本发明属于化妆品制备领域，涉及一种美白精华及制备方法，尤其涉及一种包含共生菌组合发酵物的美白组合物、美白精华及其制备方法。
背景技术：
：人体表皮的基底层细胞中含4-5％的色素细胞，人类皮肤的颜色不是取决于黑色素细胞数量，而是取决于黑色素体的数量、大小、分布及黑素化程度。在紫外线照射下，角质形成细胞会释放内皮素，当内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后，会刺激黑色素细胞的增殖，激活酪氨酸酶的活性，加快黑色素细胞树枝状突起的增长，从而加快黑色素的合成和黑色素体向角质形成细胞的迁移。由于黑色素形成的原因是多方面的，要使产品美白效果显著，必须全面综合考虑黑色素形成的原因。但是，多途径作用于黑色素的生成和转移过程，必须考虑产品的安全性和稳定性。因此，选用具有多功能、稳定、安全、且颜色浅的美白活性物质，发挥其协同美白作用，具有重要的意义。cn109745244a公开了一种美白精华，该美白精华包括：非离子乳化剂、油相组分、多元醇、维生素c及其衍生物、无机盐和水；其中，非离子乳化剂包括辛基十二醇、辛基十二醇木糖苷和peg-30二聚羟基硬脂酸酯；油相组分包括烃油，合成脂肪酸酯、动植物油、硅油及其混合物。该美白精华具有高度稳定性，但是美白成分较为单一，单一的美白途径，单一的美白通路，使得美白效果行之甚微，无法达到理想的美白状态。cn107890436a公开了一种用于美白抗氧化的化妆品，该美白抗氧化化妆品包括以下组分且各组分的质量百分含量分别为：液体石蜡21-29％，橄榄油27-33％，微晶石蜡0.5-2％，凡士林1-3％，失水山梨醇单油酸酯1-5％，甘油1.5-3.5％，美白抗氧化剂2.5-10％，二甲基亚砜3-4％，香精3-10‰，余量为去离子水。该发明虽然抗氧化功能较好，但是容易引起皮肤敏感，抗炎效果差，并且美白效果不理想。目前，美白精华普遍存在美白效果不明显、美白成分易致皮肤敏感、破坏皮肤屏障、降低皮肤免疫力等问题，不但无法达到美白效果，还会导致皮肤日渐脆弱，皮肤问题频发。因此，开发一种温和无刺激、且能够从抗氧化、抗光老化、抗糖化、抑制酪氨酸酶活性和减少黑色素合成等多个方面实现美白功效的美白精华是本领域亟需解决的问题。技术实现要素：针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种包含共生菌组合发酵物的美白组合物、美白精华及其制备方法。所述美白组合物能够从抗氧化、抗光老化、抗糖化等多个方面改善皮肤的光泽度、均匀度、通透度、白皙度和斑点沉着度。为达此目的，本发明采用以下技术方案：第一方面，本发明提供一种包含共生菌组合发酵物的美白组合物，所述美白组合物按重量份计包括：0.1-10份茶叶提取物、0.01-5份枸杞果提取物、0.01-5份密蒙花提取物、0.1-10份水仙鳞茎提取物、0.2-1份脱羧肌肽hcl、0.1-0.8份熊果苷、0.01-1份凝血酸、2-5份烟酰胺和10-20份共生菌组合发酵物。本发明提供的美白组合物，科学复配多种美白活性物质，通过茶叶提取物和枸杞果提取物实现抗氧化，通过密蒙花提取物、水仙鳞茎提取物实现抗光老化功效，通过脱羧肌肽hci实现抗糖化，同时，通过熊果苷和凝血酸抑制酪氨酸酶活性，烟酰胺促进色素代谢，添加共生菌组合发酵物，能够提高皮肤免疫力，同时所述共生菌组合发酵物与其他美白组合物之间存在协同增效的作用，共生菌组合发酵物能进一步提高美白组合物的美白功效，能够全面改善皮肤光泽度、均匀度、通透度、白皙度和斑点沉着度，使肌肤光亮无瑕。本发明中，所述茶(camelliasinensis)叶提取物的重量份数为0.1-10份，例如可以是0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、4份、5份、6份、8份或10份等。茶叶提取物具有茶多酚、儿茶素等多种功能成分，对半胱天冬蛋白酶有抑制作用，同时茶叶提取物能够清除人体自由基，具有优秀的抗氧化能力。