一种保护鼻腔的组合物的制作方法

文档序号:16531101发布日期:2019-01-05 10:45阅读:246来源:国知局

本发明涉及一种保护鼻腔的组合物,属于日常用品技术领域。



背景技术:

随着环境的污染变化,天气经常变化无常,而且经常发生大雾、雾霾,或者北方的干燥天气,就会影响人的呼吸道正常功能,鼻腔是空气的出入通道,可以过滤、润湿和温暖吸入的空气。鼻腔干燥或鼻塞,就会换用口腔呼吸,容易引发呼吸道疾病,影响人们的健康。

因此,保护好鼻腔,对于预防鼻腔干燥和呼吸道疾病至关重要。现有的保护鼻腔大多是润湿功效,但效用持续时间短,无法很好地全天候地保护呼吸道。



技术实现要素:

本发明目的是克服现有技术的缺陷,提供一种效用持久的保护鼻腔的组合物,该组合物可以保持鼻腔湿润通畅、修复鼻粘膜损伤,防止雾霾颗粒侵入呼吸系统。

本发明为实现上述目的,采用以下技术方案:

一种保护鼻腔的组合物,其特征在于基料中含有芦荟油和阳离子表面活性剂。

芦荟油是c12~c14脂肪酸为主的天然植物油,包含芦荟固有的169种有益成分,芦荟油因含有类胡萝卜素和芦荟大黄素及其衍生物,颜色呈浅黄绿色混浊液体,主要成分为混合脂肪酸甘油脂,油酸(顺—9—十八碳烯酸)占主要组成部分。芦荟油含天然胶性物质,保水木质素(lignin),具有强渗透物质,能帮助营养素渗透进入肌肤皂角(saponons),具有强力清洁、抗菌力作用,为天然皂素含anthraquinonecomplex,具有消炎、消肿、抑制细菌生长、止痒、止痛等效果。具有滋润保湿、美白祛斑、抗衰老、防过敏等直接美容效果。同时起到抑止皮肤表面致病微生物和细菌,杀死对人体皮肤有害的螨虫,防止体表微生物的繁殖,预防皮肤病的发生。适合油性皮肤,平衡、抑制皮脂分泌,促进伤口愈合。芦荟油具有抗肿瘤作用,对heps、esc、s180及b16黑色素瘤等移植性肿瘤均有效。芦荟油中所含的β—胡萝卜素(β—carotene)能增强放疗和化疗对肿瘤的疗效,并降低它们对机体的毒付作用,提高宿主的免疫功能。β-胡萝卜素预防肿瘤和辅助肿瘤治疗的作用均与抗氧化性质密切相关。β-胡萝卜素中含有多个共轭双键,为一良好的抗氧化剂,因此能提高机体的解毒功能,有利于致癌物迅速失活,对致癌物前体的活化亦有抑制作用,β—胡萝卜素还能猝灭自由基并阻止自由基的产生,类似于超氧化物岐化酶的作用,所以芦荟油又是一种很好的化妆品添加剂,使用这种添加剂的化妆品能有效抑制自由基引起的脂质过氧化作用。

芦荟油的控制指标有:比重、碘值、皂化值、酸价、折光率、游离脂肪酸、芦荟多糖和卫生指标等。用于医药和化妆品时,碘值应在80~100,皂化值应在185~195,比重约为0.903/20℃。

阳离子表面活性剂主要是含氮的有机胺衍生物,由于其分子中的氮原子含有孤对电子,故能以氢键与酸分子中的氢结合,使氨基带上正电荷。因此,它们在酸性介质中才具有良好的表面活性;而在碱性介质中容易析出而失去表面活性。阳离子表面活性剂优选中性无刺激的阳离子表面活性剂。空气中的灰尘呈负电阴离子型,与阳离子表面活性剂相互吸附,可以阻止雾霾等灰尘进入呼吸道。

本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为1~50重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为10~50重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为20~50重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为30~50重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为40~50重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为1~40重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为1~30重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为1~20重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为1~10重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为10~40重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为10~30重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为10~20重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为20~40重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为20~30重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为25~35重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述芦荟油的量为30重量份。

本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为1~50重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为10~50重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为20~50重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为30~50重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为40~50重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为1~40重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为1~30重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为1~20重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为1~10重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为10~40重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为10~30重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为10~20重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为20~40重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为20~30重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为25~35重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述阳离子表面活性剂的量为30重量份。

