本发明涉及一种生物凝胶的制备方法，特别是涉及一种具有杀虫止痒作用的生物粘附凝胶的制备方法，属于医药健康。
背景技术：
阴道炎是现代临床上较常见的带下病，按中医证侯又可细分为四类：湿热下注型、脾虚湿盛型、肾虚湿阻型及肝肾亏损型。中医对阴道炎辨证施治，湿热下注型主要通过清热燥湿、杀虫止痒来治疗，脾虚湿盛型主要通过健脾燥湿、杀虫止痒来治疗，肾虚湿阻型主要是温肾燥湿，肝肾亏损型主要是滋养肝肾、清热止带。
西医治疗主要是抑菌杀虫，滴虫性阴道炎常用硝基咪唑类抗菌药物，细菌性阴道炎除用硝基咪唑类药物外，还常用克林霉素类抗菌药物；念珠性阴道炎常用唑类和多烯类抗菌药物
中医药治疗阴道炎标本兼治，虽然起效较慢、用药时间较长，但治愈率高，病情不易反复。
凝胶剂是药物与适宜基质制成的具有凝胶特性的半固体制剂，按照凝胶基质的不同，一般分为水溶性凝胶和有机凝胶(或油溶性凝胶)。水溶性凝胶中的药物能够溶于水分散溶剂；有机凝胶中的药物应能溶于油分散溶剂。按制备方法不同，可分为环境敏感型凝胶、脂质体凝胶、微乳凝胶等，利用凝胶对温度、磁场、ph等物理环境的敏感程度不同，制成环境敏感型凝胶如温敏凝胶、磁响应性高分子凝胶微球、ph敏感凝胶等新型凝胶剂；将凝胶基质与磷脂和胆固醇混合制成具有缓释作用的脂质体凝胶；将药物与适宜的水相、油相、乳化剂按一定比例混合制成可提高难溶药物溶解度的微乳凝胶。水溶性凝胶涂展性好、无油腻感、易于清洗、使用舒适方便，提高患者的顺应性，具有较好的黏附性，可与作用部位紧密接触，透皮吸收作用较好，使凝胶剂中的有效成分缓慢扩散进入黏膜发挥药理作用，常用做外用制剂，如治疗皮肤痤疮的阿达帕林凝胶、治疗鼻炎的纳米银抗菌水凝胶、用于眼部感染的盐酸洛美沙星眼用凝胶、用于阴道炎症和滴虫病的苦参凝胶等。
本发明所述的具有杀虫止痒作用的生物凝胶在本发明完成之前未见报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种具有杀虫止痒作用的生物粘附凝胶的制备方法。
本发明的优点是：本品是复方制剂，在综合多种治疗妇科疾病药物的基础上将方中药物有机、辩证地配伍在一起，具有清热燥湿，杀虫止痒的功效。用于湿热下注、带下黄稠、阴肿阴痒：外阴炎、非特异性滴虫性、淋菌性及霉菌性阴道炎等症，经药效学研究表明，本发明凝胶具有明显抗菌、抗炎、止痒的作用，并且较市售的妇洁舒洗液具有更加明显的药理活性，具有明显的技术进步。
本发明的目的可通过下列措施来实现：
一种具有杀虫止痒作用的生物粘附凝胶的制备方法，所用重量份的原料为
其特征在于包括以下步骤：
a、将处方量的细辛提取挥发油，水用量为10-20倍，时间为4-8小时，提取液与挥发油分出备用；
b、将处方量的蛇床子用6-10倍量65-85％乙醇回流提取1-3次，每次1-3小时，合并药液，滤过，滤液回收乙醇，备用；
c、蛇床子经乙醇提取后的药渣与其余药材加4-8倍量水煎煮1-3次，每次1-2小时，合并煎液，滤过，滤液与细辛提取挥发油药液合并，浓缩至80℃测的相对密度为1.00-1.05，备用；
d、白矾加去离子水2-4倍量，加热溶解，与上述备用液合并，滤过，滤液加氨水调ph值至4.5-6.0，得药液，备用；
e、取水杨酸加3-6倍量乙醇溶解，并将细辛挥发油加适量乙醇溶解，合并乙醇液，与上述药液合并，混匀，搅匀，调ph值至4.5-6.0，静置24小时，滤过，得提取液，备用；
f、将基质用2-4倍量水溶解，加入上述e所述的提取液搅拌混合均匀，即得凝胶。
本发明的目的还可以通过下列措施来实现：
