本发明涉及一种抗微生物组合物。本发明更具体地涉及个人护理或清洁组合物，例如用于护理或清洁毛发或身体的那些，其提供抗微生物功效。其更具体地涉及一种用于毛发和头皮的清洁组合物，其包含相互作用以提供用于抗头皮屑益处的协同抗微生物功效的活性物。
背景技术：
本发明涉及一种可用于清洁任何身体部位，但特别适用于毛发和头皮的抗微生物组合物。毛发护理组合物通常提供清洁或调理益处或两者的组合。这样的组合物通常包含一种或多种清洁表面活性剂，其通常有助于清洁毛发和/或头皮，而使得没有不期望的污垢、颗粒和脂肪物质。
另外，已经通过毛发护理组合物提供了抗头皮屑益处。头皮屑是影响全球许多人的问题。该情况表现为死皮细胞团从头皮脱落。这些是白色的，并提供美学上令人不愉快的外观。导致头皮屑的一个因素是马拉色菌酵母的某些成员。为了对抗这些，已经以毛发清洁洗发剂的形式开发了抗头皮屑产品。已知的抗头皮屑洗发剂的实例包括月桂醚硫酸钠(乙氧基化阴离子表面活性剂)与抗头皮屑剂的组合。用于毛发护理的典型抗头皮屑剂是金属吡啶硫酮，例如吡啶硫酮锌(zpto)，octopirox(吡罗克酮乙醇胺(piroctoneolamine))，唑类抗微生物剂(例如，氯咪巴唑)，硫化硒及其组合。
虽然通过在这样的组合物中使用上述活性物很大程度上减轻了头皮屑的问题，然而需要增强这些活性物的功效。本发明人发现，上述活性物之一即吡啶硫酮锌(zpto)的功效可以在与氧化锌的习性改性晶体(habitmodifiedcrystal)组合，优选与含有水溶性蛋白质的包埋颗粒的那些组合时增强。本发明人进一步发现，不是根据本发明的习性改性的传统氧化锌不与zpto一起提供协同作用。
氧化锌是一种有效的细菌抑制剂，即其可以抑制细菌在基质上或在培养基中生长，但其不具有明显的杀细菌活性。
氧化锌的晶体以不同尺寸的六角形棒的形式存在。最近的出版物表明，氧化锌的3d结构构成了最大的一组，其包括纳米棒、针、螺旋、弹簧、环、缎带、管、腰带、线和梳子、蒲公英、雪绒花、针叶和海胆状等形状。氧化锌也可以以2d结构获得，例如纳米板/纳米片和纳米小球。一维结构的实例包括纳米棒和纳米线。
氧化锌已经是涵盖各种形式、形态、晶体结构及其应用的多项专利和研究文章的主题。
氧化锌(zno)通常在纤锌矿晶体结构中作为六角形棒存在，其中o2-和zn2+离子沿z轴四面体地配位和交替地堆叠。zno的各个晶面的极性不同。在六角形晶体结构中，两个六角形面富含zn2+，因此它们带正电荷，而六个矩形面由于zn2+和o2-离子的存在而是带较少正电荷的。这也意味着六边形面与矩形面相比是极性的。
过去曾试图通过使用某些分子来限制/调节zno晶体的特定面的生长，其当存在于反应介质中时，选择性地结合到特定晶体面，从而导致晶体的形状或大小或两者的变化。
cn104017393a(安徽恒昊科技有限公司，2014)公开了一种绢云母/纳米氧化锌复合材料及其制备方法。绢云母粉末的表面被涂覆氧化锌纳米颗粒。制备方法包括将氢氧化钙或氧化钙加入绢云母粉末和硫酸锌溶液的混合体系中以得到纳米氧化锌涂覆的绢云母粉末复合材料。所述材料具有良好的抗细菌性能。
us2004191331(宝洁)公开了一种包含颗粒状锌材料的组合物，其中所述颗粒状锌材料的微晶尺寸小于600a，和包含有效量的表面活性剂、有效量的颗粒状锌材料、有效量的金属吡啶硫酮盐和有效量的悬浮剂的洗发剂组合物，其中所述颗粒状锌材料的微晶尺寸小于600a。
