一种石榴皮多酚的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种高纯度石榴皮多酚的制备方法，按如下步骤：1)将石榴皮冲洗、干燥、粉碎成粉末；2)将石榴皮粉末加入到乙醇水溶液中，经超声波辅助提取；3)再经水浴回流浸提，然后真空旋转蒸发回收乙醇，取上层清液得多酚粗提液一；4)在多酚粗提液一中加入无水乙醇，配置混合液乙醇浓度至80％?90％；5)真空旋转蒸发回收乙醇，取上层清夜得多酚粗提液二；6)调节多酚粗提液二的pH至2?4；7)吸附在大孔吸附树脂柱上；8)吸附好的树脂先用水洗净树脂，再用乙醇进行洗脱，所得的提纯液放入干燥箱中干燥后得到多酚提取粉末。本发明能制得90％以上纯度的石榴皮多酚，显著提高了多酚提取的纯度，有利于石榴皮多酚更有效地应用于医药和食品工业领域。
【专利说明】
一种石榴皮多酚的制备方法
技术领域
[0001]本发明属于植物提取技术领域，具体涉及一种从石榴皮中提取高纯度石榴皮多酚的方法。
【背景技术】
[0002]石榴(Punicagranatum)为石榴科石榴属落叶灌木或小乔木植物。石榴含有丰富的多酚类物质，其含量和组成成分主要集中于石榴皮。石榴皮多酚是石榴皮中多酚羟基化合物的总称，占石榴皮干重量的10 %?20 %，其主要组分为安石榴苷、没食子酸、表儿茶素、绿原酸等。石榴皮多酚作为石榴皮中一种重要的生理活性成分，具有抗氧化、抗菌、抗突变、抗癌和降血脂等生物学功效，在医药、食品、精细化工等领域有巨大的应用价值。
[0003]目前，国内外对石榴皮的研究均主要集中在有效成分的抗氧化作用及其产生的药理活性、药效及作用机制方面。相关药效试验已经证明，石榴皮多酚含量与其生物活性呈明显的正相关性。而目前的石榴皮中多酚类成分的制备工艺，提纯得到的石榴皮多酚提取物，纯度一般只有70%左右，这严重限制了石榴皮多酚的开发与应用。
【发明内容】
[0004]本发明旨在为石榴资源的综合利用和新药研发提供基础条件，提供了一种高纯度石榴皮多酚的制备方法，其能够制得90%以上纯度的石榴皮多酚，显著提高了多酚提取的纯度，有利于石榴皮多酚更有效地应用于医药和食品工业等领域。
[0005]本发明通过如下技术方案实现:
[0006]—种高纯度石榴皮多酚的制备方法，其按如下步骤:
[0007]I)将石榴皮冲洗、干燥、粉碎成粉末；
[0008]2)将石榴皮粉末加入到乙醇水溶液中，经超声波辅助提取；
[0009]3)再经水浴回流浸提，然后真空旋转蒸发回收乙醇，取上层清液得多酚粗提液一；
[0010]4)在多酚粗提液一中加入无水乙醇，配置混合液乙醇浓度至80%-90% ;
[0011]5)真空旋转蒸发回收乙醇，取上层清夜得多酚粗提液二；
[0012]6)调节多酚粗提液二的pH至2-4;
[0013]7)吸附在大孔吸附树脂柱上；
[0014]8)吸附好的树脂先用水洗净树脂，再用乙醇进行洗脱，所得的提纯液放入干燥箱中干燥后得到多酚提取粉末。
[0015]优选的，步骤I)，粉碎成粉末后过40-50目筛。
[0016]优选的，步骤2)，乙醇水溶液的浓度为60-65%，石榴皮粉末与乙醇的体积比1:20。
[0017]优选的，步骤2)，超声波辅助提取25-3511^11，温度35-45°(:，功率360?，频率421^^。
[0018]优选的，步骤3)，浸提温度为60-70°C，浸提3次，每次2-2.5h。
[0019]优选的，步骤3)，真空旋转蒸发回收乙醇:离心5-10min，离心功率为4000r/min。
