一种鳄鞭多肽及其制备方法、包含鳄鞭多肽的组合物与流程

文档序号:17491814发布日期:2019-04-23 20:39阅读:584来源:国知局
一种鳄鞭多肽及其制备方法、包含鳄鞭多肽的组合物与流程
本申请涉及食品保健品以及药物领域,尤其涉及鳄鞭多肽液和鳄鞭多肽粉及其制备方法。本申请还涉及包含鳄鞭多肽的组合物以及鳄鞭多肽在补肾壮阳、提升生殖功能中的用途。
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:补肾益精,强身固本,是我国中医治疗各种疾病保持身体健康的重要理念。中医学中肾的概念和现代科学里对肾基于解刨学中的定义有一定区别,《皇帝内经》中《素问灵兰秘典论》对肾的定义如下:肾者,作强之官,伎巧出焉,精之处也。我国清代医学家唐容川对该句注解如下:盖髓者,肾精所生,精足则髓作,髓在骨内,髓作则骨强。所以能做强,而才力过人也。精以神生,精足神强,自多伎巧。髓不足则力不强,精不足则力不多。对于精的概念,《素问金匮真言论》有如下定义:夫精者,生之本也。故藏于精者,春不病温。肾与精关系密切,《素问六节脏象论》:肾者主蛰,封藏之本,精之处也。因此,损精伤肾的危害不言而喻,《灵枢本神篇》讲到:五脏主藏精者不可伤,伤则失守而阴虚。而《素问调经论篇》又提到:阳虚则外寒,阴虚则内热。阴虚则内热奈何。岐伯曰;有所劳倦,形气衰少,谷气不盛,上焦不行,下脘不周,内气热,热气熏胸中,故内热。由此可知,补肾益精的概念不仅仅是与壮阳有关的生殖功能相关,更是一个涉及到智力、精力、生殖、免疫、发育尤其是骨骼发育的综合范畴,所有这些都直指现代社会中人们在健康上的通病——亚健康状态。随着我国经济的腾飞,我国社会逐步实现了现代化,但是一些现代化社会的通病也随之而来。2017联合国教科文组织的最新统计数据显示,中国的亚健康人口比例达到76%,而白领阶层尤其严重,真正健康的比例仅有不足3%,这成为影响我国人民生活质量的重大问题。同样的阶段,欧美日等发达国家在上个世纪八九十年代同样经历过,当时以维生素为代表的营养强化剂以救世主的形象应运而生,并在一定程度上改善了这些问题,但是随着时间的推移,新的统计数据不断问世,2014年《美国健康医药杂志》的调查结果发现,长期服用营养补充剂的人群,并没有在之后展现出更好的健康状态,同时由于剂量问题,不科学的服用营养强化剂反而会对人体造成危害,这引起了学术界的反思,西方发达国家率先将目光放在植物动物体内有效成分的分析和开发上,替代营养强化剂的天然无副作用的绿色保健产品时代扑面而来。鞭,在我国中药学中定义为雄性动物的阴茎,但是实际操作中也常以整个生殖器入药。由于结构、组织和功能的特异性,动物鞭中具有其它部位的生物材料不具有的成分,如激素、腺体等,因而有着特殊的活性作用,中医里经常将之用于补肾壮阳益精,而使之成为一种治疗或者调养相关症状的常见药材。在《中华人民共和国中药成方制剂》中,已经制定成文的多种与补肾益精相关的药方都涉及到各种动物的鞭,其中包括鹿鞭、驴鞭、蛇鞭和蛤蚧鞭等已经作为药材,以各种形式在市面出售,在改善人民生活的同时为开发者取得了大量的经济回报。传统鳄鱼产业对鳄鱼开发利用,仅限于简单的剥皮吃肉,这使得整个产业的经济利润大打折扣,而且造成大量的资源和成本浪费,是限制其发展的瓶颈环节,而将整条鳄鱼的各个部分根据自身的特点进行分解利用才能使之能产生更大的用途获得更多的经济效益。鳄鞭在补肾益精方面的保健功效得以初步证实,针对这一独特的医学功能,使之成为深受广大消费者欢迎的保健产品,可以使得鳄鱼产业的开发更加科学完善系统,同时更大程度的提升鳄鱼产品在品种和功能上的丰富性,满足市场需求,创造经济价值。