乳酸菌在制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成体重减轻的产品中的应用
【专利摘要】本发明涉及生物医药领域，具体涉及乳酸菌在制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成体重减轻的产品中的应用。根据本发明，在服用酒精之前或之后或期间，连续服用乳酸菌，尤其是植物乳杆菌，能够改善由于酒精所造成的体重减轻的状况。并且，当乳酸菌与培养上清或与所述其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体损害的药物进行联合用药，能够更有效的改善体重减轻的状况。
【专利说明】
乳酸菌在制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成体重减轻 的产品中的应用
技术领域
[0001] 本发明设及生物医药领域，具体地，设及乳酸菌在制备用于预防和/或治疗因摄入 酒精造成体重减轻的产品中的应用。
【背景技术】
[0002] 在人类科技进步、经济发展的同时，嗜酒和滥用酒精的人群也在不断扩大，且已经 发展为国内外不可忽视的重要问题，给社会、家庭带来了极大的危害。世界卫生大会在十年 前发表的结果显示酒精有4.01%的患病率和3.19%的致死率，用数据说明了酒精对人体的 损害作用。过量饮酒是导致发展中国家人民健康受到威胁的第一位原因，在发达国家也排 在前列。截至2009年的统计，酒精引发的疾病在世界居于领先地位。中国在改革开放W后对 过量饮酒者的统计结果表明，每年过量饮酒者在正常饮酒者的比例均不断升高;据九十年 代的调查统计，西安市的过量饮酒者约有百分之Ξ十五，北京市的过量饮酒者约占百分之 十五。
[0003] 长期大量接触酒精可引起身体各项机能的慢性损伤，如果不加 W控制和治疗便会 成为健康杀手，甚至危及到生命。随着对酒精流行病学的研究深入，人们也渐渐清晰的认识 到过量摄入酒精对人体的损伤作用。酒精能够严重影响肝脏、胃肠道、神经系统、免疫系统、 骨髓及造血系统等方面健康。慢性酒精损伤的危害远远不止W上列举的运些，国内外开始 积极采取措施来控制和治疗运类疾病。通过对其发病机制的探索，现阶段利用戒酒、药物治 疗，W及利用中药材的提取物治疗等治疗手段来抑制慢性酒精损伤。但是药物治疗的缺陷 也显而易见:药物终究是药物，是药Ξ分毒，耐药性、副作用等都是问题，都会让治疗更加棘 手。在美国，尚没有FDA认可的能有效治疗慢性酒精损伤特别是由于酒精造成的体重减轻症 状的药物。
[0004] 因此，亟需开发出一种有效且无毒素作用的治疗慢性酒精损伤特别是由于酒精造 成的体重减轻症状的药物。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是为了克服W上缺陷，提供一种能够有效预防和/或治疗因摄入酒 精造成体重减轻的且无任何毒副作用的产品。
[0006] 为了实现上述目的，本发明提供了乳酸菌在制备用于预防和/或治疗因摄入酒精 造成体重减轻的产品中的应用。
[0007] 优选的，所述乳酸菌为乳酸菌的菌体物质和/或其胞外代谢产物。
[000引优选的，所述乳酸菌为植物乳杆菌，更优选为植物乳杆菌植物亚种 (Lactobacillus plantarum subsp.plantarum);最优选为保藏编号为CGMCC No.6936的植 物乳杆菌植物亚种。
[0009]优选的，所述应用还包括所述乳酸菌与其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体 损害的药物的联合用药;所述其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体损害的药物包括人 参、葛花、葛根三屯、刺五加、绿豆、五味子、菊花、决明子、山植、麦芽、桑甚、葛花、蜂蜜、玉 米肤、花生蛋白肤、乳制品、乙醒脱氨酶和维生素。
[0010] 在服用酒精之前或之后或期间，连续服用乳酸菌，尤其是植物乳杆菌，能够改善由 于酒精所造成的体重减轻的状况。并且，并且，当乳酸菌与培养上清或与所述其他能够预防 和/或治疗酒精造成的机体损害的药物进行联合用药，能够更有效的改善体重减轻的状况。
