本发明涉及保健品领域，特别涉及一种主要由天然药用植物制成的、具有增强免疫力、延缓衰老、辅助防癌，用于中老年人日常保健的保健组合物及其制备方法和应用。
背景技术：
人体免疫力是人体识别和消灭外来侵入的任何异物(病菌、病毒等)、处理衰老损伤、变异的自身细胞，以及识别和处理突变细胞和病毒感染细胞的能力。
人体是由60万亿～100万亿个细胞组成，每天有500～2000次细胞突变或变异发生，每次细胞发生突变或变异时，人体自控系统会及时发现，并命令人体免疫系统迅速介入，指挥免疫系统迅速杀灭突变或变异细胞，以此保证人体的健康状态。但是，人进入中老年后，免疫功能会降低。
现代医学科学发现，人体的免疫能力是一个与衰老有密切关系的因素，免疫功能减退是衰老的最重要原因之一。机体免疫系统的一些特殊细胞能将入侵体内的细菌、病毒和体内已衰老死亡的细胞、已突变的细胞以及引起变态反应的物质，统统地加以吞噬和消灭，使体内环境的稳定，保持机体健康。但机体免疫功能在30岁左右就开始减退，这种变化是悄然、缓慢、持续地进行。
细胞衰老也是一种细胞凋亡机制，这种机制主要由免疫系统来完成。机体让衰老细胞凋亡的过程就是避免细胞癌变的过程，这在很多动物和人体研究中正得到证实。清除体内各种垃圾是免疫系统最重要功能。人体的免疫系统随着时间的推移(逐渐衰老)变得不那么有效，因而消除衰老细胞的效果会大打折扣。99％的疾病和免疫系统失调有关(基因、遗传类疾病除外)。
因此，提高人体的免疫力，特别是提高中老年人身体的免疫力显得十分重要。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种保健组合物、制备方法及其在制备具有增强免疫力、延缓衰老、辅助防癌功能，可用于中老年人日常保健的保健品中的应用。
为实现上述目的，本发明的具体方案如下：
本发明的目的之一在于提供一种保健组合物，所述保健组合物由下列重量份数的原料制成：枸杞子5～10份；黄芪3～8份；灵芝1～6份；绞股蓝1～6份。
优选的，所述保健组合物由下列重量份数的原料制成：枸杞子7份；黄芪6份；灵芝5份；绞股蓝5份。
本发明的目的之二在于提供一种保健组合物的制备方法，所述保健组合物的制备方法包括下列步骤：
a、按下列重量份数称取原料：枸杞子5～10份；黄芪3～8份；灵芝1～6份；绞股蓝1～6份；
b、取枸杞子用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，用50～98wt％的乙醇进行醇沉分离(含醇量为30～80wt％)；取沉淀物干燥，粉碎成细粉；
c、取黄芪用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，干燥，粉碎成细粉；
d、取灵芝用30～98wt％的乙醇回流提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩，得乙醇提取物；药渣用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，得水提取物；混合二种提取物，干燥，粉碎成细粉；
e、取绞股蓝用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，用50～98wt％的乙醇进行醇沉分离(含醇量为30～80wt％)；取滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉；
f、将上述四种细粉混合均匀制成制剂。
优选的，步骤a中枸杞子7份；黄芪6份；灵芝5份；绞股蓝5份；
优选的，步骤b中枸杞子的提取次数为2次；提取时间为第一次1.5小时，第二次1小时；醇沉含醇量为70wt％；
优选的，步骤c中黄芪的提取次数为2次，提取时间为第一次1.5小时，第二次1小时；
优选的，步骤d中的绞股蓝的提取次数为2次，提取时间为第一次1.5小时，第二次1小时。
本发明将枸杞子用水提取后，再用醇沉的方法提取有效成份，有效地去除无功效作用的杂质。
本发明将灵芝先用乙醇进行回流提取，然后再用水进行提取，这样可以将灵芝中的脂溶性及水溶性活性成分尽可能提取出来，确保产品的功效。在本发明的条件下，灵芝的活性成分提取率最高，并且回流过程中所用的能量消耗也最少。
本发明的目的之三在于提供一种保健组合物应用，保健组合物的应用是指在制备增强免疫力、延缓衰老、辅助防癌的保健品中的应用。
进一步的，所述保健组合物用于中老年人的日常保健。
进一步的，所述保健组合物为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、锭剂、合剂、口服溶液剂、散剂、煎膏剂、糖浆剂。
本发明的保健组合物可以制成普通制剂、也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
本发明所采用的各活性成分的药用性能如下所示：
枸杞子，性味甘，平，归肝、肾经。功能滋补肝肾，益精明目。主治，用于虚劳精亏，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，阳痿遗精，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明。
《本草经疏》中记载，枸杞子“专于补肾”；
《本草通玄》中记载，枸杞子“补肾益精”；
《中药大辞典》中记载，枸杞子“滋肾，润肺，补肝”。
汪积慧、李鸿梅，枸杞子多糖免疫调节作用的研究[齐齐哈尔医学院学报,2002,23(11):1204.]，枸杞多糖能明显提高吞噬细胞的吞噬功能，提高t淋巴细胞的增殖能力，增加血清igg含量，具有提高机体非特异免疫功能和特异免疫功能。