目前用鳄鞭进行开发的产品市面上并不多,可以查询到的专利几乎都与酒有关,产品形式相对单一。剩下鳄鞭专利大部分采用的都是干鞭粉泡酒的方式进行药酒制备,周期长而且有效成分及营养物释放情况远不如酶解多肽,应用领域也仅限于药酒方面。专利申请号201510882599.0采用酶解,因为需要考虑酒的口感问题,除去了其中的油相成分,这点会造成脂溶性激素类物质的流失。这些专利普遍缺乏有效实施例对其功能的支持,几乎都没有关于作用效果的实施例,有的也仅仅限于公布营养成分表和一些病人病历的搜集统计。技术实现要素:以下是对本文详细描述的主题的概述。本概述并非是为了限制权利要求的保护范围。本申请旨在利用鳄鞭制作一种具有补肾壮阳、提升生殖功能的天然保健药物,可以有效提升机体的性功能,同时又没有西地那非等化学药物的毒副作用。单纯鳄鞭作用可能不够完善,借鉴《中华人民共和国中药成方制剂》中的内容,参考已确定有明确疗效的方剂,添加各种辅助鞭类中药材补肾益精功能的制成鳄鞭方剂,使生物活性更加显著。本申请利用现代酶学理论,对鳄鞭进行处理使之成为多肽液或多肽粉,并对之前的工艺进行改进,使相应成分得以充分释放。鳄鞭在新鲜时直接进行酶解,其它中药材采用传统方法煎制,二者混合,各自的活性都能得到保障。具体地,本申请提供一种鳄鞭多肽,按质量分数计,所述鳄鞭多肽包含蛋白质55%-78%、还原糖3%-15%、活性脂质8%-20%以及铁20mg/kg-50mg/kg、锌40mg/kg-70mg/kg、钼0.1mg/kg-1mg/kg、铜0.1mg/kg-1mg/kg、锰0.1mg/kg-1mg/kg、镁1mg/kg-3mg/kg、钙45mg/kg-80mg/kg、磷10mg/kg-50mg/kg,mg/kg表示每kg鳄鞭多肽中的以mg计的微量元素,其中,所述鳄鞭多肽以鳄鞭多肽液或鳄鞭多肽粉的形式。本申请的鳄鞭多肽中,尤其是锌含量明显高于目前市面上许多营养食品(如大部分有额外添加补锌成分的加锌奶粉)。另外,按照国家标准gb5009.124所规定方法检测,鳄鞭蛋白中包含人体所需全部八种必需氨基酸,同时对于性腺发育和生殖细胞产生有特殊功能的精氨酸含量丰富(占干重3%-4%)。在本申请中,所述鳄鞭多肽中的分子量分布在100da-4000da范围内。在本申请中,所述鳄鞭多肽中的分子量分布在100da-2000da范围内。在本申请中,所述鳄鞭多肽中的分子量分布在1000da-2000da范围内。在本申请中,所述鳄鞭包含暹罗鳄的铁转蛋白、血红蛋白、超氧化物歧化酶蛋白和细胞骨架蛋白的氨基酸特征序列。本申请还提供一种鳄鞭多肽液,所述鳄鞭多肽液包含蛋白质55%-78%、还原糖3%-15%、活性脂质8%-20%以及铁20mg/kg-50mg/kg、锌40mg/kg-70mg/kg、钼0.1mg/kg-1mg/kg、铜0.1mg/kg-1mg/kg、锰0.1mg/kg-1mg/kg、镁1mg/kg-3mg/kg、钙45mg/kg-80mg/kg、磷10mg/kg-50mg/kg,mg/kg表示每kg鳄鞭多肽液中的以mg计的微量元素,其中所述鳄鞭多肽液的分子量部分在100da-4000da范围内,优选地在100da-2000da范围内,更优选地在1000da-2000da范围内。本申请还提供一种鳄鞭多肽液的制备方法,所述制备方法包括:将所述鳄鞭粉碎,然后与水混合,获得混合物;将所述混合物与胰蛋白酶混合,然后酶解;加入木瓜蛋白酶,进行酶解,然后弃去沉淀,获得所述鳄鞭多肽液。