[0020]优选的，步骤4)，放置10-12h。
[0021]优选的，步骤4)，在多酚粗提液一中加入无水乙醇，配置混合液乙醇浓度至80%-90%。
[0022]优选的，步骤5)，真空旋转蒸发回收乙醇:离心15-20min，离心功率为4000r/min。
[0023]优选的，步骤7)，以6BV/h吸附速率吸附在大孔吸附树脂柱上，上柱量为4BV。
[0024]优选的，步骤7)，大孔吸附树脂柱可以是HPD-400型大孔吸附树脂柱，径高比为1:6。
[0025]优选的，步骤8)，吸附好的树脂先用4BV水以4-6BV/h的流速洗净树脂，再用6BV的60-80%浓度乙醇进行洗脱，所得的提纯液放入干燥箱中干燥10-12h后得到多酚提取粉末。
[0026]本发明创造性地提出在现有常规工艺的基础上，在浓缩的石榴皮多酚提取液中加入无水乙醇，结果有效去除了石榴皮多酚提取液中的大分子蛋白和多糖类物质，显著地提高了石榴皮多酚提取物的纯度，经试验测得，本发明能制得90%以上纯度的石榴皮多酚，为石榴皮多酚更有效地应用于医药、食品和精细化工等行业创造了条件。
【具体实施方式】
[0027]为了使本发明的目的、技术方案、积极效果更加清楚明白，通过以下实施例对本发明进行进一步详细说明。以下对于具体实施方案的描述仅用于解释本发明，并不限定本发明。
[0028]实施例1:
[0029]—种高纯度石榴皮多酚的制备方法，其按如下步骤:
[0030]I)将石榴皮冲洗、干燥、粉碎成粉末后过50目筛；
[0031]2)将石榴皮粉末加入到浓度为60%的乙醇水溶液中，石榴皮粉末与乙醇的体积比(111:￥=1:20)，经超声波辅助提取301^11，温度40°(:，功率36(^，频率42诎2;
[0032]3)再经水浴回流浸提，浸提温度为70°C，浸提3次，每次2.5h，然后真空旋转蒸发回收乙醇，离心5min，离心功率为4000r/min，取上层清液得多酸粗提液I ；
[0033]4)在多酚粗提液I中加入无水乙醇，配置混合液乙醇浓度至85%，放置12h;
[0034]5)真空旋转蒸发回收乙醇，离心20min，离心功率为4000r/min，取上层清夜得多酚粗提液2 ；
[0035]6)调节多酚粗提液2的pH至2.0;
[0036]7)以6BV/h吸附速率吸附在径高比为1:6的HPD-400型大孔吸附树脂柱上，上柱量为4BV(树脂床体积)；
[0037]8)吸附好的树脂先用4BV水，以5BV/h的流速洗净树脂，再用6BV的70%浓度乙醇进行洗脱，所得的提纯液放入干燥箱中干燥12h后得到多酚提取粉末。
[0038]上述实施例中制备的石榴皮多酚，纯度达到94%。
[0039]实施例2:
[0040]一种高纯度石榴皮多酚的制备方法，其按如下步骤:
[0041 ] I)将石榴皮冲洗、干燥、粉碎成粉末后过50目筛；
[0042]2)将石榴皮粉末加入到浓度为60%的乙醇水溶液中，石榴皮粉末与乙醇的体积比(111:￥=1:20)，经超声波辅助提取301^11，温度40°(:，功率36(^，频率42诎2;
[0043]3)再经水浴回流浸提，浸提温度为70°C，浸提3次，每次2.5h，然后真空旋转蒸发回收乙醇，离心20min，离心功率为4000r/min，取上层清液得多酚粗提液I ；
[0044]4)在多酚粗提液I中加入无水乙醇，配置混合液乙醇浓度至85%，放置12h;
