一种止血组合物及其制备方法与流程

本发明属于生物医学材料技术领域，具体涉及一种止血组合物及其制备方法。

背景技术：

在多种场合中人类(包括动物)可能受伤。在一些场合中，创伤和出血是轻微的，除施加简单急救外，仅要求常规的凝血功能就能正常止血。然而，不幸的是在很多意外场合中可能发生大量出血，例如，皮肤割破或者穿透伤(由刀割或者子弹引起)会导致主动脉损伤，一个正常人的大部分血会在几分钟中流失并死亡。因而，在日常生活中突发性事故的急救治疗、医院对病人的手术过程中的创伤止血、特别是战争中受伤战士的救护中，对患者有效的快速止血是非常重要。

目前，很多紧急止血材料被开发，例如脱水沸石/粘合剂(us4822349)、部分水合沸石(us7858123)、高岭土/纱布复合物(us7604819)以及沸石与高岭土的组合物(us8703634)。无论是正常功能的凝血还是利用止血材料来促进血液凝固，其凝血过程必须严格遵循凝血通道的每一步反应流程来达到血液凝固的目的，并且凝血通道的每一步需要消耗一定的时间，其详细过程如图1所示。所述凝血通道的每一步反应流程是指从一种凝血因子经反应形成活化凝血因子，例如图1中从凝血因子xii形成xiia(xii的活化凝血因子)，由xia激活凝血因子ix形成ixa(ix的活化凝血因子)。如果凝血通道的其中一步反应发生障碍，必然导致凝血通道不能正常进行，无法实现凝血功能。目前以沸石代表的无机止血材料，其促进血液凝固的过程需遵循内源性凝血通道(intrinsicpathway)，也就是必须严格按照以下反应流程进行：首先由沸石激活凝血因子xii形成xiia，从而启动内源性凝血瀑布，然后由xiia激活凝血因子xi形成xia，再由xia激活凝血因子ix形成ixa，再由ixa激活凝血因子x形成xa；在凝血因子xa处，活化凝血因子ii形成凝血酶，然后凝血酶剪切纤维蛋白原，形成纤维蛋白单体，最后在凝血因子xiiia作用下形成交联的纤维蛋白。由沸石激活凝血因子xii到最终形成交联的纤维蛋白的多步反应，总共需要花费2～6min。虽然沸石能促进凝血过程，但凝血时间过长，会导致患者失血过多，部分重要器官因失血会产生不可逆损伤，造成生命危险。

另外，血友病患者由于先天性缺乏凝血通道中的viii、ix、xi凝血因子，无法通过凝血通道来实现凝血。对于血友病患者发生出血的情况，止血远比正常人困难，需要通过外加生物止血制剂来实现凝血，常用的生物止血制剂可以是凝血酶、纤维蛋白胶等。如图1所示，凝血酶起凝血作用的过程是：凝血酶直接剪切纤维蛋白原，形成纤维蛋白单体，最后在凝血因子xiiia作用下形成交联的纤维蛋白，一般需要的凝血时间为0.5～1min。纤维蛋白胶能够提供凝血酶和纤维蛋白原，所以可以实现凝血功能，一般需要的凝血时间为0.5～1min。其中，凝血酶用于剪切纤维蛋白原，同时形成活化的凝血因子xiiia；剪切后的纤维蛋白原形成纤维蛋白单体，其在xiiia作用下彼此交联，形成稳定的交联纤维蛋白凝块，从而起到止血的作用。但是凝血酶或者纤维蛋白胶制取困难、纯度要求高、保存条件(-20℃)苛刻，成本非常高(凝血酶的市场价一般为2000元/mg；纤维蛋白胶的市场价一般为8000元/小包，一次用量)，因而导致其实用价值和商业价值低。

沸石是一种常用的无机材料，酶是一种促进生物反应的生物材料，无机与生物材料两者结合存在很大的挑战，其主要的原因是：沸石为“刚性”的无机材料，酶为“柔性”的生物大分子，当酶在接触到沸石表面时，刚性的沸石表面容易使得酶的“柔性”特性发生变化，即构象发生变化；并且与沸石结合后的酶，酶的其中一部分与沸石表面接触，导致与反应物接触的可能性降低，即反应速度变慢，酶与沸石的结合使得酶的活性降低。因此，在沸石表面引入酶，都会导致酶在沸石表面不同程度的失活。例如：沸石是一种无机止血材料，凝血酶是一种高效的生物止血制剂；但是两者结合，大部分凝血酶(94％)在沸石表面失活，凝血酶的凝血效果从0.5min延长至2.2min(图4)，止血效果不佳，远远没有达到紧急止血的要求。目前，现有技术仍未发现止血快速、成本低、且对血友病有效的无机生物酶结合止血材料。

