本发明属于天然产物提取领域，具体涉及一种茶多酚的常温提取方法。
背景技术：
茶多酚(teapolyphenols)是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。主要为黄烷醇(儿茶素)类，儿茶素占60～80％。茶多酚又称茶鞣或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。研究表明，茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用，能有效地阻止放射性物质侵入骨髓，并可使锶90和钴60迅速排出体外，被健康及医学界誉为“辐射克星”。
茶多酚作为医药和食品等的添加剂，开发和应用前景十分看好。此外，随着茶多酚应用研究的深入，茶多酚在化妆品、日用化工、轻化工等领域也开始得以应用。茶多酚的提取工艺目前已有了相当的研究,其中溶剂萃取、金属离子沉淀是研究和报道较多的提取法，近几年来还有一些新的方法报道，如树脂吸附法、超临界流体萃取法、超声波浸提法、微波浸提法等。但是仅仅依靠一种萃取方法，容易造成提取效率低、茶多酚提取不完全，或是残留物、杂质较多的情况。且现有的茶多酚提取方法中，由于某些流程中采用加热或高温的方式，易造成茶多酚易氧化、茶叶或茶渣易糊化、提取物易一同提取出来，造成茶多酚纯度不高的技术问题。
以上背景技术内容的公开仅用于辅助理解本发明的发明构思及技术方案，其并不必然属于本专利申请的现有技术，在没有明确的证据表明上述内容在本专利申请的申请日已经公开的情况下，上述背景技术不应当用于评价本申请的新颖性和创造性。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是提供一种茶多酚的常温提取方法，采用渗漉法与树脂提取法相结合的方式，使体系保持在常温环境下进行茶多酚提取，避免茶多酚受破坏。
为了解决以上技术问题，本发明采用以下技术方案：
一种茶多酚的常温提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
a1：渗漉法提取：将鲜茶叶经清洗、灭酶后，使用乙醇溶剂，对茶叶中的茶多酚进行渗漉法提取；
a2：溶解：将步骤a1所得粗提取物使用15％正己烷和85％乙酸乙酯的混合溶液溶解；
a3：过滤：将步骤a2所得溶液经高速离心后，取清液；
a4：树脂提取：将步骤a3所得滤液经大孔吸附树脂吸附2次；
a5：洗脱：采用浓度为10％～95％的乙醇溶液，由低浓度到高浓度地对树脂洗脱，得到洗脱液；
a6：过滤：将步骤a4所得滤液先后经活性炭及ro膜过滤；
a7：浓缩：将步骤a5所得滤液抽真空，于30～40℃水浴条件下蒸去溶剂；
a8：将步骤a7所得物置于真空干燥箱中，在65～80℃下干燥2～4h。
2.根据权利要求1所述的茶多酚提取方法，其特征在于，步骤a1所述的渗漉法提取过程包括以下步骤：
b1：灭酶：将鲜茶叶经清洗后，晾干，再经微波加热灭酶；
b2：粉碎：将步骤b1所得脱水茶叶切割破碎；
b3：浸润：将步骤b2所得茶叶置有盖不锈钢桶内，按与茶叶质量比1:1加70％乙醇液搅拌均匀，湿润密闭放置1～3h，使茶叶充分膨胀；
b4：将渗漉筒底部滤板用纱布袋包裹铺平，将湿润膨胀后的茶叶拌松弄散，均匀的装入渗漉筒，保持每层茶叶高度为8～15cm，用t型棒压匀，再按上述操作逐层装入3～5层茶叶，加压；
b5：将步骤b4最上层茶叶饼加盖不锈钢孔板压牢，打开渗漉筒下面的放料阀，渗漉筒下方放一烧杯，缓慢加入70％乙醇液；
b6：待排出茶叶粉粒之间的空气，并有乙醇流出15～20l时，关闭放料阀，盖上漉筒，浸渍12～24h；
b7：开放料阀进行渗漉，控制渗漉速度为每1000g茶叶流速为3～5ml/min，收集渗漉液；
b8：将步骤b7所得渗漉液经减压旋转蒸发除去溶剂，即制成茶多酚粗提取物。
优选地，所述的茶多酚提取方法，步骤a3中的高速离心转速为8000～10000r/min，离心时间为15～30min。