[0045]5)真空旋转蒸发回收乙醇，离心20min，离心功率为4000r/min，取上层清夜得多酚粗提液2 ；
[0046]6)调节多酚粗提液2的pH至3.0;
[0047]7)以6BV/h吸附速率吸附在径高比为1:6的HPD-400型大孔吸附树脂柱上，上柱量为4BV(树脂床体积)；
[0048]8)吸附好的树脂先用4BV水，以5BV/h的流速洗净树脂，再用6BV的60 %浓度乙醇进行洗脱，所得的提纯液放入干燥箱中干燥12h后得到多酚提取粉末。
[0049]上述实施例中制备的石榴皮多酚，纯度达到93%。
[0050]以上列举仅为本发明的若干具体实施例。本发明并不限于以上实施例，从本发明公开内容直接导出或联想变形所得的制备方法，均应认为是本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种高纯度石榴皮多酚的制备方法，其按如下步骤: 1)将石榴皮冲洗、干燥、粉碎成粉末； 2)将石榴皮粉末加入到乙醇水溶液中，经超声波辅助提取； 3)再经水浴回流浸提，然后真空旋转蒸发回收乙醇，取上层清液得多酚粗提液一； 4)在多酚粗提液一中加入无水乙醇，配置混合液乙醇浓度至80% -90 % ; 5)真空旋转蒸发回收乙醇，取上层清夜得多酚粗提液二； 6)调节多酚粗提液二的pH至2-4; 7)吸附在大孔吸附树脂柱上； 8)吸附好的树脂先用水洗净树脂，再用乙醇进行洗脱，所得的提纯液放入干燥箱中干燥后得到多酚提取粉末。2.如权利要求1所述的高纯度石榴皮多酚的制备方法，其特征是:步骤I)，粉碎成粉末后过40-50目筛。3.如权利要求1所述的高纯度石榴皮多酚的制备方法，其特征是:步骤2)，乙醇水溶液的浓度为60-65%，石榴皮粉末与乙醇的体积比1:20;和/或，超声波辅助提取25-35min，温度35-45 °C，功率360w，频率42kHz。4.如权利要求1所述的高纯度石榴皮多酚的制备方法，其特征是:步骤3)，浸提温度为60-700C，浸提3次，每次2-2.5h;和/或，真空旋转蒸发回收乙醇:离心5_10min，离心功率为4000r/mino5.如权利要求1所述的高纯度石榴皮多酚的制备方法，其特征是:步骤4)，放置10-12h。6.如权利要求1或5所述的高纯度石榴皮多酚的制备方法，其特征是:步骤4)，在多酚粗提液一中加入无水乙醇，配置混合液乙醇浓度至80%-90%。7.如权利要求1所述的高纯度石榴皮多酚的制备方法，其特征是:步骤5)，真空旋转蒸发回收乙醇:离心15_20min，离心功率为4000r/min。8.如权利要求1所述的高纯度石榴皮多酚的制备方法，其特征是:步骤7)，以6BV/h吸附速率吸附在大孔吸附树脂柱上，上柱量为4BV。9.如权利要求1或8所述的高纯度石榴皮多酚的制备方法，其特征是:步骤7)，大孔吸附树脂柱是HPD-400型大孔吸附树脂柱，径高比为1:6。10.如权利要求1所述的高纯度石榴皮多酚的制备方法，其特征是:步骤8)，吸附好的树脂先用4BV水以4-6BV/h的流速洗净树脂，再用6BV的60-80 %浓度乙醇进行洗脱，所得的提纯液放入干燥箱中干燥10-12h后得到多酚提取粉末。
【文档编号】A61K36/185GK105878306SQ201610221315
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2016年4月11日
【发明人】黎红, 高佳雨, 王佳君, 施鸿涛, 毕昕煜
【申请人】浙江中医药大学