一种芒果核多酚提取物及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种芒果核多酚提取物及其制备方法，属于食品技术及生物技术领域。本发明的芒果核多酚提取物以芒果核为原料，经过醇提取及大孔树脂纯化方法制备得到。本发明制备的芒果核多酚提取物具有显著的抑菌、抗氧化活性作用，可作为抗氧化保健品或药物而进一步研究开发。
【专利说明】
-种苦果核多齡提取物及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明设及一种芒果核多酪提取物及其制备方法，属于食品技术及生物技术领 域。
【背景技术】
[0002] 芒果（拉下学名：Mangifera indica Linn)，又称樣果、闷果、蜜望子等，属于漆树 科植物，主要生长于热带和亚热带沿海潮间带。芒果的种植分布很广，世界上有70多个国家 生产芒果，我国主要省份广西、广东、台湾、海南均有芒果种植，且芒果资源丰富、品种繁多。 2014年我国芒果种植面积为117万公顷，总产量达88万吨，是我国的大宗传统热带农产品， 出口创汇潜力巨大，在我国对外贸易中有重要的地位。
[0003] 芒果为著名热带水果之一，因其果肉细腻（肉质滑嫩、多汁）、风味独特（味道香 甜）、营养丰富（富含糖、蛋白质、粗纤维、维生素、矿物质及脂肪等），集热带水果精华于一 身，被誉为"热带水果之王"。芒果具有极高的药用价值，其果皮可入药，为利尿、竣下剂;核 仁和芒果叶也可入药，能解毒消滞、降压。据中医分析，芒果属于性平味甘、解渴生津的果 品，有益胃、止呕、防晕的功效。芒果中含有的芒果巧具有明显的抗过氧化、保护脑神经元和 桂疲止咳的功效。
[0004] 广西作为我国生产芒果为数不多的主要省份之一，更是具有芒果资源丰富，品种 繁多等优势，但是目前市场上主要还是W产地鲜销为主，少量加工成果汁、果脯W及果肉为 辅外，芒果深加工产业亟待需要进一步发展。在芒果生产加工中的废弃物，在过去常被丢弃 或者饲养牲畜。近年来，人们逐渐对芒果废弃物进行研究，包括芒果叶、芒果皮、芒果核、芒 果树皮等，尤其是占芒果总重20-60%的芒果核获得大部分研究者和企业家的关注。据报 道，芒果中化学成分种类繁多，主要W多酪为主，包括芒果巧、搬皮素、山奈酪、对径基苯甲 酸、间香豆酸、对香豆酸W及阿魏酸等，而大部分活性成分位于占芒果总重20-60%的芒果 核中。
[0005] 芒果核富含有氨基酸、多肤、蛋白质、酪类、黄酬、多糖、有机酸、皂巧、较质、黄酬、 蔥酿、生物碱、香豆素与内醋、Ξ祗及酱体、生物碱、挥发油及油脂等多种活性成分。
[0006] 近年来，我国围绕芒果核多酪类物质、黄酬类、化酬类、祗类等活性成分及其抑菌、 抗氧化功能进行的相关研究逐渐较多，但是也存在不少问题，主要有提取分离效果不明显， 鉴定获得的活性成分较少，活性成分抑菌、抗氧化作用等药理作用还不明确。
[0007] 现有的芒果核多酪提取方法，也存在提取的总多酪含量低，有机溶剂残留较多等 问题。
【发明内容】
[000引本发明的目的是充分利用自然资源，尤其是广西特色果蔬资源，提供一种芒果核 多酪提取物及其制备方法，该多酪提取物具有抑菌抗氧化性能，可用于保健品或者药物制 备。同时为了解决目前已有芒果核多酪提取方法存在的总多酪含量低、有机溶剂残留较多 的问题，本发明方法是经过醇提取及大孔树脂纯化方法制备芒果核多酪提取物。
[0009] 本发明的芒果核多酪提取物的制备方法，包括W下步骤：
[0010] (1)将芒果核干燥粉碎；
[0011] (2)用醇浓度20-90% (v/v)的乙醇溶液或甲醇溶液作为溶剂对步骤（1)中得到的 芒果核干燥粉末进行提取，然后将得到的提取液减压浓缩或真空冷冻干燥至浸膏；
[0012] (3)将步骤(2)中得到的浸膏用水、醇浓度小于50% (v/v)的乙醇溶液或者醇浓度 小于50% (v/v)的甲醇溶液溶解，除去不溶物，得到上样溶液；
