(P<0.05)。实施例5脂肪组织蛋白表达水平采用WesternBlot免疫印迹法，考察OPO结构脂肪对肾周脂肪中关键蛋白表达量的影响。将Westernblot细胞裂解液RIPA与PMSF按照9:1例混合，PMSF的最终浓度为1mM，对于150mg脂肪组织每管加入100μL裂解液，均质机充分研磨后，置于冷冻高速离心机中离心10000rpm，15min。移上清到另一1.5mL的离心管中。采用BCA法测定蛋白浓度。根据检测的蛋白浓度，统一蛋白浓度。加入SDS-PAGE蛋白上样缓冲液，90℃水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白。冷却到室温后，把蛋白样品直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内。电泳在上层胶时使用低电压80V恒压电泳，而在溴酚蓝进入下层胶时使用高电压恒压120V电泳。使用Bio-Rad的标准湿式转膜装置，转膜电压为15V，转膜时间为60分钟。转膜完毕后，立即把蛋白膜放置到预先准备好的Western洗涤液中，漂洗1-2分钟，以洗去膜上的转膜液。加入封闭液，室温封闭60分钟。按照适当比例用Western一抗稀释液稀释一抗，4℃缓慢摇动孵育过夜。回收一抗，加入Western洗涤液，共洗涤3次。按照适当比例用Western二抗稀释液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗，室温孵育一小时。回收二抗，加入Western洗涤液，共洗涤3次。用显影定影试剂盒配制显影液和定影液进行手工洗片，并拍摄结果。棕榈油组SD大鼠以及OPO70组SD大鼠的肾周脂肪中蛋白Westernblot测定结果，如图5所示。棕榈油组SD大鼠以及OPO70组SD大鼠的肾周脂肪组织中脂肪酸β氧化关键蛋白Carnitinepalmitoyltransterase-1β(CPT1β)，白色脂肪棕色化蛋白Uncouplingproteins1(UCP1)，脂解作用蛋白Hormonesensitivelipase(HSL)和Adiposetriglyceridelipase(ATGL)的相对蛋白表达如图6所示，其中，a、b表示各组间差异具有显著性(P<0.05)，其中β-actin是内参蛋白。由图1可知：OPO结构脂可以能改善SD大鼠血液中甘油三酯的量，效果与Sn-2棕榈酸相对含量呈正相关趋势，并且OPO70组SD大鼠血液中甘油三酯的量显著低于棕榈油组。其中，a、b表示各组间差异具有显著性(P<0.05)。由图2以及图3可知：与棕榈油组SD大鼠相比，OPO70组SD大鼠以及OPO50组SD大鼠肾周脂肪细胞体积较小，在相同放大倍数下观察到的脂肪细胞数更多。在OPO70组SD大鼠的脂肪细胞数较棕榈油组SD大鼠和OPO50组SD大鼠具有显著性差异。由图4可知，与棕榈油组SD大鼠相比，OPO70组SD大鼠的肾周脂肪细胞中甘油三酯脂解过程中关键基因ATGL和HSL，白色脂肪棕色化相关基因UCP1和脂肪酸β氧化关键基因CPT1b的mRNA表达量明显提高，且具有显著性差异(P<0.05)。此外，这些基因的表达量与Sn-2棕榈酸相对含量具有一定的正相关性。结合图5和图6，喂食OPO70组饲料的OPO70组SD大鼠，其肾周脂肪组织中甘油三酯脂解过程中关键蛋白ATGL和HSL，脂肪酸β氧化关键蛋白CPT-1b的表达量较棕榈油组明显提高，而白色脂肪棕色化关键蛋白UCP-1的表达量也较棕榈油组高。OPO70通过上调肾周脂肪组织中脂解、白色脂肪棕色化、和脂肪酸β氧化等因子的综合基因与蛋白表达的结果，OPO70促进了脂肪细胞中的脂解，提供能量激活白色脂肪棕色化因子表达，进而产生大量的热和能量消耗，增加脂肪酸β氧化，一系列综合作用使得脂肪细胞的脂滴减少，体积变小，从而达到预防肥胖的作用。在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。当前第1页1 2 3