所述枸杞(lyciumchinense)果提取物的重量份数为0.01-5份，例如可以是0.01份、0.05份、0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、3份、4份或5份等。枸杞果提取物具有强大的抗氧化能力，它的氧化自由基的吸收能力为25000(相对而言蓝莓的氧化自由基吸收能力为2500)，而且还富含钙、铁、锌、硒和维生素，同时枸杞果提取物还具有抗遗传损伤、维护细胞正常发育的功效，提高dna损伤后的修复能力，令机体更加年轻。所述密蒙花(buddlejaofficinalis)提取物的重量份数为0.01-5份，例如可以是0.01份、0.05份、0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、3份、4份或5份等。密蒙花提取物源于密蒙花的叶部，其提取物中含有甘草酸等多种成分，具有清热利尿等功效，可用于日化产品中，能有效调理肌肤，改善皮肤健康状态。所述水仙鳞茎(narcissustazetta)提取物的重量份数为0.1-10份，例如可以是0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、4份、5份、6份、8份或10份等。水仙鳞茎上的鳞片状叶子，储存的发育所需之养分比种子更为丰富，因此水仙鳞茎提取物含有多种植物性蛋白质、生物碱和甙类等，且含有单宁成分，具有很好的收敛皮肤的效果，同时有滋润，调理皮肤皮脂分泌的效果。所述脱羧肌肽hcl的重量份数为0.2-1份，例如可以是0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。脱羧肌肽hcl作用于氧化途径，将糖化防范于未然，能够用到晚期糖基化终末产物ages与诱导因子而非重要的胶原蛋白和弹性纤维结合，从而对抗肌肤糖化作用。所述熊果苷的重量份数为0.1-0.8份，例如可以是0.1份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份或0.8份等。熊果苷萃取自熊果的叶子，能够通过抑制体内酪氨酸酶的活性，阻止黑色素的生成，从而减少皮肤色素沉积，祛除色斑和雀斑，同时还有杀菌、消炎的作用。所述凝血酸的重量份数为0.01-1份，例如可以是0.01份、0.05份、0.1份、0.2份、0.4份、0.5份、0.8份、0.9份或1份等。凝血酸的美白机制是同时且迅速地抑制酪氨酸酶酵素和黑色素细胞的活性，并且防止黑色素聚集，消除因为紫外线照射而形成黑色素。所述烟酰胺的重量份数为2-5份，例如可以是2份、2.4份、2.8份、3份、3.2份、3.4份、3.6份、4份、4.2份、4.5份或5份等。烟酰胺是维生素b3的一种衍生物，在皮肤抗老化方面最重要的功效是减轻和预防皮肤在早期衰老过程中产生的肤色黯淡、发黄、菜色。同时可以修复受损的角质层脂质屏障，提高皮肤抵抗力。本发明中，特别精选99％的高纯度烟酰胺成分，烟酸含量小于150ppm，将刺激降到最低，保护肌肤耐受力，使肌肤白得健康。所述共生菌组合发酵物的重量份数为10-20份，例如可以是10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份或20份等。优选地，所述共生菌组合发酵物的共生菌包括裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的组合，所述共生菌组合发酵物的发酵原料包括大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子。优选地，所述共生菌中裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的质量比为(8-18):(4-8):(2-6):(1-3)。其中，所述8-18可以为9、10、11、12、13、14、15、16或17等。