[0013] (4)取非极性或弱极性大孔吸附树脂，将步骤(3)得到的上样溶液上样，先用水洗 去杂质，然后用洗脱剂(乙醇溶液或甲醇溶液)进行洗脱，收集洗脱液;所述大孔吸附树脂和 芒果核干燥粉末重量比为1:0.5-1:20;
[0014] (5)将步骤(4)收集的洗脱液减压浓缩或真空冷冻干燥，得到芒果核多酪提取物。
[0015] 在本发明的一种实施方式中，步骤(2)中提取方法为每千克芒果核粉末加入2-50L 醇浓度为30%-80%的乙醇溶液或甲醇溶液，热回流或浸溃或浸漉提取2-5次，热回流提取 时每次提取1-化，浸溃或浸漉提取时每次提取10-15天，合并提取液。
[0016] 在本发明的一种实施方式中，所述步骤(2)的提取，是将芒果核粉末Wl〇-95%(v/ V，下同）的乙醇提取，优选乙醇浓度为20%-80%，最优选为40%-60%。
[0017] 在本发明的一种实施方式中，所述步骤(2)的提取，是将芒果核粉末W乙醇提取次 数1-4次，最优选为2-3次。
[0018] 在本发明的一种实施方式中，所述步骤(2)的提取，料液比（芒果核粉末质量与乙 醇溶液之比，m/v)为1:1-1:40，优选1:5-1:30，更优选地为1:15-1:25。
[0019] 在本发明的一种实施方式中，所述步骤(2)的提取，每次提取时间为0.5-4h，优选 提取时间为1-化。
[0020] 在本发明的一种实施方式中，所述步骤(2)的提取，是在40-60°C下进行。
[0021] 在本发明的一种实施方式中，所述步骤(2)具体工艺条件是：乙醇浓度70%，料液 比1:25，提取溫度60°C，提取时间120min。
[0022] 在本发明的一种实施方式中，所述步骤(3)中浸膏的溶解所用的水、乙醇溶液或者 甲醇溶液的重量为浸膏重量的3-50倍。
[0023] 在本发明的一种实施方式中，步骤(3)的提取方法如下：将步骤(2)中得到的浸膏 用10倍浸膏重量的水或者10%乙醇溶液溶解，除去不溶物后得到上样溶液。
[0024] 在本发明的一种实施方式中，步骤(3)的除去不溶物，是采用过滤或离屯、的方法。
[0025] 在本发明的一种实施方式中，步骤(4)的大孔吸附树脂的类型选用册0-722、册0- 826、1^(-17、^(-26、1^(-28、5?70、5?700^8-8、0121或者0101，优选大孔树脂48-8、0121、 D101，更优选地为AB-8。
[0026] 在本发明的一种实施方式中，步骤(4)中的先用水洗去杂质，是指用2-5BV的水进 行洗脱W除去杂质。
[0027] 在本发明的一种实施方式中，所述步骤(4)的洗脱流速为洗脱液流速1BVA-10BV/ h，优选为 2BV/h-5Bv/h。
[0028] 在本发明的一种实施方式中，所述步骤(4)中洗脱剂乙醇溶液或者甲醇溶液的浓 度为5 %-95 %，优选为20 %-80% ;洗脱剂的洗脱体积为1-10倍柱体积，优选为3-8个柱体 积。
[0029] 在本发明的一种实施方式中，所述步骤(4)，是使用醇浓度为40-70%的乙醇溶液 进行洗脱。
[0030] 在本发明的一种实施方式中，步骤(4)的纯化方法如下:取与芒果核粉重量之比为 1:5的弱极性大孔树脂，将步骤(3)中得到的上样溶液上样，采用2-5BV的水洗去杂质，后采 用3-10BV的50%乙醇溶液进行洗脱，收集50%的乙醇溶液洗脱得到的洗脱液。
[0031] 在本发明的一种实施方式中，所述步骤(4)中，芒果核多酪提取液的上样量(芒果 核粉末质量:树脂质量)为0.5:1-20:1，优选1:1-10:1。
[0032] 在本发明的一种实施方式中，所述方法是乙醇溶液加热回流提取芒果核多酪， 回收乙醇，浓缩，将芒果核多酪提取液吸附到大孔树脂上、洗脱、收集洗脱液、浓缩、干燥，获 得纯化的芒果核多酪。
[0033] 在本发明的一种实施方式中，所述方法具体是：（1)将芒果核干燥粉碎；（2)砰取芒 果核粉末1kg加入20L浓度为50%的乙醇溶液，热回流提取Ξ次，热回流提取每次化，合并提 取液，提取液减压浓缩汁浸膏；（3)浸膏用浸膏重量10倍的水溶解，过滤出去不溶物，得到上 样溶液；（4)将上样溶液上柱，控制流出液流速为0.5BVA，上样量与树脂AB-8体积比为2:1， 至提取液全部进入树脂床;采用2-5BV的水进行洗脱，W除去杂质，然后用3-10BV的40~ 60 %乙醇溶液冲洗树脂床，控制流出液流速2BVA，收集乙醇溶液的洗脱液；（5)将收集的洗 脱液减压浓缩至一定体积，进行喷雾干燥，即得纯化产物。
