本发明涉及抗微生物制剂技术领域，具体而言，涉及一种抗微生物的中药组合物及抗微生物制剂的制备方法与应用。
背景技术：
病原体在动物体内进行生长繁殖、释放毒性物质等引起机体不同程度的病理变化，这一过程称为感染。机体受到有害微生物侵入而引发的感染、败血症等疾病问题不容小觑，轻则导致皮肤红肿，重则危害健康生命。当机体体表受到有害微生物侵害时，对体表进行消毒杀菌就显得格外重要。
现有的微生物消毒剂可按其作用水平分为高效消毒剂、中效消毒剂和低效消毒剂。高效消毒剂和中效消毒剂一般具有强氧化性或强还原性，消毒杀菌效果好，但另一方面，其也具有的极强的腐蚀性、刺激性和毒性，可能对动物体造成一定程度的伤害，如邻苯二甲醛与皮肤接触会把皮肤烧成黑色，过醋酸等会把皮肤烧成白色而奇痛难忍，含氯类的消毒剂会强烈刺激动物的呼吸道，酚类消毒剂可经动物的皮肤和破损的伤口吸收产生强毒性，损害动物的神经系统等。
低效消毒剂，如季铵盐和双胍类杀菌剂的优点是对物体的腐蚀性、对环境的污染性、对动物体的刺激性和毒性均较小，但其杀菌能力很低，在大多情况下很难达到相应的要求。
为了替代消毒剂中不利成分，既能保证有效杀菌消毒的同时，又不会对环境造成污染，中药以无残留、无副作用、不危害环境等优势逐渐被重视起来，而如何合理选择中药组合物制成的消毒杀菌剂也逐渐成为一种趋势。
鉴于此，特提出本发明。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种抗微生物的中药组合物及抗微生物制剂的其制备方法与应用，该种抗微生物的中药组合物的组分之间通过相互协同，能达到显著抗菌消毒的作用，且该中药组合物的组分均为对动物体无害的成分，能避免或减少使用后机体产生副作用。
本发明是这样实现的：
第一方面，本发明实施例提供了一种抗微生物的中药组合物，其原料包括主料，所述主料按照重量份数包括以下组分：13～20份黄柏，8～18份地锦草，6～12份秦皮，3～11份诃子，14～22份芦荟，6～14份连翘油，10～17份蒲公英以及12～19份马齿苋。
该中药组合物均采用对动物体无毒无害的成分，且成分之间通过相互协同作用，达到显著抗菌消毒的效果。此外，该中药组合物能够避免或减少使用后机体产生副作用，其各成分在环境中易降解，绿色环保，制备成本低廉，适于应用推广。
在可选实施方式中，所述主料按照重要份数包括以下组分：15～18份黄柏，10～16份地锦草，8～10份秦皮，5～9份诃子，16～20份芦荟，8～12份连翘油，12～15份蒲公英以及14～17份马齿苋。按照该配比能够进一步增加组合物的抗菌消毒效果。
在可选实施方式中，所述原料还包括辅料，所述辅料包括阿拉伯胶、吐温80、单硬脂酸甘油酯、甘油、苯羟乙脂、三乙醇胺以及乳酸中的至少一种。本申请实施方式采用的辅料均是对机体刺激小，且无毒副作用的物质，能够进一步协同增强主料的杀菌抑菌作用，有效抑制微生物的生长。
在可选实施方式中，按照所述主料的重量份数标准，所述辅料包括以下组分：20份～30份阿拉伯胶、15份～18份吐温80、25份～38份单硬脂酸甘油酯、50份～60份甘油、2份～5份苯羟乙脂、12份～20份三乙醇胺和15份～20份乳酸。
在可选实施方式中，所述主料中的黄柏、地锦、草秦皮和诃子、马齿苋为经清洗、干燥后进行粉碎得到的原料，粉碎的粒径为24～50目。
第二方面，本发明实施例提供了一种抗微生物制剂的制备方法，其包括将前述任一实施方式所述的抗微生物的中药组合物的组分混合。
在可选实施方式中，所述混合前，所述制备方法包括对抗微生物制剂的原料进行提取，获得芦荟提取液、蒲公英提取液以及由黄柏、地锦草、秦皮、诃子以及马齿苋混合提取的混合液。
在可选实施方式中，所述中药组合物的组分混合包括将所述混合液、所述芦荟提取液、所述蒲公英提取液与连翘油按重量份数混合，加热后形成浸膏。
在可选实施方式中，浸膏的密度为1.1～1.2g/cm3。
在可选实施方式中，所述芦荟提取液、蒲公英提取液以及所述混合液的提取方式均为热回流提取。
在可选实施方式中，所述芦荟提取液的提取条件为：将芦荟原料与其重量8～10倍的水混合，进行加热回流提取，提取温度为60℃～80℃，提取时间1.5～3h，提取次数2～3次，过滤、合并滤液、浓缩，得到芦荟提取液。