所述4-8可以为4.2、4.5、4.8、5、5.2、5.5、5.8、6、6.2、6.5、6.8、7、7.2、7.5、7.7或7.9等。所述2-6可以为2.2、2.5、2.8、3、3.2、3.5、3.8、4、4.2、4.5、4.8、5、5.2、5.5、5.7或5.9等。所述1-3可以为1.2、1.4、1.6、1.8、2、2.2、2.4、2.6、2.8或2.9等。优选地，所述发酵原料中大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子的质量比为(40-60):(40-60):1:(20-30):(20-30)。上述质量比中，两个40-60各自独立地可以为42、44、45、46、48、50、52、54、55、56或58等；两个20-30各自独立地可以为22、24、25、26、28或30等。优选地，所述共生菌的质量和为所述发酵原料质量和的20-30％，例如可以是21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％或29％等。本发明中，所述共生菌组合发酵物的制备方法包括如下步骤：(1)将大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子粉碎后与水混合，得到待发酵液，并进行灭菌处理；(2)将步骤(1)得到的灭菌后的待发酵液接种酵母菌和乳酸杆菌进行第一次发酵，然后加入裂裥菌进行第二次发酵，最后加入嗜热栖热菌进行第三次发酵，得到所述共生菌组合发酵物。本发明所述共生菌组合发酵物在制备过程中，考虑到不同菌种的不同生活环境，因此，发酵过程分步进行，首先使酵母菌和乳酸杆菌增菌发酵，然后加入裂裥菌进行发酵，酵母菌和乳酸杆菌对裂裥菌有诱导活化作用，可以增加裂裥菌素的产生，而产生的裂裥菌素又对酵母菌和乳酸杆菌有进一步促进作用，促进二者对原料的发酵，最后加入嗜热栖热菌，酵母菌对嗜热栖热菌同样具有诱导活化的作用，从而得到高活性的共生菌组合发酵物。在本发明中，对酵母菌、乳酸杆菌、嗜热栖热菌和裂裥菌的培养使其数量和活性满足接种要求的方式并不做具体限定，现有技术中的常用的方式均可以采用。作为本发明优选的技术方案，所述美白组合物按重量份计还包括0.1-0.5份(例如可以是0.1份、0.2份、0.3份、0.4份或0.5份等)壬二酰二甘氨酸钾和0.5-2份(例如可以是0.5份、0.8份、1份、1.5份或2份等)水解珍珠。优选地，所述美白组合物按重量份计包括1-5份茶叶提取物、0.01-1份枸杞果提取物、0.01-1份密蒙花提取物、1-5份水仙鳞茎提取物、0.2-1份脱羧肌肽hcl、0.1-0.5份熊果苷、0.01-1份凝血酸、2-5份烟酰胺、0.1-0.5份壬二酰二甘氨酸钾和0.5-2份水解珍珠。第二方面，本发明提供一种美白精华，所述美白精华包括第一方面所述的美白组合物。作为本发明优选的技术方案，所述美白精华按质量分数计包括：5-35％第一方面所述的美白组合物、5-27％保湿剂、8-42％润肤剂、2.5-8.5％乳化剂、0.02-0.1％螯合剂、0.01-1％增稠剂和0.9-1.6％抗氧化剂，余量为玫瑰花水。本发明提供的美白精华中包含第一方面所述的美白组合物，能够从多个方面改善皮肤光泽度，且保湿效果较好，能够使皮肤光滑透亮。本发明中所述美白组合物的质量分数为5-35％，例如可以是5％、8％、10％、15％、18％、20％、22％、25％、28％、30％或35％等。本发明中所述保湿剂的质量分数为5-27％，例如可以是5％、8％、10％、12％、14％、16％、20％、22％、24％、25％或27％等。本发明中所述润肤剂的质量分数为8-42％，例如可以是8％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％或42％等。本发明中所述乳化剂的质量分数为2.5-8.5％，例如可以是2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％或8.5％等。