技术实现要素：

针对现有技术的不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种止血快速、成本低、且对血友病有效的止血组合物。在研究过程中，发明人通过选择特定种类的沸石、特定性能的酶和特定沸石与酶的质量比，以及对沸石的表面进行改性来控制沸石与酶之间的相互作用以及酶在沸石表面的构象。发明人通过控制孔道尺寸、沸石的二价金属阳离子的极化作用、胰蛋白酶与沸石按照质量比为1:200～4:10的配比，以上控制手段的综合作用来“规范”酶在沸石表面的构象，发明人意外发现胰蛋白酶不进入沸石的内部骨架，并且胰蛋白酶按照规律的构象和取向排布在沸石表面(图2)，特别是胰蛋白酶的活性部分不朝向沸石，有利于“捕捉”反应物。通过设计这种特殊的止血组合物，意外地实现了无机与生物材料的高效结合，克服了酶在沸石表面失活的技术难题，打破了传统学术上的思维定式。本发明止血组合物的胰蛋白酶活性不但没有降低，反而止血组合物的止血效果相对胰蛋白酶或沸石都大大提高，凝血时间大大降低(图3)。本发明的止血组合物不涉及凝血酶等昂贵生物制剂，仅需要廉价且易得的胰蛋白酶与具有微孔和二价阳离子的沸石特异性按特定比例组合，达到了止血快速、成本低、对血友病有效止血的目的。

本发明采用如下的技术方案：本发明用简单的方法得到了一种全新的材料，其为一种止血组合物，所述止血组合物至少包括沸石和胰蛋白酶，其中所述沸石的孔道为微孔，所述的沸石包含二价金属阳离子，所述胰蛋白酶与沸石的质量比为1:200～4:10(图2)。

所述的微孔为沸石孔道尺寸在2nm以下。

进一步的，所述的二价金属阳离子选自钴离子、镍离子、钙离子、镁离子、锶离子的任意一种或者多种。

进一步的，所述的沸石与胰蛋白酶的质量比为1:100～3:10；优选的，所述的沸石与胰蛋白酶的质量比为1:60～2.5:10；优选的，所述的沸石与胰蛋白酶的质量比为1:50～2:10；优选的，所述的沸石与胰蛋白酶的质量比为1:40～1.5:10；优选的，所述的沸石与胰蛋白酶的质量比为1:20～1:10。

进一步的，所述的二价金属阳离子占沸石骨架外金属阳离子的50％～95％；优选的，所述的二价金属阳离子占沸石骨架外金属阳离子的60％～90％；优选的，所述的二价金属阳离子占沸石骨架外金属阳离子的65％～85％；优选的，所述的二价金属阳离子占沸石骨架外金属阳离子的70％～80％；优选的，所述的二价金属阳离子占沸石骨架外金属阳离子的72％～78％。

进一步的，所述的沸石的硅铝比为1～20；优选的，所述的硅铝比为1.2～15；优选的，所述的硅铝比为1.5～4；优选的，所述的硅铝比为2～3。

进一步的，所述的沸石选自a型沸石、菱沸石、β沸石、丝光沸石、x型沸石、y型沸石、zsm-5型沸石的任意一种或者多种。

本发明的第二个目的是提供一种止血组合物的制备方法，包括如下步骤：1)制备一种沸石的悬浊液，所述沸石的孔道为微孔和沸石表面包含二价金属阳离子；2)将沸石的悬浊液与胰蛋白酶接触；3)使胰蛋白酶在沸石表面吸附。

进一步的，所述胰蛋白酶与沸石的质量比为1:200～4:10；所述的沸石与胰蛋白酶的质量比为1:100～3:10；优选的，所述的沸石与胰蛋白酶的质量比为1:60～2.5:10；优选的，所述的沸石与胰蛋白酶的质量比为1:50～2:10；优选的，所述的沸石与胰蛋白酶的质量比为1:40～1.5:10；优选的，所述的沸石与胰蛋白酶的质量比为1:20～1:10。

本发明的第三个目的是提供一种止血复合材料，所述的止血复合材料包括如前所述任何一种形式的止血组合物和添加剂。

进一步的，所述添加剂选自载体、抗菌材料、抗静电材料、高分子多糖的任意一种或多种。

进一步的，所述的载体是用于使止血组合物接触于伤口的基体。

进一步的，所述的抗菌材料是自身具有杀灭或抑制微生物功能的材料。

进一步的，所述的载体选自棉、蚕丝、羊毛、塑料、纤维素、人造丝、聚酯、聚氨酯、聚乙烯泡沫、聚丙烯酸泡沫、低密度聚醚、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸甲酯的任意一种或者多种。

进一步的，所述的抗菌材料选自纳米银颗粒、香草醛、乙基香草醛类化合物的任意一种或者多种。

进一步的，所述的高分子多糖选自纤维素、木质素、淀粉、壳聚糖、琼脂糖的任意一种或多种。

本发明的第四个目的是提供如前所述任何一种形式的止血组合物或如前所述任何一种形式的止血复合材料在止血领域的用途。

本发明的有益效果是：

1.止血组合物的凝血效果远远好于沸石或者胰蛋白酶的凝血效果，凝血时间大大缩短；在遭遇突发意外大出血时，能非常高效止血，降低大动脉出血致死的风险，减少重要器官的损伤；对血友病患者也能在非常短的时间内止血。

2.胰蛋白酶(0.1元/mg)和沸石(300元/吨)都非常便宜，胰蛋白酶与沸石的止血组合物的止血效果与凝血酶(2000元/mg)所起到的作用相当，可以大大降低止血材料的成本，更具有商业化前景。尤其对于血友病患者，止血组合物可作为其随身携带的紧急止血材料，减少其出血不止的风险，降低血友病患者一生的止血用药费用。

