本发明属于生物领域，涉及已知化合物的新用途，具体涉及竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b用作ucp2抑制剂治疗胃腺癌以及用作lncrnaxloc006926抑制剂治疗肝癌的生物医药用途。
背景技术：
：胃癌是世界上第四大类常见的恶性肿瘤，虽然近年来发病率在不断下降，但是由于早诊率低，致死率仍居高不下。因此寻找判断胃癌预后的标志物及其潜在靶点很有必要。研究发现，ucp2(uncouplingprotein-2)是线粒体解偶联蛋白家族的成员，能使氧化磷酸化的过程解偶联，减少ros的生成，对肿瘤细胞有保护作用(参考文献：overexpressionofuncouplingprotein-2incancer:metabolicandheatchanges,inhibitionandeffectsondrugresistance.inflammopharmacology,2015,23:365-9)。抑制ucp2的表达可以有效抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭，但是目前公开的ucp2抑制剂极少，难以满足研发需要和临床需求。肝癌是世界上第五大类常见的恶性肿瘤。中国每年有近40万人死于肝癌，占据全球肝癌死亡的51％。由于肝癌患者早期无症状，因此大多被诊断时已经处于晚期，死亡率高并且五年生存率低。研究发现，lncrnaxloc006926在肝癌发生发展中发挥了重要作用，参与调节肝癌细胞的增殖及迁移，有望成为肝癌发生发展的生物标志物和肝癌预防治疗的新靶点(参考文献：lncrnaxloc006926抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究，免疫学杂志2018年5月第34卷第5期)。竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b分别是从竹柏或独一味中发现的天然有机化合物，化学结构如下。目前尚未见竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以用作ucp2抑制剂治疗胃腺癌的报道，也未见竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以用作lncrnaxloc006926抑制剂治疗肝癌的报道。技术实现要素：本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b用作ucp2抑制剂治疗胃腺癌以及用作lncrnaxloc006926抑制剂治疗肝癌的生物医药用途。本发明通过下面的技术方案实现：竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b用作ucp2抑制剂的生物医药用途。竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b为有效的ucp2抑制剂，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以通过抑制ucp2抑制胃腺癌细胞的增殖进而用于治疗胃腺癌。竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b用于制备治疗胃癌的药物的生物医药用途。竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b为有效的ucp2抑制剂，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以通过抑制ucp2抑制胃腺癌细胞的增殖进而用于治疗胃腺癌。进一步地，所述胃癌为胃腺癌。一种ucp2抑制剂，活性成分为竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b。竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b为有效的ucp2抑制剂，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以通过抑制ucp2抑制胃腺癌细胞的增殖进而用于治疗胃腺癌。进一步地，非活性成分包括药学辅料。一种治疗胃癌的药物制剂，活性成分为竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b。竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b为有效的ucp2抑制剂，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以通过抑制ucp2抑制胃腺癌细胞的增殖进而用于治疗胃腺癌。进一步地，非活性成分包括药学辅料。进一步地，所述胃癌为胃腺癌。竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b用作lncrnaxloc006926抑制剂的生物医药用途。竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b为有效的lncrnaxloc006926抑制剂。竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b用于制备治疗肝癌的药物的生物医药用途。竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b为有效的lncrnaxloc006926抑制剂，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以通过抑制lncrnaxloc006926抑制肝癌细胞的增殖进而用于治疗肝癌。一种lncrnaxloc006926抑制剂，活性成分为竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b。竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b为有效的lncrnaxloc006926抑制剂。进一步地，非活性成分包括药学辅料。