本发明涉及中药技术领域，具体地说，是关于一种治疗和预防糖尿病下肢血管病变的中药组合物及其应用。
背景技术：
糖尿病下肢血管病变是糖尿病常见的并发症。下肢血管病变主要是指下肢动脉病变，是外周动脉疾病的一个组成成分，表现为下肢动脉的狭窄或闭塞。糖尿病患者发生下肢动脉病变的风险较非糖尿病患者明显增加，且下肢血管病变的发病年龄更早、病情更严重、病变更广泛、预后更差。下肢动脉病变与冠状动脉疾病和心脑血管疾病等动脉血栓性疾病在病理机制上有共性，如内皮功能的损害、氧化应激等。因此在临床上这几种病变常同时存在，故下肢动脉病变对冠状动脉疾病和心脑血管疾病有提示价值。下肢动脉病变对机体的危害除导致下肢缺血性溃疡和截肢外，更重要的是这些患者心血管事件风险明显增加和更高的病死率。下肢动脉病变患者的主要死亡原因是心血管事件，在确诊1年后心血管事件发生率达21.14％，与已发生心脑血管病变者再次发作风险相当。另外，踝肱指数检查越低，预后越差，下肢多支血管受累者较单支血管受累者预后更差。
五神汤出自《辨证录》卷十三，主要用于治疗湿热蕴毒之证，清利湿热，兼益气血为其主要立方之意。《洞天奥旨》记载：“五神汤，统治多骨痈。茯苓一两，车前子一两，金银花三两，牛膝五钱，紫花地丁一两，水煎服，六剂骨消，再服十剂愈。”方后没有具体的立方解析。《辨证录》对本方进行了简单解读：“此方用茯苓、车前以利水，紫花地丁以清热，又用金银花、牛膝补中散毒。”《洞天奥旨·卷四·疮疡用金银花论》中对金银花的使用进行了特别论述：“其毒之至者，皆火热之极也。金银花最能消火热之毒，而又不耗气血，故消火毒之药，必用金银花也。”又云：“盖此药为纯补之味，而又善消火毒。”因此，陈士铎在很多内毒证之中皆使用大剂量金银花，原方中金银花剂量也为最大。《本草备药》云：“金银花散热、补虚、疗风、养血止渴。”张璐《本经逢原》云：“金银花芳香而甘，解毒去脓，泻中有补，痈疽溃后之圣药。”
技术实现要素：
本发明的第一个目的是，针对现有技术中的不足，提供一种治疗和预防糖尿病下肢血管病变的中药组合物。
本发明的第二个目的是，提供中药组合物的用途。
为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：一种治疗和预防糖尿病下肢血管病变的中药组合物，所述中药组合物由以下重量份的原料药制成：茯苓30-50份，车前子30份，金银花30-90份，牛膝15份，紫花地丁10-30份。
所述中药组合物由以下重量份的原料药制成：茯苓30-50份，车前子30份，金银花30份，牛膝15份，紫花地丁10份。
所述中药组合物由以下重量份的原料药制成：茯苓30-50份，车前子30份，金银花90份，牛膝15份，紫花地丁30份。
为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：中药组合物在制备防治糖尿病下肢血管病变药物中的应用。
本发明优点在于：本发明经药理、药效实验证明能改善糖尿病的大鼠的下肢血管病变程度；能改善糖尿病的大鼠的凝血功能；能改善了糖尿病的大鼠的炎症状况。因此可用于制备防治糖尿病下肢血管病变相关的疾病的药物。本发明提取物或组合物制备方法简单，成本低廉，本发明为防治糖尿病下肢血管病变相关的疾病的提供了一种新的药物来源。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。
实施例1本发明组合物一制备