附图说明

图1为凝血通道的示意图；

图2为本发明的止血组合物的结构示意图；

图3为自然凝血时间、胰蛋白酶、a型沸石、凝血酶以及本发明的胰蛋白酶a型沸石止血组合物的正常血液的凝血效果比较图；

图4为自然凝血时间、凝血酶、凝血酶沸石复合材料、胰蛋白酶以及本发明的胰蛋白酶a型沸石止血组合物的正常血液的凝血效果比较图；

图5为自然凝血时间、胰蛋白酶4a型沸石组合物、胰蛋白酶a型沸石(nh4⁺)组合物、本发明的胰蛋白酶a型沸石止血组合物的正常血液的凝血效果比较图。

具体实施方式

以下结合附图和实施例进一步说明本发明。

凝血效果的测定

①正常血液的凝血时间

取25mg样品加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将正常血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的正常血液，正常血液凝固时的时间记为该样品的凝血时间。

②缺乏x因子血液的凝血时间

取25mg样品加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将缺乏x因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的缺乏x因子血液，缺乏x因子血液凝固时的时间记为该样品的凝血时间。

③缺乏viii因子血液的凝血时间

取25mg样品加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将缺乏viii因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的缺乏viii因子血液，缺乏viii因子血液凝固时的时间记为该样品的凝血时间。

④缺乏ix因子血液的凝血时间

取25mg样品加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将缺乏ix因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的缺乏ix因子血液，缺乏ix因子血液凝固时的时间记为该样品的凝血时间。

⑤缺乏xi因子血液的凝血时间

取25mg样品加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将缺乏xi因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的缺乏xi因子血液，缺乏xi因子血液凝固时的时间记为该样品的凝血时间。

对比实施例1

自然凝血时间为正常人出血到凝血所需的时间。

自然凝血效果的测定：在37℃进行体外凝血实验，将正常血液预先在37℃水浴恒温半小时。体外实验时，取20μl的0.2mcacl2溶液加入到2ml的离心管中，然后加入1ml恒温的正常血液，正常血液凝固的时间记为自然凝血时间(9.6min)。

对比实施例2

a型沸石的凝血效果测定：

①取25mga型沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将正常血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的正常血液，正常血液凝固时的时间记为a型沸石的凝血时间，a型沸石的凝血时间为2.8min(表1)，由此可见a型沸石的凝血效果一般。

②取25mga型沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将乏x、viii、ix或xi因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的乏x、viii、ix或xi因子血液，乏x、viii、ix或xi因子血液凝固时的时间记为a型沸石的凝血时间，但其过程中上述有缺陷的血液长时间没有发生凝固(表1)，由此可见a型沸石对血友病的患者并没有促凝血作用。

对比实施例3

胰蛋白酶的凝血效果测定：

①取25mg胰蛋白酶加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将正常血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的正常血液，正常血液凝固时的时间记为胰蛋白酶的凝血时间(4min)，由此可见胰蛋白酶的凝血效果一般。

②取25mg胰蛋白酶加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将乏x、viii、ix或xi因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的乏x、viii、ix或xi因子血液，乏x、viii、ix或xi因子血液凝固时的时间分别为4、4.6、4、4min，由此可见胰蛋白酶的凝血效果一般。

对比实施例4

凝血酶凝血效果的测定：

①取凝血酶(sigmat4648凝血酶，生产商sigma-aldrich公司)配制成1mg/ml溶液，取50ul加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将正常血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的正常血液，正常血液凝固时的时间记为凝血酶的凝血时间，凝血酶的凝血时间为0.5min，其凝血效果较好(见图3)。

②取凝血酶(sigmat4648凝血酶，生产商sigma-aldrich公司)配制成1mg/ml溶液，取50ul加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将乏x、viii、ix或xi因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的乏x、viii、ix或xi因子血液，乏x、viii、ix或xi因子血液凝固时的时间分别为0.5、0.52、0.51、0.54min，由此可见凝血酶的凝血效果较好。

对比实施例5

凝血酶沸石复合材料的制备：将5ga型沸石分散于30ml蒸馏水中；将凝血酶溶于ph为7.0的磷酸盐缓冲液，得到质量浓度为0.1％的凝血酶(sigmat4648凝血酶，生产商sigma-aldrich公司)溶液10ml；然后将二者按体积比3:1混合，制得a型沸石与凝血酶的重量比例为10:1的混合溶液40ml。在搅拌的条件下，加入0.5g丙三醇和1g甘露醇，并逐滴加入质量浓度5％的氯化钙溶液50ul，混合均匀，再于搅拌状态下，逐滴加入体积浓度1％戊二醛溶液250ul进行交联，然后倾入适当形状的模具中，放置2小时，待形成凝胶后，-20℃冷冻24小时，再于-40℃真空冷冻干燥36h，倒模、磨碎、封装，得到凝血酶沸石复合材料。

凝血酶沸石复合材料凝血效果的测定：

①取25mg凝血酶沸石复合材料加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将正常血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的正常血液，正常血液凝固时的时间记为凝血酶沸石复合材料的凝血时间(2.2min)，固定凝血酶的凝血酶沸石复合材料的凝血效果降低，说明凝血酶固定在沸石上后凝血效果降低(图4)。