[0011] 本发明的其它特征和优点将在随后的【具体实施方式】部分予W详细说明。
【附图说明】
[0012] 附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具 体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：
[0013]图巧各组小鼠在试验期间体重的变化情况；
[0014] 图2为试验进行12周后，各组小鼠摄入鼠粮质量与体重增加质量的比值；
【具体实施方式】
[0015] W下对本发明的【具体实施方式】进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体 实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
[0016] 在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，运些范围或 值应当理解为包含接近运些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各 个范围的端点值和单独的点值之间，W及单独的点值之间可W彼此组合而得到一个或多个 新的数值范围，运些数值范围应被视为在本文中具体公开。
[0017] 公知，乳酸菌常用于维持或调节肠道菌群，从而维持肠道健康；另外，乳酸菌还常 用于提高机体的免疫力。甚至还有学者提出长期食用乳酸菌可起到减肥的作用。然而本发 明的发明人在研究的过程中发现，相反的，服用乳酸菌可W改善由于饮酒而造成的体重减 轻的状况。
[0018] 基于W上发现，本发明提供了乳酸菌在制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成 的体重减轻的产品中的应用。
[0019] 根据本发明，所述应用包括制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成的体重减轻 的产品，优选的，所述产品为药品和/或食品。
[0020] 本发明中，所述食品可W是任意类型的食品，例如果汁制品、乳制品、豆制品等。食 品也可W根据食用对象的不同而有所不同。所述食品中还可W含有常规的食品学上可接受 的添加剂，例如香料、矿物质、维生素、稳定剂、增稠剂、防腐剂等。另外，所述药品可W根据 给药途径的不同而制备成不同的剂型，例如，可W制备成散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液 剂、乳剂、混悬剂等形式，所述药物中还可W包括药学上可接受的辅料，本领域技术人员能 够根据不同的剂型选择不同的佐剂，本发明在此不再详细寶述。
[0021] 本文中的术语"乳酸菌"可W指乳酸菌菌体物质，还可W指乳酸菌的胞外代谢产 物，或者其两者的组合。其中，所述乳酸菌的菌体物质可W为活菌体和/或死菌体，本发明优 选选用乳酸菌的活菌体。所述乳酸菌的胞外代谢产物可将培养后的菌悬液进行固液分 离后得到的上清液的形式而存在。其中，所述固液分离可W通过离屯、的方法实现，例如，在 4000-12000巧 m 的条件下于 2-6 °C 离屯、5-20min。
[0022] 其中，本发明的"乳酸菌"优选为同时含有乳酸菌菌体物质和乳酸菌胞外代谢产物 菌悬液，例如，将乳酸菌种子接种到培养基进行特定时间的培养后所获的菌悬液。
[0023] 根据本发明，优选的，所述乳酸菌为乳杆菌，更优选为植物乳杆菌，进一步优选为 植物乳杆菌植物亚种化actobacillusplanta;rumsubsp.planta;rum)，最优选为保藏编号 为CGMCC No. 6936的植物乳杆菌植物亚种。本发明的发明人发现，当所述乳酸菌最优选为保 藏编号为CGMCC No.6936的植物乳杆菌植物亚种时，对于因摄入酒精造成的体重减轻状况 的改善最为显著。
[0024] 其中，保藏编号为CGMCC No. 6936的植物乳杆菌植物亚种的培养方法可W按照 201410816266.3专利申请中对CGMCC No.6936的培养条件进行。该申请的全部内容通过引 用合并于此。