本发明(茯苓30份，车前子30份，金银花30份，牛膝15份，紫花地丁10份)将方内中药饮片碾压为末，按以上药物组方成分重量比例取原料粉末，充分混合均匀，加水浸泡1小时，在蒸汽夹层锅中蒸煮二次，合并二次滤液，静置沉淀10-12小时，取上清液并按每剂原料药的份量，煎煮浓缩成汤剂，分装入瓶，蒸汽消毒。
实施例2本发明组合物二制备
本发明(茯苓35份，车前子30份，金银花30份，牛膝15份，紫花地丁10份)将方内中药饮片碾压为末，按以上药物组方成分重量比例取原料粉末，充分混合均匀，加水浸泡1小时，在蒸汽夹层锅中蒸煮二次，合并二次滤液，静置沉淀10-12小时，取上清液并按每剂原料药的份量，煎煮浓缩成汤剂，分装入瓶，蒸汽消毒。
实施例3本发明组合物三制备
本发明(茯苓32份，车前子30份，金银花30份，牛膝15份，紫花地丁10份)将方内中药饮片碾压为末，按以上药物组方成分重量比例取原料粉末，充分混合均匀，加水浸泡1小时，在蒸汽夹层锅中蒸煮二次，合并二次滤液，静置沉淀10-12小时，取上清液并按每剂原料药的份量，煎煮浓缩成汤剂，分装入瓶，蒸汽消毒。
实施例4本发明组合物四制备
本发明(茯苓50份，车前子30份，金银花30份，牛膝15份，紫花地丁10份)将方内中药饮片碾压为末，按以上药物组方成分重量比例取原料粉末，充分混合均匀，加水浸泡1小时，在蒸汽夹层锅中蒸煮二次，合并二次滤液，静置沉淀10-12小时，取上清液并按每剂原料药的份量，煎煮浓缩成汤剂，分装入瓶，蒸汽消毒。
实施例5本发明组合物五制备
本发明(茯苓40份，车前子30份，金银花30份，牛膝15份，紫花地丁10份)将方内中药饮片碾压为末，按以上药物组方成分重量比例取原料粉末，充分混合均匀，加水浸泡1小时，在蒸汽夹层锅中蒸煮二次，合并二次滤液，静置沉淀10-12小时，取上清液并按每剂原料药的份量，煎煮浓缩成汤剂，分装入瓶，蒸汽消毒。
实施例6本发明组合物六制备
本发明(茯苓42份，车前子30份，金银花30份，牛膝15份，紫花地丁10份)将方内中药饮片碾压为末，按以上药物组方成分重量比例取原料粉末，充分混合均匀，加水浸泡1小时，在蒸汽夹层锅中蒸煮二次，合并二次滤液，静置沉淀10-12小时，取上清液并按每剂原料药的份量，煎煮浓缩成汤剂，分装入瓶，蒸汽消毒。
实施例7本发明组合物七制备
本发明(茯苓48份，车前子30份，金银花30份，牛膝15份，紫花地丁10份)将方内中药饮片碾压为末，按以上药物组方成分重量比例取原料粉末，充分混合均匀，加水浸泡1小时，在蒸汽夹层锅中蒸煮二次，合并二次滤液，静置沉淀10-12小时，取上清液并按每剂原料药的份量，煎煮浓缩成汤剂，分装入瓶，蒸汽消毒。
实施例8本发明组合物八制备
本发明(茯苓30-50份，车前子30份，金银花30份，牛膝15份，紫花地丁10份)将方内中药饮片碾压为末，按以上药物组方成分重量比例取原料粉末，充分混合均匀，加水浸泡1小时，在蒸汽夹层锅中蒸煮二次，合并二次滤液，静置沉淀10-12小时，取上清液并按每剂原料药的份量，煎煮浓缩成汤剂，分装入瓶，蒸汽消毒。
实施例9对照组
五神汤(茯苓30g，车前子30g，金银花90g，牛膝15g，紫花地丁30g)将方内中药饮片碾压为末，按以上药物组方成分重量比例取原料粉末，充分混合均匀，加水浸泡1小时，在蒸汽夹层锅中蒸煮二次，合并二次滤液，静置沉淀10-12小时，取上清液并按每剂原料药的份量，煎煮浓缩成汤剂，分装入瓶，蒸汽消毒，
实施例10药理、药效实验
1、实验动物及方法：
健康spf级sd大鼠适应性喂养1周后，按随机数字表法分为正常对照组(10只)和高糖高脂糖尿病组(120只)。
正常对照组大鼠给予普通饲料喂养。
