一种知母皂苷BII、AIII、AI或BIII在制备抗肺纤维化药物方面的应用的制作方法

本发明属于医药领域，涉及已知化合物的新用途，具体涉及一种知母皂苷bii、aiii、ai或biii在制备抗肺纤维化药物方面的应用。

背景技术：

肺纤维化是各种肺间质性疾病的最终表现，是因肺泡损伤、肺组织反复破坏修复，成纤维细胞(fibroblast，fb)增殖活化及大量细胞外基质(extracellularmatrix，ecm)沉积，最终造成大量胶原纤维沉积于肺组织中的一类疾病。目前，肺纤维化发病率、患病率逐年升高，且该病缺乏有效治疗药物，所以病死率居高不下。参考文献：王源等，hif-1α与肺纤维化关系的研究进展，临床误诊误治，第32卷第10期。

传统认识将其发病过程是由肺泡损伤修复中抗纤维化和导致纤维化之间的平衡失调，该认识依据的主要事实是肺纤维化的病理改变多源于肺泡上皮细胞受损和修复异常；即：反复的微型损伤导致肺泡表皮细胞损伤，主要是肺泡i型细胞，其次是肺泡ii型细胞。受伤的表皮会启动损伤修复信号通路，主要是促进肺泡干细胞-肺泡ii型细胞的复制、迁移和分化，同时，启动其他间质细胞的重塑过程以适应表皮细胞的修复。如果表皮细胞修复不及时，或者长期激活导致失控，就会分泌多种重塑信号，不断招募和激活纤维化细胞，从而导致了肺纤维化改变和肺功能受阻。除上述机制外，氧化/抗氧化失衡、成纤维细胞和肌成纤维细胞凋亡减少、基质金属蛋白酶家族/金属蛋白酶组织抑制因子的局部失衡、肿瘤坏死因子和内皮素-1等细胞因子失衡也与疾病形成有关。所以肺纤维化可以看作内外因的相互作用于机体，使肺部细胞之间的传导信号异常，导致肺部内环境稳态失调而引起的疾病。参考文献：闫雷雷等，中医药防治肺纤维化的研究进展及思考，湖北中医杂志，第40卷第11期。

包括植物源天然产物单体在内的天然产物在药物开发中发挥了不可替代的作用。植物源天然产物单体主要有黄酮类、生物碱类、多糖类、挥发油类、醌类、萜类、木脂素类、香豆素类、皂苷类、强心苷类、酚酸类及氨基酸与酶等化合物。知母皂苷bii为来源于中药知母的呋甾皂苷类单体化合物，可以显著改善多种拟痴呆动物模型的学习记忆功能，其作用机理为上调胆碱能n&m受体，改善脑缺血及缺血损伤。现在正在按照中药、天然药物注册分类ⅰ进行研究开发，用于痴呆的防治。

目前，尚未见知母皂苷bii、aiii、ai或biii在治疗肺纤维化方面的应用。

技术实现要素：

本发明旨在提供一种知母皂苷bii、aiii、ai或biii在制备抗肺纤维化药物方面的应用。

本发明上述目的通过如下技术方案实现：

一种知母皂苷bii、aiii、ai或biii在制备抗肺纤维化药物方面的应用。

在本发明的具体实施例中，知母皂苷bii、aiii、ai或biii可以显著抑制tgf-β1诱导的人胚肺成纤维细胞增殖，具有开发成抗肺纤维化药物的前景。

一种抗肺纤维化的药物制剂，活性成分为知母皂苷bii、aiii、ai或biii。

进一步地，还含有药学上可以接受的辅料，制成药学上可以接受的剂型。

更进一步地，所述辅料为固体、液体或半固体辅料。

更进一步地，所述剂型包括片剂、胶囊、口服液和注射剂。

有益效果：

tgf-β广泛参与不同器官纤维化的发展，在肺纤维化患者中高表达，能够促进肺成纤维细胞增殖、迁移、活化，tgf-β1被广泛应用于诱导人胚肺成纤维细胞hfl1增殖构造肺纤维化细胞模型。本发明实验结果表明，知母皂苷bii、aiii、ai或biii可以显著抑制tgf-β1诱导的人胚肺成纤维细胞增殖，具有开发成抗肺纤维化药物的前景。

附图说明

图1～4为各组吸光度值比较。从图1～4结果可以看出，与对照组相比，模型组吸光度值升高，说明人胚肺成纤维细胞hfl1在tgf-β1的诱导下显著增殖，造模成功；与模型组相比，给药组吸光度值显著降低，且呈现明显的剂量依赖性，说明知母皂苷bii、aiii、ai或biii可以显著抑制tgf-β1诱导的人胚肺成纤维细胞增殖。

具体实施方式

下面结合附图和实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。

实施例1：知母皂苷bii、aiii、ai或biii的抗肺纤维化药效

一、实验材料

人胚肺成纤维细胞hfl1购自中国科学院上海细胞库。

知母皂苷bii、aiii、ai、biii纯度≥98％。

tgf-β1购自美国peprotech公司，胎牛血清购自乌拉圭lonsera公司，dmem培养基购自美国hyclone公司。

二、实验方法

1、细胞培养

将人胚肺成纤维细胞hfl1按照常规方法复苏后，接种于含有10％胎牛血清和1％双抗的dmem培养基中，37℃、5％co2培养箱培养、传代。

2、实验分组

实验分为对照组(只加入hfl1细胞)、模型组(加入hfl1细胞及10ng/ml的tgf-β)和给药组(加入hfl1细胞、10ng/ml的tgf-β和5ng/ml、50ng/ml或100ng/ml知母皂苷bii、aiii、ai或biii)。

3、mtt法检测hfl1细胞增殖

取对数生长期hfl1细胞，胰酶消化，并按照5×10³/孔的细胞量接种于无菌96孔培养板内，置于37℃，5％co2培养箱中培养。24h后，弃原培养液，按照“2、实验分组”中的分组分组并加入对应的培养基，每组6个复孔。作用48h后，每孔加入mtt溶液(5mg/ml)20μl，再孵育4h，弃去孔内培养液，每孔加入150μl二甲基亚砜，震荡混匀后，在酶标仪550nm波长处检测各孔的吸光度值(od550nm)。

4、统计学分析

利用spss软件对数据分析，采用单因素方差分析，以p＜0.05为差异有统计学意义。

三、实验结果

mtt结果如表1和图1～4所示。从结果看出，与对照组相比，模型组吸光度值升高，说明人胚肺成纤维细胞hfl1在tgf-β1的诱导下显著增殖，造模成功；与模型组相比，给药组吸光度值显著降低，且呈现明显的剂量依赖性，说明知母皂苷bii、aiii、ai或biii可以显著抑制tgf-β1诱导的人胚肺成纤维细胞增殖。

表1各组吸光度值比较

tgf-β广泛参与不同器官纤维化的发展，在肺纤维化患者中高表达，能够促进肺成纤维细胞增殖、迁移、活化，tgf-β1被广泛应用于诱导人胚肺成纤维细胞hfl1增殖构造肺纤维化细胞模型。上述实验结果表明，知母皂苷bii、aiii、ai或biii可以显著抑制tgf-β1诱导的人胚肺成纤维细胞增殖，具有开发成抗肺纤维化药物的前景。

实施例2：一种抗肺纤维化的药物制剂

一种抗肺纤维化的药物制剂，以知母皂苷bii、aiii、ai或biii为活性成分，用药学上可以接受的液体、固体或半固体辅料制成药学上可以接受的剂型，如片剂、胶囊、注射剂或口服液。

上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。