②取25mg凝血酶沸石复合材料加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将乏x、viii、ix或xi因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的乏x、viii、ix或xi因子血液，乏x、viii、ix或xi因子血液凝固时的时间分别为4、3.6、4、4min，固定凝血酶的凝血酶沸石复合材料的凝血效果降低，说明凝血酶固定在沸石上后凝血效果明显降低。

实施例1

胰蛋白酶a型沸石止血组合物的制备：

①将硅铝比为2的a型沸石，用5m浓度的氯化镁溶液室温下浸渍12h，得到的a型沸石包含二价镁离子且其占沸石骨架外金属阳离子含量的95％。

②将上述25mg的a型沸石在1ml水溶液中分散均匀，形成a型沸石的悬浊液；使a型沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与a型沸石的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在a型沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶a型沸石止血组合物。

胰蛋白酶a型沸石止血组合物的正常血液凝血时间为0.4min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子血液的凝血时间分别为0.5、0.4、0.4、0.45min，由此可见胰蛋白酶a型沸石止血组合物对正常血液的凝血效果很好；对缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也很好，凝血时间大大缩短，对血友病患者能有很好的促进凝血作用。缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液加入a型沸石时，血液长时间不凝固(表1)，胰蛋白酶a型沸石止血组合物的凝血效果远远好于a型沸石或者胰蛋白酶的凝血效果(图3)，凝血时间大大缩短，在遭遇突发意外大出血时，能非常高效止血，降低大动脉出血致死的风险，减少重要器官的损伤。止血组合物的止血效果与凝血酶所起到的作用相当，可以大大降低止血材料的成本，更具有商业化前景。

表1胰蛋白酶a型沸石止血组合物、胰蛋白酶及a型沸石的凝血时间

实施例2

不同二价阳离子的胰蛋白酶a型沸石止血组合物的制备：

①将硅铝比为2的a型沸石，分别用5m浓度的氯化钴、氯化镍、氯化钙、氯化镁或氯化锶溶液一种或多种室温下浸渍12h，得到的a型沸石分别包含不同二价阳离子。

②将上述25mg含不同二价阳离子的a型沸石在1ml水溶液中分散均匀，形成a型沸石的悬浊液；使a型沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与a型沸石的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到不同二价阳离子的胰蛋白酶a型沸石止血组合物。

不同的二价阳离子(钴，镍，钙，镁，锶)的胰蛋白酶a型沸石止血组合物(表2)与对比实施例1-3的凝血效果，二价阳离子的胰蛋白酶a型沸石止血组合物的凝血效果大大优于自然凝血、胰蛋白酶、a型沸石的凝血效果。对缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也很好，凝血时间大大缩短，对血友病患者能有很好的促进凝血作用。止血组合物的止血效果与凝血酶所起到的作用相当，可以大大降低止血材料的成本，更具有商业化前景。

表2不同二价阳离子的胰蛋白酶a型沸石止血组合物的凝血时间

备注：1)胰蛋白酶co-a型沸石止血组合物表示包含钴离子的a型沸石与胰蛋白酶组合的止血组合物。2)胰蛋白酶co-a型/ni-a型沸石止血组合物表示包含钴离子和镍离子的a型沸石与胰蛋白酶组合的止血组合物。

实施例3

不同比例的胰蛋白酶a型沸石止血组合物的制备：

①将硅铝比为2的a型沸石，用5m浓度的氯化镁溶液室温下浸渍12h，得到的a型沸石分别包含二价镁离子且其占沸石骨架外金属阳离子含量的95％。

②将上述25mg的a型沸石在1ml水溶液中分散均匀，形成a型沸石的悬浊液；使a型沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与a型沸石的质量比为1:200，1:100，1:60，1:50，1:40，1:20，1:10，1.5:10，2:10，2.5:10，3:10，4:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到不同比例的胰蛋白酶a型沸石止血组合物(表3)。

表3不同比例的胰蛋白酶a型沸石止血组合物的凝血时间

不同比例的胰蛋白酶a型沸石止血组合物(分别按1:200，1:100，1:60，1:50，1:40，1:20，1:10，1.5:10，2:10，2.5:10，3:10，4:10的质量比制备)与对比实施例1-3的凝血效果，在胰蛋白酶与沸石的质量比为1:200～4:10的范围内，不同比例的胰蛋白酶a型沸石止血组合物的凝血效果(表3)大大优于自然凝血、胰蛋白酶、沸石的凝血效果。对缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也很好，凝血时间大大缩短，对血友病患者能有很好的促进凝血作用。止血组合物的止血效果与凝血酶所起到的作用相当，可以大大降低止血材料的成本，更具有商业化前景。

对比实施例6

①将硅铝比为2的a型沸石，用5m浓度的氯化钠溶液室温下浸渍24h，得到的沸石骨架外金属阳离子为na的a型沸石(即4a型沸石)。

②将上述25mg的4a型沸石在1ml水溶液中分散均匀，形成4a型沸石的悬浊液；使4a型沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与4a型沸石的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶4a型沸石止血组合物。

