本发明涉及一种金花小檗提取物及其制备方法和用途。
背景技术：
小檗属(berberisl.)为小檗科(berberidaceae)中的一个属，习称为“三颗针”，也称铜针刺、刺黄连、刺黄柏等，其种类繁多，全世界约有500种，分布于亚洲、南北美洲、欧洲和非洲北部。在中国小檗属植物约有250多种，主要分布在西部和西南部。
我国对小檗属植物的利用具有悠久的历史，很早以前，民间常用其根茎来代替黄柏、黄连药用，取根煎服，是被用作清热解毒的一味常用的中药，治疗范围广，疗效确切。小檗属植物药用始载于《唐本草》，陶弘景称之为子檗，叙述为：“子檗树小状如石榴，其皮黄而苦，又一种多刺，皮亦黄，亦至口疮”。陈藏器的《本草拾遗》描述更为详细：“小檗如石榴，皮黄子赤，如枸杞子，两头尖小，锉枝以染黄”。《本草纲目》的记载：“小檗山间时有之，小树也，其皮外白，里黄，状如檗皮而薄小”。药理研究认为小檗的提取物具有消炎抗菌、降血压、降血脂、抗肿瘤、降血糖等药理活性，近年来研究发现其抗氧化功能也相当好。
金花小檗(berberiswilsonaehemsl)为小檗科小檗属的植物，为半常绿小灌木。目前未见本发明金花小檗提取物及其制备方法和用途的相关报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种金花小檗提取物及其制备方法和用途。
本发明首先提供了一种金花小檗提取物，它是由下述方法制备而成：
(1)分别取金花小檗的根、茎、叶，粉碎，得原料粉；
(2)取原料粉，分别用乙醇提取，即得根、茎、叶的乙醇提取物。
进一步地，步骤(2)中，所述乙醇的浓度为65％～95％v/v，优选地，所述乙醇的浓度为95％v/v。
进一步地，其制备方法还包括以下步骤：取根、茎的乙醇提取物，用正丁醇萃取，即得根、茎的正丁醇提取物。
本发明还提供了上述金花小檗提取物的制备方法，它包括以下步骤：
(1)分别取金花小檗的根、茎、叶，粉碎，得原料粉；
(2)取原料粉，分别用乙醇提取，即得根、茎、叶的乙醇提取物。
进一步地，步骤(2)中，所述乙醇的浓度为65％～95％v/v，优选地，所述乙醇的浓度为95％v/v。
本发明还提供了上述金花小檗提取物的制备方法，它包括以下步骤：取上述方法制备得到的根、茎的乙醇提取物，用正丁醇萃取，即得根、茎的正丁醇提取物。
本发明还提供了上述金花小檗提取物在制备防治老年痴呆药物中的用途。
进一步地，所述老年性痴呆为阿尔茨海默病、血管性痴呆、混合性痴呆。
本发明还提供了一种防治老年痴呆的药物，它是以上述金花小檗提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。
进一步地，所述制剂为散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂。
实验结果证明，金花小檗乙醇提取物以及正丁醇提取物对小鼠的记忆能力有所改善，对记忆障碍模型小鼠的改善作用明显。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1为金花小檗提取物对小鼠体重的影响。
图2为金花小檗提取物对小鼠跳台试验的影响。
图3为金花小檗提取物对小鼠定位航行的影响。
图4为金花小檗提取物对小鼠空间探索的影响。
具体实施方式
实施例1、金花小檗乙醇提取物的制备
选取金花小檗的根、茎、叶各300g，干燥粉碎后，分别用3000ml的95％v/v乙醇提取3次，每次提取40min，合并提取液，浓缩干燥后即得根、茎、叶提取物。
实施例2、金花小檗正丁醇提取物的制备
分别选取金花小檗的根、茎各300g，干燥粉碎后，各用3000ml的95％乙醇分3次提取，每次提取40min；合并提取液后分别浓缩，得根的浸膏24.22g、茎的浸膏12.39g；再分别加入200ml的0.1％～1％盐酸水溶液溶解，过滤，取滤液；滤液各加100ml的0.5％naoh溶液，震荡10min；最后分别用150～200ml正丁醇分2次萃取，合并萃取液后浓缩，分别得到根、茎的正丁醇片段。
实施例3、金花小檗提取物的制备
选取金花小檗的根、茎、叶各300g，干燥粉碎后，分别用3000ml的65％v/v乙醇提取3次，每次提取40min，合并提取液，浓缩干燥后即得根、茎、叶提取物。
实施例4、金花小檗提取物的制备
选取金花小檗的根、茎、叶各300g，干燥粉碎后，分别用3000ml的80％v/v乙醇提取3次，每次提取40min，合并提取液，浓缩干燥后即得根、茎、叶提取物。
以下通过试验例来说明本发明的有益效果。
试验例1、金花小檗提取物改善小鼠记忆力的研究
(1)实验方法
