本发明涉及一种白背叶中香豆素类成分的制备方法。
背景技术：
白背叶为大戟科euphorbiaceae野桐属植物白背叶mallotusapelta(lour.)muell.arg.［ricinusapeltalour.］的根或叶，又名酒药子树、白膜叶等。味微苦、涩，性平。我国主要分布于江苏、安徽、江西、福建、河南、广西、海南、陕西、云南等地。白背叶在民间应用广泛，主要以根及叶入药，根具有柔肝活血，健脾化湿，收敛固脱之功效，常用于慢性肝炎，肝脾肿大，子宫脱垂，脱肛，白带，妊娠水肿；叶能消炎止血，主要是外用，常用于中耳炎，疖肿，跌打损伤，外伤出血。
该属植物含有丰富的化合物类型，主要以苯并吡喃类、香豆素类、三萜类以及萜类化合物为主。苯并吡喃衍生物主要存在于白背叶的叶子中；香豆素类化合物主要存在于叶子中，根和茎亦有分布；三萜类化合物在白背叶的根、茎、叶中均有分布。萜类化合物以二萜类为主，存在于叶子中。此外，白背叶还含有生物碱类、黄酮类以及挥发性成分。
研究表明白背叶叶子部分有良好的止血、抗肿瘤作用，根部分具有较好的抗病毒和保肝活性，特别是某些化学成分具有强烈的抑制hiv、逆转录酶或细胞dna聚合酶的活性，提示其具有应用于治疗乙肝和艾滋病的潜力。此外，有研究表明，白背叶根水煎剂对金黄色葡萄球菌有抑制作用，乙醇提取物能够抑制志贺痢疾杆菌；从根中分离出的化合物均能在不同程度上抑制金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌及绿脓杆菌。白背叶煎剂和浸剂能使钉螺的死亡率达到30%~60%。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种白背叶中香豆素类成分的制备方法。
本发明通过下面技术方案实现：
一种白背叶中香豆素类成分的制备方法，包括如下步骤：将白背叶的干燥叶粉碎，用体积分数为80-90%的乙醇热回流2-4次，每次1.5-2.5h，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；将浸膏以适量水溶解后用大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用纯水、体积分数35%、60%、70%、80%、95%的乙醇梯度洗脱，收集80%乙醇洗脱部位，再经硅胶柱色谱分离，依次用体积比50:1、35:1、22:1、15:1、5:1的氯仿-甲醇洗脱，收集22:1洗脱部分，浓缩即得。
优选地，所述的制备方法中，用体积分数为85%的乙醇热回流提取。
优选地，所述的制备方法中，回流提取3次。
优选地，所述的制备方法中，每次提取2h。
优选地，所述的制备方法中，1kg白背叶干燥叶使用8-10l溶剂进行提取。
优选地，所述的制备方法中，1g浸膏用4-6ml水溶解。
优选地，所述的制备方法中，所述大孔吸附树脂柱为d101型。
本发明技术效果：
该制备方法操作简单，得到的香豆素提取物具有抗肿瘤、抗炎活性，可以作为白背叶的有效部位应用于药品制备。
具体实施方式
下面结合实施例具体介绍本发明的实质性内容。
实施例1
一种白背叶中香豆素类成分的制备方法，包括如下步骤：将白背叶的干燥叶粉碎，用体积分数为85%的乙醇热回流3次，每次2h，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；将浸膏以适量水溶解后用d101型大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用纯水、体积分数35%、60%、70%、80%、95%的乙醇梯度洗脱，收集80%乙醇洗脱部位，再经硅胶柱色谱分离，依次用体积比50:1、35:1、22:1、15:1、5:1的氯仿-甲醇洗脱，收集22:1洗脱部分，浓缩即得。
其中，1kg白背叶干燥叶使用9l溶剂进行提取，1g浸膏用5ml水溶解。
实施例2
一种白背叶中香豆素类成分的制备方法，包括如下步骤：将白背叶的干燥叶粉碎，用体积分数为80%的乙醇热回流2次，每次1.5h，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；将浸膏以适量水溶解后用d101型大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用纯水、体积分数35%、60%、70%、80%、95%的乙醇梯度洗脱，收集80%乙醇洗脱部位，再经硅胶柱色谱分离，依次用体积比50:1、35:1、22:1、15:1、5:1的氯仿-甲醇洗脱，收集22:1洗脱部分，浓缩即得。
其中，1kg白背叶干燥叶使用8l溶剂进行提取，1g浸膏用4ml水溶解。
实施例3
一种白背叶中香豆素类成分的制备方法，包括如下步骤：将白背叶的干燥叶粉碎，用体积分数为90%的乙醇热回流4次，每次2.5h，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；将浸膏以适量水溶解后用d101型大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用纯水、体积分数35%、60%、70%、80%、95%的乙醇梯度洗脱，收集80%乙醇洗脱部位，再经硅胶柱色谱分离，依次用体积比50:1、35:1、22:1、15:1、5:1的氯仿-甲醇洗脱，收集22:1洗脱部分，浓缩即得。
其中，1kg白背叶干燥叶使用10l溶剂进行提取，1g浸膏用6ml水溶解。
该制备方法操作简单，得到的香豆素提取物具有抗肿瘤、抗炎活性，可以作为白背叶的有效部位应用于药品制备。