在可选实施方式中，所述蒲公英提取液的提取条件为：将蒲公英原料切碎清洗后浸泡，进行加热回流提取，提取温度60℃～80℃，提取时间为1.5～2h，静置、过滤、浓缩，得到蒲公英提取液。
在可选实施方式中，所述混合液的提取条件为：将黄柏、地锦草、秦皮、诃子以及马齿苋混合后的混合物与其重量8～10倍的水混合，进行加热回流提取，提取温度为95℃～100℃，提取时间为1.5～2h，提取次数为2～3次。
在可选实施方式中，所述混合液的热回流提取为酶解辅助热回流提取：
所述混合物的酶解条件为：采用纤维素酶对混合液的原料进行酶解，纤维素酶用量为黄柏、地锦草、秦皮、诃子以及马齿苋混合后的混合物质量的0.5％～1.0％，ph为4.0～5.0，酶解时间2～3h，酶解温度35℃～45℃；
在可选实施方式中，当有抗微生物制剂的原料包括辅料时，所述制备方法包括将辅料的熔融物过筛后与所述浸膏混合，以制得抗微生物制剂。
在可选实施方式中，所述辅料的熔融温度为70℃～90℃。
在可选实施方式中，所述过筛为过80～120目筛；优选为过100目筛。
第三方面，本发明实施例还提供如前述任一实施方式所述的抗微生物的中药组合物或如前述任一实施方式所述的抗微生物制剂的制备方法制备的抗微生物制剂在动物体的消毒、消炎和/或清洗中的应用。
本发明具有以下有益效果：
本发明实施例提供了一种抗微生物的中药组合物及其制备方法与应用，该抗微生物的中药组合物的原料包括主料，即黄柏、地锦草、秦皮、诃子、芦荟、连翘油、蒲公英以及马齿苋，均为对动物体无毒无害的成分，能避免或减少其使用后机体产生副作用，主要成分之间能够相互协同，尤其在添加芦荟和蒲公英后能显著增强中药组合物的抗菌消毒效果，可有效抑制有害微生物的生长；同时，该中药组合物的各组分在环境中易降解，具有绿色环保的优点，且制备成本低廉，适于应用推广。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供了一种抗微生物的中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法。
一种抗微生物的中药组合物，其包括主料和辅料，具体如下。
主料，按照重量份数比包括：15份黄柏，10份地锦草，8份秦皮，5份诃子，16份芦荟，8份连翘油，12份蒲公英以及14份马齿苋。
辅料，按照重量份数包括：20份阿拉伯胶、15份吐温80、25份单硬脂酸甘油酯、50份甘油、2份苯羟乙脂、12份三乙醇胺以及15份乳酸。
一种抗微生物制剂的制备方法，包括采用上述抗微生物的中药组合物的组分制备，具体如下：
(1)混合液：
将清洗、干燥过的黄柏、地锦草、秦皮、诃子以及马齿苋等主料原料进行粉碎，粉碎至24目；根据上述重量份数比，将黄柏、地锦草、秦皮、诃子和马齿苋混合后，对混合物进行酶解辅助热回流提取。
酶解条件为：纤维素酶用量为混合物质量的0.5％，ph为4.0，酶解时间2h，酶解温度35℃；
提取条件为：混合物8倍重量的水，提取温度95℃，提取时间1.5h，提取次数2次。
酶解提取后将提取液静置24h并过滤，过滤后取滤液浓缩，得混合液；
(2)芦荟提取液：将芦荟与水混合，水的重量为芦荟的8倍，采用热回流提取方式进行提取，提取条件为：温度为60℃，提取次数为2次，提取时间为1.5h，提取后静置24h，过滤(滤孔为100μm，在其他实施例中，可在80～120μm的范围选择)，过滤后取滤液浓缩，得芦荟提取液；
(3)蒲公英提取液：将蒲公英清洗、切碎后浸泡，然后采用热回流提取方式进行提取，提取温度为60℃，提取时间为1.5h。提取结束后，静置24h、过滤(滤孔为100μm，在其他实施例中，可在80～120μm的范围选择)、浓缩，得蒲公英提取液；
(4)将上述步骤(1)～(3)制得的混合液、芦荟提取液以及蒲公英提取液按上述重量份数与连翘油混合，并加热至100℃，蒸发水分，直至密度达到1.10g/cm3，形成浸膏；
(5)将上述辅料按重量份数混合并加热至80℃，使辅料熔融，采用100目筛网过滤后得到辅料的熔融物，将熔融物与浸膏混合，制得抗微生物制剂。
实施例2
本实施例提供了一种抗微生物的中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法，与实施例1大致相同，区别在于参数的不同，具体如下。
