本发明涉及医药
技术领域：
，具体涉及一种治疗小儿骨肉瘤的药物组合物。
背景技术：
：肉瘤(sarcoma)是指起源于间叶组织的恶性肿瘤。骨肉瘤是肉瘤中较常见的一种，在小儿和青少年人中多见，从间质细胞系发展而来，好发于四肢长骨之两端，尤以股骨下端、胫骨上端及肱骨上端最多见。骨肉瘤病程短暂，生长迅速，早期即可发生血行转移。骨肉瘤起初在皮质内生长，可逐渐发展至骨髓腔，有时还会向外突破骨膜生长，浸润至周围软组织，较容易引起病理性骨折。总体来说，骨肉瘤的恶性程度较高，常常伴随着肺转移、避痛性跛行、肌肉萎缩、关节活动受限、截肢、死亡等不良后果，转移率、复发率和死亡率均较高。当前，治疗骨肉瘤的方法仍然多以外科手术治疗为主，并适当联合放疗和化疗。治疗骨肉瘤应行根治性手术，切除肿瘤组织是骨肉瘤治疗中重要的步骤。术前的前期化学或放射治疗和术后的巩固性化学或放射治疗对于创造手术条件，遏制肿瘤转移，提高患者的生存率非常重要。另外，近年来，免疫治疗、分子靶向治疗等新近治疗手段也取得了一定进展，但疗效尚不肯定。因此，在本领域中持续存在对开发有效治疗骨肉瘤的新药物的未满足的需求。技术实现要素：本发明的目的在于丰富临床用药选择，提供一种治疗小儿骨肉瘤的药物组合物。本申请的发明人意外地发现，2-甲基-2-(4-{5-[3-(甲基磺酰基)苯基]-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基}苯基)丙酸(以下简称化合物i)具有优异的抑制骨肉瘤细胞生长的作用，因此可以预期其在治疗小儿骨肉瘤中是特别有用的化合物i是已知的化合物，最早公开于smithklinebeechamcorporation的国际专利申请wo2006/063167a1(该专利申请的全文在本文中通过引用并入)中。专利文献wo2006/063167a1一般性地涉及可用作血清和糖皮质激素调节激酶-1(serumandglucocorticoid-regulatedkinase,sgk-1)抑制剂的1h-吡咯并[2,3-b]吡啶类化合物，含有此类化合物的药物组合物，使用此类化合物及其药物组合物治疗由sgk-1介导的疾病，特别是某些形式的肾脏疾病、充血性心力衰竭的方法。在该专利文献的说明书中，化合物i作为实施例203被公开，该实施例描述了该化合物的制备方法、物理性状和1h-nmr数据。但是，该专利文献并未提及所述化合物具有抑制骨肉瘤细胞生长的作用，而这构成了本发明的预料不到的发现。为此，本发明提供一种治疗小儿骨肉瘤的药物组合物，所述药物组合物包含a)化合物i或其药学上可接受的盐和b)药学上可接受的赋形剂。在一个方面中，所述药物组合物包含以该药物组合物的总重量计0.01-90％，优选0.1-60％，更优选1-50％的化合物i或其药学上可接受的盐。所述化合物i或其药学上可接受的盐可以与用于治疗小儿骨肉瘤的其它活性成分联合使用。根据这一方面，所述药物组合物中可以进一步包含用于治疗小儿骨肉瘤的其它药学活性成分，其选自但不限于阿霉素、顺铂、甲氨蝶呤、异环磷酰胺或其药学上可接受的盐中的一种或多种。所述其它药学活性成分也可以单独配制在另一药物组合物中并与本发明的药物组合物同时或依次施用。术语“药学上可接受的盐”以本领域所通常理解的含义使用。例如，本发明中优选的药学上可接受的盐可包括碱加成盐，例如化合物i与碱金属、碱土金属、氨或有机胺形成的药学上可接受的碱加成盐，诸如锂、钠、钾、镁、钙、铵、乙二胺盐，但不局限于这些。“药学上可接受的赋形剂”以本领域所通常理解的含义使用。本发明对所述药学上可接受的赋形剂的种类没有特别限定，只要其与所使用的活性成分相容且适用于预期的施用途径即可。例如，当意欲将本发明的活性成分制备成片剂时，可以使用填充剂如乳糖、微晶纤维素、甘露醇；粘合剂如羟丙甲纤维素、聚维酮、淀粉浆；崩解剂如交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、羟丙基淀粉；润滑剂如滑石粉、硬脂酸镁、微粉硅胶；以及视情况需要的着色剂、甜味剂、包衣材料等。再如，当意欲将本发明的活性成分制备成注射剂时，可以使用本领域已知的各种无菌赋形剂，如注射用水；注射用油如蓖麻油、大豆油、花生油；和其它注射用溶剂如丙二醇、甘油、聚乙二醇、油酸乙酯；以及视情况需要的乳化剂、助悬剂、增溶剂、缓冲剂、抑菌剂、抗氧化剂、等渗调节剂等。可以通过任何适当的给药途径施用本发明所述的药物组合物。优选地，本发明所述的药物组合物通过口服或胃肠外途径给药。应当理解的是，适合的给药途径取决于待治疗的患者的性别、年龄、体重、一般医学情况、所患有疾病的严重程度等因素，并由主治临床医师根据诊断结果和临床经验判断。本发明还提供了一种本发明的化合物i或其药学上可接受的盐在制备用于治疗小儿骨肉瘤的药物组合物中的用途。为了使本发明的实质和精神得到进一步理解，下面结合具体实施例对本发明的优选实施方案及其效果进行描述。但是，应当理解，这些描述只是用于进一步说明本发明的特征和优点，而绝非对本发明的权利要求构成任何限制。具体实施方式实施例片剂其制备方法为：将化合物i、二水合硫酸钙和乳糖混合均匀，并用适量5％羟丙甲纤维素水溶液制粒。