一种美白保湿抑菌防蚊身体乳及其制备方法与流程

本发明属于化妆品技术领域，特别涉及一种美白保湿抑菌防蚊身体乳及其制备方法。

背景技术：

健康白皙的皮肤是多数亚洲女性关注的热点，中国女性素来崇尚“肤如雪，凝如脂”的美白效果，近年来，随着人们生活质量的提高，美白化妆品的需求也随之上升。美白的方法有很多，比如：

（1）阻止黑色素合成

酪氨酸酶、多巴色素互变酶、5，6-二羟吲哚-2-羧酸氧化酶是黑色素形成过程中最主要的生物酶，其中酪氨酸酶是该过程的限速酶，酪氨酸酶主要催化一元酚羟基化生成二羟基化合物和邻苯二酚氧化生成邻苯二醌，这两类反应都有氧自由基参加，清除氧自由基也可以破坏酪氨酸酶活性；

（2）阻止黑色素传递

壬二酸，烟酰胺（vb3）等可以抑制黑色素颗粒从黑色素细胞向角质蛋白细胞转移，因此具有美白功效；

（3）加快黑色素代谢

维生素e、维生素c及其衍生物可以将氧化态黑色素颗粒还原为白色的还原态黑色素颗粒，从而达到美白的效果；

（4）抗氧化美白

受到紫外线照射后，会产生活性氧，造成磷脂膜的破坏，从而引起皮肤组织的破坏，进而产生红斑、色素沉着等问题，给皮肤带来压力，导致更多黑色素产生。抗氧化（anti-oxidant）是抗氧化自由基的简称，机体内有一整套完整的抗氧化系统，正常生理条件下，机体在氧化代谢的同时，会不断产生自由基，又不断清除自由基，自由基和自由基清除在体内处于一种相对动态平衡状态，由于年龄增长、不合理膳食、压力等原因机体自由基清除剂生成减少，过量的自由基会对机体产生有害作用，过量的自由基会进攻生物膜脂质双分子层中的不饱和脂肪酸引起脂质过氧化，导致生物膜结构和功能改变，造成细胞坏死，组织器官的功能受到影响而老化，自由基攻击蛋白，会使蛋白失去功能，引起病变，如果发生在胶原组织，会令皮肤失去弹性，自由基攻击dna，会造成dna股的切断或碱基改变，会使遗传发生错误导致癌变可能，合理的膳食营养补充及外源性抗氧化营养素的摄入，可阻止自由基对细胞的损伤，延缓衰老并预防相关疾病。

超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,sod）是生物体系中抗氧化酶系的重要组成成员，广泛分布在微生物、植物和动物体内，它能够高效清除体内的自由基，体内多余自由基会引起细胞损伤以及色素沉着，人体衰老是由于自由基堆积和清除障碍的后果，补充外源sod可以美白肌肤、延缓衰老。

水是人体之本，人体中水的含量依其不同的发展阶段而有所不同，胎儿体内的水分约占90%，婴儿时期为80%，青壮年70%，中老年60%甚至50%，人的老化过程也是水分丢失的过程。水是保护皮肤清洁、滋润、细嫩的特效而廉价的美容剂，人体皮肤表层水分在12-15%时，皮肤光滑而有弹性，一旦缺少水分，皮肤会起皮、长皱纹、色素沉积加快。

汗是从汗腺里分泌出来的，一种是外分泌腺，一种是内分泌腺，从内分泌腺分泌的汗液除了含有水、盐、尿素之外，还含有脂肪、蛋白质等物质，细菌分泌蛋白质、脂肪产生氨和脂肪酸，就会产生难闻的汗味，抑制细菌的生长可以避免汗臭的产生。

夏天，天气炎热，蚊子滋生，蚊子叮咬除了会给人们造成瘙痒不适，还会传播多种病毒如东部马脑炎病毒、委内瑞拉脑炎病毒、辛得毕斯病、基孔肯雅病毒、乙型脑炎病毒、圣路易斯病毒、登革病毒、黄热病病毒、西尼罗病毒等，可以引起脑炎、出血热、肝炎、发热、轻度不适、关节炎等。