胰蛋白酶4a型沸石组合物的正常血液凝血时间为5min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为6.5、6、6、6.5min，由此可见胰蛋白酶4a型沸石组合物对正常血液和缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也不理想。胰蛋白酶4a型沸石组合物的凝血效果远不如的胰蛋白酶a型沸石止血组合物(图5)，胰蛋白酶4a型沸石组合物甚至比4a型沸石或者胰蛋白酶的凝血效果差，表明胰蛋白酶在4a型沸石(无二价阳离子)活性减小，甚至全部失活；也导致沸石促进凝血的效果降低。

对比实施例7

①将硅铝比为2的a型沸石，用5m浓度的氯化铵溶液室温下浸渍24h，得到的a型沸石包含一价铵离子且其占沸石骨架外金属阳离子含量的60％。

②将上述a型沸石(nh4⁺)在1ml水溶液中分散均匀，形成a型沸石(nh4⁺)的悬浊液；使a型沸石(nh4⁺)与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与a型沸石(nh4⁺)的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶a型沸石(nh4⁺)组合物。

胰蛋白酶a型沸石(nh4⁺)组合物的正常血液凝血时间为5.2min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为6.1、6.4、6.4、6.5min，由此可见胰蛋白酶a型沸石(nh4⁺)组合物对正常血液和缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也不理想。胰蛋白酶a型沸石(nh4⁺)组合物的凝血效果远不如的胰蛋白酶a型沸石止血组合物(图5)，胰蛋白酶a型沸石(nh4⁺)组合物甚至比a型沸石(nh4⁺，2.8min)或者胰蛋白酶的凝血效果差，表明胰蛋白酶在a型沸石(nh4⁺，无二价阳离子)活性减小，甚至全部失活，也导致沸石促进凝血的效果降低。

对比实施例8

①将硅铝比为15的β沸石，用0.1m浓度的氨水溶液室温下浸渍24h，得到的β沸石包含一价铵离子且其占沸石骨架外金属阳离子含量的40％。

②将上述β沸石(nh4⁺)在1ml水溶液中分散均匀，形成β沸石(nh4⁺)的悬浊液；使β沸石(nh4⁺)与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与β沸石(nh4⁺)的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶β沸石(nh4⁺)组合物。

胰蛋白酶β沸石(nh4⁺)组合物的正常血液凝血时间为5.6min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为6.1、6.4、6.3、6.5min，由此可见胰蛋白酶β沸石(nh4⁺)组合物对正常血液和缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也不理想。胰蛋白酶β沸石(nh4⁺)组合物的凝血效果远不如的胰蛋白酶β沸石止血组合物，胰蛋白酶β沸石(nh4⁺，2.8min)组合物甚至比β沸石(nh4⁺)或者胰蛋白酶的凝血效果差，表明胰蛋白酶在β沸石(nh4⁺，无二价阳离子)活性减小，甚至全部失活，也导致沸石促进凝血的效果降低。

对比实施例9

①将硅铝比为2的a型沸石，用5m浓度的氯化镁溶液室温下浸渍12h，得到的a型沸石包含二价镁离子且其占沸石骨架外金属阳离子含量的95％。

②将上述25mga型沸石在1ml水溶液中分散均匀，形成a型沸石的悬浊液；使a型沸石与0.83mg胰蛋白酶充分分散均匀(按胰蛋白酶与a型沸石的质量比为1:300)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶a型沸石组合物(1:300)。

胰蛋白酶a型沸石组合物(1:300)的正常血液凝血时间为2.8min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液在加入胰蛋白酶a型沸石组合物(1:300)后，血液长时间不凝固。由此可见，a型沸石与胰蛋白酶的比例需要合适，才能发挥较好的促凝血作用；当胰蛋白酶与沸石比例低于1:200时，促凝血效果差。

对比实施例10

①将硅铝比为2的a型沸石，用5m浓度的氯化镁溶液室温下浸渍12h，得到的a型沸石包含二价镁离子且其占沸石骨架外金属阳离子含量的95％。

②将上述a型沸石在1ml水溶液中分散均匀，形成a型沸石的悬浊液；使a型沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与a型沸石的质量比为5:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶a型沸石组合物(5:10)。

正常血液和缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液在加入胰蛋白酶a型沸石组合物(5:10)后，血液长时间不凝固。由此可见，a型沸石与胰蛋白酶的比例需要合适，才能发挥较好的促凝血作用；当胰蛋白酶与沸石比例高于4:10时，反而导致血液产生抗凝现象，加剧血液的大量流失。

对比实施例11

将介孔二氧化硅mcm-41(孔道为2.8-4.5nm)在1ml水溶液中分散均匀，形成介孔二氧化硅mcm-41的悬浊液；使介孔二氧化硅mcm-41与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与介孔二氧化硅mcm-41的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，得到胰蛋白酶mcm-41组合物。

胰蛋白酶mcm-41组合物的正常血液凝血时间为5min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为5.5、6.3、6.2、6.1min，由此可见胰蛋白酶mcm-41组合物对正常血液和缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也不理想。胰蛋白酶mcm-41组合物甚至比mcm-41(3min)或者胰蛋白酶的凝血效果差，胰蛋白酶会进入mcm-41的介孔中，由于血液里面含有大量的大体积生物分子，在接触血液时，介孔孔道内的胰蛋白酶无法快速激活凝血通道反应，使得促进凝血的效果降低。