[0025] 根据本发明，所述产品还含有一种或多种其他能够预防和/或治疗酒精造成的机 体损害的药物W和所述乳酸菌进行联合用药。在该联合用药的情况下，对乳酸菌对因摄入 酒精造成的体重减轻的效果更加明显。
[0026] 优选的，所述其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体损害的药物选自人参、葛 花、葛根、Ξ屯、刺五加、绿豆、五味子、菊花、决明子、山植、麦芽、桑甚、葛花、蜂蜜、玉米肤、 花生蛋白肤、乳制品、乙醒脱氨酶和维生素中的至少一种。
[0027] 根据本发明，当所述产品中含有的是乳酸菌的菌体物质时，W每克所述产品为基 准，所述乳酸菌的含量可W为i〇6-i〇iicfu。
[00%] CFlKColony-Forming化its,菌落形成单位)指活菌个数。在活菌培养计数时，由 单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，称为菌落形成单 位，W其表达活菌的数量，可W通过平板菌落计数法获得。本发明中，当双歧杆菌的死菌体 的浓度WCFU/ml表示时，是指乳酸菌的活菌体死亡后得到相应数量的死菌体，并将其溶于 缓冲液中配制成所需浓度。
[0029] W下的实施例将对本发明作进一步的说明，但并不因此限制本发明。
[0030] 在下述制备例、实施例和对比例中：
[0031] 受试菌株及培养条件：
[0032] 保藏编号为CGMCC No.6936的植物乳杆菌植物亚种下简称Zhang-化），保藏编 号为CGMCC No.6275的干酪乳杆菌（专利申请号201310074931.1);受试菌经Ξ代活化后在 MRS厌氧液体培养基中于37 °C厌氧培养18h，使菌浓度达到109cfu/ml，菌液在室溫下W 6000g离屯、lOmin收集菌体和上清液，菌体用无菌生理盐水重悬洗涂两次后，用无菌生理盐 水调整至不同浓度;菌悬液即为将培养后的培养液混合均匀并可选的使用无菌生理盐水稀 释后获得的产物。
[0033] 其中，MRS厌氧液体培养基的配方为：膜蛋白腺10.0 g，牛肉膏10.0 g，酵母浸粉 5. Og，巧樣酸Ξ锭2. Og，葡萄糖20.0 g，吐溫801. OmL，乙酸钢5. Og，憐酸氨二钟2. Og，硫酸儀 0.5g，硫酸儘0.25g，水lL，pH6.5，12ΓC灭菌15min。
[0034] 实验动物：
[0035] SPF级ICR小鼠，购于北京维通利华公司实验动物技术有限公司，饲养于农业部转 基因生物食用安全监督检验测试中屯、(北京)动物房，每笼5只，，定时更换垫料，保持鼠笼内 清洁干燥，室溫20±2°C，湿度50±5%，12小时灯照/黑暗循环。
[0036] 本发明所用的试剂、培养基组成W及实验学方法等在没有特别说明的情况下，均 为本领域常规使用的试剂、培养基组成W及实验学方法。
[0037] 实施例1-6
[0038] 用于说明本发明提供的乳酸菌在预防和/或治疗因摄入酒精造成的体重减轻中的 应用
[0039] 按照表1中的设置，将小鼠随机分为9组，每组15只。适应性饲养7天，然后按照如下 表2的处理方式对每组小鼠进行处理。每2周称量小鼠体重一次，计算处理12周时每组小鼠 摄入鼠粮质量与体重增加质量的比值(料重比），结果见表3。其中，空白对照组、酒精模型 组、Zhang-化低剂量组、Zhang-化高剂量组和上清液组每周体重的变化趋势见图1，12周时 小鼠料重比见图2。
[0040] 表 1
[0041]
[0044] 注:酒精指的是50%乙醇;从第3周开始，每天灌胃2次，V'前为第一次，V'后为第 二次，两次间隔30min。
[0045] 实施例7
[0046] 用于说明本发明提供的乳酸菌在预防和/或治疗因摄入酒精造成的体重减轻中的 应用
[0047] 按照如上试验组的处理方式对一组15只的小鼠进行处理，不同的是，受试物为同 等体积的生理盐水悬浮的乳酸菌菌体物质和蜂蜜液(含水量20%)的混合物，其中，动物双 歧杆菌菌体物质的含量为107c化/ml,蜂蜜的用量使得在每毫升灌服液中，蜂蜜W除去水的 重量计，其和菌体物质的重量之和与菌体物质含量为l〇8c化/ml菌液中的菌体物的质重量 相等。每2周称量小鼠体重一次，计算处理12周时小鼠摄入鼠粮质量与体重增加质量的比值 (料重比），结果见表3。
