本发明涉及一种抗迁移型蛋白运输载体材料的制备方法，属于医用材料技术领域。
背景技术：
蛋白质是制备生物活性物质输送载体的最有前途的基质，溶剂蒸发法及反溶剂法是目前常用的纳米颗粒制备方法。玉米醇溶蛋白具有很好的生物相容性及生物粘附性，其分子结构中亲水区域和疏水区域分区明显，类似于嵌段共聚物，有独特的自组装特性，比一般的蛋白质耐消化，与疏水性活性物质具有特异性结合能力，可作为良好的生物活性物质输送载体。用反溶剂和溶剂蒸发法都能诱导zein发生自组装。但是玉米醇溶蛋白的疏水性，在中性条件下极易发生聚集，经过干燥后不能复溶。patel等用酪蛋白酸钠作为稳定剂，制备了酪蛋白酸钠稳定的zein纳米粒子，在中性条件下稳定，且当酪蛋白酸钠/zein为2:1冻干的颗粒能够复溶，粒径没有显著改变。但是，在酸性条件下，该胶体颗粒容易发生聚集而沉淀，作为输送载体的应用范围受到限制。果胶它能在胃肠环境中保持原状，在结肠中被果胶酶和微生物利用。有lmp-pectin的水凝胶或微球制备的报道，这种结构就使得zein可以防止果胶酶对果胶的分解而果胶防止了zein被蛋白酶的降解，但是方法繁琐，不适合大规模生产。甜菜果胶是一种具有表面活性的天然阴离子的多糖，目前有报道将其作为乳液的包覆层提高乳液的稳定性可以设想利用sbp作为zein胶体颗粒的稳定剂，zein对疏水性生物活性物质有较高的荷载和包封能力，sbp作为包裹层提高zein胶体颗粒体系的稳定性，也可避免上消化道的低ph值和蛋白酶等消化酶破坏目标物，由于zein与sbp的黏附性和保护作用，使目标物不受破坏并且延长在消化道内的停留时间，sbp与zein复合胶体颗粒在结肠菌群分泌的糖苷酶的作用下，释放出疏水性活性物质，实现了疏水性活性物质的结肠内靶向释放。但是现有的载体材料还存在着些许问题，特别是用于临床时存在操作困难以及术后不稳定、不固定，容易从植入位点迁移的问题，所以对其进行有效改性是现有研究技术的方向。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题：针对现有载体材料用于临床时存在操作困难以及术后不稳定、不固定，容易从植入位点迁移的问题，提供了一种抗迁移型蛋白运输载体材料的制备方法。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：
（1）取猪牙皂并真空冷冻干燥，粉碎并过筛，得过筛粉末并按质量比1:10，将过筛粉末添加至乙醇溶液中，搅拌混合并水浴浸提，静置冷却至室温，过滤并收集滤液；
（2）将滤液旋转蒸发，得旋蒸液并加入至大孔吸附树脂色谱柱中，洗脱处理，后，收集洗脱液并按质量比1:8，将质量分数5％壳聚糖溶液添加至洗脱液中，搅拌混合并超声分散10～15min，得分散液；
（3）按重量份数计，分别称量45～50份去离子水、3～5份冰醋酸、6～8份纳米羟基磷灰石置于研钵中，研磨分散并油浴加热，高温灭菌并调节ph至7.0，得基体浆液；
（4）按重量份数计，分别称量45～50份质量分数85％乙醇溶液、3～5份玉米醇溶蛋白和10～15份分散液置于烧杯中，搅拌混合并收集得混合液，按质量比1:1，将混合液与基体浆液搅拌混合并置于研钵中研磨分散，收集分散浆液并真空冷冻干燥，收集得干燥颗粒并破碎研磨过,筛，即可制备得所述的抗迁移型蛋白运输载体材料。
步骤（2）所述的洗脱处理为用质量分数30％乙醇溶液洗脱处理，控制乙醇溶液洗脱速率为2bv/h。
步骤（3）所述的调节ph采用的是质量分数5％氢氧化钠溶液。
本发明与其他方法相比，有益技术效果是：
（1）本发明技术方案采用米醇溶蛋白为载体主体，由于其具有很好的生物相容性及生物粘附性，其分子结构中亲水区域和疏水区域分区明显，类似于嵌段共聚物，有独特的自组装特性，比一般的蛋白质耐消化，与疏水性活性物质具有特异性结合能力，可作为良好的生物活性物质输送载体，同时本发明技术方案通过将其与羟基磷灰石混合并制备，有效提高材料的稳定性能，使目标物不受破坏并且延长在消化道内的停留时间，提高材料作用时长；
（2）本发明技术方案对猪牙皂进行提取并收集猪牙皂苷，由于其影响复杂的基因和蛋白质网络交互作用，通过其负载并填充至材料内部后，有效释放并降低材料在人体中的迁移性能，有效作用在人体内部形成有效的抗迁移作用。
具体实施方式