本发明中所述螯合剂的质量分数为0.02-0.1％，例如可以是0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％或0.1％等。本发明中所述增稠剂的质量分数为0.01-1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％或0.1％等。本发明中所述抗氧化剂的质量分数为0.9-1.6％，例如可以是0.9％、1％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％或1.6％等。作为本发明优选的技术方案，所述保湿剂包括透明质酸钠、海藻糖、糖类同分异构体、1,2-己二醇、丁二醇、木糖醇、脱水木糖醇、木糖醇基葡糖苷、泛醇或甘油中的任意一种或至少两种的组合。优选地，所述润肤剂包括角鲨烷、牛油果树果酯、低芥酸菜籽油、碳酸二辛酯、辛酸/癸酸甘油三酯、聚二甲基硅氧烷或硬脂酸中的任意一种或至少两种的组合。优选地，所述乳化剂包括丙烯酸酯类共聚物钠、卵磷脂、甘油硬脂酸酯、peg-100硬脂酸酯、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇或鲸蜡硬脂基葡糖苷中的任意一种或至少两种的组合。优选地，所述螯合剂包括乙二胺四乙酸二钠。优选地，所述增稠剂包括水解小核菌胶。优选地，所述抗氧化剂包括对羟基苯乙酮和/或生育酚乙酸酯。作为本发明优选的技术方案，所述美白精华按质量分数计还包括0.9-10％皮肤调理剂。优选地，所述皮肤调理剂包括白松露菌提取物、神经酰胺、苦参根提取物、胀果甘草根提取物、黄芩根提取物、视黄醇棕榈酸酯或甘草酸二钾中的任意一种或至少两种的组合。作为本发明优选的技术方案，所述美白精华按质量分数计包括：5-35％第一方面所述的美白组合物、0.01-0.1％透明质酸钠、0.5-2％海藻糖、0.3-2％糖类同分异构体、0.4-0.6％1,2-己二醇、2-10％丁二醇、0.01-0.2％木糖醇、0.01-0.3％脱水木糖醇、0.1-0.5％木糖醇基葡糖苷、0.3-1％泛醇、2-10％甘油、1-5％角鲨烷、1-5％牛油果树果酯、1-5％低芥酸菜籽油、2-10％碳酸二辛酯、2-10％辛酸/癸酸甘油三酯、1-5％聚二甲基硅氧烷、0.5-2％硬脂酸、0.07-0.35％丙烯酸酯类共聚物钠、0.03-0.15％卵磷脂、0.25-1％甘油硬脂酸酯、0.25-1％peg-100硬脂酸酯、1-3％聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、0.8-2.4％鲸蜡硬脂醇、0.2-0.6％鲸蜡硬脂基葡糖苷、0.01-1％白松露菌提取物、0.5-6％神经酰胺、0.01-0.5％苦参根提取物、0.01-0.5％胀果甘草根提取物、0.01-0.5％黄芩根提取物、0.3-1％视黄醇棕榈酸酯、0.1-0.5％甘草酸二钾、0.02-0.1％螯合剂、0.01-1％增稠剂和0.4-0.6％对羟基苯乙酮和0.5-1％生育酚乙酸酯，余量为玫瑰花水。第三方面，本发明提供一种如第二方面所述的美白精华的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：(1)将保湿剂、润肤剂和乳化剂中的水相成分与玫瑰花水混合，得到水相混合液，将保湿剂、润肤剂和乳化剂中的油相成分混合，得到油相混合液；(2)将步骤(1)得到的水相混合液和油相混合液混合搅拌，得到混合液；(3)将步骤(2)得到的混合液、配方量的第一方面所述的美白组合物、螯合剂、增稠剂和抗氧化剂混合，得到所述美白精华。作为本发明优选的技术方案，步骤(1)中所述水相成分与玫瑰花水混合的温度为80-85℃，例如可以是80℃、81℃、82℃、83℃、84℃或85℃等；时间为5-10min，例如可以是5min、5.5min、6min、6.5min、7min、7.5min、8min、8.5min、9min、9.5min或10min等。