与本发明研究内容相关的专利如下：

cn106265307b公开了一种紧致焕肤身体乳，活性成分包括了大黄提取物、干姜提取物、茯苓提取物、野菊花提取物、绿茶提取物、葡萄籽提取物和茶多酚。可促进血液循环，改善皮肤弹性与光泽，有助于肌肤紧实和塑型，抑制胶原蛋白酶和弹性蛋白酶的活性，防止皮肤出现皱纹。同时，具有抗氧化和抗菌作用，预防色素沉淀的产生，对色斑具有修复作用。

cn104958247b公开了一种含有葛仙米提取物的身体乳，所述身体乳包括如下的原料：葛仙米提取物，甘油，辛酸/癸酸甘油三酯，氢化聚异丁烯，牛油果树果脂，鲸蜡硬脂醇，甜菜碱，甘油聚醚-26，聚二甲基硅氧烷，鲸蜡硬脂醇橄榄油酸酯和山梨坦橄榄油酸酯的复合物、甘油硬脂酸酯和peg-100硬脂酸酯的复合物，牡丹籽油，银耳多糖，生育酚乙酸酯，水、丁二醇、积雪草提取物、虎杖根提取物、黄芩根提取物、茶叶提取物、光果甘草根提取物、母菊花提取物和迷迭香叶提取物的复合物，燕麦β-葡聚糖，尿囊素，卡波姆，三乙醇胺，edta二钠，香精等等，溶剂为水。能迅速补充身体肌肤所需营养，增强弹性，缓解因干燥引起的粗糙、燥痒、皲裂、起屑等现象。

cn104622760b公开了一种身体护理组合物及其制备方法。该身体护理组合物包含滋润身体组合物和保湿致热组合物，两者按照1:10-10:1重量百分比混合涂抹产生热量。所述保湿致热组合物包含原料组份为多元醇：无水硫酸盐＝1:1-7:1的比例混合。所述滋润身体组合物包含以下原料组份：增稠剂0.05-0.2％；螯合剂0.02-0.07％；油脂8-27％；乳化剂1-3.5％；抗氧化剂0.01-0.1％；调理剂0.1-1.5％；提取物0.5-3％；水余量。具有身体乳滋润、护肤的一般功效外，涂抹时还能产生热量，使身体发热变暖，促进血液循环。

cn106265307a公开了一种紧致焕肤身体乳，活性成分包括了大黄提取物、干姜提取物、茯苓提取物、野菊花提取物、绿茶提取物、葡萄籽提取物和茶多酚。可促进血液循环，改善皮肤弹性与光泽，有助于肌肤紧实和塑型，抑制胶原蛋白酶和弹性蛋白酶的活性，防止皮肤出现皱纹。同时，具有抗氧化和抗菌作用，预防色素沉淀的产生，对色斑具有修复作用。

cn104958247a公开了一种含有葛仙米提取物的身体乳，所述身体乳包括如下的原料：葛仙米提取物，甘油，辛酸/癸酸甘油三酯，氢化聚异丁烯，牛油果树果脂，鲸蜡硬脂醇，甜菜碱，甘油聚醚-26，聚二甲基硅氧烷，鲸蜡硬脂醇橄榄油酸酯和山梨坦橄榄油酸酯的复合物、甘油硬脂酸酯和peg-100硬脂酸酯的复合物，牡丹籽油，银耳多糖，生育酚乙酸酯，水、丁二醇、积雪草提取物、虎杖根提取物、黄芩根提取物、茶叶提取物、光果甘草根提取物、母菊花提取物和迷迭香叶提取物的复合物，燕麦β-葡聚糖，尿囊素，卡波姆，三乙醇胺，edta二钠，香精等等，溶剂为水。能迅速补充身体肌肤所需营养，增强弹性，缓解因干燥引起的粗糙、燥痒、皲裂、起屑等现象。

cn103976912a公开了一种十八症提取液及其制备方法和应用。其具有显著的镇定抗炎、散火消肿、收敛、透皮促进吸收效果及抑制病原菌的作用，这种特性使得十八症提取液具备止痒、止痛、抑菌效用，同时起到防止瘙痒所致皮肤损害而引起感染的作用，将其应用于化妆品中具有显著的抗敏止痒功效。