us2004058855(宝洁)公开了一种向真核细胞递送过量锌以抑制细胞代谢的方法，所述方法包括用锌离子载体处理所述细胞，所述锌离子载体能够将锌离子递送穿过细胞膜，其中所述锌离子载体材料的最小抑制浓度(mic)小于约500ppm。进一步公开了一种向真核细胞递送过量锌以抑制细胞代谢的方法，所述方法包括用锌离子载体材料处理所述细胞，所述锌离子载体材料能够将锌离子递送穿过细胞膜，其中所述锌离子载体材料与含锌材料组合，并且进一步地其中存在细胞内锌水平与在所述锌离子载体材料不存在的情况下相比超过1.5倍的增加。
因此，据本发明人所知，迄今为止尚未知晓或公布包含吡啶硫酮锌与氧化锌的习性改性晶体(优选含有水溶性蛋白质)组合的抗微生物组合物。
仍需要协同增强吡啶硫酮锌的抗微生物功效的更加新的且更有效的组合物。
这通过利用水溶性蛋白质作为晶体习性改性剂，经由氧化锌颗粒的原位合成，首先制备氧化锌的习性改性晶体而实现。我们已经确定，蛋白质如丝胶(来源于丝绸)、溶菌酶和牛血清白蛋白(bsa)有助于产生新的晶体形态，其提供杀生物活性。我们已经确定，有可能通过选择性地使用某些蛋白质作为晶体习性改性剂来改变晶体的形态、颗粒堆积和缺陷。这些蛋白质可以与zno的晶面结合，从而影响晶体的功能。此外，我们还已经确定，蛋白质在成核步骤中影响晶体形成，从而导致晶体中缺陷的增加。当这样的晶体改性氧化锌与吡啶硫酮锌组合时，观察到协同抗微生物活性，特别是针对真菌，如糠秕马拉色菌(malasseziafurfur)。
技术实现要素：
根据第一方面，公开了一种抗微生物组合物，其包含：
(a)氧化锌的习性改性晶体；和
(b)吡啶硫酮锌；
其中所述氧化锌的习性改性晶体在452nm处的光致发光峰强度与氧化锌在452nm处的光致发光峰强度之比为至少5。
氧化锌的习性改性晶体优选地包含水溶性蛋白质的包埋颗粒。
根据第二方面，公开了一种制备本发明的组合物的方法，其包括将吡啶硫酮锌与所述氧化锌的习性改性晶体混合的步骤；所述氧化锌的习性改性晶体通过包括以下步骤的方法制备：
(i)将水溶性蛋白质的水溶液与不可水解的水溶性锌盐的水溶液混合；
(ii)向其添加弱碱；
(iii)加热步骤(ii)的反应混合物以达到60至90℃的温度；和，
(iv)过滤步骤(iii)的内容物，用水洗涤残留物，并将其干燥以获得作为滤出物的所述氧化锌的习性改性晶体。
本发明的其它方面在说明书中详细讨论。
具体实施方式
根据第一方面，公开了一种抗微生物组合物，其包含：(a)氧化锌的习性改性晶体；和(b)吡啶硫酮锌；其中所述氧化锌的习性改性晶体在452nm处的光致发光峰强度与氧化锌在452nm处的光致发光峰强度之比为至少5。
zno通常结晶为六角形棒状晶体，具有八个面，其中两个面是正六角形，六个面是矩形。习性改性是其中在氧化锌晶体形成过程中在反应介质中引入添加剂的过程，它可以改变晶体的生长，从而允许和抑制在特定方向上的生长。这导致各向异性，从而导致形态变化。术语“习性改性”在晶体工程中常用。根据本发明，习性改性的氧化锌优选地包含一种或多种水溶性蛋白质的包埋颗粒。
如本文所用，水溶性是指材料在25℃和大气压下在水中的溶解度为0.1重量％或更高。
尤其优选的是所述蛋白质是丝胶、牛血清白蛋白(bsa)、明胶、卵清蛋白、酪蛋白、玉米醇溶蛋白、乳清蛋白或溶菌酶中的一种或多种，更优选丝胶、牛血清白蛋白或溶菌酶。
通过选择性使用上述蛋白作为晶体习性改性剂，对氧化锌晶体的形态、其中的颗粒堆积和缺陷进行了改性。不希望被理论束缚，据信这些蛋白质，特别是水溶性蛋白质，可以选择性地结合到氧化锌晶体的晶面，从而影响晶体的功能。进一步地，据信蛋白质还在成核步骤中影响晶体形成，其导致晶体中缺陷的增加。