优选地，步骤(1)所述油相成分混合的温度为78-80℃，例如可以是78℃、78.5℃、79℃、79.5℃或80℃等；时间为5-10min，例如可以是5min、5.5min、6min、6.5min、7min、7.5min、8min、8.5min、9min、9.5min或10min等。优选地，步骤(2)所述混合搅拌的温度为80-82℃，例如可以是80℃、80.5℃、81℃、81.5℃或82℃等；时间为10-15min，例如可以是10min、11min、12min、13min、14min或15min等。优选地，步骤(3)所述混合的温度为40-45℃，例如可以是40℃、41℃、42℃、43℃、44℃或45℃等；时间均为10-20min，例如可以是10min、11min、12min、13min、14min、15min、16min、17min、18min、19min或20min等。作为本发明优选的技术方案，所述制备方法包括如下步骤：(1)将保湿剂、润肤剂和乳化剂中的水相成分与玫瑰花水加入水相锅中，在80-85℃下搅拌混合5-10min，得到水相混合液；将保湿剂、润肤剂和乳化剂中的油相成分加入油相锅中，在78-80℃下搅拌混合5-10min，得到油相混合液；(2)将步骤(1)得到的水相混合液和油相混合液抽入乳化锅中，在80-82℃下混合搅拌10-15min，得到混合液；(3)将步骤(2)得到的混合液、配方量的第一方面所述的美白组合物、螯合剂、增稠剂和抗氧化剂在40-45℃下搅拌混合10-20min，冷却至37℃以下出料，得到所述美白精华。本发明所述的数值范围不仅包括上述例举的点值，还包括没有例举出的上述数值范围之间的任意的点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。与现有技术相比，本发明的有益效果为：(1)本发明提供的美白组合物，科学复配多种美白活性物质，通过茶叶提取物、枸杞果提取物、密蒙花提取物、水仙鳞茎提取物、脱羧肌肽hci、熊果苷、凝血酸、烟酰胺和共生菌组合发酵物多种美白活性物质相互配合，协同增效，促进色素代谢，提高抗氧化、抗光老化和抗糖化功效，同时能够抑制酪氨酸酶活性，使肌肤光亮无瑕；同时，本发明中添加的共生菌组合发酵物不仅能够提高肌肤免疫力，还能够进一步提高美白组合物的美白功效，同时，所述美白精华不添加香精、色素、激素和铅汞等风险成分，增强肌肤免疫力、耐受力、修护力，使肌肤白得更安全，白得更强韧；(2)本发明提供的美白精华，其dpph自由基清除率为70.1-76.9％，ros表皮角质形成细胞积累量为8.7-13.6％，糖化抑制率为54.6-69.9％，使用本发明提供的美白精华后相对酪氨酸酶活性为18.4-23.7％，相对黑色素含量为10.2-13.4％，同时所述面霜能够明显减少受试者面部的黑色素含量，黑色素含量减少值为43.3-53.9％，说明本发明提供的美白精华具有优异的抗氧化、抗光老化和抗糖化的功效，能够抑制酪氨酸酶活性，促进色素代谢，全面改善肌肤色素沉着问题。具体实施方式下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。以下实施例中，所述共生菌组合发酵物可以通过如下方法进行制备：(1)将33.11g大米、33.11g川谷籽、0.66g人参、16.56g巨藻和16.56g覆盆子粉碎，然后与180g水混合，用80目滤布过滤，得到待发酵液，并在100℃下加热20min进行灭菌处理；(2)将灭菌后的待发酵液利用精氨酸调节ph为4.5，置于种子罐中，接种4g酵母菌和2g乳酸杆菌，在5m3/h/50l的通气量，以150rpm搅拌转动下，30℃培养22h；(3)然后加入精氨酸调节ph为6.5，加入12g裂裥菌，在5m3/h/50l的通气量，以150rpm搅拌转动下，30℃培养22h；(4)最后利用精氨酸调节ph为8.0，加入6g嗜热栖热菌，在5m3/h/50l的通气量，以150rpm搅拌转动，35℃培养22h后升温至58℃培养18h，得到初步产物；(5)将初步产物进行过滤，取清液，在其中加入活性炭搅拌10min，进行吸附纯化处理，然后利用过滤的方式再次取清液，灭菌，得到共生菌组合发酵物。