本发明保护鼻腔的组合物还包括紫草油和虾青素中的一种或两种。

紫草油凉血解毒,化腐生肌,可以促进鼻腔内破裂处的愈合。本发明中的紫草油优选由麻油浸泡制得,中医学认为麻油性味甘凉,外用有解毒生肌、消肿止痛功效,从现代药理学角度来看,麻油消炎止痒,对皮肤及黏膜无刺激性,有利于组织的修复生长和促进创面愈合。

本发明中的虾青素,即3,3′-二羟基-4,4′-二酮基-β,β′-胡萝卜素,又名虾黄质、龙虾壳色素,为萜烯类不饱和化合物,化学分子式为c40h52o4,分子结构中有两个β-紫罗兰酮环,11个共轭双键。虾青素广泛存在于自然界,如大多数甲壳类动物和鲑科鱼类体内,植物的叶、花、果,以及火烈鸟的羽毛中等。虾青素在体内可与蛋白质结合而呈青、蓝色,有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、预防心脑血管疾病的作用;还可以提高身体耐力,降代肌肉受损的风险;调节细胞因子,抑制炎症细胞因子和化学因子的基因显现。

本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述紫草油的量为1~30重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述紫草油的量为10~30重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述紫草油的量为20~30重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述紫草油的量为1~20重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述紫草油的量为1~10重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述紫草油的量为10~20重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述紫草油的量为5~15重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述紫草油的量为10~25重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述紫草油的量为15重量份。

本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述虾青素的量为1~30重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述虾青素的量为10~30重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述虾青素的量为20~30重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述虾青素的量为1~20重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述虾青素的量为1~10重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述虾青素的量为10~20重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述虾青素的量为5~15重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述虾青素的量为10~25重量份;本发明的典型实施方案,以100重量份基料计,所述虾青素的量为15重量份。

本发明中的基料为膏基,蜡基,油基或乳液基,优选便于鼻腔使用的制剂形式。膏基和蜡基便于制成条状直接用于鼻腔内,油基和乳液基可以用喷剂或借助棉签的形式作用于鼻腔内,膏基和蜡基基料主要包括:霍霍巴油,橄榄油,可可脂,蜂蜡。霍霍巴油主要起保湿作用。

优选地,本发明基料还包括维生素e,精油,薄荷精油,清凉剂,中药组分和α-红没药醇中的一种或几种。

维生素e是一种脂溶性维生素,其主要有效成分为生育酚。维生素e对酸、热都很稳定,可以保护t淋巴细胞、保护红细胞、抗自由基氧化;对烧伤、冻伤、毛细血管出血、美容等方面有很好的疗效。

精油选植物精油,赋予基料不同的香味。

薄荷精油清咽润喉,清凉镇痛,能抑制粘膜发炎,并促进排汗;还可以收缩微血管,排除体内素素,舒缓发痒、发炎和灼伤,柔软皮肤;配合清凉剂可以更好地收缩鼻腔内毛细血管,缓解鼻腔发干发痒症状,保持鼻腔通畅。

α-红没药醇不仅具有抗炎性能,还被证明有抑菌活性,有效保护和护理过敏性皮肤。

进一步地,中药组分为抗炎中药,优选黄柏、霍香、金银花、薄公英、茶多酚、花黄素和茶褐素中的一种或几种。

本发明与现有技术相比,具有以下优点:

本发明用芦荟油作为主要功效成分,对鼻腔内伤口促进愈合,保湿又防癌,配合阳离子表面活性剂从阻止灰尘吸入呼吸道和保湿防护上对鼻腔进行双重保护;紫草油进一步促进伤口愈合,虾青素抗氧化的同时进一步辅助抗癌。

本发明组合物,能够防雾霾(pm2.5里含有氮氧化物之类的,只要皮肤接触这种污染的空气就能被氧化,产生自由基,所以很多仿雾霾其实是抗氧化),对鼻腔有保湿、抗菌抗炎、抗氧化,收缩毛细血管并促进小创伤愈合的功效,有效缓解鼻塞,保持鼻腔通气。

【具体实施方式】

所提供的以下实施例仅用于解释目的而不是用于,也不应被解释为以任何方式限制本发明。本领域那些技术人员将会认识到在不超越本发明的精神或范围的情况下可对以下实施例做出常规变化和修改。