晶体材料通常是从其溶液结晶而来，具有类似于其晶胞的形状，晶胞是材料的最小单位。氧化锌具有六角形晶胞，其通常结晶为六角形棱柱状棒，有两个六角面和六个矩形面。通过玩弄结晶而故意地偏离这样的形态被称为晶体习性改性。这可以通过改变物理条件来实现，例如使体系经受不同的温度、压力、浓度或溶剂化条件。或者，可以使用已知优先地吸附到晶体的特定面，从而阻止在这些面上的生长的痕量杂质。这些杂质被称为晶体习性改性剂。它们经常保持吸附在晶体的面上。
在本发明中，蛋白质，特别是水溶性蛋白质，被用作晶体习性改性剂，其据信导致氧化锌的生长从其自然六角形棱柱状形态偏离到形成球形组件的聚集细薄圆盘状颗粒。
本发明的氧化锌的习性改性晶体能够具有工业应用，尤其是在家庭和个人护理产品的广泛技术领域中。特定领域的非限制性实例包括皮肤清洁、毛发护理、表面卫生和家庭护理产品。
氧化锌用于多种化妆品组合物，但通常的氧化锌及其改性变体中的至少一些不具有足够的抗微生物活性。这样的氧化锌中的一些已在us2004191331中使用和公开，即usp-2、usp-1、z-cote和nanox。本发明人已经实验了类似类型的氧化锌(具有大表面积)，确定它们不表现出通过使用本发明公开和要求保护的组合物实现的与zpto的协同抗微生物活性。不希望被理论束缚，本发明人认为，该协同益处是通过使用具有通过使用本发明中的蛋白质而实现的特定结构缺陷的氧化锌所实现，并且在us2004191331中使用的氧化锌的大表面积不是当与zpto一起使用时实现期望益处的关键因素。
添加已知的抗微生物剂以提高抗细菌活性是一种普遍的做法。本发明提供了吡啶硫酮锌与氧化锌的习性改性晶体的协同混合物，其即使在低水平下也具有显著的抗微生物功效。
包含蛋白质的包埋颗粒的氧化锌的习性改性晶体优选形状如圆盘。每个圆盘的厚度优选为10nm至30nm。圆盘的平均直径优选为200nm至500nm。平均尺寸是通过malvern
氧化锌的习性改性晶体优选具有式znox，其中x<1，并且特征为在452nm处的光致发光峰，其比从传统氧化锌获得的高出数倍(大于5倍)。优选地，x的值在0.95至1的范围内。本发明的组合物优选地包含0.05-5％、更优选0.10-2.0％、进一步更优选0.2-1.0％、最优选0.3-0.5重量％的氧化锌的习性改性晶体。
本发明的组合物包含吡啶硫酮锌(zpto)，其是1-羟基-2-吡啶硫酮锌的缩写。吡啶硫酮的多价金属盐由以下通式表示：
在吡啶硫酮锌的情况下，m是金属阳离子锌。
吡啶硫酮锌基于所述组合物的重量优选以0.01至10％，更优选0.01至5.0％，进一步更优选0.05至2.0％存在。zpto是颗粒状材料。虽然粒径对于实现本发明的益处并非关键，然而zpto的粒径优选为0.25至8微米，更优选0.5至8.0微米，进一步更优选1.0至7.5微米。zpto可商购自kolonlifescienceinc.，sinolion(usa)ltd，lonza和其他供应商。
本发明的组合物优选地还包含化妆品可接受的载体。优选地，所述载体被优选地选择为使得本发明的组合物可以被递送为用作洗发剂、毛发调理剂或沐浴露。根据一个方面，化妆品可接受的载体是水或水溶液。根据另一优选方面，载体还包含表面活性剂。化妆品可接受的载体是使得所述组合物可制备为洗发剂、毛发调理剂、沐浴露、洗手或洗脸产品、乳霜、洗剂、凝胶、粉末、软膏或皂条