其中，大米为东北大米，川谷籽购自贵州，人参为长白山白参，巨藻购自山东长岛县，覆盆子购自安徽。酵母菌选自啤酒酵母，乳酸杆菌选自嗜热乳酸杆菌。实施例1提供一种美白组合物，所述复合物按重量份计包括：2份茶叶提取物、0.5份枸杞果提取物、0.5份密蒙花提取物、3份水仙鳞茎提取物、0.5份脱羧肌肽hcl、0.3份熊果苷、0.5份凝血酸、3份烟酰胺、0.25份壬二酰二甘氨酸钾、1.25份水解珍珠和15份共生菌组合发酵物。实施例2提供一种美白组合物，所述复合物按重量份计包括：5份茶叶提取物、1份枸杞果提取物、1份密蒙花提取物、5份水仙鳞茎提取物、1份脱羧肌肽hcl、0.1份熊果苷、0.1份凝血酸、2份烟酰胺、0.1份壬二酰二甘氨酸钾、0.5份水解珍珠和20份共生菌组合发酵物。实施例3提供一种美白组合物，所述复合物按重量份计包括：1份茶叶提取物、0.01份枸杞果提取物、0.01份密蒙花提取物、1份水仙鳞茎提取物、0.2份脱羧肌肽hcl、0.5份熊果苷、1份凝血酸、5份烟酰胺、0.5份壬二酰二甘氨酸钾、2份水解珍珠和15份共生菌组合发酵物。实施例4提供一种美白组合物，所述复合物按重量份计包括：0.1份茶叶提取物、0.01份枸杞果提取物、0.01份密蒙花提取物、0.1份水仙鳞茎提取物、0.2份脱羧肌肽hcl、0.1份熊果苷、0.01份凝血酸、2份烟酰胺、0.1份壬二酰二甘氨酸钾、2份水解珍珠和16份共生菌组合发酵物。实施例5提供一种美白组合物，所述复合物按重量份计包括：10份茶叶提取物、5份枸杞果提取物、5份密蒙花提取物、10份水仙鳞茎提取物、1份脱羧肌肽hcl、0.8份熊果苷、1份凝血酸、5份烟酰胺和12份共生菌组合发酵物。实施例6提供一种美白组合物，与实施例1的区别在于所述共生菌组合发酵物的重量份增加为20份。实施例7提供一种美白组合物，与实施例1的区别在于所述共生菌组合发酵物的重量份减少为10份。对比例1～9为单一的美白活性物质，分别为：茶叶提取物(对比例1)、密蒙花提取物(对比例2)、枸杞果提取物(对比例3)、水仙鳞茎提取物(对比例4)、脱羧肌肽hcl(对比例5)、熊果苷(对比例6)、凝血酸(对比例7)、烟酰胺(对比例8)、共生菌组合发酵物(对比例9)。对比例10～18将不同的美白活性物质进行复配的得到的美白组合物，按重量份计各对比例的配方如下表1所示：表1应用实施例1～7提供一种美白精华，所述美白精华按质量分数计包括如下组分：其中，应用实施例1～7中的美白组合物分别为实施例1～7提供的美白组合物。制备方法为：(1)将保湿剂、润肤剂和乳化剂中的水相成分与玫瑰花水加入水相锅中，在80℃下搅拌混合5min，得到水相混合液；将保湿剂、润肤剂和乳化剂中的油相成分加入油相锅中，在78℃下搅拌混合5min，得到油相混合液；(2)将步骤(1)得到的水相混合液和油相混合液抽入乳化锅中，在80℃下混合搅拌10min，得到混合液；(3)将步骤(2)得到的混合液、配方量的的美白组合物、螯合剂、增稠剂和抗氧化剂在40℃下搅拌混合20min，冷却至37℃以下出料，得到所述美白精华。应用实施例8提供一种美白精华，与应用对比例1相比区别仅在于，所述美白精华中美白组合物的含量增加为35％，其余组分及含量同应用实施例1。应用实施例9提供一种美白精华，与应用对比例1相比区别仅在于，所述美白精华中美白组合物的含量减少为5％，其余组分及含量同应用实施例1。应用对比例1～18与应用对比例1相比，将其中的美白组合物分别替换为对比例1～18提供的美白活性物质或美白组合物，其余组分及含量同应用实施例1。应用对比例19与应用对比例1相比，不含美白组合物，其余组分及含量同应用实施例1。