1、根据权利要求1所述的制备工艺，其特征在于步骤f中所有提取液重量和与基质的比例为1：2-1：4。
2、根据权利要求1所述的制备工艺，其特征在于步骤f中所述的基质为泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、羟丙基甲基纤维素k100的混合基质。
3、根据权利要求所述的制备工艺，其特征在于凝胶ph值范围为4.5-6.0。
本发明克服了洗液作用时间较短，疗效欠佳的缺点，制成凝胶后，作用时间延长，可与作用部位紧密接触，透皮吸收作用较好，使凝胶剂中的有效成分缓慢扩散进入黏膜发挥药理作用，能更好的抑菌、消炎，根据药效学实验证明，含相同生药量本发明凝胶较市面销售的妇洁舒洗液对体内抗真菌、止痒、二甲苯所致小鼠耳肿胀、蛋清所致的大鼠足跖肿胀具有名更加明显的作用效果，体现了明显的技术进步。
女性的阴道内壁有粘膜，它们非常脆弱，频繁用强效杀菌的洗液清洗，会破坏阴道粘膜这道天然保护屏障，屏障一旦受损，私处免疫功能将迅速下降，很多女性表示在使用洗液后，私处反而更加不舒服。但是，凝胶很好的解决了这一问题，凝胶作用温和，减轻了患者的痛苦，并且疗效更加明显，具有明显的实用性和突出贡献。
从包装上来讲，凝胶采用真空无菌，一次使用，便于携带，而洗液多是瓶装，多次使用时，容易进入空气，洗液兑水后还需用到盆、毛巾等用品。凝胶较洗液使用更方便，实用性更强。
本发明的凝胶具有杀菌、止痒、抗炎的功效，对外阴炎、非特异性滴虫性、淋菌性及霉菌性阴道炎具有明显的疗效，这些药理作用，通过以下药效学试验例得到证实。
菌种金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌，大肠埃希菌，变形杆菌，铜绿假单胞菌，化脓性链球菌，淋病奈瑟菌，曲霉菌，白色念珠菌，由吉林大学基础医学部病原免疫细胞遗传学实验中心提供。
试药本发明凝胶由本发明单位实验室自制，妇洁舒洗液(吉林省镇赉银诺克药业有限公司，批号：20180501)。
1、本发明凝胶对体外抑菌实验的影响
平皿打空法：将上述细菌分别接种于普通营养琼脂培养基、巧克力琼脂培养基上过夜、(淋病奈瑟菌厌氧培养48小时)。转种液体肉汤培养基(血清)活化9亿/ml。将已活化好的菌株接种取0.1ml接种普通琼脂培养基和巧克力琼脂培养基上，用打孔器打孔。将本发明凝胶高压处理后稀释五个不同浓度(药品浓度为：0.08g生药/ml、0.05g生药/ml、0.04g生药/ml、0.02g生药/ml和0.01g生药/ml)，妇洁舒洗液给药组1浓度为0.05g生药/ml、妇洁舒洗液给药组2浓度0.02g生药/ml，分别加入孔内，每孔加药液50μl，设两个平行孔，进行培养。结果见表1。
抑菌标准判定：抑菌环>6mm为耐药，6-8mm为低度敏感，8-10mm为中度敏感，>10为高度敏感。
表1本发明凝胶对体外抑菌实验的影响
结果证实本发明凝胶对各种菌种均有较强的抑菌作用，其中对大肠杆菌、白色念珠菌、淋病奈瑟菌、变形杆菌的抑菌作用最强。含相同剂量的本发明凝胶与妇洁舒洗液相比，对各均抑制效果相差不大。
2、体内抗真菌试验
在家兔阴部皮内注射0.lml白色念珠菌atcc1o231标准菌菌液，局部于48h后形成脓疡。本发明凝胶(0.08g生药/ml、0.04g生药/ml)剂量组及妇洁舒洗液(0.08g生药/ml、0.04g生药/ml)每天涂药3次(0.5ml/次)，对照组涂等量生理盐水。每天各点取分泌物培养以观察是否长菌确定药物疗效。结果表明，经本发明凝胶治疗后，第2天起效，第5天有50％转阴，第8天痊愈；经妇洁舒洗液治疗后，第3天起效，第6天有50％转阴，第10天痊愈；说明，本发明凝胶较妇洁舒洗液抗菌活性更强。