根据本发明的进一步优选方面，所述组合物是洗发剂、毛发调理剂或沐浴产品。
根据本发明特别优选的方面，组合物是洗发剂。
本发明的组合物，特别是洗发剂，与阴离子表面活性剂例如烷基硫酸盐和/或乙氧基化烷基硫酸盐表面活性剂一起配制。这些阴离子表面活性剂优选以按组合物的重量计1至20％，优选2至16％，进一步更优选3至16％的水平存在。优选的烷基硫酸盐为c8-18烷基硫酸盐，更优选为c12-18烷基硫酸盐，优选为具有增溶性阳离子如钠、钾、铵或取代铵的盐的形式。
优选的烷基醚硫酸盐是具有下式的那些：ro(ch2ch2o)nso3m；
其中r为具有8至18个(优选12至18)个碳原子的烷基或烯基；n是平均值大于至少0.5，优选在1至3之间，更优选在2至3之间的数字；m是增溶性阳离子，例如钠、钾、铵或取代的铵。实例是月桂基醚硫酸钠(sles)。具有0.5至3、优选1至3的平均乙氧基化度的sles是尤其优选的。
根据本发明的洗发剂组合物可以包含化妆品可接受且适合于局部施用于毛发的一种或多种另外的阴离子清洁表面活性剂。
本发明的组合物优选地另外包含两性表面活性剂，优选甜菜碱表面活性剂，优选烷基酰胺丙基甜菜碱表面活性剂，例如椰油酰胺丙基甜菜碱。在优选实施方式中，所述组合物包含0.1至10重量％，优选0.5至8重量％，更优选1至5重量％的甜菜碱表面活性剂
为了增强来自本发明的组合物特别是洗发剂的活性物的沉积，其中通常包含阳离子聚合物。在本发明中，优选的是所述组合物另外包含0.01至2.0％的阳离子聚合物。阳离子聚合物优选是瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵。瓜尔胶聚合物主要含有半乳甘露聚糖聚合物链。取决于有多少瓜尔胶已经被水解和阳离子化，这种聚合物可以以不同分子量和阳离子取代度获得。阳离子聚合物优选地以按组合物的重量计0.04至0.5％，更优选0.08至0.25％存在。
所述组合物的ph优选等于或高于4.0，更优选在5.0至10.0的范围内。
优选地，本发明的组合物还包含悬浮剂。合适的悬浮剂选自聚丙烯酸类、丙烯酸交联聚合物、丙烯酸与疏水性单体的共聚物、含羧酸单体与丙烯酸酯类的共聚物、丙烯酸与丙烯酸酯类的交联共聚物，杂多糖树胶和晶体长链酰基衍生物。
悬浮剂(如果包含)通常基于组合物的总重量按悬浮剂的总重量计以0.1至10％、优选0.5％到6％、更优选0.5％至4％的水平存在于本发明的洗发剂组合物中。
本发明的组合物可包含用于增强性能和/或消费者可接受性的其他成分。这样的成分包括芳香剂、染料和颜料、ph调节剂、珠光剂或遮光剂、粘度调节剂、防腐剂和天然毛发营养素，如植物性药物、果实提取物、糖衍生物和氨基酸。
本发明的组合物优选是基于水性的。其优选地包含大量的水，优选按组合物的重量计为70％至95％。
当待通过本发明的组合物提供调理益处时，所述组合物被称为毛发调理剂。通常，在毛发护理组合物中最常用的调理剂是不溶于水的油性物质，如矿物油、天然油，如甘油三酯，和硅酮聚合物。调理益处是通过所述油性物质沉积在毛发上，导致形成使毛发在潮湿时更容易梳理，在干燥时更容易管理的膜而实现。特别有用的调理剂是硅酮化合物，优选非挥发性硅酮化合物。有利地，本文的组合物可以包含一种或多种硅酮。硅酮是以分散或悬浮颗粒形式发现的调理剂。它们旨在在用水冲洗毛发后留下沉积在毛发上。合适的硅油可包括聚烷基硅氧烷、聚芳基硅氧烷、聚烷基芳基硅氧烷、聚醚硅氧烷共聚物及其混合物。氨基硅酮通常与洗发剂组合物一起配制。氨基硅酮是含有至少一个伯胺、仲胺、叔胺或季铵基团的硅酮。也可以使用高分子量硅胶。另一种有用的类型是交联硅酮弹性体，例如二甲聚硅氧烷/乙烯基/二甲聚硅氧烷交联聚合物(例如dowcorning9040和9041)。
