本发明属于医药制剂技术领域，具体涉及了一种纳米晶颗粒及其制备方法。
背景技术：
淫羊藿苷元(icaritin,it)为小檗科淫羊藿属植物淫羊藿中的一种多羟基黄酮类单体成分，其结构式如下：
药理研究表明，it抗骨质疏松活性较淫羊藿中其他黄酮苷类化合物强，在体外具有促进成骨细胞活性，抑制破骨细胞活性的作用。淫羊藿苷作为其主要有效成分之一,近年来吸引了国内外众多学者的关注,并对其药理作用进行了深入而广泛的研究，迄今的结果发现淫羊藿苷的主要生理活性在于改善心脑血管系统功能、增强机体免疫力及调节内分泌,同时还具有抗肿瘤、抗肝毒、抗缺氧再氧合和健骨等作用。
淫羊藿苷元溶解性差，在二氯甲烷和乙酸乙酯中略溶，在甲醇、无水乙醇和水中几乎不溶，在不同ph缓冲液中几乎不溶或不溶。其极低的溶解度必然会影响到药物的吸收。临床尚未有淫羊藿苷元制剂。因而寻求一种能增加淫羊藿苷元的溶出度的制剂尤其重要。
cn101485630a公开了一种淫羊藿苷元脂质体，改善了淫羊藿苷元体外溶出度差，生物利用度低的不足。但是制备脂质体收率较低且在实际生产中较难操作。
cn101513388a公开了一种淫羊藿苷元微乳剂及其制备方法，它是将活性成分溶解于油脂中，加上乳化剂、助乳化剂和水制备而成的微乳粒径为10～100nm的微乳剂。但是大量的表面活性剂给人体带来大量的毒副作用。
cn101637467a公开了一种淫羊藿苷元磷脂复合物或环淫羊藿苷元磷脂复合物，极大的改善了它们的溶解性，解决其水溶性、脂溶性差，生物利用度低的缺点。但制备工艺较为复杂，且用到大量有机溶剂，不利于环保。
cn105982869a公开了一种淫羊藿苷元片剂，将淫羊藿苷元、羟丙基纤维素溶解在二乙二醇单乙基醚中，加入气相二氧化硅吸附，然后制成片剂。但长期放置后，随着溶剂挥发，淫羊藿苷元将会析出，导致药物溶出变慢。
现有技术中，为解决淫羊藿苷元溶解度低，溶出度差等问题，常采用微乳、脂质体等新型制剂技术，工艺复杂难控制，且不稳定。制备成传统固体制剂，长期放置后溶出度会变差。
技术实现要素：
发明人考虑到淫羊藿苷元水溶性差，采用湿法研磨技术，将药物粒度减小至纳米级别，溶解度增加较为明显，但是湿法研磨采用表面活性剂十二烷基硫酸钠、多库酯钠、十六烷基三甲基溴化铵等，作为电荷保护剂，用量较大。在经过大量探索性实验后，意外的发现，选用立体保护剂，如羟丙基纤维素、聚维酮等助悬剂，与表面活性剂组合，可以减少表面活性剂的用量，提高药物服用的安全性。再将淫羊藿苷元纳米晶混悬液覆载到空白丸芯颗粒上，制备成淫羊藿苷元纳米晶颗粒，所得颗粒进一步制备成片剂、胶囊或颗粒剂，仍会保留原有纳米晶的优势，使药物溶出迅速，生物利用度大幅提高，体内吸收良好。
本发明具体通过以下方案实现：
一种纳米晶颗粒，包含内层丸芯和外层包衣组成的淫羊藿苷元纳米晶颗粒，所述外层包衣含有淫羊藿苷元、表面活性剂和助悬剂。
所述表面活性剂为十二烷基硫酸钠、多库酯钠、十六烷基三甲基溴化铵中的一种。
所述淫羊藿苷元与表面活性剂的重量比是1:0.001-0.01。
优选地，所述淫羊藿苷元与表面活性剂的重量比是1：0.005-0.01。
所述助悬剂选自羟丙基甲基纤维素、聚维酮、羟丙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、海藻酸钠中的一种或多种。
所述内层丸芯可以为固体制剂常规空白丸芯。
所述内层丸芯可以选自微晶纤维素、蔗糖、乳糖、预胶化淀粉、淀粉、糊精、甘露醇、山梨醇中的一种。
所述淫羊藿苷元与助悬剂的重量比为1:1-5。
优选地，所述淫羊藿苷元与助悬剂的重量比为1：2.5-3.0。
本发明还提供了一种纳米晶颗粒的制备方法，具体采用如下方法制备：将淫羊藿苷元加入到表面活性剂、助悬剂的水溶液中，搅拌，通过湿法研磨技术研磨后得到淫羊藿苷元纳米晶混悬液，将此混悬液通过喷雾干燥在丸芯颗粒上，即得淫羊藿苷元纳米晶颗粒。
优选的，所述纳米晶颗粒采用如下方法制备：将淫羊藿苷元加入到表面活性剂、助悬剂的水溶液中，搅拌，通过球磨机研磨后，将药物粒度减小至纳米级别，得到淫羊藿苷元纳米晶混悬液，将此混悬液通过流化床喷雾干燥在空白丸芯颗粒上，即得淫羊藿苷元纳米晶颗粒。
所述纳米晶颗粒可按照教科书和/或其他现有技术方法，进一步制备成片剂、胶囊剂或颗粒剂等剂型，且仍保留原有特性。
上述制备方法所得淫羊藿苷元纳米晶混悬液还可以按照教科书和/或其他现有技术方法，制备成液体制剂或口服液，且仍保留原有特性。
本发明制备的淫羊藿苷元纳米晶颗粒，具有以下优点：
1.本发明纳米晶颗粒采用十二烷基硫酸钠、多库酯钠、十六烷基三甲基溴化铵，起到了电荷保护剂的作用，药物溶出迅速，稳定性良好，生物利用度大幅提高，体内吸收良好。
2.该制作方法操作简单，适用于工业大生产。
具体实施方式
下面通过实施例来进一步说明本发明。应该正确理解的是：本发明的实施例仅仅是用于说明本发明而给出，而不是对本发明的限制，所以，在本发明的方法前提下对本发明的简单改进均属本发明要求保护的范围。
实施例1
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到十二烷基硫酸钠、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间45min，d90＝320nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在微晶纤维素丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例2
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到多库酯钠、羟丙基纤维素、聚维酮的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间30min，d90＝400nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在淀粉丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例3
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到十六烷基三甲基溴化铵、甲基纤维素的水溶液中，搅拌均匀，通过湿法研磨机研磨，研磨时间40min，d90＝350nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在蔗糖丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例4
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到十六烷基三甲基溴化铵、乙基纤维素的水溶液中，搅拌均匀，通过湿法研磨机研磨，研磨时间40min，d90＝350nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在乳糖丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例5
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到十六烷基三甲基溴化铵、聚维酮的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间50min，d90＝220nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在预胶化淀粉丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例6
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到十六烷基三甲基溴化铵、海藻酸钠的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间35min，d90＝360nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在糊精丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例7
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到十二烷基硫酸钠、羟丙基甲基纤维素的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间60min，d90＝240nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在甘露醇丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例8