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明,以下各实施例的份数均为重量份:

实施例1:

膏基基料100份,芦荟油1份,阳离子表面活性剂1份。

实施例2:

膏基基料100份,芦荟油5份,阳离子表面活性剂5份。

实施例3:

膏基基料100份,芦荟油10份,阳离子表面活性剂10份。

实施例4:

膏基基料100份,芦荟油15份,阳离子表面活性剂15份。

实施例5:

膏基基料100份,芦荟油20份,阳离子表面活性剂20份。

实施例6:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂20份。

实施例7:

膏基基料100份,芦荟油40份,阳离子表面活性剂20份。

实施例8:

膏基基料100份,芦荟油50份,阳离子表面活性剂20份。

实施例9:

膏基基料100份,芦荟油50份,阳离子表面活性剂5份。

实施例10:

膏基基料100份,芦荟油50份,阳离子表面活性剂10份。

实施例11:

膏基基料100份,芦荟油50份,阳离子表面活性剂15份。

实施例12:

膏基基料100份,芦荟油50份,阳离子表面活性剂30份。

实施例13:

膏基基料100份,芦荟油10份,阳离子表面活性剂20份。

实施例14:

膏基基料100份,芦荟油1份,阳离子表面活性剂20份。

实施例15:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份。

实施例16:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂10份,紫草油1份。

实施例17:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂10份,紫草油5份。

实施例18:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂10份,紫草油10份。

实施例19:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂10份,紫草油15份。

实施例20:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂10份,紫草油20份。

实施例21:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂10份,紫草油30份。

实施例22:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素1份。

实施例23:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素5份。

实施例24:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素10份。

实施例25:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素15份。

实施例26:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素20份。

实施例27:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素25份。

实施例26:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素30份。

实施例27:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油1份,虾青素1份。

实施例28:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油5份,虾青素5份。

实施例29:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油10份,虾青素10份。

实施例30:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油15份,虾青素15份。

实施例31:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油20份,虾青素20份。

实施例32:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油30份,虾青素30份。

实施例33:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油10份,虾青素5份。

实施例34:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油20份,虾青素5份。

实施例35:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油30份,虾青素5份。

实施例36:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂20份,紫草油5份,虾青素10份。

实施例37:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂20份,紫草油5份,虾青素15份。

实施例38:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂20份,紫草油5份,虾青素20份。

实施例39:

膏基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂20份,紫草油5份,虾青素30份。

实施例40:

蜡基基料100份,芦荟油1份,阳离子表面活性剂1份。

实施例41:

蜡基基料100份,芦荟油10份,阳离子表面活性剂10份。

实施例42:

蜡基基料100份,芦荟油20份,阳离子表面活性剂20份。

实施例43:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂30份。

实施例44:

蜡基基料100份,芦荟油40份,阳离子表面活性剂10份。

实施例45:

蜡基基料100份,芦荟油50份,阳离子表面活性剂30份。

实施例46:

蜡基基料100份,芦荟油10份,阳离子表面活性剂20份。

实施例47:

蜡基基料100份,芦荟油10份,阳离子表面活性剂30份。

实施例48:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油1份。

实施例49:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油10份。

实施例50:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油15份。

实施例51:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油20份。

实施例52:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油25份。

实施例53:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油30份。

实施例54:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素10份。

实施例55:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素20份。

实施例56:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素30份。

实施例57:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油10份,虾青素30份。

实施例58:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油20份,虾青素30份。

实施例59:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油30份,虾青素20份。

实施例60:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油1份,虾青素10份。

实施例61:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油5份,虾青素15份。

实施例62:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油30份,虾青素1份。

实施例63:

蜡基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油25份,虾青素5份。

实施例64:

油基基料100份,芦荟油15份,阳离子表面活性剂15份。

实施例65:

油基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份。

实施例66:

油基基料100份,芦荟油40份,阳离子表面活性剂20份。

实施例67:

油基基料100份,芦荟油50份,阳离子表面活性剂30份。

实施例68:

油基基料100份,芦荟油1份,阳离子表面活性剂50份。

实施例69:

油基基料100份,芦荟油25份,阳离子表面活性剂25份。

实施例70:

油基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油15份。

实施例71:

油基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油20份。

实施例72:

油基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,紫草油30份。

实施例73:

油基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素15份。

实施例74:

油基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素20份。

实施例75:

油基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂15份,虾青素30份。

实施例76:

油基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂20份,紫草油20份,虾青素20份。

实施例77:

油基基料100份,芦荟油25份,阳离子表面活性剂25份,紫草油1份,虾青素30份。

实施例78:

油基基料100份,芦荟油25份,阳离子表面活性剂25份,紫草油30份,虾青素1份。

实施例79:

油基基料100份,芦荟油25份,阳离子表面活性剂25份,紫草油15份,虾青素15份。

实施例80:

乳液基基料100份,芦荟油10份,阳离子表面活性剂30份。

实施例81:

乳液基基料100份,芦荟油25份,阳离子表面活性剂25份。

实施例82:

乳液基基料100份,芦荟油30份,阳离子表面活性剂10份。

实施例83:

乳液基基料100份,芦荟油25份,阳离子表面活性剂25份,紫草油10份。

实施例84:

乳液基基料100份,芦荟油25份,阳离子表面活性剂25份,虾青素10份。

实施例85:

乳液基基料100份,芦荟油10份,阳离子表面活性剂30份,紫草油10份,虾青素10份。

实施例86:

乳液基基料100份,芦荟油25份,阳离子表面活性剂25份,紫草油15份,虾青素15份。

本发明实施例1-39制成膏霜状产品时,制备方法为:

将油溶性组分诸如芦荟油、油溶性阳离子表面活性剂、紫草油和/或虾青素油与膏基基料的油溶性组分诸如霍霍巴油、橄榄油、可可脂类混合熔化,将水相组分诸如纤维素、黄原胶等溶化,分别加热到80~90℃左右,油相加入水相,均质混合,直至乳化完成,冷却至40~50℃时加入功能成分(维生素e,精油,薄荷精油,清凉剂,中药组分和α-红没药醇中的一种或几种),待完全冷却,得到膏霜。

本发明实施例40-63以蜡基基料为主料制成蜡基类膏状产品时,制备方法为:

将蜡基(蜂蜡、小烛树蜡等)及其他油溶性组分(霍霍巴油、橄榄油、可可脂、芦荟油、油溶性阳离子表面活性剂、紫草油或虾青素油)混合加热至熔化,冷却至40~50℃时加入功能成分(维生素e,精油,薄荷精油,清凉剂,中药组分和α-红没药醇中的一种或几种),倒入模具,完全冷却后脱模即可。

本发明实施例64-79制成油剂的制备方法为:

将油溶性成分(霍霍巴油、橄榄油、可可脂、芦荟油、油溶性阳离子表面活性剂、紫草油或虾青素油)混合加热熔化,冷却至40~50℃时加入功能成分(维生素e,精油,薄荷精油,清凉剂,中药组分和α-红没药醇中的一种或几种),冷却即可。

本发明实施例80-86以乳液基为基料制成乳液的制备方法为:

将油相(油溶性组分:霍霍巴油、橄榄油、可可脂、芦荟油、油溶性阳离子表面活性剂、紫草油或虾青素油)熔化,水相(水溶性组分)溶化,加热到80~90℃左右,油相加入水相,均质混合,直至乳化完成,冷却至40~50℃时加入功能成分(维生素e,精油,薄荷精油,清凉剂,中药组分和α-红没药醇中的一种或几种),待完全冷却,得到乳液。

实施例1-86的功效性试验:

功效实验方法:

一、保湿性:

电容法测定皮肤角质层水分含量(方法见qb/t4256-2011《化妆品保湿功效评价指南》),皮肤含水量测试仪corneometercm825(德国ck公司)测定皮肤水分含量mmv值,是一个相对值,单位c.u.(corneometerunits),测得本发明实施例1-86的变化率(水合率)%在5~20%内。

二、抗炎/修复:

1.实验原理

透明质酸酶能将大分子的透明质酸水解成低分子化合物,未水解的透明质酸会与十六烷基三甲基溴化铵(ctab)形成不溶物,而水解后的低分子化合物不会。通过测定405nm处的浊度值,可以反映透明质酸酶的活性。

2.主要试剂

透明质酸钠(bomei,mw(0.8~2.0)×106);透明质酸酶(海源叶生物科技有限公司,300~500u/mg);醋酸钠(nac2h3o3·3h2o),冰醋酸,氯化钠,十六烷基三甲基溴化铵(ctab)均为国产分析纯。