刘彦平、李积东，枸杞子多糖对小鼠nk细胞和白细胞活性的免疫调节作用[青海医学院学报，22(1)：2001-2002]，研究结果表明，枸杞多糖能增强nk细胞杀伤活性及增加白细胞数量，对环磷酰胺所诱发的nk细胞杀伤活性的降低，枸杞子多糖有回复作用。枸杞子多糖具有正向免疫调节作用。
李晓莉等，枸杞子多糖对小鼠耐缺氧能力的影响[营养学报2000,22(4):337-339]，试验结果表明，枸杞子多糖具有提高实验动物耐缺氧的功能。
黄芪，性甘，微温。归肺、脾经。功能补气升阳，固表止汗，利水消肿，生津养血，行滞通痹，托毒排脓，敛疮生肌。用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，内热消渴，血虚萎黄，半身不遂，痹痛麻木，痈疽难溃，久溃不敛。
《别录》：“主妇人子脏风邪气，逐五脏间恶血，补脏腑虚损，五劳羸瘦，止渴，腹痛，泄痢，益气，利阴气。”
《珍珠囊》：“益胃气，去肌热，止自汗，诸痛用之。”
《汤液本草》：“心云：补五脏诸虚不足，而泻阴火，去虚热。无汗则发之，有汗则止之。”
《本草汇言》：“补肺健脾，实卫敛汗，驱风运毒。”
荆雪宁，黄芪多糖诱导树突状细胞成熟并促进特异性抗肿瘤免疫的实验研究(山东中医药大学博士论文，2013年5月)，研究结果表明，黄芪多糖可以体外诱导dc成熟。经黄芪多糖诱导成熟的dc疫苗可有效的向t细胞提呈抗原，促进t细胞的增殖和活化，增加抗肿瘤细胞因子的分泌，激活ctl特异性抗肿瘤的能力，显示了良好的体外抗肿瘤效果。黄芪多糖诱导的dc疫苗可以通过增加荷瘤小鼠t细胞增殖能力、促进细胞因子tnf-α、il-12的产生、诱导th1/th2向th1转化等机制增强机体抗肿瘤免疫功能，减缓荷瘤小鼠瘤体生长速度，发挥延长生命作用。
肖峰等，黄芪皂苷提取物对糖尿病大鼠肾脏的保护作用(中国中药杂志，2005，10:2014-2018)，实验结果说明黄芪皂苷提取物对糖尿病大鼠具有一定的肾脏保护作用。
姜琛璐等，黄芪多糖免疫调节作用研究进展[食品科学，2013，34(11)：327-332]，结果表明黄芪是一味可药食两用的传统中药材，其中含量最多的活性成分为黄芪多糖。黄芪多糖是一种有多重功效的天然提取物质，具有调节血糖，保护肝肾、调节免疫力和抗氧化防衰老的功效，尤以免疫调节功能最为突出。
灵芝，性甘，平。归心、肺、肝肾经。功能补气安神，止咳平喘。用于心神不宁，失眠心悸，肺虚咳喘，虚劳短气，不思饮食。
《本经》：“紫芝主耳聋，利关节，保神，益精气，坚筋骨，好颜色，久服轻身不老延年。”
《纲目》：“紫芝疗虚劳。”
张莘莘，黑灵芝多糖的抗肿瘤活性及其分子机制初探(南昌大学博士论文，2014年5月)，研究结果表明，黑灵芝多糖在体内具有很强的抗肿瘤和免疫调节作用，其作用机制可能是通过活化免疫器官，激活免疫细胞及免疫信号通路，来提高机体免疫力；通过激活g蛋白信号转导通路和线粒体凋亡通路，从而促进肿瘤细胞凋亡，最终实现其较强的抗肿瘤作用。
绞股蓝，性味：微甘；性凉。归经：归肺；脾；肾经。功效：益气健脾，化痰止咳，清热解毒。功效分类：补虚药；化痰药；清热药。
主治：体虚乏力；虚劳失精；白细胞减少症；高脂血症；病毒性肝炎；慢性胃肠炎；慢性气管炎。
本发明的有益效果是：
1、本发明的保健组合物应用范围广，具有增强免疫力、延缓衰老、辅助防癌，达到益寿延年的目的，符合大多数人群的使用要求。
2、本发明将枸杞子用水提取，再用醇沉的方法去除杂质，可大大减少服用量；灵芝采用乙醇进行回流提取、药渣放用水进行煎煮，用二种不同极性的溶剂提取灵芝，可以将灵芝的脂溶性有效成分及水溶性有效成分都提取出来，大大提高了本品的功能效果，同时，在本发明的条件下，原料的利用率也最高；黄芪有效成分主要是水溶性成分，因此采用水提取的方法进行提取。本品药材的提取工艺仅使用了水及乙醇等安全的溶剂，没有使用任何有毒的原料及试剂，产品安全无副作用。
3、本发明工艺科学合理、成本低廉、适于大规模生产。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步的描述，但本发明的实施方式不限如此。
实施例1
保健组合物的制备方法包括以下步骤：
a、称取枸杞子1000克；黄芪800克；灵芝600克；绞股蓝600克。
b、取枸杞子用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，用50～98wt％的乙醇进行醇沉分离(含醇量为30～80wt％)；取沉淀物干燥，粉碎成细粉；
c、取黄芪用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，干燥，粉碎成细粉；
d、取灵芝用30～98wt％的乙醇回流提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩，得乙醇提取物；药渣用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，得水提取物。混合二种提取物，干燥，粉碎成细粉；
e、取绞股蓝用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，用50～98wt％的乙醇进行醇沉分离(含醇量为30～80wt％)；取滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉；
将上述步骤制得的四种粉未混匀，加入辅料适量，压制成片，即得。
实施例2
a、称取枸杞子700克；黄芪600克；灵芝500克；绞股蓝600克。
b、取枸杞子用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，用50～98wt％的乙醇进行醇沉分离(含醇量为30～80wt％)；取沉淀物干燥，粉碎成细粉；
c、取黄芪用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，干燥，粉碎成细粉；