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到十二烷基硫酸钠、羟丙基甲基纤维素、羟丙纤维素的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间60min，d90＝240nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在乳糖丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例9
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到十二烷基硫酸钠、海藻酸钠的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间60min，d90＝240nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在微晶纤维素丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例10
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到十二烷基硫酸钠、甲基纤维素的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间60min，d90＝240nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在山梨醇丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例11
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到十二烷基硫酸钠、羟丙基甲基纤维素的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间60min，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在蔗糖丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例12
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到多库酯钠、甲基纤维素的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间45min，d90＝320nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在山梨醇丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例13
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到十二烷基硫酸钠、甲基纤维素的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间45min，d90＝320nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在山梨醇丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例14
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到多库酯钠、甲基纤维素的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间45min，d90＝320nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在山梨醇丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
实施例15
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到吐温-80、聚乙二醇的水溶液中，搅拌均匀，通过湿法研磨机研磨，研磨时间45min，d90＝320nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在羟丙纤维素丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
对比实施例1
1)处方
2)制备工艺：
淫羊藿苷元溶解在二乙二醇单乙基醚中，加入羟丙基纤维素，搅拌使溶解，再加入处方量的气相二氧化硅吸附，然后和微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁混合均匀，采用直接压片工艺压制而成。
对比实施例2
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到甲基纤维素的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间45min，d90＝320nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在山梨醇丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
对比实施例3
1)处方
2)制备方法
淫羊藿苷元粉碎过100目筛，加入到多库酯钠的水溶液中，搅拌均匀，通过珠磨机研磨，研磨时间45min，d90＝320nm，然后将此混悬液通过流化床喷雾干燥在山梨醇丸芯上，最后装入胶囊壳即得。
验证实施例
1.溶出度检测
采用高效液相色谱法对制剂的溶出度进行测定，用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；以0.1％磷酸溶液-甲醇(20:80)为流动相；流速为每分钟1.0ml；检测波长为270nm。溶出度测定方法参照中国药典2010年版二部附录xc第二法。取实施例1-15和对比实施例1-3制备的制剂，以水(900ml)为溶出介质，转速为75rpm，依法操作，经5min时，取溶液适量滤过，弃去至少10ml初滤液，取续滤液作为供试品溶液。另取淫羊藿苷元对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中约含5.5μg的溶液，作为对照品溶液。精密量取上述两种溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品溶液中淫羊藿苷元的溶出度。
表1溶出度检测结果
2.药代动力学检测
1)动物分组及给药
wistar大鼠(270±30)g，雌雄各半。在温度20～22℃，相对湿度45％～65％，光照/黑暗12h/12h条件下饲养，自由饮食、饮水。
实施例1-15和对比实施例1-3灌胃给药组：将已禁食12小时自由饮水的健康wistar大鼠30只，雌雄各半。各组单次灌胃给药，给药剂量为5mg/kg。给药前12h禁食，自由饮水。分别于给药前(0h)、给药后0.083、0.25、0.5、1、1.5、2、4、8、12和24h眼眶后静脉丛取血200μl左右，肝素抗凝，4℃4000rpm条件下离心10min，分离血浆，保存于-20℃低温冰箱中。实验期间自由饮水，灌胃后4h进食。
实施例1-15和对比实施例1-3静脉给药组：将健康wistar大鼠30只，雌雄各半，分为5组。各组尾静脉注射给药，给药剂量为5mg/kg。分别于给药前(0h)、给药后0.083、0.25、0.5、1、1.5、2、4、8、12和24h眼眶后静脉丛取血200μl左右，肝素抗凝，4℃4000rpm条件下离心10min，分离血浆，保存于-20℃低温冰箱中。实验期间自由进食与饮水。
2)血浆样品测定
将所有经处理过的血浆样品，进行uplc-ms/ms定量分析，测定血浆药物浓度。
3)生物利用度的计算
将测定的血药浓度－时间数据用das软件(drugandstatistics，中国数学药理学会，孙瑞元等编制)计算药动学参数。根据公式计算各化合物的绝对生物利用度，t为最后可实测药物浓度的采样时间。
表2各实施例的生物利用度