性能测试1对应用实施例1～9和应用对比例1～19提供的美白精华进行安全性能测试，方法如下：(1)红细胞溶血实验红细胞悬液的制备：选择健康家兔，心脏取血9ml，加入2％的草酸钾溶液1ml，离心，弃去上清液，用20mmol/l的pbs溶液将沉淀物稀释至20ml，4℃保存备用。选择样品用pbs溶液稀释至不同浓度，每个样品设置5个浓度梯度。取10ml待测样品的稀释液，加入200μl上述红细胞悬液(控制样品终浓度分别为5、10、20、50、100mg/ml)，以蒸馏水作为全溶血对照，pbs溶液作为阴性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离心10min，取上清液，用分光光度计测试其在560nm处的吸光度(a560)，按如下公式计算溶血率；绘制溶血率-样品浓度标准曲线，计算50％红细胞发生溶血时的样品浓度(hd50)。(2)蛋白变性实验：将样品用pbs溶液稀释至10g/l，取10ml待测样品的稀释液，加入200μl上述红细胞悬液，以蒸馏水作为空白对照，1mg/ml十二烷基硫酸钠(sds)溶液作为阳性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离心10min，取上清液，用分光光度计分别测试其在540nm和575nm处的吸光度a540和a575，按照如下公式计算蛋白变性指数(di)；其中，r1＝空白对照组a575/空白对照组a540，r2＝实验组a575/实验组a540，r3＝阳性对照组a575/阳性对照组a540。根据l/d值对待测样品的刺激性进行评价，其中l/d值为hd50/di，红细胞溶血实验刺激性分级标准如下表2所示：表2l/d分级>100无刺激性10<l/d≤100微刺激性1<l/d≤10轻度刺激性0.1<l/d≤1中度刺激性上述红细胞溶血实验和蛋白变性实验的测试结果如下表3所示：表3由安全性能测试可知，本发明提供的美白精华的l/d值均大于100，说明该美白精华温和无刺激，且由应用实施例1和应用实施例6、7、18比较可知，共生菌组合发酵物含量的增加能够降低美白精华的刺激性，使所得产品更加安全可靠。性能测试2对应用实施例1～9和应用对比例1～19提供的美白精华进行抗氧化、抗糖化和抗光老化测试，具体方法如下：(1)抗氧化测试dpph自由基清除能力评价：清除dpph(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基能力在一定程度上反应物质的抗氧化能力。自由基清除率越大，表明抗氧化能力越强，抗衰老能力越强。因此，可以通过中药组合物对清除dpph自由基能力的研究来判断其抗衰老效果。将样品用dmso稀释为质量分数2％的待测样品，进行下面试验：向试管中加入质量浓度为45.8mg/l的dpph测试液2.0ml和一定量的待测样品，总体积用无水乙醇补充至3ml，摇匀，避光反应30min后，用1cm比色皿在517nm波长处测定吸光度，记为a10；向试管中加入无水乙醇2ml和相应体积的待测样品，总体积用无水乙醇补充至3ml，测得的吸光度记为a11；向试管中加入dpph测试液2ml和无水乙醇1ml，测得的吸光度记为a12，计算待测液对dpph自由基清除率(y')；dpph自由基清除率的计算公式为：式中a10为待测样品清除dpph后体系的吸光度值，a11为样品空白对照清除dpph后体系的吸光度值，a12为未加药品前反应体系的吸光度值，测试结果如表4所示。(2)抗光老化测试蓝光下表皮角质形成细胞氧化应激测试，具体测试方法为：使用蓝光辐射氧化organotypical皮肤模型，经测试样品抗光老化组合物预处理后进行蓝光照射，蓝光强度为15j/cm2。由于中高剂量的ros(活性氧簇)会通过细胞氧化应激反应诱导细胞凋亡甚至导致其坏死，因此测量ros在表皮角质形成细胞积累能够反映出测试样品的抗光老化能力，测试结果如表4所示。(3)抗糖化测试选取280位年龄在18-50岁之间的女性志愿者，分别在脸部使用应用实施例1～9和应用对比例1～19提供的美白精华，受试对象每天使用两次，连续使用30天，测试期间不使用其它任何产品。