在本申请中,所述鳄鞭可以包括鳄鱼的阴茎+阴囊+睾丸。在本申请中,提及的鳄鱼为暹罗鳄人工饲养子二代,鳄鱼繁育饲养许可证:(国渔)水野驯繁字2012-5019号。在本申请中,可以利用绞刀孔径10mm以下的绞肉机粉碎所述鳄鞭。在本申请中,还可以用切片机将鳄鞭制备为厚度<1mm的薄片,然后冻干,再用粉碎机破碎为20目以下。在本申请中,粉碎后的鳄鞭按照质量比1∶1-2∶1的比例与水混合。在本申请中,可以将破碎为20目以下的鳄鞭与水按质量比1∶4-1∶9的比例混合。在本申请中,可以将鳄鞭与水按质量比1∶0.5-1∶9的比例混合。在本申请中,可以将粉碎的鳄鞭与水的混合物按质量比100∶1-1000∶1的比例与胰蛋白酶混合。在本申请中,加入胰蛋白酶后,可以在37℃-55℃下进行酶解。在本申请中,加入胰蛋白酶后,可以酶解2-5h。在本申请中,加入胰蛋白酶后,可以在37℃-55℃下进行酶解2-5h。在本申请中,加入胰蛋白酶后,可以按质量比100∶1-1000∶1的比例加入木瓜蛋白酶。在本申请中,加入木瓜蛋白酶后,可以在45℃-60℃下进行酶解。在本申请中,加入木瓜蛋白酶后,可以酶解2-5h。在本申请中,加入木瓜蛋白酶后,可以在45℃-60℃下进行酶解2-5h。本申请还提供一种鳄鞭多肽粉,所述鳄鞭多肽粉包含蛋白质55%-78%、还原糖3%-15%、活性脂质8%-20%以及铁20mg/kg-50mg/kg、锌40mg/kg-70mg/kg、钼0.1mg/kg-1mg/kg、铜0.1mg/kg-1mg/kg、锰0.1mg/kg-1mg/kg、镁1mg/kg-3mg/kg、钙45mg/kg-80mg/kg、磷10mg/kg-50mg/kg,mg/kg表示每kg鳄鞭多肽粉中的以mg计的微量元素,其中所述鳄鞭多肽液的分子量部分在100da-4000da范围内,优选地在100da-2000da范围内,更优选地在1000da-2000da范围内。本申请还提供所述鳄鞭多肽粉的制备方法,所述制备方法包括:将所述鳄鞭多肽液于-50℃下,冻干72h,根据仪器不同可能会有条件上的变化,获得所述鳄鞭多肽粉。所述鳄鞭多肽在补肾壮阳、提升生殖功能中的用途。本申请还提供一种补肾壮阳组合物,所述补肾壮阳组合物包含所述鳄鞭多肽。本申请还提供一种补肾壮阳组合物,所述补肾壮阳组合物包含人参、补骨脂、当归、淫羊藿、菟丝子、枸杞、山药、肉苁蓉、韭菜子、熟地黄、山茱萸、巴戟天、剌五加、茯苓中的任一种或更多种。在本申请中,所述补肾壮阳组合物包含人参、补骨脂、当归、淫羊藿、菟丝子、枸杞、山药、肉苁蓉、韭菜子、熟地黄、山茱萸、巴戟天、剌五加、茯苓。在本申请中,所述补肾壮阳组合物包含人参、补骨脂、当归、淫羊藿、菟丝子、枸杞、山药、肉苁蓉、韭菜子、剌五加、熟地黄。本申请还提供一种补肾壮阳组合物,所述补肾壮阳组合物包含所述鳄鞭多肽,以及人参、补骨脂、当归、淫羊藿、菟丝子、枸杞、山药、肉苁蓉、韭菜子、熟地黄、山茱萸、剌五加、巴戟天、茯苓中的任一种或更多种。在本申请中,所述补肾壮阳组合物包含所述鳄鞭多肽,以及人参、补骨脂、当归、淫羊藿、菟丝子、枸杞、山药、肉苁蓉、韭菜子、熟地黄、山茱萸、巴戟天、剌五加、茯苓。在本申请中,所述补肾壮阳组合物包含所述鳄鞭多肽,以及人参、补骨脂、当归、淫羊藿、菟丝子、枸杞、山药、肉苁蓉、韭菜子、剌五加、熟地黄。本申请的补肾壮阳组合物可以用于保健品,也可以用于普通食品。本申请的补肾壮阳组合物可以促进性器官的生长发育,改善性器官功能,提升性行为,提高体内性激素水平等功效,因而具有补肾壮阳的效果。