将湿颗粒过80目筛，干燥，与淀粉、滑石粉和硬脂酸镁混合；过40目筛，并压制成片剂，共计200片。实验例1化合物i对骨肉瘤细胞的体外增殖抑制作用评价本实验的目的是考察化合物i对两种骨肉瘤细胞系——人骨肉瘤细胞系mg63和大鼠骨肉瘤细胞系umr106的体外细胞增殖的抑制作用。1、实验方法将处于指数生长期的生长在含10％胎牛血清的dmem培养基中的mg63和umr106细胞分别以4.5×103个细胞/孔的密度接种于96孔培养板(每孔体积为90微升)中，然后放回培养箱中在37℃、5％二氧化碳的条件下继续培养24小时。然后，将96孔培养板从培养箱中取出，并按照以下给药方案施加药物(每个方案设10个复孔)：空白对照组：向每个孔中加入10μl的上述dmem培养基。阳性对照组：向每个孔中加入10μl的含有0.5μg/ml盐酸阿霉素的上述dmem培养基。化合物i低浓度组：向每个孔中加入10μl的含有0.1μg/ml化合物i的上述dmem培养基。化合物i中浓度组：向每个孔中加入10μl的含有0.5μg/ml化合物i的上述dmem培养基。化合物i高浓度组：向每个孔中加入10μl的含有1.0μg/ml化合物i的上述dmem培养基。然后，将96孔板放回培养箱继续培养48小时。培养结束后，在避光条件下向96孔板的每孔中加入20μl的mtt(浓度为5mg/ml的pbs溶液)，并放回培养箱中在37℃、5％二氧化碳的条件下继续培养3小时。然后，吸去所有培养基，加入120μl的dmso，于37℃下水浴振荡30min，待生成的紫色结晶完全溶解后，用酶标仪测定波长为570nm处的吸光度值(od570)。各给药方案对mg63和umr106细胞的体外细胞增殖抑制作用采用抑制率(％)来评估，其计算方法如下：抑制率(％)＝[1-(给药组的od570值/空白对照组的od570值)]×100％。2、实验结果本实验的结果如下表1-2所示。表1化合物i对人骨肉瘤细胞系mg63的体外细胞增殖的抑制率(％)组别抑制率(％)空白对照组0阳性对照组23.9±6.5化合物i低剂量组15.7±6.1化合物i中剂量组38.3±8.9*化合物i高剂量组56.2±9.6*表2化合物i对大鼠骨肉瘤细胞系umr106的体外细胞增殖的抑制率(％)注：以上结果表示为均值±标准差，*表示与阳性对照组比较，p<0.05。3、讨论以上结果说明，化合物i对于所测定的两种骨肉瘤细胞系——人骨肉瘤细胞系mg63和大鼠骨肉瘤细胞系umr106均具有一定的细胞增殖抑制作用，并且均呈现出一定的剂量依赖性。并且，在相同的浓度条件下，化合物i对以上两种骨肉瘤细胞系的增殖抑制作用甚至超过了阳性对照药盐酸阿霉素的水平。实验例2化合物i对骨肉瘤荷瘤小鼠的体内抗肿瘤作用研究本实验的目的是考察化合物i对umr106荷瘤小鼠的体内治疗作用。1、实验方法本实验采用6-8周龄的雄性c57bl/6小鼠。将动物在23℃室温、50％相对湿度和12小时光照/12小时黑暗条件下适应两天。动物可自由进食和饮水。实验当日，将umr106细胞以8×105/100μl/只的剂量接种于体重差异无统计学意义的小鼠的皮下。当肿瘤生长至约100mm3(肿瘤体积按照以下公式估算：v＝0.52×长度×宽度2，单位mm3)时，将荷瘤小鼠随机分为4组，每组8只，并按照以下给药方案对各实验组进行给药：空白对照组：给予正常食物和饮用水，持续28日。化合物i低剂量组：除给予正常食物和饮用水外，还于每日上午9-10点之间灌胃给予小鼠化合物i，剂量为10mg/kg体重/日，持续28日。化合物i中剂量组：除给予正常食物和饮用水外，还于每日上午9-10点之间灌胃给予小鼠化合物i，剂量为50mg/kg体重/日，持续28日。化合物i高剂量组：除给予正常食物和饮用水外，还于每日上午9-10点之间灌胃给予小鼠化合物i，剂量为100mg/kg体重/日，持续28日。每天观察小鼠的活动状态和肿瘤体积生长的情况。给药结束后，采用颈椎脱臼法处死小鼠，取出肿瘤，测量肿瘤体积并称重。2、实验结果本实验的结果如表3所示。表3化合物i对umr106荷瘤小鼠的肿瘤体积和重量的影响注：以上结果表示为均值±标准差，*表示与空白对照组比较，p<0.05。3、讨论以上实验结果表明，化合物i对umr106荷瘤小鼠的肿瘤具有明显的治疗作用，与体外实验的结果相一致。相比于空白对照组而言，化合物i低、中、高剂量组的小鼠的肿瘤生长明显减缓，肿瘤的体积和重量显著降低。总而言之，以上实验结果充分证实了化合物i可以用于制备用于治疗小儿骨肉瘤的药物组合物，为本领域治疗小儿骨肉瘤的手段提供了更多的临床用药选择。以上所述仅是本发明的优选实施方式。应当指出，对于本
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的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和原理的前提下，还可以做出若干改进、修饰和等同替换等，这些改进、修饰和等同替换后的技术方案也应视为落在本发明的保护范围之内。当前第1页12