选用体重为20±2g的雄性昆明小鼠小鼠进行跳台实验、水迷宫实验，并测定小鼠血清中的mda含量及t-sod活力。将小鼠按体重平均分组进行饲养。按照灌胃条件，将记忆再现缺失模型小鼠分为5个组：金花小檗的根、茎、叶提取物的高、中、低剂量各一组，茎正丁醇片段组、根正丁醇片段组，另设定正常小鼠空白组和模型组各1个组，每组8只小鼠。提取物的高、中、低剂量浓度分别设为100mg/ml、50mg/ml、25mg/ml，根、茎正丁醇片段的浓度(w/ml)为2.1％、1.64％，连续处理27天。
饲养期间保证动物在23±2℃温度，自由饮水与进食，每天控制光照/黑暗12h循环，晚间8点停止光照，早间8点开始光泽。实验开始前，动物适应性喂养3d。第一天灌胃时，进行首次称重，以后每三天称重一次，共称重10次。
跳台实验：实验装置为一长方形反射箱，分为2间，底面辅以间距为0.5cm铜栅，每间的左或右角放置一个高和直径均为4.5cm的绝缘台。正式测定试验前1天，小鼠灌胃后30min将小鼠放入电击室，用100ua电流来电击训练5min，使小鼠产生电击记忆。剔除对电击刺激不敏感的小鼠，24hr后进行正式测定实验，小鼠最后一次灌胃10min后，再灌胃一定量的30％乙醇(根据小鼠体重，乙醇灌胃体积按0.1ml/g换算)，形成记忆再现缺失模型小鼠。30min后将动物放在跳台上，记录小鼠第一次跳下跳台的时间(潜伏期)，以及5min内的每只小鼠受到电击的次数总数(错误次数)。
水迷宫实验：实验装置是一个直径为130cm，深40cm的圆形水池，人为地将水池分为四个象限并做好标记，平台固定放置于其中一个象限中央，水池内加水加至超出平台1-2cm高，水温控制在23±2℃。正式试验前两天将小鼠头沿池壁放入水中，按固定顺序使每只老鼠从4个象限入水，测定动物在迷宫内游泳总路程、在平台所在象限(目标象限)的时间，游泳平均速度，以及穿越平台的次数，动物找到平台的时间平均值为潜伏期，每个象限的潜伏期平均值为当天潜伏期，以第四天数据为最终成绩。
正式试验前两天将动物放入水迷宫中进行适应性游泳，剔除不游泳的个体，正式实验总共5天，前4天为定位航行实验。第一天灌胃后1h除空白组注射生理盐水外，其他各组动物均以0.1ml/10g体重换算体积腹腔注射东莨菪碱(3mg/kg)造成获得性记忆障碍模型。20min后将小鼠放入水迷宫中自由游泳，60s内找到平台所花费的时间记为潜伏期，在平台停留5s后，将动物取出，如果60s内动物没有找到平台，由人为引导动物游至平台并让它在平台停留5s，记为潜伏期60s；实验四天后记录小鼠游泳总路程、潜伏期、目标象限时间百分比和平均速度；第五天为空间探索实验，空间探索实验时将平台撤去，让动物从原来平台象限对面的象限入水，记录动物进入原平台象限时间和穿越平台的次数。
(2)统计分析
用spss18.0统计软件进行方差分析，组间比较用lsd法，以p＜0.01表示差异有显著性，结果数据以means±std表示。
(3)实验结果
从图1可以看出，实验组与正常组小鼠比较，灌胃第1d，第10d，第19d，第30d之后，各组动物体重没有显著差异(p＞0.05)，说明金花小檗提取物对小鼠体重无较明显的影响。
从图2可以看出，实验组与模型组对比，潜伏期明显增加，错误次数明显减少，对测得的数据进行统计分析得出实验组与模型组差异极显著(p＜0.01)，与正常组对比差异不显著(p＞0.05)。
从图3可以看出，与正常组总路程比较，模型组动物没有差异；与正常组的目标象限时间百分比除模型组外均无差异；与正常组潜伏期比较，模型组有显著差异(p<0.05)，根提取物中剂量组、叶提取物高、中剂量组有显著或极显著差异，其他组无差异；与正常组平均速度比较，模型组无差异。与模型组总路程比较，各组均无明显差异；与模型组目标象限时间百分比比较，除茎提取物低剂量组外，其他组均有显著或极显著差异；与模型组潜伏期比较，根提取物低剂量组、叶提取物所有剂量组、根正丁醇片段组和茎正丁醇片段组无差异，其他组有显著或极显著差异；与模型组平均速度比较，正常组无差异。
从图4可以看出，与模型组动物比较，除了茎提取物的高、中剂量组和茎正丁醇片段组外，剩余组别动物穿越平台次数显著增加(p≤0.05)；与模型组动物在目标象限停留时间比较，所有组目标象限时间百分比的差异均为极显著(p<0.01)；与正常组动物比较，模型组穿越平台次数减少，有显著差异(p≤0.05)，目标象限时间百分比减少，有极显著差异(p<0.01)，实验组和正常组比较，除茎提取物高剂量组穿越次数有显著降低(p≤0.05)，其他组与正常组比较，两个指标均无差异(p＞0.05)。
综上，金花小檗乙醇提取物以及正丁醇提取物对小鼠的记忆能力有所改善，对记忆障碍模型小鼠的改善作用明显。