[0034] 本发明还要求保护按照所述制备方法或者纯化方法得到的芒果核多酪提取物在 制备食品、保健品或药物上的应用。
[0035] 所述保健品或药物，是具有抑菌抗氧化活性的保健品或药物。
[0036] 本发明的有益效果：
[0037] 1、本发明通过对芒果核多酪提取步骤进行改进，有效提高了多酪物质的提取效 率，得到的提取液中多酪含量可达18-20.9mg/g(即1kg芒果核干燥粉末中可提取得到18- 20.9g多酪）。而且，本发明方法W水或者乙醇为溶剂，既廉价又无毒。
[0038] 2、本发明采用大孔树脂纯化的方法进一步对提取液进行纯化，该纯化方法操作简 便、快捷，选用的大孔树脂具有吸附量大、解吸率大的特点，有效去除了提取液的杂质，防止 了有机溶剂残留的问题。
[0039] 3、按照本发明方法得到的芒果核多酪提取物，产量可达3.6-20.9mg/g，得到的多 酪提取物对径基和超氧自由基阴离子具有明显的清除作用。
【附图说明】
[0040] 图1为没食子酸标准曲线图；
[0041 ]图2为芒果核多酪提取物对径基的清除作用；
[0042] 图3为芒果核多酪提取物对超氧自由基阴离子的清除作用；
[0043] 图4为芒果核多酪提取物对DPK1的清除作用。
【具体实施方式】
[0044] 下面结合实施例对本发明的技术内容做进一步说明，下述实施例是说明性的，不 是限定性的，不能w下述实施例来限定本发明的保护范围。
[0045] 各实施例中使用的一起设备、化学试剂W及检测方法如下：
[0046] 仪器与设备:FW100高速万能粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司；UPC-n-20T优 普系列超纯水器，四川优普超纯科技有限公司；SQP电子天平，赛多利斯科学仪器(北京)有 限公司；ZWYR-D2403振荡培养箱，上海智诚分析仪器制造有限公司；SHZ-D虹予华牌循环水 真空累，巩义市予华仪器有限责任公司;皿S-6S电子恒溫不诱钢水浴锅，上海宜昌仪器纱筛 厂;UV1901PC紫外可见分光光度计，上海奥析科学仪器有限公司；
[0047] 化学试剂：无水碳酸钢、甲醇、乙醇、丙酬、乙酸乙醋、福林酪试剂、没食子酸标准 品、各种类型大孔树脂等均由柳州苏利有限责任公司提供。
[0048] 测定：
[0049] 没食子酸标准曲线的建立:准确称取50mg没食子酸，用70%乙醇溶液定容至50ml， 即得浓度为1. Omg/ml没食子酸标准溶液。取9支50ml容量瓶，分别移取0、1、2、3、4、5、7.5、 10、12.51111上述没食子酸标准溶液，将其稀释后配成0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10、0.15、 0.20、0.25mg/ml的标准液。用福林法测定吸光度值。W没食子酸浓度为横坐标，765nm处的 吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，并进行回归分析。福林酪法测定总酪的标准曲线（图1)。 结果表明，没食子酸在浓度0-0.25mg/ml内与其吸光值呈良好的线性关系，在此范围内的线 性回归方程为:y = 4.2974X+0.056，r2 = 0.9994。
[0050] 总酪含量的测定:准确移取待测液2.0ml于50ml容量瓶中，加入福林试剂1.0ml，充 分混合后静置2min，加入10ml 7%的碳酸钢溶液，充分混合后用蒸馈水定容，置30°C恒溫水 浴中反应化，不断振荡。取出，在波长765nm处测定吸光度值蒸馈水为空白对照）。根据标 准曲线及其回归方程求出待测液中的多酪含量，然后计算出Ig芒果核干燥破碎后的粉末样 品中多酪类物质的含量(W没食子酸计，mg/g，即多酪含量mg/芒果核粉末g)。