d、取灵芝用30～98wt％的乙醇回流提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩，得乙醇提取物；药渣用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，得水提取物。混合二种提取物，干燥，粉碎成细粉；
e、取绞股蓝用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，用50～98wt％的乙醇进行醇沉分离(含醇量为30～80wt％)；取滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉；
将上述步骤制得的四种粉未混匀，加入辅料适量，压制成片，即得。
实施例3
a、称取枸杞子500克；黄芪300克；灵芝100克；绞股蓝100克。
b、取枸杞子用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，用50～98wt％的乙醇进行醇沉分离(含醇量为30～80wt％)；取沉淀物干燥，粉碎成细粉；
c、取黄芪用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，干燥，粉碎成细粉；
d、取灵芝用30～98wt％的乙醇回流提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩，得乙醇提取物；药渣用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，得水提取物。混合二种提取物，干燥，粉碎成细粉；
e、取绞股蓝用水提取1～4次，每次0.5～4小时，滤过，合并滤液，浓缩，用50～98wt％的乙醇进行醇沉分离(含醇量为30～80wt％)；取滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉；
将上述步骤制得的四种粉未混匀，加入辅料适量，压制成片，即得。
以实施例2为基础，采用正交实验法，以紫外-可见分光光度法测量干膏中的枸杞子多糖含量为评价指标，优选枸杞了提取醇沉的最佳工艺条件。本实验采用三水平，九因素，以考察提取工艺中枸杞子的浸泡时间、加水量、提取时间、浓缩密度、醇沉分离工艺的含醇量、静置时间等工艺参数，以确定最佳工艺。
表1枸杞子提取醇沉工艺l27(39)正交试验设计表
依据《中国药典》2015年版一部，枸杞子药材含量测定项下中的枸杞多糖测定方法测定枸杞子干膏多糖含量。
表2正交试验安排表及正交试验结果
根据表2结果，得最佳提取醇沉工艺条件为：第一次加水10倍量，浸泡30分钟，提取1.5小时，第二次加水10倍量，提取1小时，浓缩成密度为1.16～1.18的稠膏，加入95wt％乙醇使含醇量达70wt％，静置12小时，过滤，滤渣挥干乙醇，干燥。
以下为本发明保健组合物的药效学试验研究：
一、细胞免疫功能测定
(1)杞芪片对小鼠免疫器官的影响
1试验材料
1.1主要试剂
杞芪片(东莞市亚洲制药有限公司提供，批号：20160614)、盐酸左旋咪唑片(广东华南药业集团有限公司，国药准字h44020759)、nacl(天津致远化学试剂有限公司，批号：2016102067)；
1.2药物
杞芪片，7.00g生药/g，杞芪片临床每日用量为23.1g生药/d(3.85g生药/0.55g/粒，一次3粒，一天2次)，成人体重以60kg计，平均用药剂量为0.385g生药/kg/d，本试验小鼠低、中、高三个剂量组分别设为3.85、7.7、15.4g生药/kg/d，上述剂量为临床用药剂量的10、20、40倍(按体重计算)。左旋咪唑：本实验小鼠剂量设计为25mg/kg。
1.3动物
km小鼠，雄性，spf级，18～22g，南方医科大学实验动物中心，动物质量合格证：scxk(粤)2013-0002。
1.4饲养环境：实验期动物房环境温度23.0±2.0℃，相对湿度40-70％，换气次数>15次/小时，12小时照明/12小时黑暗，明暗交替，实验动物使用许可证号：syxk(粤)2012-1125。
1.5主要器材
hzt-a1000电子天平(福州华志科学仪器有限公司)；fa2004b电子天平(上海精科天美科学仪器有限公司)
2方法
2.1分组及给药
取雄性km小鼠60只，体质量18-22g，按体质量随机分成5组，即生理盐水组、左旋咪唑阳性药物组、杞芪片低、中、高3个剂量组(3.85、7.7、15.4g生药/kg)，每组12只。杞芪片各剂量组及左旋咪唑阳性药物组每只动物每日给予相应剂量的药物，灌胃容积为20ml/kg，生理盐水组则给予等体积生理盐水，连续给药30d。于实验结束时小鼠称重，脱颈椎处死小鼠后取脾脏、胸腺，称重。
胸腺指数(mg/10g)＝(胸腺重量×1000/小鼠体重)×10
脾脏指数(mg/10g)＝(脾脏重量×1000/小鼠体重)×10
2.2统计学处理
采用统计软件spss21.0进行数据分析，一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算f值，f值<f0.05，结论：各组均数间差异无显著性；f值≥f0.05，p≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
3结果
由表3可见，与生理盐水组比较，杞芪片各剂量组及左旋咪唑组的胸腺重和胸腺指数有显著性差异(p＜0.05或p＜0.01)，杞芪片低、高剂量组及左旋咪唑组的脾脏重和脾脏指数有一定的上升趋势，但无显著性差异，提示杞芪片对小鼠免疫器官重量有一定的增强作用。
表3杞芪片对小鼠免疫器官的影响
注：与生理盐水组比较，*p＜0.05，**p＜0.01
4小结
小鼠连续给予杞芪片灌胃30天，对小鼠免疫器官重量有一定的影响。结果提示杞芪片有一定增加小鼠的免疫器官重量的作用。