在其中硅酮存在的组合物中，硅酮的量可以范围为约0.1至约10重量％，优选约0.1至约8重量％，更优选约0.3至约5重量％。
所述组合物的ph优选等于或高于4.0，更优选在5.0至7.0的范围内。
毛发调理组合物通常包含单独使用或混合使用的、选自阳离子表面活性剂的调理表面活性剂。用于根据本发明的调理剂组合物中的合适的阳离子表面活性剂包括鲸蜡基三甲基氯化铵，山嵛基三甲基氯化铵，鲸蜡基氯化吡啶，四甲基氯化铵，四乙基氯化铵，辛基三甲基氯化铵，十二烷基三甲基氯化铵，十六烷基三甲基氯化铵，辛基二甲基苄基氯化铵，癸基二甲基苄基氯化铵，硬脂基二甲基苄基氯化铵，双十二烷基二甲基氯化铵，双十八烷基二甲基氯化铵，牛油三甲基氯化铵，二氢化牛油二甲基氯化铵(例如，arquad2ht/75，来自akzonobel)，椰油三甲基氯化铵，peg-2-油基氯化铵及其相应的氢氧化物。
用于组合物的最优选的阳离子表面活性剂是硬脂酰胺丙基二甲胺、山嵛基三甲基氯化铵或硬脂基三甲基氯化铵。在本发明的调理剂中，阳离子表面活性剂的含量通常为按组合物的重量计0.1至5％，优选0.5至2.5％。
本发明的毛发调理组合物优选还可另外包含脂肪醇。认为脂肪醇和阳离子表面活性剂在调理组合物中的组合使用是特别有利的，因为这导致形成层状相，其中阳离子表面活性剂是分散的。
本发明的调理剂中脂肪醇的含量通常为按组合物的重量计0.5至10％，优选0.1至8％，更优选0.2至7％，最优选0.3至6％。阳离子表面活性剂与脂肪醇的重量比合适地为1:1至1:10，更优选1:1.5至1:8，最佳为1:2至1:5。
本发明的组合物可用于皮肤护理，例如身体、手或脸洗涤。抗微生物组合物还可包含表面活性剂。优选的表面活性剂为非离子表面活性剂，例如c8-c22，优选c8-c16脂肪醇乙氧基化物，当产品为液体形式时，其包含1至8个环氧乙烷基团。表面活性剂优选选自伯烷基硫酸盐、仲烷基磺酸盐、烷基苯磺酸盐或乙氧基化烷基硫酸盐。所述组合物还可包含阴离子表面活性剂，例如烷基醚硫酸盐，优选来自天然或合成来源的具有1至3个环氧乙烷基团的那些，和/或磺酸。尤其优选的是月桂基醚硫酸钠。烷基多糖苷也可存在于所述组合物中，优选碳链长度在c6和c16之间的那些。
因此，在高度优选的方面，抗微生物组合物包含选自阴离子表面活性剂、脂肪酸酰胺、烷基硫酸盐、直链烷基苯磺酸盐及其组合的表面活性剂。
当存在所述表面活性剂时，所述抗微生物组合物优选地包含按所述组合物的重量计1至90％的表面活性剂
当使用表面活性剂时，特别优选的表面活性剂是皂。皂是对于本发明的抗微生物组合物的个人洗涤应用合适的表面活性剂。皂优选是c8-c24皂、更优选c10-c20皂，最优选c12-c18皂。皂的阳离子可以是碱金属、碱土金属或铵。优选地，皂的阳离子选自钠、钾或铵。更优选地，皂的阳离子为钠或钾。
典型的脂肪酸混合物由按皂的重量计5-30％椰子脂肪酸和70-95％脂肪酸组成。从其他合适的油/脂肪(如花生、大豆、牛油、棕榈、棕榈仁等)获得的脂肪酸也可以以其他期望比例使用。
当存在时，本发明的皂优选以按组合物的重量计1-90％、优选10-85％、更优选25-75％的量存在。