[0051] 抗氧化活性的测定：
[0052] 清除径基自由基能力测定:分别取不同质量浓度的待测样液于5只试管中，各加入 硫酸亚铁、双氧水，静置aOmin后加入水杨酸，静置后在510nm处测定吸光度Ai，用蒸馈水替 代水杨酸按照上述方法测定吸光度值A2,用蒸馈水代替待测液按上述方法测定吸光度值Ao， Vc做对照，按照下列公式求多酪物质对径自由基的清除率:径自由基（％) = [A0-(A广A2)]/ (Ao)*100(%)。
[0053] 清除超氧阴离子自由基能力测定：取4.5ml化is-HCl缓冲溶液，于20°C水浴中预 热20min，分别加入1ml不同浓度的样品液和0.4ml 25mmol/L的邻苯Ξ酪溶液，混匀后，于25 °C水浴中反应5min，然后加入8mol/L的HC1溶液1ml终止反应，然后在325nm处测定吸光度 Ai，空白W蒸馈水代替样品液，测定吸光度Ao。样品对超氧阴离子自由基的清除率:清除率 (%) = (l-Ai/Ao)*100(%)。
[0054] DPPH清除能力测定:分别取2.0血不同质量浓度（1.0、5.0、！0.0、15.0、芒果核活性 成分样液于5只试管中，各加入2mL DPPH(0.04mg/ml)，静置20min在517皿检测吸光度Ai; W 无水乙醇代替DPPH，按照上述方法测定吸光度A2 ;做空白组按上述方法测定吸光度Ao，WVc 做对照，样品对DPPH自由基的清除率:DPPH清除率（％ ) = [1-(Ai-A2)/A0]*100( % )。
[0055] 实施例1:本发明的芒果核多酪提取物的制备方法
[0056] (1)芒果核多酪提取:芒果核干燥粉碎，砰取芒果核粉末1kg加入20L浓度为50 %的 乙醇，热回流提取Ξ次，热回流提取每次Ih，合并提取液，提取液减压浓缩汁浸膏，浸膏用浸 膏重量10倍的水溶解，过滤出去不溶物，得到上样溶液，总多酪含量为18-20.9g/kg芒果核 粉末。
[0057] (2)上柱:将芒果核多酪提取液上柱，控制流出液流速为0.5BV/h，上样量与树脂 AB-8体积比为2:1，至提取液全部进入树脂床。
[0化引（3)洗脱:采用2-5BV的水进行洗脱，W除去杂质，后分别采用3-10BV的5%-80%乙 醇冲洗树脂床，控制流出液流速2BVA，收集洗脱液，分别减压浓缩至一定体积，进行喷雾干 燥，即得不同组分的纯化产物，其中全部组分总多酪含量约为20.9g/kg，纯化产物中，水洗 脱液中多酪含量约为2.2g/kg，5 %乙醇洗脱液中多酪含量约为3.8g/kg，10 %乙醇洗脱液中 多酪含量约为4.8g/kg，20 %乙醇洗脱液中多酪含量约为8.04g/kg，30 %乙醇洗脱液中多酪 含量约为8.5g/kg，40 %乙醇洗脱液中多酪含量约为13.3g/kg，50 %乙醇洗脱液中多酪含量 约为15.2g/kg，60 %乙醇洗脱液多酪中含量约为13.7g/kg，70 %乙醇洗脱液中多酪含量约 为11. Ig/kg，80%乙醇洗脱液中多酪含量约为9.9g/kg。
[0059] 实施例2:选用不同条件进行提取
[0060] 采用本发明提供的方法，选用不用条件进行芒果核多酪(样品为芒果核干燥粉碎 Ig)提取实验，在单因素试验基础上，选取乙醇浓度、料液比、提取时间和提取溫度四个主要 因素做L9(34)正交试验(表1)，正交结果分析如表2。
[0061 ]表1芒果核多酪提取工艺正交试验表头设计
[0(?日]表3芒果核多酪提取验证试验 [0066]
[0067]由表2可知，各因素对芒果核多酪提取影响大小顺序为:B〉A〉D〉C，即料液比〉乙醇 浓度〉提取时间〉提取溫度，其中料液比对芒果核多酪提取影响最显著，其次是乙醇浓度和 提取时间，影响显著性一样，提取溫度对芒果核多酪提取影响最不显著。由正交试验结果可 W得出最佳试验组合为A3B3C3D3，即乙醇浓度70%，料液比1: 25，提取溫度60°C，提取时间 120min。并不是正交表的组合中，所W需要做验证试验(表3)，由验证试验结果可知多酪的 提取含量是5.36mg/g，所W芒果核多酪提取的最佳工艺条件为乙醇浓度70%，料液比1:25， 提取溫度60 °C，提取时间120min。