对比实施例12

将介孔a型沸石(孔道为5nm)在1ml水溶液中分散均匀，形成介孔a型沸石的悬浊液；使介孔a型沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与介孔a型沸石的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，得到胰蛋白酶介孔a型沸石组合物。

胰蛋白酶介孔a型沸石组合物的正常血液凝血时间为5.5min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为5.6、5.3、5.2、5.1min，由此可见胰蛋白酶介孔a型沸石组合物对正常血液和缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也不理想。胰蛋白酶介孔a型沸石组合物甚至比介孔a型沸石或者胰蛋白酶的凝血效果差，胰蛋白酶会进入介孔a型沸石的介孔中，由于血液里面含有大量的大体积生物分子，在接触血液时，介孔孔道内的胰蛋白酶无法快速激活凝血通道反应，使得促进凝血的效果降低。

对比实施例13

菱沸石的凝血效果测定：取25mg菱沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将正常血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的正常血液，正常血液凝固时的时间记为菱沸石的凝血时间，菱沸石的凝血时间为2min，由此可见菱沸石的凝血效果一般。

取25mg菱沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将乏x、viii、ix或xi因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的乏x、viii、ix或xi因子血液，乏x、viii、ix或xi因子血液凝固时的时间记为菱沸石的凝血时间，但其过程中上述有缺陷的血液长时间没有发生凝固，由此可见菱沸石对血友病的患者并没有促凝血作用。

实施例4

胰蛋白酶菱沸石止血组合物的制备：

①将硅铝比为1.5的菱沸石，用5m浓度的氯化镁溶液室温下浸渍12h，得到的菱沸石包含二价镁离子且其占沸石骨架外金属阳离子含量的95％。

②将上述25mg的菱沸石在1ml水溶液中分散均匀，形成菱沸石的悬浊液；使菱沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与菱沸石的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶菱沸石止血组合物。

胰蛋白酶菱沸石止血组合物的正常血液凝血时间为0.35min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为0.45、0.35、0.35、0.45min，由此可见胰蛋白酶菱沸石止血组合物对正常血液的凝血效果很好；对缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也很好，凝血时间大大缩短，对血友病患者能有很好的促进凝血作用。缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液加入菱沸石时，血液长时间不凝固。胰蛋白酶菱沸石止血组合物的凝血效果远远好于菱沸石或者胰蛋白酶的凝血效果，凝血时间大大缩短，在遭遇突发意外大出血时，能非常高效止血，降低大动脉出血致死的风险，减少重要器官的损伤。止血组合物的止血效果与凝血酶所起到的作用相当，可以大大降低止血材料的成本，更具有商业化前景。

对比实施例14

β沸石的凝血效果测定：取25mgβ沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将正常血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的正常血液，正常血液凝固时的时间记为β沸石的凝血时间，β沸石的凝血时间为3min，由此可见β沸石的凝血效果一般。

取25mgβ沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将乏x、viii、ix或xi因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的乏x、viii、ix或xi因子血液，乏x、viii、ix或xi因子血液凝固时的时间记为β沸石的凝血时间，但其过程中上述有缺陷的血液长时间没有发生凝固，由此可见β沸石对血友病的患者并没有促凝血作用。

实施例5

胰蛋白酶β沸石止血组合物的制备：

①将硅铝比为15的β沸石，用5m浓度的氯化镁溶液室温下浸渍12h，得到的β沸石包含二价镁离子且其占沸石骨架外金属阳离子含量的95％。

②将上述25mg的β沸石在1ml水溶液中分散均匀，形成β沸石的悬浊液；使β沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与β沸石的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶β沸石止血组合物。

胰蛋白酶β沸石止血组合物的正常血液凝血时间为0.52min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为0.55、0.55、0.5、0.5min，由此可见胰蛋白酶β沸石止血组合物对正常血液的凝血效果很好；对缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也很好，凝血时间大大缩短，对血友病患者能有很好的促进凝血作用。缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液加入β沸石时，血液长时间不凝固。胰蛋白酶β沸石止血组合物的凝血效果远远好于β沸石或者胰蛋白酶的凝血效果，凝血时间大大缩短，在遭遇突发意外大出血时，能非常高效止血，降低大动脉出血致死的风险，减少重要器官的损伤。止血组合物的止血效果与凝血酶所起到的作用相当，可以大大降低止血材料的成本，更具有商业化前景。

对比实施例15

丝光沸石的凝血效果测定：取25mg丝光沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将正常血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的正常血液，正常血液凝固时的时间记为丝光沸石的凝血时间，丝光沸石的凝血时间为2.5min，由此可见丝光沸石的凝血效果一般。

取25mg丝光沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将乏x、viii、ix或xi因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的乏x、viii、ix或xi因子血液，乏x、viii、ix或xi因子血液凝固时的时间记为丝光沸石的凝血时间，但其过程中上述有缺陷的血液长时间没有发生凝固，由此可见丝光沸石对血友病的患者并没有促凝血作用。