一种抗微生物的中药组合物，其包括主料和辅料：
主料，按照重量份数比包括：18份黄柏，16份地锦草，10份秦皮，9份诃子，20份芦荟，12份连翘油，15份蒲公英以及17份马齿苋。
辅料，按照重量份数包括：30份阿拉伯胶、18份吐温80、38份单硬脂酸甘油酯、60份甘油、5份苯羟乙脂、20份三乙醇胺以及20份乳酸。
一种抗微生物制剂的制备方法，包括采用上述抗微生物的中药组合物的组分制备，具体如下：
(1)混合液：
将清洗、干燥过的黄柏、地锦草、秦皮、诃子以及马齿苋等主料原料进行粉碎，粉碎至50目；根据上述重量份数比，将黄柏、地锦草、秦皮、诃子和马齿苋混合后，对混合物进行酶解辅助热回流提取。
酶解条件为：纤维素酶用量为混合物质量的1.0％，ph为5.0，酶解时间3h，酶解温度45℃；
提取条件为：混合物10倍量的水(重量)，提取温度100℃，提取时间2h，提取次数3次。
酶解提取后将提取液过滤，取滤液、浓缩，得混合液；
(2)芦荟提取液：将芦荟与水混合，水的重量为芦荟的10倍，采用热回流提取方式进行提取，提取条件为：温度为80℃，提取次数为3次，提取时间为3h，过滤后取滤液浓缩，得芦荟提取液；
(3)蒲公英提取液：将蒲公英清洗、切碎后浸泡，然后采用热回流提取方式进行提取，提取温度为80℃，提取时间为2h，提取结束后，静置36h、过滤(滤孔为100μm)、浓缩，得蒲公英提取液；
(4)将上述步骤(1)～(3)制得的混合液、芦荟提取液、蒲公英提取液与连翘油混合，并加热至100℃，蒸发水分，直至密度达到1.20g/cm3，形成浸膏；
(5)将上述辅料按重量份数比混合并加热至80℃，使辅料熔融得到辅料熔融物，采用100目筛网过滤后，将熔融物与浸膏混合，制得抗微生物制剂。
实施例3
本实施例提供了一种中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法，与实施例1～2大致相同，区别在于参数的不同，具体如下。
一种抗微生物的中药组合物，其包括主料和辅料：
主料，按照重量份数比包括：17份黄柏，13份地锦草，9份秦皮，7份诃子，18份芦荟，10份连翘油，13份蒲公英以及15份马齿苋。
辅料，按照重量份数包括：25份阿拉伯胶、17份吐温80、30份单硬脂酸甘油酯、55份甘油、4份苯羟乙脂、16份三乙醇胺以及17份乳酸。
一种抗微生物制剂的制备方法，包括采用上述抗微生物的中药组合物的组分制备，具体如下：
(1)混合液：将清洗、干燥过的黄柏、地锦草、秦皮、诃子以及马齿苋等主料原料进行粉碎，粉碎至50目；根据上述重量份数比，将黄柏、地锦草、秦皮、诃子和马齿苋混合后，对混合物进行酶解辅助热回流提取。
酶解条件为：纤维素酶用量为混合物质量的0.8％，ph为4.5，酶解时间2.5h，酶解温度40℃；
提取条件为：混合物9倍重量的水，提取温度98℃，提取时间1.8h，提取次数3次。
酶解提取后将提取液过滤，取滤液浓缩，得混合液；
(2)芦荟提取液：将芦荟与水混合，水的重量为芦荟的9倍，采用热回流提取方式进行提取，提取条件为：温度为70℃，提取次数为3次，提取时间为2.5h，过滤后取滤液浓缩，得芦荟提取液；
(3)蒲公英提取液：将蒲公英清洗、切碎后浸泡，然后采用热回流提取方式进行提取，提取温度为70℃，提取时间为1.8h。提取结束后，静置(时间为30h)、过滤(滤孔为80～120μm)、浓缩，得蒲公英提取液；
(4)将上述步骤(1)～(3)制得的混合液、芦荟提取液、蒲公英提取液与连翘油混合，加热至100℃，蒸发水分，直至密度达到1.15g/cm3，形成浸膏；
(5)将上述辅料按重量份数比混合并加热至80℃，使辅料熔融得到辅料熔融物，采用100目筛网将熔融物过滤后，与浸膏混合，制得抗微生物制剂。
实施例4
本实施例提供了一种中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法，与实施例1大致相同，区别在于，中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法中没有加入辅料中的苯羟乙脂。
实施例5