(2)杞芪片对小鼠cona诱导的脾淋巴细胞转化的影响
1试验材料
1.1主要试剂
杞芪片(东莞市亚洲制药有限公司提供，批号：20160614)、盐酸左旋咪唑片(广东华南药业集团有限公司，国药准字h44020759)、nacl(天津致远化学试剂有限公司，批号：2016102067)、rpmi1640培养液(gibco，批号：8116157)、小牛血清(浙江天杭生物科技有限公司，批号：20150914)、2-巯基乙醇(genview，批号：6526010150)、双抗(solarbio，批号：20160509)、刀豆蛋白a(sigma，批号：201600402)、盐酸(天津大茂试剂厂，批号：20160715)、异丙醇(天津大茂试剂厂，批号：20140304)、mtt(sigma，批号：201603000)、hank’s液(genview，批号：6706010110)、pbs缓冲液(hyclone，批号：aba2112280)、台盼蓝(广州翔博生物科技有限公司，批号：0108xb15)。
1.2药物
杞芪片，7.00g生药/g，杞芪片临床每日用量为23.1g生药/d(3.85g生药/0.55g/粒，一次3粒，一天2次)，成人体重以60kg计，平均用药剂量为0.385g生药/kg/d，本试验小鼠低、中、高三个剂量组分别设为3.85、7.7、15.4g生药/kg/d，上述剂量为临床用药剂量的10、20、40倍(按体重计算)。左旋咪唑：本实验小鼠剂量设计为25mg/kg。
1.3动物
km小鼠，spf级，18～22g，南方医科大学实验动物中心，动物质量合格证：scxk(粤)2013-0002。
1.4饲养环境：实验期动物房环境温度23.0±2.0℃，相对湿度40-70％，换气次数>15次/小时，12小时照明/12小时黑暗，明暗交替，实验动物使用许可证号：syxk(粤)2012-1125。
1.5主要器材
hzt-a1000电子天平(福州华志科学仪器有限公司)；fa2004b电子天平(上海精科天美科学仪器有限公司)；tecaninfinite200pro多功能酶标仪(tecanaustriagmbh)；脉动真空灭菌器(山东新华医疗器械股份有限公司)；fa2104上皿电子天平(上海精密科学仪器有限公司)；sw-cj-1f洁净工作台(苏净集团苏州安泰空气技术有限公司)；台式低速大容量离心机l550(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司)；血球计数板(上海市求精生化试剂仪器有限公司)；ba310-t生物显微镜(motic)；3100二氧化碳培养箱(thermo)。
2方法
2.1主要溶液配制
完全培养基：rpmi1640培养液，用前加入10％小牛血清，1％谷氨酰胺(200mmol/l)，1％双抗(1万u/ml)及5×10-5mol/l的2-巯基乙醇，用无菌的1mol/l的hcl或1mol/l的naoh调ph至7.0-7.2，即完全培养液。
cona液：用双蒸水配制成100μg/ml的溶液，过滤除菌，-20℃保存。
无菌hank’s液：用前以3.5％的无菌nahco3调ph7.2-7.4。
mtt液：将5mgmtt溶于1mlph7.2的pbs中，现配现用。
酸性异丙醇溶液：96ml异丙醇中加入4ml1mol/l的hcl，临用前配制。
2.2分组及给药
取雄性km小鼠60只，体质量18-22g，按体质量随机分成5组，即生理盐水组、左旋咪唑阳性药物组、杞芪片低、中、高3个剂量组(3.85、7.7、15.4g生药/kg)，每组12只。杞芪片各剂量组及左旋咪唑阳性药物组每只动物每日给予相应剂量的药物，灌胃容积为20ml/kg，生理盐水组则给予等体积生理盐水，连续给药30d。
2.3mtt法
2.3.1脾细胞悬液的制备
末次给药后1h，称重，无菌取脾、胸腺，称重，将脾置于盛有3ml无菌hank’s液平皿中，并在脾上面放置一块纱布，用大号注射器内芯轻轻将脾磨碎，制成单个脾细胞悬液。经200目筛网过滤，用hank’s液冲洗两次，每次离心10min(1000r/min)。然后将脾细胞重悬于3ml的完全培养液中，用台盼蓝染色计数活细胞数(活细胞数应95％以上)，调整细胞浓度为3×106个/ml。
2.3.2淋巴细胞增殖反应
将每一份脾细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1ml，一个孔加入75μlcona液(相当于7.5μg/ml)，另一个孔作为对照，置5％co2培养箱中培养72h。48h时用完全培养基换一次液，培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7ml，再加入0.7ml不含小牛血清的rpmi1640培养液，同时加入mtt(5mg/ml)50μl/孔，轻轻吹打混匀，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙醇，人工吹打混匀，使紫色结晶完全溶解，然后分装到96孔培养板中，每个孔分装3孔作为平行样，用酶标仪，以570nm波长测定光密度值。用加cona孔的光密度值减去不加cona孔的光密度值代表淋巴细胞的增殖能力。
2.4统计学处理
采用统计软件spss21.0进行数据分析，一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算f值，f值<f0.05，结论：各组均数间差异无显著性；f值≥f0.05，p≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
3结果
由表4可见，与生理盐水组比较，杞芪片低、中剂量组均对小鼠的脾淋巴细胞增殖有增强作用，且有显著性差异(p＜0.01)，杞芪片高剂量组和左旋咪唑组的脾淋巴细胞增殖有一定的上升趋势，但无统计学差异，提示杞芪片对小鼠cona诱导的脾淋巴细胞转化具有明显的促进作用。
