本发明属于枸杞中类黄酮物质提取技术领域，特别是涉及一种酶辅助微波提取枸杞中类黄酮方法。
背景技术：
枸杞(lyciumbarbarum)属茄科落叶灌木，其果实为卵圆形红浆果，食药兼用。据《本草汇言》载：“枸杞能使气可充，血可补，阳可生，阴可长，火可降，风湿可去，有十全之妙用焉。”研究表明枸杞总黄酮是枸杞子中重要的活性成分之一，不仅具有抗动脉粥样硬化、脂肪肝、降低血糖、抗氧化和抑制肿瘤等作用。目前，枸杞类黄酮物质的提取方法主要有有机溶剂提取法，水提取法和超声提取法等，虽具有所需设备简易和操作简单等优点，但提取效率不高，而且过程中消耗大量的有机溶剂，对环境不友好。植物细胞壁的主要是有纤维素组成，所以设计利用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶能破坏细胞壁，利于枸杞类黄酮物质向胞外扩散，提高提取率，利用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶等提取活性成分的酶法是一种新型提取方法。微波提取具有提取效率高、杂质少和溶剂用量少等特点。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种酶辅助微波提取枸杞中类黄酮方法。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：
一种酶辅助微波提取枸杞中类黄酮方法，包括以下步骤：
1.将枸杞干果粉碎至20～30目，得到枸杞果粉；
2.按液固比10ml/g加入水，加入0.3％纤维素酶、0.2％果胶酶的一种或二者混合的混合酶，加量为0.3～0.5％，在ph4.0～4.5，温度50℃条件下搅拌60min，加热沸腾灭酶活。
3往酶解水液中加入乙醇，得到体积百分浓度为40％～50％的乙醇水溶液，采用微波法，温度50℃，功率为300w～400w进一步提取酶解液中枸杞类黄酮物质，微波提取时间20min，得到枸杞类黄酮物质。
4.使用大孔树脂d101纯化枸杞类黄酮物质，用3倍大孔树脂d101体积的水洗脱后，前后分别用5倍体积的体积百分浓度为10％的乙醇水溶液和5倍体积的体积百分浓度为30％的乙醇水溶液洗脱，收集30％的乙醇水溶液洗脱液，除去乙醇后进行喷雾干燥，得到2.8kg～3.5kg粉末，即为枸杞类黄酮物质。
本发明优点：本发明采用科学合理的酶-微波联用提取方法明显提高了枸杞中类黄酮物质的提取率，对枸杞的进一步开发具有很重要的指导意义。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
实施例1
一种酶辅助微波提取枸杞中类黄酮方法，包括以下步骤：
1.将100kg枸杞干果粉碎至30目，得到枸杞果粉。
2.按以液固比10ml/g加入水，分别加0.3％纤维素酶和0.2％果胶酶，在ph4.5，温度50℃条件下搅拌60min，加热沸腾灭酶活。
3.往酶解水液中加入乙醇，得到体积百分浓度为40％乙醇水溶液，采用微波法，温度50℃，功率为300w进一步提取酶解液中枸杞类黄酮物质，微波提取时间20min。
4.使用大孔树脂d101纯化，用3倍体积的水洗脱后，前后分别用5倍体积的体积百分浓度为10％乙醇水溶液和体积百分浓度为30％的乙醇水溶液洗脱，收集体积百分浓度为30％的乙醇水溶液洗脱，除去乙醇后进行喷雾干燥，得到3.4kg粉末，即为枸杞类黄酮物质。
实施例2
一种酶辅助微波提取枸杞中类黄酮方法，包括以下步骤：
1.将100kg枸杞干果粉碎至30目，得到枸杞果粉。
2.按以液固比10ml/g加入水，分别加0.3％纤维素酶，在ph4.0，温度50℃条件下搅拌60min，加热沸腾灭酶活。
3.往酶解水液中加入乙醇，得到体积百分浓度为40％乙醇水溶液，采用微波法，温度50℃，功率为300w进一步提取酶解液中枸杞类黄酮物质，微波提取时间20min。
4.使用大孔树脂d101纯化，用3倍体积的水洗脱后，前后分别用5倍体积的体积百分浓度为10％乙醇水溶液和体积百分浓度为30％的乙醇水溶液洗脱，收集体积百分浓度为30％的乙醇水溶液洗脱，除去乙醇后进行喷雾干燥，得到2.8kg粉末，即为枸杞类黄酮物质。
实施例3
一种酶辅助微波提取枸杞中类黄酮方法，包括以下步骤：
将100kg枸杞干果粉碎至30目，得到枸杞果粉。
2.按以液固比10ml/g加入水，分别加0.3％果胶酶，在ph4.5，温度50℃条件下搅拌60min，加热沸腾灭酶活。
3.往酶解水液中加入乙醇，得到体积百分浓度为40％乙醇水溶液，采用微波法，温度50℃，功率为300w进一步提取酶解液中枸杞类黄酮物质，微波提取时间20min。
4.使用大孔树脂d101纯化，用3倍体积的水洗脱后，前后分别用5倍体积的体积百分浓度为10％乙醇水溶液和体积百分浓度为30％的乙醇水溶液洗脱，收集体积百分浓度为30％的乙醇水溶液洗脱，除去乙醇后进行喷雾干燥，得到2.2kg粉末，即为枸杞类黄酮物质。
实施例4
一种酶辅助微波提取枸杞中类黄酮方法，包括以下步骤：
1.将100kg枸杞干果粉碎至30目，得到枸杞果粉。
2.按以液固比10ml/g加入水，分别加0.3％纤维素酶和0.2％果胶酶，在ph4.5，温度50℃条件下搅拌60min，加热沸腾灭酶活。
3.往酶解水液中加入乙醇，得到体积百分浓度为40％乙醇水溶液，采用微波法，温度50℃，功率为400w进一步提取酶解液中枸杞类黄酮物质，微波提取时间20min。
4.使用大孔树脂d101纯化，用3倍体积的水洗脱后，前后分别用5倍体积的体积百分浓度为10％乙醇水溶液和体积百分浓度为30％的乙醇水溶液洗脱，收集体积百分浓度为30％的乙醇水溶液洗脱，除去乙醇后进行喷雾干燥，得到3.5kg粉末，即为枸杞类黄酮物质。
实施例5
一种酶辅助微波提取枸杞中类黄酮方法，包括以下步骤：
1.将100kg枸杞干果粉碎至30目，得到枸杞果粉。
2.按以液固比10ml/g加入水，分别加,0.3％纤维素酶和0.2％果胶酶，在ph4.5，温度50℃条件下搅拌60min，加热沸腾灭酶活。
3.往酶解水液中加入乙醇，得到体积百分浓度为50％乙醇水溶液，采用微波法，温度50℃，功率为300w进一步提取酶解液中枸杞类黄酮物质，微波提取时间20min。
4.使用大孔树脂d101纯化，用3倍体积的水洗脱后，前后分别用5倍体积的体积百分浓度为10％乙醇水溶液和体积百分浓度为30％的乙醇水溶液洗脱，收集体积百分浓度为30％的乙醇水溶液洗脱，除去乙醇后进行喷雾干燥，得到3.0kg粉末，即为枸杞类黄酮物质。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。