一种治疗肝癌的药物制剂，活性成分为竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b。竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b为有效的lncrnaxloc006926抑制剂，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以通过抑制lncrnaxloc006926抑制肝癌细胞的增殖进而用于治疗肝癌。进一步地，非活性成分包括药学辅料。有益效果：1、本发明发现，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b为有效的ucp2抑制剂，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以通过抑制ucp2抑制胃腺癌细胞的增殖进而用于治疗胃腺癌；2、本发明发现，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b为有效的lncrnaxloc006926抑制剂，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以通过抑制lncrnaxloc006926抑制肝癌细胞的增殖进而用于治疗肝癌。附图说明图1为竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b化学结构式；图2为竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b对胃腺癌sgc7901细胞中ucp2蛋白水平的影响；图3为竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b对胃腺癌sgc7901细胞增殖的影响；图4为竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b对肝癌hepg2细胞中lncrnaxloc006926水平的影响；图5为竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b对肝癌hepg2细胞增殖的影响。具体实施方式下面结合附图和实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。实施例1：竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以用作ucp2抑制剂治疗胃腺癌一、实验材料竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b化学结构式如图1所示。这些化合物均为购买或自制，纯度在95％以上，可以用于细胞实验研究。胃腺癌细胞系sgc7901购自atcc；胎牛血清和dmem培养液购自美国gibco公司。ucp2鼠抗人单克隆抗体、β-actin鼠抗人单克隆抗体和鼠二抗购自美国santacruz公司。二、实验方法1、细胞培养胃腺癌细胞系sgc7901用含10％胎牛血清、1％青链霉素的dmem培养液于37℃、5％co2培养。细胞用0.05％胰蛋白酶进行消化传代。至对数生长期进行后续实验。2、分组及处理实验设有：对照组、竹柏内酯j给药组、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a给药组、独一味素a给药组、独一味素b给药组。收集对数期的胃腺癌sgc7901细胞，经胰蛋白酶消化后，1000r/min离心10min，弃掉上清液，用细胞培养液悬浮调整细胞数为2×106/ml，铺于96孔板中，24h后弃掉旧培养液，加入新鲜的含有10％胎牛血清的dmem培养基，给药组分别加入竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a或独一味素b至终浓度为5μm，对照组加入等量溶媒，继续培养48h。每组均设3个复孔。3、westernblot检测胃腺癌细胞中的ucp2水平按照上述方法进行药物干预培养48h后，收集细胞，trizol法提取细胞蛋白。10％的sds-page垂直电泳分离，上样量为每孔50微克，转移蛋白至pvdf膜上，用2％的bsa封闭后，1:200ucp2鼠抗人单克隆抗体或1:500的β-actin鼠抗人单克隆抗体4℃过夜，加入l:2000倍稀释的鼠二抗室温孵育1h，用ecl发光系统进行显影，β-actin为参照物。按ucp2灰度值/β-actin灰度值的比值计算ucp2蛋白的相对含量。4、mtt检测细胞增殖按照上述方法进行药物干预培养48h后，加入浓度为5mg/ml的mtt溶液，放在co2培养箱中孵育反应4h。同时设置空白组，空白组中不加细胞。吸除上清液，加入dmso溶液150μl，放置于避光条件下反应10min，观察结晶物完全溶解后，于酶标仪检测570nm波长处吸光度od值。计算公式：生长抑制率＝(1-给药组od/对照组od)×100％。5、统计学方法实验数据采用spss22.0统计学软件分析，数据以x±s表示，两组数据比较用t检验，以p＜0.05为差异有统计学意义。三、实验结果1、药物对胃腺癌细胞中ucp2蛋白水平的影响结果如表1和图2所示。与对照组相比，竹柏内酯j给药组、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a给药组、独一味素a给药组、独一味素b给药组胃腺癌sgc7901细胞中ucp2蛋白水平显著降低，差异有统计学意义(p＜0.05)。表1药物对胃腺癌sgc7901细胞中ucp2蛋白水平的影响组别ucp2灰度值/β-actin灰度值对照组1.00竹柏内酯j给药组0.62±0.051-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a给药组0.64±0.06独一味素a给药组0.50±0.04独一味素b给药组0.51±0.052、药物对胃腺癌sgc7901细胞增殖的影响结果如表2和图3所示。与对照组相比，竹柏内酯j给药组、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a给药组、独一味素a给药组、独一味素b给药组胃腺癌sgc7901细胞的增殖能力显著降低，差异有统计学意义(p＜0.05)。