表4杞芪片对小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响
注：与生理盐水组比较，*p＜0.05，**p＜0.01
4小结
小鼠连续给予杞芪片灌胃30天，对小鼠cona诱导的脾淋巴细胞增殖能力有明显的促进作用且差异有显著性意义。
(3)杞芪片对小鼠迟发型变态反应(dth)的影响(耳肿胀法)
1试验材料
1.1主要试剂
杞芪片(东莞市亚洲制药有限公司提供，批号：20160614)、盐酸左旋咪唑片(广东华南药业集团有限公司，国药准字h44020759)、2,4-二硝基氟苯(成都艾科化学技术有限公司，生产批号：201602291)；丙酮(衡阳市凯信化工试剂有限公司，生产批号：20150807)。
1.2药物
杞芪片，7.00g生药/g，杞芪片临床每日用量为23.1g生药/d(3.85g生药/0.55g/粒，一次3粒，一天2次)，成人体重以60kg计，平均用药剂量为0.385g生药/kg/d，本试验小鼠低、中、高三个剂量组分别设为3.85、7.7、15.4g生药/kg/d，上述剂量为临床用药剂量的10、20、40倍(按体重计算)，左旋咪唑：本实验小鼠剂量设计为25mg/kg。
1.3动物
km小鼠，雄性，spf级，18～22g，南方医科大学实验动物中心，动物质量合格证：scxk(粤)2013-0002。
1.4饲养环境：实验期动物房环境温度23.0±2.0℃，相对湿度40-70％，换气次数>15次/小时，12小时照明/12小时黑暗，明暗交替，实验动物使用许可证号：syxk(粤)2012-1125。
1.5主要器材
打孔器，fa2004b电子天平(上海精科天美科学仪器有限公司)。
2方法
2.1dnfb溶液配制
dnfb溶液应新鲜配制，称取dnfb50mg，置清洁干燥小瓶中，将预先配好的5ml丙酮麻油溶液(丙酮:麻油＝1:1)，倒入小瓶，盖好瓶塞并用胶布密封。混匀后，备用。
2.2分组及给药
取雄性km小鼠60只，体质量18-22g，按体质量随机分成5组，即生理盐水组、左旋咪唑阳性药物组、杞芪片低、中、高3个剂量组(3.85、7.7、15.4g生药/kg)，每组12只。杞芪片各剂量组及左旋咪唑阳性药物组每只动物每日给予相应剂量的药物，灌胃容积为20ml/kg，生理盐水组则给予等体积生理盐水，连续给药30d。
2.3致敏
给药第13天，先将小鼠腹部皮肤剪毛，再用脱毛膏脱毛，范围3cm×3cm，于次日用dnfb溶液均匀涂抹致敏，每只50μl。
2.4dth的产生与测定
致敏5天后，用dnfb溶液均匀涂抹于小鼠右耳(两面)进行攻击，每只10μl。攻击后24h颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右耳壳。用打孔器取下直径8mm的耳片，称重。用左右耳重量之差表示dth的程度。
2.5统计学处理
采用统计软件spss21.0进行数据分析，一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算f值，f值<f0.05，结论：各组均数间差异无显著性；f值≥f0.05，p≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
3结果
由表5可见，杞芪片各剂量组及左旋咪唑组的小鼠的左右耳片重量差值明显高于生理盐水组，其中杞芪低剂组和左旋咪唑组具有显著性差异(p＜0.01)，提示杞芪片对小鼠迟发型变态反应作用具有明显的促进作用。
表5杞芪片对小鼠迟发型变态反应(dth)的影响
注：与生理盐水组比较，*p＜0.05，**p＜0.01
4小结
杞芪片连续灌胃给予小鼠30天，对小鼠dth有明显的促进作用，且有显著性差异。
二、体液免疫功能测定
(1)杞芪片对小鼠血清溶血素的影响(血凝法)
1试验材料
1.1主要试剂
杞芪片(东莞市亚洲制药有限公司提供，批号：20160614)、盐酸左旋咪唑片(广东华南药业集团有限公司，国药准字h44020759)、2％绵羊红细胞(广州鸿泉生物科技有限公司，生产批号：160926)、nacl(天津致远化学试剂有限公司，批号：2016102067)。
1.2药物
杞芪片，7.00g生药/g，杞芪片临床每日用量为23.1g生药/d(3.85g生药/0.55g/粒，一次3粒，一天2次)，成人体重以60kg计，平均用药剂量为0.385g生药/kg/d，本试验小鼠低、中、高三个剂量组分别设为3.85、7.7、15.4g生药/kg/d，上述剂量为临床用药剂量的10、20、40倍(按体重计算)，左旋咪唑：本实验小鼠剂量设计为25mg/kg。
1.3动物
km小鼠，雄性，spf级，18～22g，南方医科大学实验动物中心，动物质量合格证：scxk(粤)2013-0002。
1.4饲养环境：实验期动物房环境温度23.0±2.0℃，相对湿度40-70％，换气次数>15次/小时，12小时照明/12小时黑暗，明暗交替，实验动物使用许可证号：syxk(粤)2012-1125。
1.5主要器材
台式低速大容量离心机l550(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司)
微量血凝实验板(美国corning)。
电热恒温培养箱(上海一恒科学仪器有限公司)
2方法
2.1溶液配制
0.5％srbc：取15ml的2％srbc，加生理盐水至60ml。
2.2分组及给药
取雄性km小鼠60只，体质量18-22g，按体质量随机分成5组，即生理盐水组、左旋咪唑阳性药物组、杞芪片低、中、高3个剂量组(3.85、7.7、15.4g生药/kg)，每组12只。杞芪片各剂量组及左旋咪唑阳性药物组每只动物每日给予相应剂量的药物，灌胃容积为20ml/kg，生理盐水组则给予等体积生理盐水，连续给药30d。