实施例6

胰蛋白酶丝光沸石止血组合物的制备：

①将硅铝比为10的丝光沸石，用5m浓度的氯化镁溶液室温下浸渍12h，得到的丝光沸石包含二价镁离子且其占沸石骨架外金属阳离子含量的95％。

②将上述25mg的丝光沸石在1ml水溶液中分散均匀，形成丝光沸石的悬浊液；使丝光沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与丝光沸石的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶丝光沸石止血组合物。

胰蛋白酶丝光沸石止血组合物的正常血液凝血时间为0.45min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为0.45、0.45、0.5、0.5min，由此可见胰蛋白酶丝光沸石止血组合物对正常血液的凝血效果很好；对缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也很好，凝血时间大大缩短，对血友病患者能有很好的促进凝血作用。缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液加入丝光沸石时，血液长时间不凝固。胰蛋白酶丝光沸石止血组合物的凝血效果远远好于丝光沸石或者胰蛋白酶的凝血效果，凝血时间大大缩短，在遭遇突发意外大出血时，能非常高效止血，降低大动脉出血致死的风险，减少重要器官的损伤。止血组合物的止血效果与凝血酶所起到的作用相当，可以大大降低止血材料的成本，更具有商业化前景。

对比实施例16

x型沸石的凝血效果测定：取25mgx型沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将正常血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的正常血液，正常血液凝固时的时间记为x型沸石的凝血时间，x型沸石的凝血时间为2.1min，由此可见x型沸石的凝血效果一般。

取25mgx型沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将乏x、viii、ix或xi因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的乏x、viii、ix或xi因子血液，乏x、viii、ix或xi因子血液凝固时的时间记为x型沸石的凝血时间，但其过程中上述有缺陷的血液长时间没有发生凝固，由此可见x型沸石对血友病的患者并没有促凝血作用。

实施例7

胰蛋白酶x型沸石止血组合物的制备：

①将硅铝比为1的x型沸石，用5m浓度的氯化镁溶液室温下浸渍12h，得到的x型沸石包含二价镁离子且其占沸石骨架外金属阳离子含量的95％。

②将上述25mg的x型沸石在1ml水溶液中分散均匀，形成x型沸石的悬浊液；使x型沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与x型沸石的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶x型沸石止血组合物。

胰蛋白酶x型沸石止血组合物的正常血液凝血时间为0.48min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为0.48、0.45、0.5、0.5min，由此可见胰蛋白酶x型沸石止血组合物对正常血液的凝血效果很好；对缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也很好，凝血时间大大缩短，对血友病患者能有很好的促进凝血作用。缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液加入x型沸石时，血液长时间不凝固。胰蛋白酶x型沸石止血组合物的凝血效果远远好于x型沸石或者胰蛋白酶的凝血效果，凝血时间大大缩短，在遭遇突发意外大出血时，能非常高效止血，降低大动脉出血致死的风险，减少重要器官的损伤。止血组合物的止血效果与凝血酶所起到的作用相当，可以大大降低止血材料的成本，更具有商业化前景。

对比实施例17

y型沸石的凝血效果测定：取25mgy型沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将正常血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的正常血液，正常血液凝固时的时间记为y型沸石的凝血时间，y型沸石的凝血时间为2min，由此可见y型沸石的凝血效果一般。

取25mgy型沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将乏x、viii、ix或xi因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的乏x、viii、ix或xi因子血液，乏x、viii、ix或xi因子血液凝固时的时间记为y型沸石的凝血时间，但其过程中上述有缺陷的血液长时间没有发生凝固，由此可见y型沸石对血友病的患者并没有促凝血作用。

实施例8

胰蛋白酶y型沸石止血组合物的制备：

①将硅铝比为3的y型沸石，用5m浓度的氯化镁溶液室温下浸渍12h，得到的y型沸石包含二价镁离子且其占沸石骨架外金属阳离子含量的95％。

②将上述25mg的y型沸石在1ml水溶液中分散均匀，形成y型沸石的悬浊液；使y型沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与y型沸石的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶y型沸石止血组合物。

胰蛋白酶y型沸石止血组合物的正常血液凝血时间为0.3min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为0.33、0.4、0.3、0.3min，由此可见胰蛋白酶y型沸石止血组合物对正常血液的凝血效果很好；对缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也很好，凝血时间大大缩短，对血友病患者能有很好的促进凝血作用。缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液加入y型沸石时，血液长时间不凝固。胰蛋白酶y型沸石止血组合物的凝血效果远远好于y型沸石或者胰蛋白酶的凝血效果，凝血时间大大缩短，在遭遇突发意外大出血时，能非常高效止血，降低大动脉出血致死的风险，减少重要器官的损伤。止血组合物的止血效果与凝血酶所起到的作用相当，可以大大降低止血材料的成本，更具有商业化前景。

对比实施例18

zsm-5型沸石的凝血效果测定：取25mgzsm-5型沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将正常血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的正常血液，正常血液凝固时的时间记为zsm-5型沸石的凝血时间，zsm-5型沸石的凝血时间为2min，由此可见zsm-5型沸石的凝血效果一般。