优选的组合物可包含其他已知成分，例如香料、颜料、防腐剂、润肤剂、防晒剂、乳化剂、胶凝剂和增稠剂。这些成分的选择将在很大程度上取决于组合物的形式。
水是优选的载体。当存在水时，其优选按组合物的重量计以至少1％，更优选至少2％，还优选至少5％存在。当水为载体时，优选的液体组合物包含10-99.8重量％的水。
制备本发明的组合物的优选方法包括将吡啶硫酮锌与所述氧化锌的习性改性晶体混合的步骤；所述氧化锌的习性改性晶体通过包括以下步骤的方法制备：
(i)将水溶性蛋白质的水溶液与不可水解的水溶性锌盐的水溶液混合；
(ii)向其添加弱碱；
(iii)加热步骤(ii)的反应混合物以达到60至90℃的温度；和，
(iv)过滤步骤(iii)的内容物，用水洗涤残留物，并将其干燥以获得作为滤出物的所述氧化锌的习性改性晶体。
优选的是所述不可水解的水溶性锌盐是硝酸盐、硫酸盐、乙酸盐或甲酸盐。盐优选不是氯化物盐。氯化物盐与蛋白质一起使用导致锌离子与蛋白质中所含氨基酸之间不期望的络合。
术语“可水解盐”是指盐，其当加入水中时立即(加入水中5分钟内)形成氧化锌或锌的碱性氧-氢氧化物。锌的可水解盐的实例包括无水氯化锌、取代氨基醇的锌络合物和锌酸钠。据信可水解盐在介质中形成zno颗粒，因此当使用这样的盐时，不可能调节形态/缺陷/结晶度。
优选的是弱碱为六亚甲基四胺、尿素或氢氧化镁。其他优选的弱碱包括氨、吡啶、羟胺和甲胺。在将弱碱引入反应容器之前，必须使水溶性蛋白质与不可水解的水溶性锌盐接触。这确保锌离子与蛋白质中的氨基酸残基的适当络合。还优选的是在引入弱碱之前，将反应混合物加热至40℃至60℃约30分钟。另一方面，如果在加入蛋白质之前，碱与锌盐接触，其导致在介质中形成六角形氧化锌颗粒的非常小的晶种。所得产物可具有显著更低的光致发光和光催化活性。
强碱，如氢氧化钠，不应在该方法中使用，因为存在更快沉淀的可能性。
加入弱碱后，将步骤(ii)的反应混合物加热以达到60至90℃的温度。在所述方法的优选方面，将步骤(iii)的经加热的反应混合物在4至6巴的压力下在惰性气氛中热压处理(autoclave)。与其未经热压处理的对应物相比，热压处理产生更有效的产物。
在最后步骤中，通过任何合适的手段过滤步骤(iii)的内容物。用水洗涤残留物，然后干燥其以得到晶体习性改性氧化锌作为滤出物。
进一步优选的是，晶体习性改性氧化锌在600℃至800℃下煅烧。煅烧还用于暗示在没有或有限的空气或氧气供应的情况下施加于矿石和其他固体材料以实现热分解、相转变或挥发性部分的去除的热处理过程。煅烧通常在低于给定材料的熔点的温度下发生。
对于0.5mg/ml的产物溶液，优选的是煅烧产物的光致发光发射(在452nm波长处)为至少8。
根据本发明还公开的是所述组合物用于递送抗微生物益处的非治疗性用途。
还公开的是氧化锌的习性改性晶体和吡啶硫酮锌用于制造用于提供抗微生物益处的组合物的非治疗性用途；
其中所述氧化锌的习性改性晶体在452nm处的光致发光峰强度与氧化锌在452nm处的光致发光峰强度之比为至少5；和
其中所述氧化锌的习性改性晶体呈圆盘状；每个圆盘的厚度为10nm至30nm，且所述圆盘的平均直径为200nm至500nm。
以下非限制性实施例进一步说明本发明的优选实施方式。除非另有说明，否则实施例中和说明书通篇提及的所有百分比都是基于总重量。
实施例