2.3血凝法
2.3.1免疫动物及血清分离
给药第15天，每只小鼠腹腔注射0.2ml2％srbc进行免疫。免疫5天后，给药1h后，称重，内眦静脉丛取血于离心管内，放置约1h，将凝固血与管壁剥离，使血清充分析出，2000r/min离心10min，收集血清。
2.3.2凝集反应
用生理盐水将血清倍比稀释(1:2～1:256)，将不同稀释度的血清分别置于微量血凝实验板内，每孔100μl，再加入100μl0.5％(v/v)的srbc悬液，混匀，装入湿润的平盘内加盖，于37℃温箱孵育3h，观察血球凝集程度。
血清凝集程度一般分为5级(0—ⅳ)记录，按下式计算抗体积数，受试杞芪片组的抗体积数显著高于对照组的抗体水平，可判定该项实验结果阳性。
抗体积数＝(s1+2s2+3s3……nsn)
式中1、2、3……n代表对倍稀释的指数，s代凝集程度的级别，抗体积数越大，表示血清抗体越高。
0级红细胞全部下沉，集中在孔底部形成致密的圆点状，四周液体清晰。
ⅰ级红细胞大部分沉集在孔底成园点状，四周有少量凝集的红细胞。
ⅱ级凝集的红细胞在孔底形成薄层，中心可以明显见到一个疏松的红点。
ⅲ级凝集的红细胞均匀地铺散在孔底成一薄层，中心隐约可见一个小红点。
ⅳ级凝集的红细胞均匀铺散在孔底成一薄层，凝块有时成卷折状。
2.4统计学处理
采用统计软件spss21.0进行数据分析，一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算f值，f值<f0.05，结论：各组均数间差异无显著性；f值≥f0.05，p≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
3结果
由表6可见，杞芪片各剂量组小鼠的抗体积数均高于生理盐水组，其中杞芪片高剂量组及左旋咪唑组具有显著性差异(p＜0.05或p＜0.01)，提示杞芪片对小鼠血清溶血素有一定的促进作用。
表6杞芪片对小鼠血清溶血素中抗体积数的影响
注：与生理盐水组比较，*p＜0.05，**p＜0.01
4小结
小鼠连续给予杞芪片灌胃30天，对小鼠血清血溶素的抗体积数具有明显的促进作用。结果表明杞芪片对小鼠血清溶血素抗体水平具有明显的促进作用。
三、单核—巨噬细胞功能测定
(1)杞芪片对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清功能的影响
1试验材料
1.1主要试剂
杞芪片(东莞市亚洲制药有限公司提供，批号：20160614)、盐酸左旋咪唑片(广东华南药业集团有限公司，国药准字h44020759)、印度墨水(北京索莱宝科技有限公司，生产批号：1224d023)，无水碳酸钠(天津市大茂化学试剂厂，生产批号：20151006)。
1.2药物
杞芪片，7.00g生药/g，杞芪片临床每日用量为23.1g生药/d(3.85g生药/0.55g/粒，一次3粒，一天2次)，成人体重以60kg计，平均用药剂量为0.385g生药/kg/d，本试验小鼠低、中、高三个剂量组分别设为3.85、7.7、15.4g生药/kg/d，上述剂量为临床用药剂量的10、20、40倍(按体重计算)，左旋咪唑：本实验小鼠剂量设计为25mg/kg。
1.3动物
km小鼠，雄性，spf级，18～22g，南方医科大学实验动物中心，动物质量合格证：scxk(粤)2013-0002。
1.4饲养环境：实验期动物房环境温度23.0±2.0℃，相对湿度40-70％，换气次数>15次/小时，12小时照明/12小时黑暗，明暗交替，实验动物使用许可证号：syxk(粤)2012-1125。1.5主要仪器
tecaninfinite200pro多功能酶标仪(tecanaustriagmbh)。2方法
2.1溶液配制
注射用墨水：取印度墨水原液8ml，置清洁干燥小瓶中，加入生理盐水20ml，即印度墨水稀释3.5倍备用。
0.1％na2co3溶液：取0.2gna2co3，加蒸馏水至200ml。
2.2分组及给药
取雄性km小鼠60只，体质量18-22g，按体质量随机分成5组，即生理盐水组、左旋咪唑阳性药物组、杞芪片低、中、高3个剂量组(3.85、7.7、15.4g生药/kg)，每组12只。杞芪片各剂量组及左旋咪唑阳性药物组每只动物每日给予相应剂量的药物，灌胃容积为20ml/kg，生理盐水组则给予等体积生理盐水，连续给药30d。
2.3碳廓清实验
末次给药1h后，称体重，从小鼠尾静脉注入稀释的印度墨水(用生理盐水稀释3.5倍，临用前现配制)，按小鼠空腹每10g体重0.1ml计算。待墨汁注入，立即计时。注入墨汁后2、10min，分别从内眦静脉丛取血20μl，立即将其加到2ml0.1％na2co3溶液中，吹打混匀。用酶标仪在600nm波长处测光密度值(od值)，以na2co3溶液作空白对照。两次采血完毕之后脱颈椎处死小鼠，取肝脏和脾脏，用滤纸吸干脏器表面血污，分别称重。以吞噬指数表示小鼠碳廓清的能力，按下式计算吞噬指数(a)。
碳廓清指数
吞噬指数
2.4统计学处理
采用统计软件spss21.0进行数据分析，一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算f值，f值<f0.05，结论：各组均数间差异无显著性；f值≥f0.05，p≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
3结果
由表7可见，杞芪片中、高剂量组及左旋咪唑组小鼠的吞噬指数明显高于生理盐水组，具有统计学差异(p＜0.05或p＜0.01)，提示杞芪片能明显提高小鼠单核-巨噬细胞的碳廓清能力。
表7杞芪片对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力的影响
注：与生理盐水组比较，*p＜0.05，**p＜0.01
4小结