cn103961291a公开了一种土香薷提取液及其制备方法和应用。本发明经水提制得的土香薷提取液，其具有显著的抗自由基、抗氧化、抗辐射、抗菌抑菌、促进皮肤细胞增殖，防护皮肤紫外线损伤以及防止皮肤氧化损伤的作用，这种特性使得土香薷提取液具备防止皮肤的氧化损伤、减少黑素合成、延缓皮肤衰老的作用，将其应用于化妆品中具有显著的抗过敏、抗衰老功效。

cn102641232b公开了一种具有嫩白滋养功效的大花红景天身体乳，主要由大花红景天根提取液、蓝莓果提取液、红茶提取液、玫瑰草油和相应辅料制成；本发明中大花红景天能润养保湿，维持肌肤的恒湿弹性，并具有抗氧化和美白功能，被《本草纲目》记载为“黄金植物”。蓝莓富含的花青素是纯天然的抗衰老营养补充剂。红茶可以滋润皮肤，促进血液循环，活化细胞，同时具有抗菌、提神等作用。玫瑰草能使皮肤恢复保湿的状态，调理皮脂分泌，促进细胞再生，其宜人的芳香对情绪安抚有作用，也有提振的效果。以大花红景天为“君”，蓝莓为“臣”，“佐”以红茶，“使”以玫瑰草，能有效清除自由基，给肌肤筑起一道防线，使肌肤保湿、滋润、自然白皙。

技术实现要素：

市场上还没有一款能够同时具有美白保湿抑菌防蚊功能的身体乳。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是提供一种美白保湿抑菌防蚊身体乳，由以下重量份的组分组成：光甘草定0.03-0.06%、sod2-4%、烟酰胺1-4%、小分子透明质酸0.01-0.03%、维生素c1-4%、矿物油1-5%、肉豆蔻异丙酯3-5%、蒲公英提取物5-8%、百部提取物5-8%、苦参碱0.05-1%、蛇床子素0.05-1%、毛麝香精油0.05-0.2%、香茅精油0.05-0.2%、黄原胶0.05-1%、余量去离子水。

制备包括以下步骤：

步骤一：将配方量的小分子透明质酸、黄原胶、蒲公英提取物、百部提取物、苦参碱、蛇床子素、sod、烟酰胺、维生素c、去离子水混合搅拌至完全溶解，形成水相；

步骤二：配方量的矿物油、肉豆蔻异丙酯混合搅拌10-20min，得到油相；

步骤三：将水相及油相混合搅拌10-20min，加入毛麝香精油、香茅精油搅拌混匀后，在均质机中均质30-40min，得到乳化均匀的混合物；

步骤四：将步骤三中得到的混合物ph值调到5.5-6.5；

步骤五：灭菌罐装既得。

本发明部分原料购买信息如下：

sod购自武汉远程科技发展有限公司；

蒲公英提取物购自新天域生物科技有限公司；

蛇床子素购自陕西永源生物技术有限公司；

苦参碱购自西安东华生物技术有限公司；

百部提取物购自西安青芷生物技术有限公司；

毛麝香精油购自江西环球天然香料有限公司；

香茅精油购自江西恒诚天然香料油有限公司；

具体的，本发明中用到的sod可清除生物体新陈代谢产生的超氧阴离子自由基及羟基自由基，同时，也可作为超氧阴离子的底物诱导酶，保护机体细胞免受有氧代谢物的损害。sod作为一种良好的自由基清除剂，在提高机体免疫力，延缓衰老等方面有着很好的功效。补充外源性sod，可以提高体内sod的含量和活性，清除体内自由基，维持人体器官、组织的正常运行。

光甘草定是一种黄酮类物质，因为其强大的美白作用被誉为“美白黄金”。作为世界上最昂贵、最安全的祛斑美白成分，在美容行业日渐受到关注。光甘草定主要通过竞争性抑制酪氨酸酶活性，把一部分酪氨酸酶从黑色素合成的催化环中带走，阻止底物与酪氨酸酶的结合，从而抑制黑色素的合成。

烟酰胺，又名尼克酰胺（naa）、维生素b3、维生素pp，被广泛地应用于临床防止糙皮病、舌炎、口炎、皮炎的治疗。它可以抑制黑色素颗粒的形成，还可以抑制其向表皮细胞上行至角质层，有效抑制黑色素向角质细胞传递，当有部分黑色素不可避免地达到表层皮肤后，烟酰胺又能通过加速皮肤细胞地更新速度从而促进黑色素细胞脱落。