取25mgzsm-5型沸石加入到2ml的离心管,在37℃进行体外凝血实验，将乏x、viii、ix或xi因子血液预先在37℃水浴恒温半小时。然后加入20ul的0.2mcacl2，最后加入1ml恒温的乏x、viii、ix或xi因子血液，乏x、viii、ix或xi因子血液凝固时的时间记为zsm-5型沸石的凝血时间，但其过程中上述有缺陷的血液长时间没有发生凝固，由此可见zsm-5型沸石对血友病的患者并没有促凝血作用。

实施例9

胰蛋白酶zsm-5型沸石止血组合物的制备：

①将硅铝比为20的zsm-5型沸石，用5m浓度的氯化镁溶液室温下浸渍12h，得到的zsm-5型沸石包含二价镁离子且其占沸石骨架外金属阳离子含量的95％。

②将上述25mg的zsm-5型沸石在1ml水溶液中分散均匀，形成zsm-5型沸石的悬浊液；使zsm-5型沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与zsm-5型沸石的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶zsm-5型沸石止血组合物。

胰蛋白酶zsm-5型沸石止血组合物的正常血液凝血时间为0.4min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为0.43、0.42、0.4、0.4min，由此可见胰蛋白酶zsm-5型沸石止血组合物对正常血液的凝血效果很好；对缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也很好，凝血时间大大缩短，对血友病患者能有很好的促进凝血作用。缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液加入zsm-5型沸石时，血液长时间不凝固。胰蛋白酶zsm-5型沸石止血组合物的凝血效果远远好于zsm-5型沸石或者胰蛋白酶的凝血效果，凝血时间大大缩短，在遭遇突发意外大出血时，能非常高效止血，降低大动脉出血致死的风险，减少重要器官的损伤。止血组合物的止血效果与凝血酶所起到的作用相当，可以大大降低止血材料的成本，更具有商业化前景。

实施例10

胰蛋白酶zsm-5型/y型沸石止血组合物的制备：

①将硅铝比为20的zsm-5型沸石和硅铝比为4的y型沸石，用5m浓度的氯化镁溶液室温下浸渍12h。

②将上述25mg的zsm-5型沸石和y型沸石(1:1)在1ml水溶液中分散均匀，形成zsm-5型沸石和y型沸石的悬浊液；使zsm-5型沸石和y型沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与zsm-5型沸石和y型沸石的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶zsm-5型/y型沸石止血组合物。

胰蛋白酶zsm-5型/y型沸石止血组合物的正常血液凝血时间为0.34min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为0.33、0.32、0.4、0.34min，由此可见胰蛋白酶zsm-5型/y型沸石止血组合物对正常血液的凝血效果很好；对缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也很好，凝血时间大大缩短，对血友病患者能有很好的促进凝血作用。胰蛋白酶zsm-5型/y型沸石止血组合物的凝血效果远远好于沸石或者胰蛋白酶的凝血效果，凝血时间大大缩短，在遭遇突发意外大出血时，能非常高效止血，降低大动脉出血致死的风险，减少重要器官的损伤。止血组合物的止血效果与凝血酶所起到的作用相当，可以大大降低止血材料的成本，更具有商业化前景。

实施例11

胰蛋白酶丝光沸石/x型沸石止血组合物的制备：

①将硅铝比为20的丝光沸石和硅铝比为1.2的x型沸石，用5m浓度的氯化镁溶液室温下浸渍12h。

②将上述25mg的丝光沸石和x型沸石(1:1)在1ml水溶液中分散均匀，形成丝光沸石和x型沸石的悬浊液；使丝光沸石和x型沸石与胰蛋白酶充分接触(按胰蛋白酶与丝光沸石和x型沸石的质量比为1:10加入)，25℃混合30min，使胰蛋白酶在沸石表面吸附，并将上述溶液在-20℃真空干燥5h，胰蛋白酶分散于沸石表面上，得到胰蛋白酶丝光沸石/x型沸石止血组合物。

胰蛋白酶丝光沸石/x型沸石止血组合物的正常血液凝血时间为0.4min，缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液凝血时间分别为0.43、0.37、0.4、0.36min，由此可见胰蛋白酶丝光沸石/x型沸石止血组合物对正常血液的凝血效果很好；对缺乏x、viii、ix、xi凝血因子的血液的凝血效果也很好，凝血时间大大缩短，对血友病患者能有很好的促进凝血作用。胰蛋白酶丝光沸石/x型沸石止血组合物的凝血效果远远好于沸石或者胰蛋白酶的凝血效果，凝血时间大大缩短，在遭遇突发意外大出血时，能非常高效止血，降低大动脉出血致死的风险，减少重要器官的损伤。止血组合物的止血效果与凝血酶所起到的作用相当，可以大大降低止血材料的成本，更具有商业化前景。

综上所述，胰蛋白酶负载在含有介孔孔道或者只含一价阳离子的沸石，都会导致凝血效果变差。所述止血组合物的沸石的微孔孔道和二价金属阳离子调控酶在其表面的构象，并且胰蛋白酶与沸石按照质量比为1:200～4:10分配，使得胰蛋白酶在该沸石表面活性不但没有降低，反而两者形成的止血组合物促进凝血的活性大大增加，凝血速度快于沸石或胰蛋白酶，凝血时间大大缩短，对血友病患者也有很好的促进凝血作用。

以上实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。