杞芪片连续灌胃给予小鼠30天，对小鼠单核-巨噬细胞的碳廓清能力具有明显的作用。表明杞芪片能增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬清除能力。
四、nk细胞活性测定
(1)杞芪片对nk细胞活性的影响(ldh法)
1试验材料
1.1主要试剂
杞芪片(东莞市亚洲制药有限公司提供，批号：20160614)、yac-1细胞(由广东药科大学基础学院提供)、rpmi1640培养液(gibco，批号：8116420)、小牛血清(浙江天杭生物科技有限公司，批号：20160721)、2-巯基乙醇(genview，批号：6526010150)、双抗(solarbio，批号：20160509)、hank's液(genview，批号：61121010110)、pbs缓冲液(hyclone，批号：ab10111039)、台盼蓝(广州翔博生物科技有限公司，批号：0108xb15)、盐酸(天津大茂试剂厂，批号：20160715)、乳酸锂(sigma，批号：mkbv2142v)；硝基氯化四氮唑(int)(sigma，批号：slbr2464v)；吩嗪二甲酯硫酸盐(pms)(sigma，批号：p920271116)；氧化型辅酶ⅰ(nad)(roche，批号：l5300141)、tris-hcl(beyotime，批号：091316161108)、np40(fluka，批号：slnm1610e)、nh4cl(广州化学试剂厂，批号：20150504-2)、khco3(广州化学试剂厂，批号：2015q401-1)、edta(威佳科技，批号：20110718)。
1.2药物
杞芪片，7.00g生药/g，杞芪片临床每日用量为23.1g生药/d(3.85g生药/0.55g/粒，一次3粒，一天2次)，成人体重以60kg计，平均用药剂量为0.385g生药/kg/d，本试验小鼠低、中、高三个剂量组分别设为3.85、7.7、15.4g生药/kg/d，上述剂量为临床用药剂量的10、20、40倍(按体重计算)。
1.3动物
km小鼠，spf级，18～22g，南方医科大学实验动物中心，动物质量合格证：scxk(粤)2013-0002。
1.4饲养环境：实验期动物房环境温度23.0±2.0℃，相对湿度40-70％，换气次数>15次/小时，12小时照明/12小时黑暗，明暗交替，实验动物使用许可证号：syxk(粤)2012-1125。
1.5主要器材
hzt-a1000电子天平(福州华志科学仪器有限公司)、fa2004b电子天平(上海精科天美科学仪器有限公司)、tecaninfinite200pro多功能酶标仪(tecanaustriagmbh)、脉动真空灭菌器(山东新华医疗器械股份有限公司)、fa2104上皿电子天平(上海精密科学仪器有限公司)、sw-cj-1f洁净工作台(苏净集团苏州安泰空气技术有限公司)、台式低速大容量离心机l550(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司)、血球计数板(上海市求精生化试剂仪器有限公司)、ba310-t生物显微镜(motic)、ae2000生物显微镜(motic)、3100二氧化碳培养箱(thermo)、u底96孔板(corning)、平底96孔板(nest)。
2方法
2.1溶液配制：
ldh基质液的配制：
乳酸锂5×10-2mol/l
硝基氯化四氮唑(int)6.6×10-4mol/l
吩嗪二甲酯硫酸盐(pms)2.8×10-4mol/l
氧化型辅酶ⅰ(nad)1.3×10-3mol/l
将上述试剂溶于0.2mol/l的tris-hcl缓冲液中(ph＝8.2)
2.2分组及给药
取雌性km小鼠48只，体质量18-22g，按体质量随机分成4组，即生理盐水组、杞芪片低、中、高3个剂量组(3.85、7.7、15.4g生药/kg)，每组12只。杞芪片各剂量组每只动物每日给予相应剂量的药物，灌胃容积为20ml/kg，生理盐水组则给予等体积生理盐水，连续给药30d。
2.3靶细胞传代(yac-1细胞)
实验前24h将靶细胞进行传代培养。用前以hank’s液洗3次，用rpmi1640完全培养液调整细胞浓度为1×105个/ml。
2.4脾细胞悬液的制备(效应细胞)
实验结束时无菌取脾，置于盛有适量无菌hank’s液的无菌平皿中，用4层纱布将脾磨碎，制成单个细胞悬液。经200目筛网过滤，离心10min(1000r/min)。弃上清，加入1ml红细胞裂解液，吹打混匀，立即计时，5min后离心10min(1000r/min)。再用hank's液洗2次，每次离心10min(1000r/min)，弃上清，用2ml含10％小牛血清的rpmi1640完全培养液重悬，用台盼蓝染色计数活细胞数(应在95％以上)，最后用rpmi1640完全培养液调整细胞浓度为5×106个/ml。
2.5nk细胞活性检测
取靶细胞和效应细胞各100μl，加入u型96孔培养板中，靶细胞自然释放孔加靶细胞和1640培养液各100μl，靶细胞最大释放孔加靶细胞和1％np40各100μl；上述各项均设三个平行孔，于37℃、5％co2培养箱中培养4h，然后将96孔培养板以1500r/min离心5min，每孔吸取上清100ul置平底96孔培养板中，同时加入ldh基质液100ul，根据室温不同反应3min，每孔加入1mol/l的hcl30ul，在酶标仪490nm波长处测光密度(od)值，按下式计算nk细胞活性。
nk细胞活性％＝(反应孔od-自然释放孔od)/(最大释放孔od-自然释放孔od)×100％
2.6统计学处理
采用统计软件spss21.0进行数据分析，一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算f值，f值<f0.05，结论：各组均数间差异无显著性；f值≥f0.05，p≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