2.1醋酸缓冲液(0.2m,ph6.0,0.15mnacl)

称取醋酸钠(nac2h3o3·3h2o)2.73g用适量水溶解,加入1mol/lhac水溶液(5.88ml冰醋酸用水稀释至100ml)1.0ml,加入0.8766gnacl,定容至100ml。

2.2透明质酸钠溶液(0.5mg/ml)

称取透明质酸钠12.5mg,溶于25ml上述醋酸缓冲液。

2.3透明质酸酶溶液(1mg/ml)

称取4mg透明质酸酶(现用透明质酸酶为上海源叶生物科技有限公司,300u-500u/mg),溶于4ml上述醋酸缓冲液。

2.4ctab溶液(2.5%)

称取ctab2.5g,加入适量水,加热溶解成透明,冷却至室温后定容至100ml.

3.实验方法

a1样品实验组:分别取待测液25l、50l、125l及250l,用醋酸缓冲液(2.1)补足到250l,加入200l透明质酸钠溶液(2.2),加入透明质酸酶溶液(2.3)50l,于37℃下反应15min,加入1.0mlctab溶液(2.4),37℃放置10min,于405nm下测定其吸光度值。

a2样品空白组:分别取待测液25l、50l、125l及250l,用醋酸缓冲液(2.1)补足到250l,加入200l透明质酸钠溶液(2.2),加入醋酸缓冲液溶液(2.1)50l,于37℃下反应15min,加入1.0mlctab溶液(2.4),37℃放置10min,于405nm下测定其吸光度值。

b1阳性对照实验组:取0.5%甘草酸二钾水溶液25l、50l、125l及250l,用醋酸缓冲液(2.1)补足到250l,加入200l透明质酸钠溶液(2.2),加入透明质酸酶溶液(2.3)50□,于37℃下反应15min,加入1.0mlctab溶液(2.4),37℃放置10min,于405nm下测定其吸光度值。

b2阳性对照空白组:取0.5%甘草酸二钾水溶液25l、50l、125l及250l,用醋酸缓冲液(2.1)补足到250l,加入200l透明质酸钠溶液(2.2),加入醋酸缓冲液溶液(2.1)50l,于37℃下反应15min,加入1.0mlctab溶液(2.4),37℃放置10min,于405nm下测定其吸光度值。

c1对照实验组:醋酸缓冲液(2.1)250l,加入200l透明质酸钠溶液(2.2),加入透明质酸酶溶液(2.3)50l,于37℃下反应15min,加入1.0mlctab溶液(2.4),37℃放置10min,于405nm下测定其吸光度值。

c2对照空白组:醋酸缓冲液(2.1)250l,加入200l透明质酸钠溶液(2.2),加入醋酸缓冲液溶液(2.1)50l,于37℃下反应15min,加入1.0mlctab溶液(2.4),37℃放置10min,于405nm下测定其吸光度值。

实验组加入透明质酸酶溶液;

样品空白组:缓冲液替代透明质酸酶液,消除测试样品本底吸收;

空白对照组:缓冲液代替样品,即阴性对照。

4、透明质酸酶抑制率的计算

样品对透明质酸酶抑制率的测定计算公式如下:

[1-(a2-a1)/(c2-c1)]*100%

其中a1为样品实验组吸光度值;a2为样品空白组吸光度值;c1为对照实验组吸光度值;c2为对照空白组吸光度值。

测得实施例1-86产品的透明质酸酶活性抑制率在20~50%内。

三、抗氧化:dpph自由基清除实验

1.实验原理

dpph自由基有单电子,在517nm处有一强吸收,其醇溶液呈紫色。当有自由基清除剂存在时,由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失,其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系,因而可用分光光度计进行快速的定量分析。

2.主要试剂

dpph(上海源叶生物科技有限公司,≥97%);抗坏血酸(vc),甲醇均为国产分析纯。

3.实验方法见表1:

表1:

“+”为添加,“/”为不添加

空白组:甲醇代替dpph甲醇液,消除测试样品本底吸收;

空白对照组:蒸馏水代替样品,即阴性对照。

dpph清除率(%)=[a0-(a1-a2)]/a0*100%

其中a0为空白对照组吸光度值;a1为实验组吸光度值;a2为空白组吸光度值。

分别对实施例1-86进行抗氧化性验证,实施例1-86的dpph自由基清除率在30~70%内。

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