取猪牙皂并真空冷冻干燥，粉碎并过200目筛，得过筛粉末并按质量比1:10，将过筛粉末添加至质量分数55％乙醇溶液中，搅拌混合并置于65～70℃下水浴加热2～3h，静置冷却至室温，过滤并收集滤液，将滤液置于55～60℃下旋转蒸发至原体积1/5，得旋蒸液并加入至大孔吸附树脂色谱柱中，随后用质量分数30％乙醇溶液洗脱处理，控制乙醇溶液洗脱速率为2bv/h，待洗脱完成后，收集洗脱液并按质量比1:8，将质量分数5％壳聚糖溶液添加至洗脱液中，搅拌混合并置于200～300w下超声分散10～15min，得分散液；按重量份数计，分别称量45～50份去离子水、3～5份冰醋酸、6～8份纳米羟基磷灰石置于研钵中，研磨分散并置于120～130℃下油浴加热10～15min，高温灭菌并用质量分数5％氢氧化钠溶液调节ph至7.0，得基体浆液；按重量份数计，分别称量45～50份质量分数85％乙醇溶液、3～5份玉米醇溶蛋白和10～15份分散液置于烧杯中，搅拌混合并收集得混合液；按质量比1:1，将混合液与基体浆液搅拌混合并置于研钵中研磨分散，收集分散浆液并真空冷冻干燥，收集得干燥颗粒并破碎研磨过200目筛，即可制备得所述的抗迁移型蛋白运输载体材料。
实例1
取猪牙皂并真空冷冻干燥，粉碎并过200目筛，得过筛粉末并按质量比1:10，将过筛粉末添加至质量分数55％乙醇溶液中，搅拌混合并置于65℃下水浴加热2h，静置冷却至室温，过滤并收集滤液，将滤液置于55℃下旋转蒸发至原体积1/5，得旋蒸液并加入至大孔吸附树脂色谱柱中，随后用质量分数30％乙醇溶液洗脱处理，控制乙醇溶液洗脱速率为2bv/h，待洗脱完成后，收集洗脱液并按质量比1:8，将质量分数5％壳聚糖溶液添加至洗脱液中，搅拌混合并置于200w下超声分散10min，得分散液；按重量份数计，分别称量45份去离子水、3份冰醋酸、6份纳米羟基磷灰石置于研钵中，研磨分散并置于120℃下油浴加热10min，高温灭菌并用质量分数5％氢氧化钠溶液调节ph至7.0，得基体浆液；按重量份数计，分别称量45份质量分数85％乙醇溶液、3份玉米醇溶蛋白和10份分散液置于烧杯中，搅拌混合并收集得混合液；按质量比1:1，将混合液与基体浆液搅拌混合并置于研钵中研磨分散，收集分散浆液并真空冷冻干燥，收集得干燥颗粒并破碎研磨过200目筛，即可制备得所述的抗迁移型蛋白运输载体材料。
实例2
取猪牙皂并真空冷冻干燥，粉碎并过200目筛，得过筛粉末并按质量比1:10，将过筛粉末添加至质量分数55％乙醇溶液中，搅拌混合并置于67℃下水浴加热2h，静置冷却至室温，过滤并收集滤液，将滤液置于57℃下旋转蒸发至原体积1/5，得旋蒸液并加入至大孔吸附树脂色谱柱中，随后用质量分数30％乙醇溶液洗脱处理，控制乙醇溶液洗脱速率为2bv/h，待洗脱完成后，收集洗脱液并按质量比1:8，将质量分数5％壳聚糖溶液添加至洗脱液中，搅拌混合并置于250w下超声分散12min，得分散液；按重量份数计，分别称量47份去离子水、4份冰醋酸、7份纳米羟基磷灰石置于研钵中，研磨分散并置于125℃下油浴加热12min，高温灭菌并用质量分数5％氢氧化钠溶液调节ph至7.0，得基体浆液；按重量份数计，分别称量47份质量分数85％乙醇溶液、4份玉米醇溶蛋白和12份分散液置于烧杯中，搅拌混合并收集得混合液；按质量比1:1，将混合液与基体浆液搅拌混合并置于研钵中研磨分散，收集分散浆液并真空冷冻干燥，收集得干燥颗粒并破碎研磨过200目筛，即可制备得所述的抗迁移型蛋白运输载体材料。
实例3
取猪牙皂并真空冷冻干燥，粉碎并过200目筛，得过筛粉末并按质量比1:10，将过筛粉末添加至质量分数55％乙醇溶液中，搅拌混合并置于70℃下水浴加热3h，静置冷却至室温，过滤并收集滤液，将滤液置于60℃下旋转蒸发至原体积1/5，得旋蒸液并加入至大孔吸附树脂色谱柱中，随后用质量分数30％乙醇溶液洗脱处理，控制乙醇溶液洗脱速率为2bv/h，待洗脱完成后，收集洗脱液并按质量比1:8，将质量分数5％壳聚糖溶液添加至洗脱液中，搅拌混合并置于300w下超声分散15min，得分散液；按重量份数计，分别称量50份去离子水、5份冰醋酸、8份纳米羟基磷灰石置于研钵中，研磨分散并置于130℃下油浴加热15min，高温灭菌并用质量分数5％氢氧化钠溶液调节ph至7.0，得基体浆液；按重量份数计，分别称量50份质量分数85％乙醇溶液、5份玉米醇溶蛋白和15份分散液置于烧杯中，搅拌混合并收集得混合液；按质量比1:1，将混合液与基体浆液搅拌混合并置于研钵中研磨分散，收集分散浆液并真空冷冻干燥，收集得干燥颗粒并破碎研磨过200目筛，即可制备得所述的抗迁移型蛋白运输载体材料。