3结果：
由表8可见，杞芪片各剂量组小鼠的nk细胞活性均高于生理盐水组，且杞芪片中、高剂组具有显著性差异(p＜0.05或p＜0.01)，提示杞芪片对小鼠的nk细胞杀伤活性具有明显的促进作用。
表8杞芪片对小鼠nk细胞杀伤活性的影响
注：与生理盐水组比较，*p＜0.05，**p＜0.01
4小结
杞芪片连续灌胃给予小鼠30天，对小鼠nk细胞的杀伤活性有明显的促进作用。
五、总结
一、细胞免疫功能测定
(1)杞芪片对小鼠免疫器官的影响：杞芪片对小鼠的免疫器官重量有明显的增强作用。(2)杞芪片对小鼠cona诱导的脾淋巴细胞转化的影响：杞芪片对小鼠cona诱导的脾淋巴细胞转化具有明显的促进作用。
(3)杞芪片对小鼠迟发型变态反应(dth)的影响(耳肿胀法)：杞芪片对小鼠迟发型变态反应作用具有明显的促进作用。
结果提示杞芪片可以增强机体的细胞免疫功能。
二、体液免疫功能测定
杞芪片对小鼠血清溶血素的影响(血凝法)：杞芪片对小鼠血清溶血素抗体水平具有明显的促进作用。结果提示杞芪片具有一定增强机体的体液免疫作用。
三、单核—巨噬细胞功能测定
杞芪片对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清功能的影响：杞芪片能增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬清除能力。
四、nk细胞活性测定
杞芪片对nk细胞活性的影响(ldh法)：杞芪片对小鼠nk细胞的杀伤活性有明显的促进作用。
综上所述，本实验结果证明杞芪片具有以下作用：
1、增强机体的细胞免疫功能。
2、增强机体的体液免疫作用。
3、增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬清除能力。
4、增强小鼠nk细胞杀伤活性。
本发明的组合物可以制成普通制剂、也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，如稀释剂与吸收剂：淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂：水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，例如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氨化油等；吸收促进剂，例如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等；还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。
为了给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、gelucire、高岭土、滑石粉等；粘合剂，如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。
为了将给药单元制成胶囊，将有效成分与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明胶胶囊或软胶囊中，也可将有效成分制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。
例如将本发明的组合物制成注射用制剂，如溶液剂、混悬剂溶液剂、乳剂、冻干粉针剂，这种制剂可以是含水或非水的，可含一种和/或多种药效学上可接受的载体、稀释剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂，如稀释剂可选自水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、ph调节剂等。这些辅料是本领域常用的。
此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其他材料。
作为优选，本发明的所述片剂由以下组分重量份的组成：枸杞子5～10份、黄芪3～8份、灵芝1～6份、绞股蓝1～6份、淀粉4份、蜂蜜3份、碳酸氢钠2份、蔗糖1份、滑石粉1份；上述片剂易于压制，同时，中老年人服用后易吸收，效果很好；进一步的，还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片；进一步的，还可以制成胶囊，将枸杞子5～10份、黄芪3～8份、灵芝1～6份、绞股蓝1～6份、淀粉4份、蜂蜜3份、碳酸氢钠2份、蔗糖1份、滑石粉1份、甲基纤维素1份置于硬的明胶胶囊或软胶囊中，也可将有效成分制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。
进一步的，还可以将本发明的保健组合物制成注射用制剂，如溶液剂、混悬剂溶液剂、乳剂、冻干粉针剂，这种制剂可以是含水或非水的，如含水的：枸杞子5～10份、黄芪3～8份、灵芝1～6份、绞股蓝1～6份、淀粉4份、蜂蜜3份、明胶3份、碳酸氢钠2份、蔗糖1份、滑石粉1份、水20-50份；非含水的：枸杞子5～10份、黄芪3～8份、灵芝1～6份、绞股蓝1～6份、淀粉4份、蜂蜜3份、碳酸氢钠2份、蔗糖1份、滑石粉1份、1，3-丙二醇20-30份；另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠(0.5份)、葡萄糖(1份)或甘油(1份)，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、ph调节剂等，这些辅料是本领域常用的。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。