实施例a：将1g可商购丝胶添加到50ml蒸馏水中。将内容物充分搅拌直到得到澄清溶液。向该溶液中加入3g六水合硝酸锌的水溶液。该溶液在40℃下加热15分钟。将1.5g六胺溶解于50ml水中。将六胺溶液添加到该混合物中。将内容物转移到stoppard热液瓶中，并在氮气气氛中、5.0巴压力下、90℃烘箱中加热5小时。将形成的氧化锌的习性改性晶体过滤、用水冲洗并风干。
实施例b：实施例a的一部分产物在700℃下煅烧两小时以制备实施例b的样品。
实施例c：样品为来自sigma-aldrich的吡啶硫酮锌。
实施例d：1:2重量比的可作为
可商购zno的煅烧在700℃下进行两小时。
实施例1：实施例a+实施例c，重量比为1:2
实施例2：实施例b+实施例c，重量比为1:2
上述样品如下所述进行其对糠秕马拉色菌的抗真菌功效。
抗真菌活性：
将糠秕马拉色菌atcc14521菌株在modifieddixon琼脂上从甘油储备液复苏。平板在30℃下放置72小时。在测试前约72小时，将平板培养物接种到另一个无菌modifieddixon琼脂平板的表面上，并在30℃下培养约72小时。从第二继代培养，在620nm处调节培养物的光密度以给出107cfu/ml的细胞强度。将培养物进一步稀释100倍以获得在糠疹癣菌(pityrosporum)肉汤中为105cfu/ml。
将10mg的每种样品(样品为微粒，因此其必须彻底混合，如涡流/超声波)称重至1.5ml无菌eppendorf试管中。在上述试管和1.5ml空白无菌eppendorf试管(无颗粒，作为对照)中分别加入1000μl的糠秕马拉色菌接种物，使得每个试管中的负荷为105个细胞/ml。
所有样品在32℃的摇瓶培养箱中以120rpm保持振摇。24小时培养后，从各自的1.5mleppendorf试管中取出10μl样品，并用990μl糠疹癣菌肉汤稀释。这表示10-2稀释。从上述24小时接种物进行连续稀释，并将100μl的稀释物铺板到modifieddixon平板上。平板稀释10-2、10-3、10-4和10-5。所有平板保持在32℃下培养24-72小时。对所有平板进行平板计数。
关于抗真菌活性用log减少表示的数据总结在下表1中：
表1：
表1中的数据表明，根据本发明的组合物(实施例1和2)与本发明之外的那些(实施例a至d)相比提供了非常优越的功效。
实施例b、c和2至4：不同重量比的zno的习性改性晶体和zpto的组合物的抗真菌功效：
下表2所示的各种组合物(不同重量比)使用与上文相同的程序测试抗真菌功效。数据总结在表2中。为了比较的目的，已经重复了实施例b、c和2的数据。
表2：
上表中的数据表明，在本发明的zno和zpto的较宽重量比范围内有改善的功效，但重量比优选地小于1:1。
本发明组合物的抗细菌功效：
制备了根据表3的组合物，并按照下文给出的程序测试其抗细菌功效：
制备了组合物的储备水溶液(1％w/v)。取8ml该溶液。ph保持在10。然后取1ml细胞(1ml金黄色葡萄球菌细菌悬浮液(储备109个细胞/ml)。向其进一步加入1mldi水。悬浮液在室温下培养30和60秒。向1ml的上述反应混合物中加入9ml的dey-engley中和肉汤，培养5分钟。这表示10-1稀释。进行连续稀释并铺板1ml到lb平板上。
表3
表3中的数据清楚地证明了本发明组合物的抗细菌活性。
测定了在0.5mg/ml浓度下，各种煅烧氧化锌样品在452nm处的光致发光光谱，强度(a.u)表示的数据总结于下表4中：
表4
上表4中的数据表明，根据本发明制备的习性改性氧化锌(使用蛋白质并进一步煅烧)与常规氧化锌的煅烧样品相比，表现出大于5的光致发光比率。