维生素c是一种水溶性强抗氧化剂，其在体内可以和氧自由基结合发生还原反应，减轻酯类过氧化反应，减少脂质过氧化物的产生，保护sod等活性，还能阻止黑色素地氧化过程，抑制黑色素形成，通过影响黑色素形成的多个环节如还原黑色素中间体和黑色素聚合物，减少多巴和多巴醌类物质形成，抑制黑色素的产生。

毛麝香为玄参科毛麝香属植物，别名麝香草、凉草、毛老虎、香草等。性温，味辛，具有杀菌、消炎、祛风湿，消肿毒，行气散瘀止痛的功效，主要用于治风湿骨痛，气滞腹痛，疮疖肿毒，皮肤湿疹，瘙痒，跌打损伤。毛麝香叶挥发油具有较强烈的香气，还具有抗氧化、消炎，对肺癌、皮肤癌、肝癌等癌症具有抗癌抑癌的生理作用。

蒲公英为菊科多年生草本植物，主要含有黄酮类、三萜类、倍半萜内酯类、色素类、挥发油和植物甾醇类等化学成分，具有清热解毒、利尿通淋、消肿散结等多种功效。蒲公英提取物具有较好的抗菌消炎的功能，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌、枯草芽孢杆菌、肠炎沙门氏菌、白色念球菌具有明显的抑菌效果。蒲公英提取物主要活性成分为蒲公英黄酮。

百部，性微温，味甘、苦，主治润肺下气止咳，杀虫。外用治头虱，体虱，蛲虫病，阴部瘙痒。百部所含生物碱对大部分致病菌及皮肤真菌有抑制作用。

苦参为豆科槐属植物，性寒，味苦，主要用于清热、杀虫、利尿、祛湿，瘙痒等。苦参碱是从苦参中提取的一类生物碱，对痢疾杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌、金黄色葡萄球菌均有明显的抑制作用。

蛇床子为伞形科植物蛇床的果实，性温，味辛、苦，具有祛风燥湿、杀虫止痒、温肾壮阳的功效。蛇床子素是从蛇床子中提取的香豆素类成分，其对细菌和真菌具有强烈的抑制作用。

香茅是香毛属多年生草本植物，别名柠檬草，性温，味辛，具有疏风通络、温中止痛、和胃通气、醒脑、利尿降压、抗癌、抗疟疾等功效。香茅精油是天然的祛蚊成分，主要是因为其香茅醛和香叶醇含量高。

小分子透明质酸具有快速渗透、吸收的特性，经过皮肤纤维细胞的作用快速合成皮肤自己的透明质酸，增加内源性透明质酸的含量，使皮肤水润光滑。

本发明相比现有技术，其有益效果为：

本发明美白保湿抑菌防蚊身体乳，通过添加sod清除自由基，减少黑色素形成；添加光甘草定抑制酪氨酸酶活性，减少黑色素形成；添加烟酰胺抑制黑色素颗粒向角质细胞传递、加快皮肤更新速度；添加维生素c还原黑色素中间体和黑色素聚合物，减少多巴和多巴醌类物质形成，多种途径美白肌肤，效果显著，并且组份安全。添加蒲公英提取物、百部提取物、苦参碱、蛇床子素、毛麝香精油多种天然组份抑制细菌生长，抗菌广谱，长效，不产生耐药性，安全；添加小分子透明质酸、矿物油、肉豆蔻异丙酯，提高肌肤的含水量和锁水度，添加香茅油，有效祛除蚊子。

附图说明

图1sod、维生素c对超氧阴离子清除率；

图2sod、维生素c对羟基自由基清除率；

图3实施例一到实施例五对超氧阴离子、羟基自由基清除率；

图4皮肤亮度实验结果；

图5黑色素减少比例结果；

图6角质层水分变化。

具体实施方式

以下通过具体实施例进一步描述本发明，但本发明不仅限于此。

实施例一

配方：光甘草定0.06%、sod4%、烟酰胺4%、小分子透明质酸0.01%、维生素c4%、矿物油1%、肉豆蔻异丙酯3%、蒲公英提取物5%、百部提取物5%、苦参碱0.05%、蛇床子素0.05%、毛麝香精油0.05%、香茅精油0.05%、黄原胶1%、余量去离子水；

