本发明涉及一种利福昔明微乳液及其制备方法，属于兽用药物液态制剂
技术领域：
。
背景技术：
：利福昔明是一种新型抗菌药物，其抗菌谱广，杀菌作用强，不良反应小，局部用药不易被机体吸收，仅在用药局部发挥高效抗菌作用，对厌氧菌杀灭效果理想，是一种良好的治疗局部感染的抗菌药物。在兽医临床方面，利福昔明主要用于治疗奶牛乳房、子宫、胃肠道和皮肤等局部的感染。利福昔明不溶于水，目前其剂型主要有片剂、栓剂、胶囊剂、干混悬剂等，有限的药物剂型不仅制约了利福昔明的应用范围，也给临床用药带来了许多不便。研发新的利福昔平药物剂型是临床用药的迫切技术需求。微乳是一种新型递药系统，该系统由表面活性剂、辅助表面活性剂、油和水以适当的比例经乳化而成，是一种均匀、低粘度、透明或半透明的热力学稳定分散体系。微乳是介于乳状液和胶团溶液之间的一种过渡中间状态溶液，是一种热力学稳定的体系，制备时不需要强大的外力，可以长期贮存，而且离心时不分层。微乳具有极高的稳定性和对溶质的高分散性及很强的吸附能力，微乳作为难溶性药物的载体，具有加溶作用，使不溶或难溶性药物的溶解度显著提高，从而提高药物的生物利用度和机体的吸收速率，是医药界热点研究的药物递药系统之一。技术实现要素：为了克服利福昔明现有药物剂型较少，临床使用不方便，临床应用范围受制约等缺点，本发明提供了一种利福昔明微乳液及其制备方法，这种利福昔明微乳液既增加了利福昔明的药物剂型，又扩大了利福昔明的临床应用范围，更加方便了临床用药。本发明还提供了一种利福昔明微乳液的制备方法。本发明解决技术问题所采用的技术方案是：一种利福昔明微乳液，包括以重量计的组分如下：利福昔明1.46～1.66g、液体石蜡1.8～2.2g、油酸乙酯4.6～5.4g、吐温-808～12g、泊洛沙姆-1880.95～1.05g、丙二醇38.5～44g、蒸馏水16～24g、亚硫酸氢钠0.13～0.17g。优选的，利福昔明1.56g、液体石蜡2g、油酸乙酯5g、吐温-8010g、泊洛沙姆-1881g、丙二醇40g、蒸馏水20g、亚硫酸氢钠0.15g。本发明利福昔明微乳液的制备方法包括如下步骤：（1）取蒸馏水5g，加入亚硫酸氢钠0.13～0.17g，搅拌溶解，制成亚硫酸氢钠溶液。（2）分别取液体石蜡1.8～2.2g、油酸乙酯4.6～5.4g、吐温-808～12g、泊洛沙姆-1880.95～1.05g、丙二醇38.5～44g，依次加入容器中，以600r/min～800r/min转速混合均匀，然后加入11～19g的蒸馏水，搅拌，制成微乳液。（3）取利福昔明1.46～1.66g，加入微乳液中，以600r/min～800r/min转速搅拌，并加热80℃，使其完全溶解，制成利福昔明微乳液。（4）取亚硫酸氢钠溶液，加入利福昔明微乳液中，搅拌，制成所需浓度的利福昔明微乳液。（5）取制备的利福昔明微乳液，分装，115℃灭菌20min，即得成品。本发明的有益效果是：将利福昔明制成微乳液，增加了利福昔明的药物剂型，方便了临床用药，扩大了利福昔明药物的应用范围。生产利福昔明微乳液工艺简单，成本低，易于实现产业化。利福昔明微乳液性状稳定，不分层，方便长期贮存。利福昔明微乳液利用微乳的加溶作用及对药物的高度分散性和吸附能力，显著提高了药物的溶解度，减少了有机物的使用量，药液刺激性小，使用安全。利用微乳作为载药系统，提高了利福昔明的生物利用度和机体的吸收速率。其制备方法的有益效果是：采用微乳作为载药系统，将油相、表面活性剂、辅助表面活性剂和水乳化成微乳体系，并将利福昔明溶于微乳液中，从而形成利福昔明微乳液的制备方法，不仅提高了难溶性药物利福昔明的溶解度，增强了药液的稳定性，还能促进药物在机体内的吸收，提高了药物的生物利用度，增强了药物的疗效，而且生产成本低，生产工艺简单。具体实施方式下面结合具体实施方式对本发明作进一步的说明。实施例1制备1.8％利福昔明微乳液，其步骤如下：（1）称取蒸馏水5g，加入亚硫酸氢钠0.13g，充分搅拌溶解，制成亚硫酸氢钠溶液。（2）分别取液体石蜡1.8g、油酸乙酯4.6g、吐温-808g、泊洛沙姆-1880.95g、丙二醇38.5g，依次加入容器中，以600r/min～800r/min转速充分搅拌，使其混合均匀，然后加入蒸馏水19g，充分搅拌，制成微乳液。