本申请的补肾壮阳组合物含有大量的蛋白、多肽及各种元素,营养丰富、健康滋补,是保健养生的佳品。该补肾壮阳组合物主要用于各自补肾益精壮阳抗疲劳的保健食品生产。本申请的补肾壮阳组合物具有降血糖抗氧,健脾养胃,固肾涩精,调节肠道菌群,增加骨密度等功效。本申请的补肾壮阳组合物可以调节免疫力,缓解疲劳,改善记忆,增加骨密度。本申请的补肾壮阳组合物可以增强免疫力,保肝降血糖,具有缓解疲劳,增强骨密度,促进消化,改善生长发育等功效。本申请的补肾壮阳组合物可以调节中枢神经系统、扩张血管,促进红细胞生长,改善睡眠,改善缺氧耐受性,保护肝损伤等作用。本申请的补肾壮阳组合物可以补肾气、涩精气、固虚脱,缓解疲劳,增强免疫力,降血糖。本申请的补肾壮阳组合物补肾阳、壮筋骨,缓解疲劳,增强免疫力。本申请的补肾壮阳组合物具有补肾阳、益精血、通肠道,对神经系统、生殖系统和消化系统的调理作用显著。本申请的补肾壮阳组合物可以抗炎,改善免疫力,保肝护肝,降血糖血脂,缓解视疲劳及营养性贫血。本申请的补肾壮阳组合物扩张冠状动脉,补肾助阳,增强骨密度、缓解疲劳同时还有雌激素养作用。本申请的补肾壮阳组合物壮筋骨调血糖,增强免疫力缓解疲劳。本申请的补肾壮阳组合物具有抗菌祛痰,缓解疲劳,增强免疫力和抗击病原微生物的作用。本申请的补肾壮阳组合物可以促进性腺功能,抗氧化降血压,辅助降血糖,改善疲劳,提高骨密度和免疫力。本申请的补肾壮阳组合物具有补肝肾、益精髓,明目等功能,对抗氧化、减肥、保护肝损伤有益。本申请的补肾壮阳组合物具有免疫抗炎、抗衰老、中枢镇静等作用,对抗辐射,改善记忆,缓解疲劳,提高缺氧耐受性,增加骨密度和免疫力效果明显。本申请的补肾壮阳组合物可以降血糖,健脾养胃,固肾涩精,调节肠道菌群,增加骨密度,调节免疫力,缓解疲劳,改善记忆,保肝降血糖,促进消化,改善生长发育,调节中枢神经系统,扩张血管,促进红细胞生长,改善睡眠,改善缺氧耐受性,保护肝损伤,抗炎,降血脂,缓解营养性贫血,明目,抗氧化,减肥,中枢镇静,抗辐射。首先,本申请采用的所有材料都来源于天然成分,且都属于国家药食同源种类目录中的药材,对人体无危害性。第二,用各种成分混合而成的鳄鞭壮阳组合物效果明显,并有相关实验科学佐证。第三,采用了酶解法将鳄鞭分解为鳄鞭多肽,使其中的活性成分和营养物质得以充分释放,保留全部成分。第四,与传统的一步酶解方法不同,本申请采用了具有酶切位点模糊性的木瓜蛋白酶(倾向于在疏水氨基酸残基后进行酶解)和酶切位点极为严格的胰蛋白酶(只在精氨酸和赖氨酸后进行酶解)的联合酶解法获得鳄鞭多肽。采用酶切特性具有较大差异的两种蛋白酶酶解旨在:1、更充分的酶解蛋白,获得产量大、酶解程度高的鳄鞭多肽;2、获得肽链多样性更多的多肽产物;3、丰富多肽的生物学活性,氨基酸组成,尤其是末端氨基酸残基的不同会大大改变所得多肽抗氧化性、络合性等生物活性功效,可能与多肽水解物整体体现出的各种功效直接相关。第五,使用范围广,可用于不同产品的制备。本申请的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述,并且,部分地从说明书中变得显而易见,或者通过实施本申请而了解。本申请的目的和其他优点可通过在说明书、权利要求书以及附图中所特别指出的结构来实现和获得。附图说明附图用来提供对本申请技术方案的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与本申请的实施例一起用于解释本申请的技术方案,并不构成对本申请技术方案的限制。图1是电子显微镜下的小鼠精子。