制备过程如下：

步骤一：将配方量的小分子透明质酸、黄原胶、蒲公英提取物、百部提取物、苦参碱、蛇床子素、sod、烟酰胺、维生素c、去离子水混合搅拌至完全溶解，形成水相；

步骤二：配方量的矿物油、肉豆蔻异丙酯混合搅拌10-20min，得到油相；

步骤三：将水相及油相混合搅拌10-20min，加入毛麝香精油、香茅精油搅拌混匀后，在均质机中均质30-40min，得到乳化均匀的混合物；

步骤四：将步骤三中得到的混合物ph值调到5.5-6.5；

步骤五：灭菌罐装既得。

实施例二

配方：光甘草定0.03%、sod3%、烟酰胺3%、小分子透明质酸0.03%、维生素c3%、矿物油5%、肉豆蔻异丙酯5%、蒲公英提取物6%、百部提取物6%、苦参碱0.06%、蛇床子素0.06%、毛麝香精油0.06%、香茅精油0.06%、黄原胶0.08%、余量去离子水；

制备过程同实施例一。

实施例三

配方：光甘草定0.04%、sod3%、烟酰胺2%、小分子透明质酸0.02%、维生素c2%、矿物油4%、肉豆蔻异丙酯4%、蒲公英提取物8%、百部提取物8%、苦参碱1%、蛇床子素1%、毛麝香精油0.2%、香茅精油0.1%、黄原胶0.06%、余量去离子水；

制备过程同实施例一。

实施例四

配方：光甘草定0.05%、sod2%、烟酰胺1%、小分子透明质酸0.01%、维生素c1%、矿物油2%、肉豆蔻异丙酯3%、蒲公英提取物7%、百部提取物7%、苦参碱0.07%、蛇床子素0.07%、毛麝香精油0.1%、香茅精油0.2%、黄原胶0.07%、余量去离子水；

制备过程同实施例一。

实施例五

配方：光甘草定0.06%、sod4%、烟酰胺4%、小分子透明质酸0.03%、维生素c4%、矿物油5%、肉豆蔻异丙酯5%、蒲公英提取物8%、百部提取物8%、苦参碱1%、蛇床子素1%、毛麝香精油0.2%、香茅精油0.2%、黄原胶0.05%、余量去离子水；

制备过程同实施例一。

实验一：酪氨酸活性抑制测定

实验试剂与仪器：酪氨酸、l-抗坏血酸-葡糖苷、光甘草定、bsa223s-g分析天平（上海精天电子仪器公司）、智能数显恒温水浴锅（江苏金怡仪器科技有限公司）、dr6000紫外-可见光分光光度计（美国哈希公司）

实验方法：以0.01mol/lph6.8的磷酸缓冲液配置1.5g/l的左旋多巴为底物，取40μl加到96孔板后，添加80μl磷酸缓冲液及40μl的受试物。然后加入40μl的100u/ml酪氨酸酶，混匀后在30℃水浴反应30min，在490nm处测吸光度。空白对照使用40μl上述磷酸缓冲液。按下式计算酪氨酸酶活性抑制率。

抑制率=[1-(t1-t2)/(c1-c2)]×100%

式中c1为加酶不加样品时的吸光度，c2为不加酶不加样品时的吸光度，t1为加酶加样品时的吸光度，t2为不加酶加样品时的吸光度。

实验结果:

实验二：体外抗氧化活性实验

实验分为7组：sod、维生素c、实施例一到实施例五。

实验仪器及试剂：bsa223s-g分析天平（上海精天电子仪器公司）、dr6000紫外-可见光分光光度计（美国哈希公司）、sigma3-18k冷冻离心机（北京博励行仪器）、智能数显恒温水浴锅（江苏金怡仪器科技有限公司）、超氧阴离子试剂盒、羟基自由基试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

实验方法：参照试剂盒说明书进行测定。

实验结果如图1、2、3所示。

根据实验结果可以看出sod较低浓度时就表现出很高的超氧阴离子自由基清除率和羟基自由基清除率。抗氧化能力sod＞维生素c，经过两者协同作用，抗氧化能力提高。其中实施例五的效果最好。