表2药物对胃腺癌sgc7901细胞增殖的影响组别生长抑制率(％)对照组0竹柏内酯j给药组71.55±7.071-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a给药组72.86±8.15独一味素a给药组80.25±7.93独一味素b给药组81.64±8.05上述实验结果表明，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b为有效的ucp2抑制剂，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以通过抑制ucp2抑制胃腺癌细胞的增殖进而用于治疗胃腺癌。实施例2：竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以用作lncrnaxloc006926抑制剂治疗肝癌一、实验材料竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b化学结构式如图1所示。这些化合物均为购买或自制，纯度在95％以上，可以用于细胞实验研究。肝癌细胞系hepg2购自atcc；胎牛血清和dmem培养液购自美国gibco公司。lncrnaxloc006926、gapdh的rt-pcr引物按照文献设计并委外合成，序列如下：lncrnaxloc006926上游引物：5’-aaggagaacacaaaacaggcat-3’；lncrnaxloc006926下游引物：5’-tgtgaagccctagatttcccat-3’；gapdh上游引物：5’-gcaccgtcaaggctgagaac-3’；gapdh下游引物：5’-tggtgaagacgccagtgga-3’。二、实验方法1、细胞培养肝癌细胞系hepg2用含10％胎牛血清、1％青链霉素的dmem培养液于37℃、5％co2培养。细胞用0.05％胰蛋白酶进行消化传代。至对数生长期进行后续实验。2、分组及处理实验设有：对照组、竹柏内酯j给药组、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a给药组、独一味素a给药组、独一味素b给药组。收集对数期的肝癌细胞系hepg2，经胰蛋白酶消化后，1000r/min离心10min，弃掉上清液，用细胞培养液悬浮调整细胞数为2×106/ml，铺于96孔板中，24h后弃掉旧培养液，加入新鲜的含有10％胎牛血清的dmem培养基，给药组分别加入竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a或独一味素b至终浓度为8μm，对照组加入等量溶媒，继续培养48h。每组均设3个复孔。3、rt-pcr检测肝癌细胞中的lncrnaxloc006926水平按照上述方法进行药物干预培养48h后，收集细胞，trizol法提取细胞总rna。取总rna3μg，采用revertaidtm逆转录试剂盒完成逆转录。反应总体积为50μl，其中10×taqbuffer5.0μl，mgcl2(25mmol/l)5.0μl，dntpmix(10mmol/l)2μl，lncrnaxloc006926及gapdh上、下游引物(10μmol/l)各1μl，cdna5μl，taq酶(5u/μl)0.5μl，补足双蒸水至50μl。反应条件为：95℃预变性5min，94℃变性40s，55℃退火60s，72℃延伸60s，72℃终末延伸10min，共30循环。4、mtt检测细胞增殖按照上述方法进行药物干预培养48h后，加入浓度为5mg/ml的mtt溶液，放在co2培养箱中孵育反应4h。同时设置空白组，空白组中不加细胞。吸除上清液，加入dmso溶液150μl，放置于避光条件下反应10min，观察结晶物完全溶解后，于酶标仪检测570nm波长处吸光度od值。计算公式：生长抑制率＝(1-给药组od/对照组od)×100％。5、统计学方法实验数据采用spss22.0统计学软件分析，数据以x±s表示，两组数据比较用t检验，以p＜0.05为差异有统计学意义。三、实验结果1、药物对肝癌细胞中lncrnaxloc006926水平的影响结果如表3和图4所示。与对照组相比，竹柏内酯j给药组、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a给药组、独一味素a给药组、独一味素b给药组肝癌hepg2细胞中lncrnaxloc006926水平显著降低，差异有统计学意义(p＜0.05)。表3药物对肝癌hepg2细胞中lncrnaxloc006926水平的影响组别lncrnaxloc006926/gapdh对照组1.00竹柏内酯j给药组0.62±0.071-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a给药组0.38±0.04独一味素a给药组0.57±0.05独一味素b给药组0.59±0.042、药物对肝癌hepg2细胞增殖的影响结果如表4和图5所示。与对照组相比，竹柏内酯j给药组、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a给药组、独一味素a给药组、独一味素b给药组肝癌hepg2细胞的增殖能力显著降低，差异有统计学意义(p＜0.05)。表4药物对肝癌hepg2细胞增殖的影响组别生长抑制率(％)对照组0竹柏内酯j给药组62.45±8.331-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a给药组83.67±7.85独一味素a给药组66.71±8.62独一味素b给药组63.92±8.09上述实验结果表明，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b为有效的lncrnaxloc006926抑制剂，竹柏内酯j、1-去氧-2,3-去氢竹柏内酯a、独一味素a、独一味素b可以通过抑制lncrnaxloc006926抑制肝癌细胞的增殖进而用于治疗肝癌。上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于上述的具体实施例。当前第1页12