图2是小鼠交尾实验图,图中白色为雄性小鼠,黑色为雌性小鼠,红圈所示,为一次典型的雄鼠对雌鼠的性行为骑跨。图3是小鼠睾丸酮检测实验,梅花笼实验中所用的特制鼠笼,中间黑色为雌性小鼠,白色为来自不同组的雄性小鼠。图4是鳄鞭水解物中各物质分子质量分布。图5图示鳄鞭多肽蛋白测序检测结果。具体实施方式为使本申请的目的、技术方案和优点更加清楚明白,下文中将结合附图对本申请的实施例进行详细说明。需要说明的是,在不冲突的情况下,本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互任意组合。实施例中使用的仪器设备包括:绞肉机(广州旭众食品机械有限公司sz-500)、万用粉碎机(江阴方圆机械有限公司wf-20b)、中药蒸煮锅(深圳航方有限公司fts-10a)、发酵罐(淄博盖亿化工设备有限责任公司0.5立方搪玻璃反应釜)、称量设备(电子秤上海亚津设备有限公司)、冻干机(上海制冷设备有限公司fnly-2)、热风干燥机(南京銮豪机械设备有限公司fzg-8)、超速离心机离心机(日本hitachicr22n)实施例实施例1:鳄鞭多肽液、鳄鞭多肽粉和中药药液的制备原料:新鲜鳄鞭、人参、补骨脂、当归、淫羊藿、菟丝子、枸杞、山药、肉苁蓉、韭菜子、熟地黄、山茱萸、剌五加、巴戟天、茯苓。所用药材均属从正规商家购买的人工养殖药材。鳄鞭处理:新鲜鳄鞭(鳄鱼的阴茎+阴囊+睾丸)采集下来,去掉表皮,直接在-20℃下保存至制作时取用。鳄鞭多肽的制备工艺:方法一,鳄鞭直接用绞肉机粉碎(绞刀孔径10mm以下)将所得肉糜,按照1∶1-2∶1与水混合。方法二,鳄鞭用切片机制备为厚度<1mm的薄片,冻干后用粉碎机破碎为20目以下,与水按照1∶4-9进行混匀。将上述所得混合物与胰蛋白酶按照100∶1-1000∶1混合,温度37℃-55℃酶解2-5h;随后按照100∶1-1000∶1加入木瓜蛋白酶,45℃-60℃酶解2-5h,所得溶液离心或者过滤去渣,所得溶液为鳄鞭多肽酶解液。中药药液制备:人参∶补骨脂∶当归∶淫羊藿∶菟丝子∶枸杞∶山药∶肉苁蓉∶韭菜子∶熟地∶山茱萸∶巴戟天∶剌五加∶茯苓=1-10∶1-40∶1-15∶2-20∶1-15∶1-30∶1-30∶1-20∶1-20∶1-25∶0-20∶0-20∶0-24∶0-20∶0-20,全部用中药粉碎机粉碎为<20目的药粉,按照药粉∶水=1-10∶200混合,用中药蒸煮锅,80℃-120℃蒸煮2-6h。将药渣过滤除去,取得中药药液。将之前制备得到的鳄鱼酶解液与中药药液按照不同比例进行混合,得到产品即为鳄鞭补肾壮阳药物,也可以对二者混合物冻干后以干粉的形式获得。实施例2如实施例1中方法,鳄鞭多肽液制备方法按照方法二,肉∶水=1∶4混合,混合物与蛋白酶比例两步均为1∶100,时间均为4小时。中药药液制备,人参∶补骨脂∶当归∶淫羊藿∶菟丝子∶枸杞∶山药∶肉苁蓉∶韭菜子∶熟地黄=1∶2∶1∶2∶2∶1∶1∶1∶1∶1,药粉与水比例为7∶200,时间6h。分别稀释一倍备用。实施例3如实施例1中方法,鳄鞭多肽液制备方法按照方法二,肉∶水=1∶4混合,混合物与蛋白酶比例两步均为1∶100,时间均为4小时。中药药液制备,人参∶补骨脂∶当归∶淫羊藿∶菟丝子∶枸杞∶山药∶肉苁蓉∶韭菜子∶熟地黄∶山茱萸∶锁阳∶巴戟天∶茯苓=4∶1∶2∶1∶1∶2∶4∶1∶1∶2∶1∶1∶1∶1,药粉与水比例为10∶200,时间6h。稀释一倍中混合备用。实施例4按照实施例2中方法制备得到鳄鱼鞭多肽液和中药药液,分别进行小鼠灌胃实验。