优选地，所述的茶多酚提取方法，步骤a4中所述的大孔径树脂为60～90nm孔径、25％～40％孔度的d101b大孔吸附树脂。
优选地，所述的茶多酚提取方法，步骤a4中保持体系温度为15～25℃，流速为3.5～5.5bv/h。
优选地，所述的茶多酚提取方法，步骤a6中所述ro膜材质为醋酸纤维素膜或聚酰胺膜，孔径为1.5～1nm。
优选地，所述的茶多酚提取方法，步骤a6中所述活性炭目数为200～325目。
优选地，所述的茶多酚提取方法，步骤b1中微波加热的温度为200～300℃。
优选地，所述的茶多酚提取方法，步骤b2中用哑口颚式破碎机、锤式粉碎机、超微粉碎机中的一种进行破碎。
优选地，所述的茶多酚提取方法，步骤b4中施加压力为300～400kpa。
本发明具有以下有益效果：
(1)本发明采用渗漉法对茶多酚进行粗提取，体系温度低，提纯效率高；
(2)本发明采用大孔径树脂对茶多酚进行吸附提取，提取效果好，有害有机物残留少；
(3)本发明所述的茶多酚提取方法，所提纯的茶多酚纯度高。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明。应该强调的是，下述说明仅仅是示例性的，而不是为了限制本发明的范围及其应用。
实施例1：
一种茶多酚的常温提取方法，包括以下步骤：
b1：灭酶：将鲜茶叶经清洗后，晾干，再经微波在200℃下加热灭酶；
b2：粉碎：将步骤b1所得脱水茶叶用哑口颚式破碎机切割破碎；
b3：浸润：将步骤b2所得茶叶置有盖不锈钢桶内，按与茶叶质量比1:1加70％乙醇液搅拌均匀，湿润密闭放置1h，使茶叶充分膨胀；
b4：将渗漉筒底部滤板用纱布袋包裹铺平，将湿润膨胀后的茶叶拌松弄散，均匀的装入渗漉筒，保持每层茶叶高度为8cm，用t型棒压匀，再按上述操作逐层装入3层茶叶，加压至300kpa；
b5：将步骤b4最上层茶叶饼加盖不锈钢孔板压牢，打开渗漉筒下面的放料阀，渗漉筒下方放一烧杯，缓慢加入70％乙醇液；
b6：待排出茶叶粉粒之间的空气，并有乙醇流出15l时，关闭放料阀，盖上漉筒，浸渍12h；
b7：开放料阀进行渗漉，控制渗漉速度为每1000g茶叶流速为3ml/min，收集渗漉液；
b8：将步骤b7所得渗漉液经减压旋转蒸发除去溶剂，即制成茶多酚粗提取物。
a1：渗漉法提取：将鲜茶叶经清洗、灭酶后，使用乙醇溶剂，对茶叶中的茶多酚按b1～b8所述步骤进行渗漉法提取；
a2：溶解：将步骤a1所得粗提取物使用15％正己烷和85％乙酸乙酯的混合溶液溶解；
a3：过滤：将步骤a2所得溶液经8000r/min高速离心30min后，取清液；
a4：树脂提取：将步骤a3所得滤液经60nm孔径、25％孔度的d101b大孔吸附树脂吸附2次，保持体系温度为15℃，流速为3.5bv/h；
a5：洗脱：采用浓度为10％～95％的乙醇溶液，由低浓度到高浓度地对树脂洗脱，得到洗脱液；
a6：过滤：将步骤a4所得滤液先后经200目活性炭及孔径为0.5nm的醋酸纤维素ro膜过滤；
a7：浓缩：将步骤a5所得滤液抽真空，于30℃水浴条件下蒸去溶剂；
a8：将步骤a7所得物置于真空干燥箱中，在65℃下干燥4h。
实施例2
一种茶多酚的常温提取方法，包括以下步骤：
b1：灭酶：将鲜茶叶经清洗后，晾干，再经微波加热300℃下灭酶；
b2：粉碎：将步骤b1所得脱水茶叶采用锤式粉碎机切割破碎；
b3：浸润：将步骤b2所得茶叶置有盖不锈钢桶内，按与茶叶质量比1:1加70％乙醇液搅拌均匀，湿润密闭放置3h，使茶叶充分膨胀；
b4：将渗漉筒底部滤板用纱布袋包裹铺平，将湿润膨胀后的茶叶拌松弄散，均匀的装入渗漉筒，保持每层茶叶高度为15cm，用t型棒压匀，再按上述操作逐层装入3～5层茶叶，加压至400kpa；
b5：将步骤b4最上层茶叶饼加盖不锈钢孔板压牢，打开渗漉筒下面的放料阀，渗漉筒下方放一烧杯，缓慢加入70％乙醇液；