实验三：美白祛斑实验

实验仪器：minoltachromametercm-700d（日本美能达公司）、mexametermx18皮肤黑色素和血红素测试仪（德国courage+khazak公司）。

实验方法：

1.招募志愿受试者100例，年龄18-66岁。

2.每晚用沐浴后用实施例五配方身体乳涂抹全身，20天1个疗程。

3.服用产品前、第20天、第40天、第60天、第80天分别用仪器测量受试者的皮肤状态。皮肤亮度使用minoltachromameter(cm-700d)测量皮肤亮度l值，每次平行测量3次，取平均值，将所有志愿受试者的l值再取平均值。皮肤黑色素值用mexametermx18测量，每次平行测量3次，取平均值，计算黑色素下降比例，将所有志愿者黑色素下降比例再取平均值。

4.实验结果如图3、4所示。

由实验结果可以看出，本产品能够提亮肤色、减少黑色素的美白效果。

实验四：皮肤保湿实验

实验人群：100名健康女性志愿者，年龄18-65岁。

样品：实施例一到实施四

实验仪器：皮肤角质层水分测试仪(德国courage&kazaka)，

试验方法：

受试部分测试基础值前2-3天不使用任何化妆品，1-3小时不能接触水。试验前，受试者使用香皂清洁前壁内测，擦拭干净后做五个标记，分别是空白对照区、实施例一到实施例五区域，实验区域面积3×3cm²，每个区域间隔2cm。正式测试前在恒温恒湿（温度21±0.5℃，湿度50±2%）的房间静坐30min。使用样品前，20天、第40天、第60天、第80天，测试五个区域皮肤角质层水分含量。将每次测得数据计算平均值。

实验结果如图5。

实验五：抑菌实验

实验试剂及仪器：高压灭菌器ym30b（上海三申医疗器械有限公司），恒温培养箱（广东泰宏君科学仪器股份有限公司），超净工作台（上海泸净医疗器械有限公司）。枯草芽孢杆菌[cmcc(b)63501]、金黄色葡萄球菌[cmcc(b)26003]、大肠埃希菌[cmcc(b)44102]、白色念珠菌[cm-cc(f)98001]、营养琼脂培养基、双倍乳糖胆盐培养基。

实验方法：

1.取经36℃培养24h的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的营养琼脂斜面培养物，加入到0.9%无菌氯化钠溶液中，与标准比浊液浊度相当，作为原液；用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50-100cfu的菌悬液。

2.取实施例一至实施例五1ml和50-100cfu实验菌（金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌），分别注平皿中，立即倾注溶化并冷至45℃的营养琼脂平皿，每菌株平行制备2个平皿。取双倍乳糖胆盐培养基管7支，分别加入大肠埃希菌10ml、1ml大肠埃希菌+9ml实施例一到五乳液、稀释剂10ml，以上培养管在44℃培养24h。观察发酵管中产酸产气情况，划琼脂平板进行确认实验。

3.结果判定：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念球菌回收率大于70%，样品无抑菌作用；回收率小于70%，样品有抑菌作用。大肠埃希菌检出阳性，样品无抑菌作用，以“+”表示；加入菌液的供试品如未检出阳性菌，样品有抑菌作用，以“-”表示。

实验结果：

抑菌作用结果

实验六驱蚊实验

实验材料：白纹伊蚊购自北京军区军事医学研究所。

实验方法：

1.选择合格受试者

在60×45×45cm蚊笼中放入蚊虫约500只（雌蚊），志愿者将手渗入蚊笼中2min，前来停落的蚊虫多于30只为合格受试者，可用于实验。

2.在50名合格受试者双手背各暴漏7×7cm皮肤，其余部分严密遮盖。其中1只手作为空白对照，另1只手将实施例一至实施例五的身体乳按1.5mg/cm均匀涂抹于手背暴露皮肤上，2h后将手伸入蚊笼中2min，观察有无蚊虫前来吸血，以后每小时测试1次，只要有1只蚊虫前来吸血即判失效，记录平均有效保护时间，并观察计算4、6、8、10及12h的有效保护率。

有效保护率=（对照组平均叮咬数-实验组平均叮咬数）/对照组平均叮咬数

实验结果：