[006引实施例3:大孔树脂纯化工艺
[0069] 选取不同树脂种类、样液浓度、吸附速率、上样量、乙醇洗脱浓度、洗脱速率等因素 分别进行单因素试验，确定各因素的最佳值。
[0070] 上样液制备:砰取芒果核粉末20g，按照乙醇浓度70 %，料液比1: 25，提取溫度60 °C，每次提取化，提取3次，提取后滤液合并，减压浓缩至干，真空干燥至恒重，精密砰取干膏 适量，W甲醇或乙醇溶液溶于10ml容量瓶中，加甲醇或乙醇溶液稀释至刻度，摇匀备用。移 取1ml滤液至10ml容量瓶，加甲醇或乙醇溶液稀释至刻度，摇匀。按照上述方法测定多酪的 含量。
[0071] 静态吸附：取10种经过预处理好的大孔吸附树脂各lOg，各加入芒果核多酪溶液 10ml，每lOmin振摇一次，2h后分别各取树脂吸附后的溶液测定多酪含量，计算各树脂对芒 果核多酪的吸附率。
[0072] 静态解吸：
[0073] 将静态吸附的树脂过滤抽干，加30ml 50%乙醇解吸，每lOmin振摇一次，化后分别 各取树脂吸附后的溶液测定多酪含量，计算各树脂对芒果核多酪的解吸率。见表4。从表中 可W看出，10种树脂的吸附率都较大(大于90%)，解吸率都大于40%，其中AB-8、DM21、D101 的解吸率都大于60%，选取AB-8、DM21、D101做动态吸附实验。
[0074] 表4大孔树脂对芒果核多酪的吸附与解吸率
[0075]
[0076] 动态吸附：
[0077] 取处理好的静态吸附优选巧巾树脂AB-8、DM21、D101各15mL于柱内，加芒果核多酪 提取液于柱顶，W0.5BVA的流速进行动态吸附，按照树脂体积流出收集流出液，测定多酪 含量，计算各树脂对芒果核多酪的吸附率。结果见表5,表明AB-8和D101达到饱和吸附时，所 吸附的总多酪量较DM21大，选取其做解吸实验。
[0078] 表5大孔树脂对芒果核多酪的动态吸附结果
[0079]
[0080] 动态解吸:取处理好的AB-8和D101树脂各20ml于柱内，分别加芒果核多酪提取液 (10.5mg/g)于柱顶，W0.5BV/h的流速进行吸附后，用60%乙醇W2BV/h的流速进行洗脱，按 照树脂体积流出收集洗脱液，测定多酪含量，计算各树脂对芒果核多酪的吸附率。结果见表 6,可W看出AB-8比D101解吸效果好，选取其作为最佳树脂。
[0081 ]表6大孔树脂对芒果核多酪的动态解吸结果
[0082]
[0083] 乙醇浓度:取10份处理好的AB-8树脂20ml于柱内，加芒果核多酪提取液于柱顶，W 0.5BV/h的流速进行吸附后，再分别用5BV的水、5 %、10 %、20 %、30 %、40 %、50 %、60 %、 70%、80%乙醇W2BVA流速进行单独洗脱，按照树脂体积流出收集洗脱液，测定多酪含量， 结果见表7，可W看出，当乙醇洗脱浓度为40 %-70 %时，洗脱总多酪得率最高。
[0084] 表7乙醇洗脱浓度考察
[0085]
[0086] 实施例4:芒果核多酪提取物的制备方法
[0087] 将芒果核干燥粉碎，砰取芒果核粉末1kg加入20L浓度为50 %的乙醇，热回流提取 Ξ次，热回流提取每次化，合并提取液，提取液减压浓缩汁浸膏，浸膏用浸膏重量10倍的水 溶解，过滤出去不溶物，得到上样溶液，总多酪含量为18-20.9g/kg。
[0088] 将芒果核多酪提取液上柱，控制流出液流速为0.5BVA，上样量与树脂AB-8体积比 为2:1，至提取液全部进入树脂床。采用2-5BV的水除去杂质，然后采用3-10BV的50%乙醇冲 洗树脂床，控制流出液流速2BVA，收集洗脱液，分别减压浓缩至一定体积，进行喷雾干燥， 即得纯化产物，多酪含量为14-15.2邑/1^。
[0089] 实施例5:芒果核多酪提取物的制备方法