（3）取利福昔明1.46g，加入微乳液中，以600r/min～800r/min转速充分搅拌，并加热至80℃，使其完全溶解，制成利福昔明微乳液。（4）取制成的亚硫酸氢钠溶液，加入制成的利福昔明微乳液中，充分搅拌，制成1.8％利福昔明微乳液。（5）取制备的1.8％利福昔明微乳液，分装，115℃灭菌20min，即得成品。实施例2制备1.9％利福昔明微乳液，其步骤如下：（1）取蒸馏水5g，加入亚硫酸氢钠0.14g，充分搅拌溶解，制成亚硫酸氢钠溶液。（2）分别取液体石蜡1.9g、油酸乙酯4.9g、吐温-809g、泊洛沙姆-1880.95g、丙二醇40g，依次加入容器中，以600r/min～800r/min转速充分搅拌，使其混合均匀，然后加入蒸馏水18.1g，充分搅拌，制成微乳液。（3）取利福昔明1.51g，加入微乳液中，以600r/min～800r/min转速充分搅拌，并加热至80℃，使其完全溶解，制成利福昔明微乳液。（4）取制成的亚硫酸氢钠溶液，加入制成的利福昔明微乳液中，充分搅拌，制成1.9％利福昔明微乳液。（5）取制备的1.9％利福昔明微乳液，分装，115℃灭菌20min，即得成品。实施例3：制备2.0％利福昔明微乳液，其步骤如下：（1）取蒸馏水5g，加入亚硫酸氢钠0.15g，充分搅拌溶解，制成亚硫酸氢钠溶液。（2）分别取液体石蜡2g、油酸乙酯5g、吐温-8010g、泊洛沙姆-1881g、丙二醇41g，依次加入容器中，以600r/min～800r/min转速充分搅拌，使其混合均匀，然后加入蒸馏水15.5g，充分搅拌，制成微乳液。（3）取利福昔明1.56g，加入微乳液中，以600r/min～800r/min转速充分搅拌，并加热至80℃，使其完全溶解，制成利福昔明微乳液。（4）取制成的亚硫酸氢钠溶液，加入制成的利福昔明微乳液中，充分搅拌，制成2.0％利福昔明微乳液。（5）取制备的2.0％利福昔明微乳液，分装，115℃灭菌20min，即得成品。实施例4：制备2.1％利福昔明微乳液，其步骤如下：（1）取蒸馏水5g，加入亚硫酸氢钠0.16g，充分搅拌溶解，制成亚硫酸氢钠溶液。（2）分别取液体石蜡2.1g、油酸乙酯5.2g、吐温-8011g、泊洛沙姆-1881g、丙二醇42g，依次加入容器中，以600r/min～800r/min转速充分搅拌，使其混合均匀，然后加入蒸馏水13.5g，充分搅拌，制成微乳液。（3）取利福昔明1.61g，加入微乳液中，以600r/min～800r/min转速充分搅拌，并加热至80℃，使其完全溶解，制成利福昔明微乳液。（4）取制成的亚硫酸氢钠溶液，加入制成的利福昔明微乳液中，充分搅拌，制成2.1％利福昔明微乳液。（5）取制备的2.1％利福昔明微乳液，分装，115℃灭菌20min，即得成品。实施例5：制备2.2％利福昔明微乳液，其步骤如下：（1）取蒸馏水5g，加入亚硫酸氢钠0.17g，充分搅拌溶解，制成亚硫酸氢钠溶液。（2）分别取液体石蜡2.2g、油酸乙酯5.4g、吐温-8011.5g、泊洛沙姆-1881.05g、丙二醇43.5g，依次加入容器中，以600r/min～800r/min转速充分搅拌，使其混合均匀，然后加入蒸馏水11g，充分搅拌，制成微乳液。（3）取利福昔明1.66g，加入微乳液中，以600r/min～800r/min转速充分搅拌，并加热至80℃，使其完全溶解，制成利福昔明微乳液。（4）取制成的亚硫酸氢钠溶液，加入制成的利福昔明微乳液中，充分搅拌，制成2.2％利福昔明微乳液。（5）取制备的2.2％利福昔明微乳液，分装，115℃灭菌20min，即得成品。本发明所制备的利福昔明微乳液的质量控制1、物理性状本发明的利福昔明微乳液为桔红色、半透明、稍粘稠液体。2、药物含量测定采用高效液相色谱法测定微乳液中利福昔明的含量（1）工作曲线的绘制色谱条件色谱柱：C18(150mm×4.6mm,5μm)；注温：25℃；流速：1mL/min；检测波长236nm；进样量20μL；流动相：甲醇-乙腈-0.075mol/L磷酸二氢钾溶液-1mol/L柠檬酸溶液（32:28:25:4）。对照品溶液制备精密称取经105℃干燥至恒重的利福昔明对照品(p=95.7％）10mg，置于100mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，制成100μg/mL的对照品储备液。