[004引对比例1
[0049] 用于说明参比物质在预防和/或治疗因摄入酒精造成的体重减轻中的应用
[0050] 按照如上试验组的处理方式对一组15只的小鼠进行处理，不同的是，受试物为同 等体积的蜂蜜液(含水量20%)生理盐水稀释液，其中，蜂蜜的用量使得在每毫升灌服液中， 蜂蜜W除去水的重量计，其重量与菌体物质含量为l〇8c化/ml菌液中的菌体物的质重量相 等。每2周称量小鼠体重一次，计算处理12周时小鼠摄入鼠粮质量与体重增加质量的比值 (料重比），结果见表3。
[0化1 ] 表3 [0化2]
[0054] 由表3可W看出，乳酸菌，尤其是植物乳杆菌能够显著地预防和治疗由于酒精摄入 而导致的体重减轻。并且在优选的情况下，当使用菌悬液时或者当乳酸菌与其他可降低酒 精对机体造成伤害的药物共同作用时，改善酒精导致的体重减轻状况的效果更加明显。
[0055] 如图2所示的，在长期持续灌胃酒精后，模型组与对照组相比，料重比呈现负值，小 鼠体重显著下降，在低、高剂量的植物乳杆菌活菌体及其上清液的干预下，料重比恢复至正 常组水平，小鼠体重显著增加，显著高于模型组，与对照组没有显著性差异。说明植物乳杆 菌体可W减轻因摄入酒精造成的体重减轻的不良影响。
[0056] W上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中 的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可W对本发明的技术方案进行多种简单变型，运 些简单变型均属于本发明的保护范围。
[0057] 另外需要说明的是，在上述【具体实施方式】中所描述的各个具体技术特征，在不矛 盾的情况下，可W通过任何合适的方式进行组合。为了避免不必要的重复，本发明对各种可 能的组合方式不再另行说明。
[0058] 此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可W进行任意组合，只要其不违背本 发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。
【主权项】
1. 乳酸菌在制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成的体重减轻的产品中的应用。2. 根据权利要求1所述的应用，其中，所述乳酸菌为乳酸菌的菌体物质和/或其胞外代 谢产物。3. 根据权利要求2所述的应用，其中，所述乳酸菌的菌体物质为乳酸菌活菌体。4. 根据权利要求1-3中任意一项所述的应用，其中，所述乳酸菌为乳杆菌。5. 根据权利要求4所述的应用，其中，所述乳杆菌为植物乳杆菌。6. 根据权利要求5所述的应用，其中，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌植物亚种 (Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)〇7. 根据权利要求6所述的应用，其中，所述植物乳杆菌植物亚种的保藏编号为CGMCC No.6936〇8. 根据权利要求1-7中任意一项所述的应用，其中，所述产品还含有药学上和/或食品 学上可接受的辅料。9. 根据权利要求1-8中任意一项所述的应用，其中，所述应用还包括所述乳酸菌与其他 能够预防和/或治疗酒精造成的机体损害的药物的联合用药。10. 根据权利要求9所述的应用，其中，所述其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体损 害的药物选自人参、葛花、葛根、三七、刺五加、绿S、五味子、菊花、决明子、山楂、麦芽、桑 葚、葛花、蜂蜜、玉米肽、花生蛋白肽、乳制品、乙醛脱氢酶和维生素中的至少一种。
【文档编号】A61P39/00GK105878294SQ201610298132
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2016年5月6日
【发明人】金君华, 张红星, 卞丽芳, 谢远红, 马京升, 刘慧
【申请人】北京农学院