采用德国map580皮肤测试仪测试，测试得到的糖化抑制率结果如下表4所示：表4本发明中提供的美白精华具有较明显的抗氧化、抗光老化和抗糖化效果，所述美白精华的dpph自由基清除率为70.1-76.9％，ros表皮角质形成细胞积累量为8.7-13.6％，糖化抑制率为54.6-69.9％，说明所述美白精华能够有效清除自由基，抑制蓝光条件下人体表皮角质细胞ros的生成，进而保护皮肤细胞不受蓝光照射的损伤，并同时抑制糖化反应。因此，本发明提供的美白精华能够从多个方面实现美白效果，令皮肤健康白皙。性能测试3对应用实施例1～9和应用对比例1～19提供的美白精华进行美白效果测试，方法如下：(1)酪氨酸酶活性抑制试验取对数生长期的小鼠黑色素瘤b16细胞，接种于6孔细胞培养板，培养过夜。分别加入终体积分数为1％的受试样品，以未处理组作细胞对照组，每组2个复孔。培养48h后用pbs洗涤1次，每孔加入100μl裂解液，刮取收集细胞，离心取上清液。取50μl细胞上清液至96孔板，再加入50μl1％l-多巴溶液，于37℃孵育1h，m3读板仪于475nm处读取吸光度值。相对酪氨酸酶活性(％)＝(测定孔吸光度值-空白对照组吸光度值)/(细胞对照组吸光度值-空白对照组吸光度值)×100％。(2)黑色素合成抑制实验取对数生长期的小鼠黑色素瘤b16细胞，接种于t25细胞培养瓶，培养过夜。分别加入终体积分数为1％的受试样品，以未处理组作为细胞对照组。培养48h后用pbs洗涤1次，加入1ml1mol/lnaoh溶液，刮取收集细胞，放入80℃水浴中30min，取上清液加入96孔板，m3读板仪于475nm处读取吸光度值。相对黑色素含量(％)＝(测定孔吸光度值-空白对照组吸光度值)/(细胞对照组吸光度值-空白对照组吸光度值)×100％。酪氨酸酶活性以及黑色素合成抑制实验结果如表5所述，其中对照组的酪氨酸酶活性为100％，对照组的黑色素含量为100％。(3)美白效果人体评测选取280位年龄在18-50岁之间的女性志愿者，分别在脸部使用应用实施例1～9和应用对比例1～19提供的美白精华，每天早晚各使用1次，共使用4周。采用皮肤红黑色素测试仪(hexametermx18)评估受试对象使用面膜组合物前、后皮肤黑色素含量变化。所用仪器的测量范围是0-999，测量数值越高，说明皮肤中黑色素含量越高。受试对象使用本发明制备的面膜组合物前、后面部肌肤黑色素的减少量如表5所示。表5由上表结果可知，使用本发明提供的美白精华后相对酪氨酸酶活性为18.4-23.7％，对酪氨酸酶的抑制效果较好，同时也能明显抑制细胞中的黑色素的合成，相对黑色素含量为10.2-13.4％，且通过人体评测结果可知，本发明提供的美白精华在使用4周之后，能够明显降低受试者的黑色素含量，受试者面部的黑色素含量减少值为43.3-53.9％，说明所述美白精华的美白效果较好；且由应用实施例1、6-9和应用对比例18比较可知，共生菌组合发酵物的加入能够明显提升美白精华的美白效果，且随着加入量的增加，其效果明显上升，其中应用实施例8的受试者黑色素的减少量高达53.9％。综上所述，本发明提供的美白精华温和无刺激，且抗氧化、抗光老化和抗糖化效果较为明显，也能够抑制酪氨酸酶的活性，减少细胞中的黑色素的合成量，相比于单一的美白活性物质(应用对比例1～9)或缺少某一种美白活性物质复配得到的美白组合物(应用对比例10～18)，本发明提供的美白组合物效果更加优异，同时，且共生菌组合发酵物与其他美白活性物质同时使用时，能够明显提升美白精华的安全性和美白效果。申请人声明，以上所述仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，所属
技术领域：
的技术人员应该明了，任何属于本
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的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。当前第1页12