试验用小鼠均为周龄为三周龄的雄性icr(instituteofcancerresearch)小鼠,平均随机分为两组,灌胃时间为六周,每只实验组小鼠灌胃0.25ml药液,对照组小鼠灌胃0.25ml饮用水。灌胃结束后,小鼠引颈处死,对之进行称重,同时取睾丸和附睾进行称重。睾丸系数和附睾系数以睾丸质量比上体重测得,附睾系数用附睾重量比体重获得。所有结果以算数平均值±标准差形式表示。表1.鳄鱼鞭壮阳方剂对幼年至青年icr小鼠体重、性腺重量和性腺系数的影响由表1可知,与对照组相比,中药组和鳄鱼鞭多肽组都明显有促进小鼠性器官发育的作用。但是,从体重看,单纯的中药组小鼠体型较瘦弱,而鳄鞭组小鼠体型最为强壮。中药组和鳄鞭多肽组的比较可知,鳄鞭多肽对附睾促进作用显著,与对照组比重量和系数变化高达43.7%和34.0%,比中药组也高出15.4%和5.5%。而中药成分可以较明显的提升睾丸系数,比对照组高约10%,比鳄鞭组高3%。实施例5按照实施例3中方法制备得到包含鳄鞭多肽液和中药药液的组合物,进行小鼠灌胃实验。试验用小鼠均为四周龄的雄性icr小鼠,适应性饲养一周后,平均随机分为三组,灌胃时间为八周,每只实验组小鼠灌胃0.25ml药液,对照组小鼠灌胃0.25ml饮用水,阳性对照组小鼠灌胃市售补肾填精丸所制成的悬浊液,阳性对照组药液中该补肾填精丸用量为等体积实验组灌胃药液中干物质量。灌胃结束后,小鼠引颈处死,对之进行称重,同时取睾丸和附睾进行称重。睾丸系数和附睾系数以睾丸质量比上体重测得,附睾系数用附睾重量比体重获得。所有结果以算数平均值±方差形式表示。表2.鳄鞭壮阳方剂对icr小鼠幼年至成年体重、性腺重量和性腺系数发育的影响由本次实验结果可知,实验组结果均优于阳性对照组和对照组,与对照组相比,对性腺发育作用比较明显,其中睾丸重量,附睾重量和附睾系数提升均为10%左右,附睾系数提升为5.1%。与实施例4的单独使用相比,包含鳄鞭多肽和中药药业的组合物对附睾相关参数的影响不如单独的鳄鞭多肽效果显著,其最主要的原因在于与中药的混合使鳄鞭多肽的浓度减半所致,另外,不同鼠龄小鼠对药物敏感度的区别以及两种药物之间可能存在的拮抗作用都是潜在原因。二者混合后,保留了中药对睾丸系数的正相关作用,同时消除了其对小鼠体型的不利影响。对比鳄鞭多肽和中药成分的单独作用,所述组合物一定程度上实现了对二者的扬长避短。实施例6照实施例3中方法二,制备得到包含鳄鞭多肽和中药药液的组合物,进行小鼠灌胃实验。试验用小鼠均为四周龄的雄性icr小鼠,适应性饲养一周后,平均随机分为三组,灌胃时间为八周,每只实验组小鼠灌胃0.25ml药液,对照组小鼠灌胃0.25ml饮用水,灌胃结束后,小鼠引颈处死,每只小鼠取附睾一枚,放入500μlpbs中,在三小时内用电子显微镜进行观察计数,对精子密度、活率和正向迁移率进行评估。结果以算术平均数±方差的形式表示出来。表3.鳄鞭壮阳方剂对小鼠精子状态的影响分组小鼠数目(只)精子浓度(百万/ml)精子活率(%)正向迁移率(%)实验组1012.6±2.066.5±5.145.25±6.5对照组1011.08±1.865.13±6.539.5±3由表3可知,所述组合物对小鼠的精子浓度和处于最活跃阶段具有明显正向迁移活性的精子比例均有一定影响,但是对精子活率的影响不大。实施例7照实施例3中方法二制备得到包含鳄鞭多肽和中药药液的组合物,进行小鼠灌胃实验。试验用小鼠均为四周龄的雄性icr小鼠,适应性饲养一周后,平均随机分为三组,灌胃时间为八周,每只实验组小鼠灌胃0.25ml药液,对照组小鼠灌胃0.25ml饮用水。