本实施例提供了一种中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法，与实施例1大致相同，区别在于，中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法中没有加入辅料中的三乙醇胺。
实施例6
本实施例提供了一种中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法，与实施例1大致相同，区别在于，中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法中没有加入辅料中的乳酸。
对比例1
本实施例提供了一种中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法，与实施例1大致相同，区别在于，中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法中的芦荟/芦荟提取液替换为同等份量的蒲公英/蒲公英提取液。
对比例2
本实施例提供了一种中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法，与实施例1大致相同，区别在于，将中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法中的蒲公英/蒲公英提取液替换为同等份量的芦荟/芦荟提取液。
对比例3
本实施例提供了一种中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法，与实施例1大致相同，区别在于，中药组合物以及抗微生物制剂的制备方法中的连翘油替换为同等重量份数的芦荟提取液。
验证例1
验证实施例1～6提供的抗微生物制剂的抗菌性能。
验证方法
(a)挑选实验室具有代表性的菌种，金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌和绿脓杆菌。将该四种菌种分别接种于四个琼脂培养基上，在37℃下培养24小时，分别从上述琼脂培养基中挑取典型菌落分别接种于四个新鲜的营养肉汤培养基中，同温度下，培养24小时，备用；
(b)取本发明实施例1～6制备的抗微生物制剂6组、对比例1～3以及对比例4(碘伏)附各10ml，分别置于稀释容器中，对其分别稀释25倍，将上述稀释液分别分置容器内，置于无菌条件下，备用；
(c)将步骤(a)中经营养肉汤培养基中培养24小时的实验菌种用无菌的营养肉汤分别稀释50倍，每种菌种分装于4个培养皿中，分别标记实施例1～实施例6以及对比例1～4；
将上述步骤(b)实施例1～6所得的稀释溶液分别滴入实验组培养皿，对比例1～3稀释溶液分别滴入对照组培养皿。检测菌落残留面积，检测结果请参照表1。
表1检测结果
由表1可知，本发明实施例1～6提供的外用抗微生物中药组合物制剂抑制相比于对比例1～4而言，抗金黄色葡萄球菌、白色念球菌、大肠杆菌以及绿脓杆菌的效果显著优于对比例1～4；
根据对比例1～2与实施例1～6的结果可知，蒲公英提取液与芦荟提取液具有协同作用，两者相辅相成，加入中药组合物中，能显著提高中药组合物制剂的抗微生物能力；
根据对比例3与实施例1～6的结果对比可知，连翘油对中药组合物制剂的抗微生物能力具有显著影响；
可见，在本申请的实施例中，实施例1提供的外用抗微生物中药组合物制剂抑制各类菌种的能力最优，其抗金黄色葡萄球菌、白色念球菌、大肠杆菌以及绿脓杆菌的效果均显著优于其他实施方案。
综上，本发明提供了一种中药组合物，该中药组合物的原料包括主料，主料包括黄柏、地锦草、秦皮、诃子、芦荟、连翘油、蒲公英以及马齿苋，均为对动物体无毒无害的成分，能避免或减少其使用后机体产生副作用，主要成分之间能够相互协同，尤其在添加芦荟和蒲公英后能显著增强中药组合物的抗菌消毒效果，可有效抑制有害微生物的生长；同时，该中药组合物的各组分在环境中易降解，具有绿色环保的优点，且制备成本低廉，适于应用推广。
此外，本申请还提供了采用上述中药组合物制备的抗微生物制剂、抗微生物制剂的制备方法、该抗微生物制剂的制备方法制备的抗微生物制剂以及中药组合物在制备抗微生物制剂中的应用。该抗微生物制剂具有易制备且可显著抑制微生物生长的效果。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。