[0090] 将芒果核干燥粉碎，砰取芒果核粉末1kg加入20L浓度为50 %的乙醇，热回流提取 Ξ次，热回流提取每次化，合并提取液，提取液减压浓缩汁浸膏，浸膏用浸膏重量10倍的水 溶解，过滤出去不溶物，得到上样溶液，总多酪含量为18-20.9g/kg。
[0091] 将芒果核多酪提取液上柱，控制流出液流速为0.5BVA，上样量与树脂AB-8体积比 为2:1，至提取液全部进入树脂床。采用2-5BV的水除去杂质，然后采用3-10BV的40%乙醇冲 洗树脂床，控制流出液流速2BVA，收集洗脱液，分别减压浓缩至一定体积，进行喷雾干燥， 即得纯化产物，多酪含量为12-13.3g/kg。
[0092] 实施例6:芒果核多酪提取物的制备方法
[0093] 将芒果核干燥粉碎，砰取芒果核粉末1kg加入20L浓度为50 %的乙醇，热回流提取 Ξ次，热回流提取每次化，合并提取液，提取液减压浓缩汁浸膏，浸膏用浸膏重量10倍的水 溶解，过滤出去不溶物，得到上样溶液，总多酪含量为18-20.9g/kg。
[0094] 将芒果核多酪提取液上柱，控制流出液流速为0.5BVA，上样量与树脂AB-8体积比 为2:1，至提取液全部进入树脂床。采用2-5BV的水除去杂质，然后采用3-10BV的70%乙醇冲 洗树脂床，控制流出液流速2BVA，收集洗脱液，分别减压浓缩至一定体积，进行喷雾干燥， 即得纯化产物，多酪含量为10-11.1 g/kg。
[00M]实施例7:本发明方法得到的芒果核多酪提取物的抗菌抗氧化性能
[0096] 抑菌效果的测定：
[0097] 将供试菌株于斜面培养基上活化，用接种环挑取环1-2环于50mL无菌生理盐水Ξ 角瓶中振荡lOmin(内有数粒玻璃珠），要求菌悬液约10化即/mL左右备用。称取一定量真空 冷冻干燥的实施例4-6得到的芒果核多酪提取物样品，在超净工作台上用无菌的40%乙醇 水溶液溶解样品至所需的浓度，备用。新鲜配制的培养基基于12rC条件下灭菌，当培养基 冷至50-60°C时，于超净工作台上将培养基倒入灭菌的090mm的培养皿中，每皿15-20mL培 养基，待平板冷却后，每皿中加入0.5mL菌悬液，用Ξ角玻璃涂棒均匀涂成薄板备用。将无菌 滤纸片浸入配好的药液其中12h，渐干。每一含菌平板上，呈正Ξ角形排布3片带药无菌纸 片，细菌于37°C条件下培养2地，啤酒酵母和黑曲霉于30°C条件下培养5d，测其抑菌圈直径。 根据抑菌圈大小来确定其抑菌效果。W不加芒果核多酪溶液只加菌悬液为对照。结果显示， 本发明得到的芒果核多酪提取物具有强烈的抑菌效果。
[0098] 芒果核多酪物质抗氧化活性研究：
[0099] 径基是活性最强的活性氧化自由基，会诱发机体产生氧化损伤，其清除率常常是 反应药物抗氧化作用的重要指标。同样的，超氧阴离子也是生物体主要的活性氧自由基，由 其引起的体内脂质过氧化是机体衰老、屯、血管疾病及肿瘤发生的重要原因。芒果核多酪径 基自由基清除能力如图2所示，清除能力随着多酪浓度增加而增加，当芒果核多酪的浓度达 到0.6mg/ml时清除率能达到约90%，说明芒果核多酪具有较强的清除径基自由基作用。芒 果核多酪超氧阴离子自由基清除能力如图3所示，芒果核多酪的浓度越高，清除超氧阴离子 自由基的能力越强，当芒果核多酪的浓度达到0.5-0.6mg/mL，清除能力趋于平稳，清除率达 到83%，但是清除能力较Vc弱些。芒果核多酪提取物DPPH自由基清除能力结果如图4所示， 清除能力随着多酪浓度增加而增加，当浓度达到〇.6mg/mLW上时，其对DPPH自由基的清除 率能达到90%，说明芒果核多酪具有较强的清除DPPH自由基作用。W上数据说明芒果果核 多酪对径基自由基W及超氧阴离子自由基均具有较好的清除能力，研究结果将为芒果核资 源的综合利用及其相应的功能性食品开发提供参考借鉴。
[0100] W上通过实施例对本发明的内容进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳 实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的 精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该W权利要求书所界 定的为准。