b6：待排出茶叶粉粒之间的空气，并有乙醇流出20l时，关闭放料阀，盖上漉筒，浸渍24h；
b7：开放料阀进行渗漉，控制渗漉速度为每1000g茶叶流速为5ml/min，收集渗漉液；
b8：将步骤b7所得渗漉液经减压旋转蒸发除去溶剂，即制成茶多酚粗提取物。
a1：渗漉法提取：将鲜茶叶经清洗、灭酶后，使用乙醇溶剂，对茶叶中的茶多酚经b1～b8所述的渗漉法提取；
a2：溶解：将步骤a1所得粗提取物使用15％正己烷和85％乙酸乙酯的混合溶液溶解；
a3：过滤：将步骤a2所得溶液经转速为10000r/min离心15min后，取清液；
a4：树脂提取：将步骤a3所得滤液经90nm孔径、40％孔度的d101b大孔吸附树脂吸附2次，保持体系温度为25℃，流速为5.5bv/h；
a5：洗脱：采用浓度为10％～95％的乙醇溶液，由低浓度到高浓度地对树脂洗脱，得到洗脱液；
a6：过滤：将步骤a4所得滤液先后经325目活性炭及孔径为1nm聚酰胺ro膜过滤；
a7：浓缩：将步骤a5所得滤液抽真空，于40℃水浴条件下蒸去溶剂；
a8：将步骤a7所得物置于真空干燥箱中，在80℃下干燥2h。
实施例3
一种茶多酚的常温提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
b1：灭酶：将鲜茶叶经清洗后，晾干，再经250℃微波加热灭酶；
b2：粉碎：将步骤b1所得脱水茶叶经超微粉碎机切割破碎；
b3：浸润：将步骤b2所得茶叶置有盖不锈钢桶内，按与茶叶质量比1:1加70％乙醇液搅拌均匀，湿润密闭放置2h，使茶叶充分膨胀；
b4：将渗漉筒底部滤板用纱布袋包裹铺平，将湿润膨胀后的茶叶拌松弄散，均匀的装入渗漉筒，保持每层茶叶高度为10cm，用t型棒压匀，再按上述操作逐层装入3～5层茶叶，加压至350kpa；
b5：将步骤b4最上层茶叶饼加盖不锈钢孔板压牢，打开渗漉筒下面的放料阀，渗漉筒下方放一烧杯，缓慢加入70％乙醇液；
b6：待排出茶叶粉粒之间的空气，并有乙醇流出17l时，关闭放料阀，盖上漉筒，浸渍18h；
b7：开放料阀进行渗漉，控制渗漉速度为每1000g茶叶流速为5ml/min，收集渗漉液；
b8：将步骤b7所得渗漉液经减压旋转蒸发除去溶剂，即制成茶多酚粗提取物。
a1：渗漉法提取：将鲜茶叶经清洗、灭酶后，使用乙醇溶剂，对茶叶中的茶多酚进行渗漉法提取；
a2：溶解：将步骤a1所得粗提取物使用15％正己烷和85％乙酸乙酯的混合溶液溶解；
a3：过滤：将步骤a2所得溶液经转速为9000r/min，离心20min后，取清液；
a4：树脂提取：将步骤a3所得滤液经80nm孔径、35％孔度的d101b大孔吸附树脂吸附2次,保持体系温度为20℃，流速为4bv/h；
a5：洗脱：采用浓度为10％～95％的乙醇溶液，由低浓度到高浓度地对树脂洗脱，得到洗脱液；
a6：过滤：将步骤a4所得滤液先后经250目活性炭及孔径为0.7nm的醋酸纤维素ro膜过滤；
a7：浓缩：将步骤a5所得滤液抽真空，于35℃水浴条件下蒸去溶剂；
a8：将步骤a7所得物置于真空干燥箱中，在75℃下干燥3h。
为详细说明本发明的有益效果，进一步提供了实验结果。
将等量、同产地、同品质鲜茶叶分别经三种常见常温或低温提取方法与本发明三个实施例所述提取方法进行茶多酚提取，三种常见提取方法所使用的材料与试验条件如下表所示。
检测并记录六种不同提纯条件下的茶多酚回收率、纯度等实数据，如下表所示。
由实验结果可见，相比乙醇-水溶液、超声波提取、生物酶-柱层析的常温或低温提取方法，采用本发明所述方法对鲜茶叶进行茶多酚提取，具有茶多酚回收率高、所制得茶多酚的多酚含量高、溶剂残留量低、茶多酚中咖啡因含量极少的优势。
以上内容不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明，对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明由所提交的权利要求书确定的专利保护范围。