精密量取对照品储备液2mL，置于10mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到浓度为20μg/mL的对照品溶液。供试品溶液制备精密量取样品适量（约相当于利福昔明20mg），置于100mL容量瓶中，加流动相充分溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取此液1mL置于10mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。阴性对照溶液制备按配方比例量取与供试品相当的空白微乳液适量，按照供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。精密量取对照品储备液0.5、2.0、4.0、8.0、10mL分别置于10mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，配制成浓度分别为5、20、40、80、100μg/mL的系列对照品溶液。按色谱条件测定，以峰面积（y）对利福昔明的浓度（x，μg/mL）进行线性回归方程，方程为y=65047x+48715，r2=0.9996。利福昔明在5～100μg/mL范围内线性关系良好。（2）回收率测定取制备的100μg/mL对照品储备液，分别精密取适量储备液并添加配方剂量的空白微乳液基质，超声溶解后，用流动相稀释成低（L=10μg/mL）、中（M=50μg/mL）、高（H=80μg/mL）3种理论浓度的对照品，每个浓度配制3份，按色谱条件测定其含量，计算回收率，结果见表1。高、中、低浓度对照品的回收率范围为98.4％～100.2％，RSD为0.58％～1.32％。方法回收率符合要求。表1利福昔明微乳液回收率（3）药物含量测定精密量取3批次的利福昔明微乳样品，每批次3份，制成供试品溶液，进行含量测定。结果表明，三批样品中利福昔明平均含量分别为标示量的96.22％、99.39％、101.22％，符合规定。3、稳定性试验取不同批次的利福昔明微乳液，分别置于室温下避光保存1年、2年，观察利福昔明微乳液性状变化，测定利福昔明含量。结果发现利福昔明微乳液外观性状未发生明显变化，利福昔明含量符合要求，说明利福昔明微乳液性状稳定性良好，测定结果见表2表2利福昔明微乳液稳定性注：同列肩标不同字母表示差异显著（P<0.05），含有相同字母表示差异不显著（P>0.05）4、药物代谢动力学试验（1）试验动物选取11～12月龄健康荷斯坦犊牛5头，按照常规方式饲养，饲料中未添加任何药物。（2）用药方法肌内一次注射2％利福昔明微乳液，剂量为0.02mL/kg体重。（3）血样采集在用药后1h、2h、4h、8h、12h、18h、24h分别采取血样2mL，注入装有1％肝素的离心管中，4000r/min离心15min，制备血浆，置于-20℃冰箱中保存待测。（4）血药浓度测定取血浆1mL，加入20％三氯乙酸0.25mL，沉淀蛋白，置于-4℃冰箱中冷藏15min，4000r/min离心15min，吸取上清液适量，过已经活化的C18柱，待流尽后，用1mL～2mL洗涤液洗涤，至流出液为中性，吹干。用洗脱液洗脱以上样品，收集洗脱液，取20μl用高压液相色谱测定，计算利福昔明血药浓度。（5）血药浓度测定结果在肌内注射2％利福昔明微乳液后的不同时间，牛血样血药浓度测定结果见表3。以血浆利福昔明浓度0.5μg/ml为最小有效浓度，2％利福昔明微乳液能够维持有效血药浓度的时间近24h，有效血药浓度维持时间较长，可有效用于治疗全身感染。表310％利福昔明微乳液在羊体内的血药浓度（μg/ml）时间（h）1248121824平均浓度3.283.363.271.341.100.760.46±SD0.220.280.210.290.250.250.21由上可以看出，将利福昔明制成微乳液方便了临床用药，由于利福昔明微乳液有效血药浓度维持时间较长，因此，本发明的利福昔明微乳液是目前临床治疗畜禽疾病较为理想的一种新型制剂。以上为本发明的最佳实施方案，本领域的普通技术人员依据本发明公开的内容显而易见地想到的一些替代方案，均应落入本发明的保护范围。当前第1页1 2 3