【主权项】
1. 一种芒果核多酚提取物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： (1) 将芒果核干燥粉碎； (2) 用醇浓度20-90%v/v的乙醇溶液或甲醇溶液作为溶剂对步骤（1)中得到的芒果核 干燥粉末进行提取，然后将得到的提取液减压浓缩或真空冷冻干燥至浸膏； (3) 将步骤（2)中得到的浸膏用水、醇浓度小于50%v/v的乙醇溶液或者醇浓度小于 50 % v/v的甲醇溶液溶解，除去不溶物，得到上样溶液； (4) 取非极性或弱极性大孔吸附树脂，将步骤(3)得到的上样溶液上样，先用水洗去杂 质，然后用洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液;所述大孔吸附树脂和芒果核干燥粉末重量比为1: 0.5-1:20； (5) 将步骤(4)收集的洗脱液减压浓缩或真空冷冻干燥，得到芒果核多酚提取物。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)的大孔吸附树脂为AB-8、DM21 或者D101。3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)的洗脱剂为浓度5%-95%v/v 的乙醇溶液或者甲醇溶液;洗脱剂的洗脱体积为1-10倍柱体积。4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)的洗脱剂为醇浓度为40-70 % 的乙醇溶液。5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中提取方法为每千克芒果核 粉末加入2-50L醇浓度为30 %-80 %的乙醇溶液或甲醇溶液，热回流或浸渍或浸漉提取2-5 次，热回流提取时每次提取l_3h，浸渍或浸漉提取时每次提取10-15天，合并提取液。6. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)的提取是在40-60°C下进行， 提取次数1-4次、每次提取时间为0.5-4h、料液比为1:1-1:40。7. 根据权利要求1-6任一所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)具体是:取与芒果核粉 重量之比为1:5的弱极性大孔树脂，将步骤(3)中得到的上样溶液上样，采用2-5BV的水洗去 杂质，后采用3-10BV的50 %乙醇溶液进行洗脱，收集50 %的乙醇溶液洗脱得到的洗脱液。8. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法具体是：（1)将芒果核干燥粉碎； (2)秤取芒果核粉末lkg加入20L浓度为50 %的乙醇溶液，热回流提取三次，热回流提取每次 lh，合并提取液，提取液减压浓缩汁浸膏；（3)浸膏用浸膏重量10倍的水溶解，过滤出去不溶 物，得到上样溶液；（4)将上样溶液上柱，控制流出液流速为0.5BV/h，上样量与树脂AB-8体 积比为2:1，至提取液全部进入树脂床;采用2-5BV的水进行洗脱，以除去杂质，然后用3-10BV的40~60%乙醇溶液冲洗树脂床，控制流出液流速2BV/h，收集乙醇溶液的洗脱液；（5) 将收集的洗脱液减压浓缩至一定体积，进行喷雾干燥，即得纯化产物。9. 根据权利要求1所述的方法得到的芒果核多酚提取物。10. 权利要求9所述的芒果核多酚提取物在制备食品、保健品或药物上的应用。
【文档编号】A23L33/105GK105998109SQ201610471546
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年6月24日
【发明人】康超, 罗杨合, 李燕, 伍淑捷, 帅良, 覃盛, 李菁, 苏时旭
【申请人】贺州学院