3、止痒试验
60只豚鼠，随机分6组，擦伤右后足背脱毛处，局部涂药(0.lml/足)10min后，(对照组涂等量溶媒)，于创伤面滴0.l％磷酸组织胺0.05ml/只，此后每隔3min递增浓度，以出现豚鼠回头舔右后足时所给予的磷酸组织胺总量为致痒，结果见表2。本发明凝胶(0.08g生药/ml、0.04g生药/ml)对豚鼠致痒阅有非常显著提高(p<0.01)，0.02g生药/ml剂量组也有显著提高(p<0.05)，相同剂量本发明凝胶组与妇洁舒洗液组相比，作用结果更明显。
表2本发明凝胶对磷酸组织胺致痒反应的影响
与对照组比较：*p<0.05；**p<0.01
4、小鼠二甲苯诱发耳肿胀试验
小鼠60只，均分6组。用药组涂药一次，每耳0.lml，对照组涂等量溶媒。1h后给小鼠右耳涂二甲苯0.05ml/耳，左耳作对照。15min后处死动物，用直径6mm打孔器将双耳同部位等面积的耳片取下，以左、右耳重量之差为肿胀度，结果见表3。本发明凝胶(0.08g生药/ml、0.04g生药/ml、0.02g生药/ml)三个剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀均有抑制作用。同剂量本发明凝胶较妇洁舒洗液活性更强，作用更加明显。
表3本发明凝胶对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响
与对照组比较：*p<0.05；**p<0.01
5、大鼠蛋清足跖肿胀试验
取小鼠60只，均分为6组，用药组涂药(0.lml/100g)1h后，于小鼠右后足掌腱膜下注入1％角叉菜胶0.03ml/只，对照组涂等量溶媒。于致炎后6h后将小鼠颈椎脱臼处死，剪下双侧后足，分别称重，求左、右足重量之差，即为肿胀度。结果表明：本发明凝胶能够明显抑制角叉菜胶引起的小鼠足肿胀，且高、中剂量组有显著差异。同剂量的本发明凝胶较妇洁舒洗液作用效果更明显。见表4。
表4本发明凝胶对对小鼠角叉菜胶性足肿胀的影响
与对照组比较：*p<0.05；**p<0.01
具体实施方式
本发明是通过下面的实施例进行详细的说明，但不意味着本发明仅限于此，具体实施方案如下：
实施例1凝胶的处方及制备工艺
将处方量的细辛提取挥发油，水用量为14倍，时间为8小时，提取液与挥发油分出备用；将处方量的蛇床子用8倍量80％乙醇回流提取3次，每次2小时，合并药液，滤过，滤液回收乙醇，备用；蛇床子经乙醇提取后的药渣与其余药材加8倍量水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液与细辛提取挥发油药液合并，浓缩至的相对密度为1.00-1.05(80℃测)，备用；白矾加去离子水2倍量，加热溶解，与上述备用液合并，滤过，滤液加氨水调ph值至4.5-6.0，得药液，备用；取水杨酸加3-6倍量乙醇溶解，并将细辛挥发油加适量乙醇溶解，合并乙醇液，与上述药液合并，混匀，搅匀，调ph值至4.5-6.0，静置24小时，滤过，得提取液，备用；将泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、羟丙基甲基纤维素k100m用2倍量水溶解，加入上述e所述的提取液搅拌混合均匀，加入去离子水至1000ml，搅匀，即得凝胶。