本发明涉及一种珊瑚树萜类成分的制备方法。
背景技术：
珊瑚树是忍冬科（caprifoliaceae）荚蒾属植物（viburnumodoratissimum），常绿灌木或小乔木，别名：高栌树、早禾树、珊瑚枝、法国冬青。原产我国，主要分布于湖南、福建、广东、台湾及浙江，日本、朝鲜也有分布。珊瑚树的原变种是viburnumodoratissimumker-gawl.var.odoratissimum，其他两个变种分别为日本珊瑚树（viburnumodoratissimumker-gawl.var.awabuki）和云南珊瑚树（viburnumodoratissimumker-gawl.var.sessiliflorum）；始载于《中国高等植物图鉴》，它的枝叶可入药，有通经活络功效，主治风湿痹痛、跌打肿痛、骨折。
珊瑚树中主要含有二萜、三萜、黄酮、倍半萜、木脂素及香豆素苷等类化合物。其中vibsanin型二萜类化合物是珊瑚树的特征化合物，根据现代研究报道它只存在于荚蒾属的v.awabuki、v.odoratissimum和v.suspensum中，其分为3种亚型结构即十一元环型、七元环型和重排型，这3种亚型化合物在强光或高温下会发生重排反应。
珊瑚树主要具有细胞毒、抑菌、鱼毒、抑制植物生长等活性，其中细胞毒活性是其主要生物活性，近年来研究发现珊瑚树中成分对kb、a-549、ht-29、p-388、nugc-3和hone-1等细胞表现出细胞毒活性。另外，从珊瑚树中分离出来的有机酸和黄酮成分有较强的抑菌效果。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种珊瑚树萜类成分的制备方法。
本发明通过下面技术方案实现：
一种珊瑚树萜类成分的制备方法，包括如下步骤：将珊瑚树干燥叶粉碎，用40-50%的甲醇冷浸提取1-3次，每次3-5d，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；将浸膏用适量的水溶解后用乙酸乙酯萃取3-5次，合并萃取液，减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取物；将乙酸乙酯萃取物用硅胶拌样，65-75℃烘干，经硅胶色谱柱分离，依次用体积比为65:1、45:1、16:1、10:1的氯仿-甲醇洗脱，收集16:1洗脱部分，浓缩即得。
优选地，所述的制备方法中，用45%的甲醇冷浸提取。
优选地，所述的制备方法中，冷浸提取2次。
优选地，所述的制备方法中，每次4d。
优选地，所述的制备方法中，1kg珊瑚树叶用7-9l溶剂进行提取。
优选地，所述的制备方法中，1g浸膏用8-10ml水溶解。
优选地，所述的制备方法中，1g乙酸乙酯萃取物用1-2g硅胶拌样。
优选地，所述的制备方法中，所述硅胶为180目。
优选地，所述的制备方法中，70℃烘干。
本发明技术效果：
该方法可以富集珊瑚树萜类成分，具有细胞毒和抑菌的作用，可以用于药品制备。此外，该方法操作简便，可大规模实施。
具体实施方式
下面结合实施例具体介绍本发明的实质性内容。
实施例1
一种珊瑚树萜类成分的制备方法，包括如下步骤：将珊瑚树干燥叶粉碎，用45%的甲醇冷浸提取2次，每次4d，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；将浸膏用适量的水溶解后用乙酸乙酯萃取4次，合并萃取液，减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取物；将乙酸乙酯萃取物用180目硅胶拌样，70℃烘干，经硅胶色谱柱分离，依次用体积比为65:1、45:1、16:1、10:1的氯仿-甲醇洗脱，收集16:1洗脱部分，浓缩即得。
其中，1kg珊瑚树叶用8l溶剂进行提取，1g浸膏用9ml水溶解，1g乙酸乙酯萃取物用1.5g硅胶拌样。
实施例2
一种珊瑚树萜类成分的制备方法，包括如下步骤：将珊瑚树干燥叶粉碎，用40%的甲醇冷浸提取1次，每次3d，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；将浸膏用适量的水溶解后用乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取物；将乙酸乙酯萃取物用180目硅胶拌样，65℃烘干，经硅胶色谱柱分离，依次用体积比为65:1、45:1、16:1、10:1的氯仿-甲醇洗脱，收集16:1洗脱部分，浓缩即得。
其中，1kg珊瑚树叶用7l溶剂进行提取，1g浸膏用8ml水溶解，1g乙酸乙酯萃取物用1g硅胶拌样。
实施例3
一种珊瑚树萜类成分的制备方法，包括如下步骤：将珊瑚树干燥叶粉碎，用50%的甲醇冷浸提取3次，每次5d，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；将浸膏用适量的水溶解后用乙酸乙酯萃取5次，合并萃取液，减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取物；将乙酸乙酯萃取物用180目硅胶拌样，75℃烘干，经硅胶色谱柱分离，依次用体积比为65:1、45:1、16:1、10:1的氯仿-甲醇洗脱，收集16:1洗脱部分，浓缩即得。
其中，1kg珊瑚树叶用9l溶剂进行提取，1g浸膏用10ml水溶解，1g乙酸乙酯萃取物用2g硅胶拌样。
该方法可以富集珊瑚树萜类成分，具有细胞毒和抑菌的作用，可以用于药品制备。此外，该方法操作简便，可大规模实施。