将所有小鼠按照1∶3与五周龄雌性b6小鼠混笼饲养3小时,混笼时间选为当天21时,混笼前雌性小鼠用100ng/ml小鼠促性腺激素进行腹腔注射,以诱导发情,随后在红光灯下用夜视摄影机拍摄记录,并统计雄性小鼠发生性行为的次数,统计时以雄性小鼠对雌性小鼠完成一次骑跨为准(如图2),并在最终算出各个组平均每只小鼠一小时发生的性行为次数,统计区间统一定位摄像开始的最初1.5个小时。将所有小鼠重新按照原来分组继续进行灌胃流程,一周后,在结束最后一次灌胃当天进行小鼠睾丸酮检测。用“梅花笼”检测在发情雌性小鼠诱导下雄性小鼠血清睾丸酮含量(如图3)。经过发情处理的雌性小鼠放于笼子中央,其它五个笼体分别放置五只不同组的雄性小鼠,红光灯下共同放置一个小时,将所有雄性小鼠迅速进行眼球取血,用睾丸酮试剂盒对小鼠血清进行睾丸酮浓度检测。结果以算术平均数±方差的形式表示出来。表4.小鼠交尾实验及睾丸酮实验结果由表4可知,服用所述组合物的实验组小鼠单位时间内发生交配行为的数目显著增加,同时在受到发情雌性小鼠刺激后体内睾丸酮浓度显著高于对照组,说明所述组合物在增强小鼠性欲、提升体内性激素分泌水平方面功效明显。实施例8对如实施例2中所述鳄鞭多肽液,冻干得到鳄鞭多肽粉,对鳄鞭多肽粉进行成分分析。其中蛋白类物质总量采用国标gb5095-2010中所述凯氏定氮法检测。多肽含量采用bio-tech公司生产bca试剂盒检测。还原糖采用国标gb/t5009.7-2008中所述方法进行检测。其它元素采用icp-mass(inductivelycoupledplasmamass)检测,具体方法为,将冻干鳄鞭多肽粉用100倍蒸馏水溶解,将所得溶液用十倍体积浓硝酸浸泡过夜后,一起用硝化炉进行硝解,随后进行icp-mass检测对各种元素含量进行测量。表5.每100g鳄鞭多肽粉中不同营养成分含量成分总蛋白(g)多肽(g)还原糖(g)铁(mg)锌(mg)钼(mg)铜(mg)锰(mg)镁(mg)钙(g)磷(g)含量45.817.85.64.65.50.0430.0680.070.210.270.039所得结果如表5所示。根据表格可知鳄鞭多肽粉中各种营养物质齐全,含量丰富,蛋白质和多肽为主要营养元素,锌含量很高可能是其能影响性腺发育的重要原因。实施例9按照实施2制备鳄鞭多肽液,用thermolcqdecaxp质普仪对其中物质的分子质量进行检测。结果如图4。可知溶液中几乎所有物质分子量都小于2000da,其中绝大部分集中于1000da以下,几乎不存在超过4000da,鳄鞭中的蛋白被水解的很完全,说明其中的营养得到充分释放,同时分子量很小可以被人体直接吸收。实施例10鳄鞭多肽中含有大量的多肽,利用tripletof5600+液质联用系统对之进行多肽序列的鉴定,可以得之其属于暹罗鳄。结果如图5所示。虽然本申请所揭露的实施方式如上,但所述的内容仅为便于理解本申请而采用的实施方式,并非用以限定本申请。任何本申请所属领域内的技术人员,在不脱离本申请所揭露的精神和范围的前提下,可以在实施的形式及细节上进行任何的修改与变化,但本申请的专利保护范围,仍须以所附的权利要求书所界定的范围为准。当前第1页12
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  • 访客 来自[中国] 2023年04月27日 15:54
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  • 访客 来自[中国] 2023年04月25日 09:15
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