糖尿病组大鼠高糖高脂饲料喂养12周后大鼠尾静脉注射stz30mg/kg造模，72h后尾静脉采血测血糖高于16.7mmol/l确定造模成功。高糖高脂糖尿病组(100只)分为5组。模型对照组一，模型对照组二，模型对照组三，本发明组一，本发明组二，本发明组三。
模型对照组一(20只)：高糖高脂饲料配方：1％的胆固醇，10％的猪油，10％的蔗糖，0.3％的胆酸钠，其中78.7％为普通饲料。
模型对照组二(20只)：高糖高脂饲料配方：1％的胆固醇，10％的猪油，10％的蔗糖，0.3％的胆酸钠，其中78.7％为普通饲料。给予对照组实施9(茯苓30g，车前子30g，金银花90g，牛膝15g，紫花地丁30g)(生药2.3g/(kg·d)灌胃给药)
本发明组一(20只)：高糖高脂饲料配方：1％的胆固醇，10％的猪油，10％的蔗糖，0.3％的胆酸钠，其中78.7％为普通饲料。给予实施例1的组合物(生药2.3g/(kg·d)灌胃给药)
本发明组二(20只)：高糖高脂饲料配方：1％的胆固醇，10％的猪油，10％的蔗糖，0.3％的胆酸钠，其中78.7％为普通饲料。给予实施例2的组合物(生药2.3g/(kg·d)灌胃给药)
本发明组三(20只)：高糖高脂饲料配方：1％的胆固醇，10％的猪油，10％的蔗糖，0.3％的胆酸钠，其中78.7％为普通饲料。给予实施例3的组合物(生药2.3g/(kg·d)灌胃给药)
动物自由饮水，继续原方法喂养4周实验结束取血取材。实验结束后，各组大鼠股动脉放血，分离血清，-20℃保存备用，用于生化指标测定。颈椎脱臼处死大鼠并解剖，取放血对侧股动脉，以4％多聚甲醛溶液固定，用于he染色和免疫组化检测。
动物超声检测股动脉管径和血流量。抽血检测凝血指标凝血酶原时间(pt)、活化部分凝血酶时间(aptt)、纤维蛋白原(fib)、血浆黏度、红细胞聚集指数。使用酶联免疫吸附(elisa)法检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(tnf-α)、白介素-6(il-6)、细胞间粘附分子-1(icam-1)、血管细胞间粘附分子-1(vcam-1)、超敏c反应蛋白(hscrp)水平。石蜡切片与免疫组化测定血管性血友病因子(vwf)和组织因子(tf)表达。
2、实验结果
2.1下肢血管病变程度检测
各组大鼠的下肢血管病变程度见表1。与正常对照组比较，模型组大鼠的股动脉管径明显减小，血流量明显减少，差异有统计学意义(p<0.05)。模型对照组二(五神汤)，本发明组一，本发明组二，本发明组三与模型对照组一比较，模型对照组二(五神汤)，本发明组一，本发明组二，本发明组三大鼠的股动脉管径明显增大，血流量明显增加，差异有统计学意义(p<0.05)。本发明组一，本发明组二，本发明组三优于模型对照组二(五神汤)。本发明能改善糖尿病的大鼠的下肢血管病变程度。
表1各组大鼠下肢血管病变程度的比较
注：与正常对照组比较，*p<0.05；与模型对照组比较，△p<0.05
2.2凝血指标检测
各组大鼠的凝血指标见表2。与正常对照组比较，模型对照组一大鼠的pt和aptt明显减少，fib、血浆黏度和红细胞聚集指数明显增加，差异有统计学意义(p<0.05)。
模型对照组二(五神汤)，本发明组一，本发明组二，本发明组三与模型对照组一比较，模型对照组二(五神汤)，本发明组一，本发明组二，本发明组三大鼠的pt和aptt明显增加，fib、血浆黏度和红细胞聚集指数明显减少，差异有统计学意义(p<0.05)。本发明组一，本发明组二，本发明组三优于模型对照组二(五神汤)。提示本发明能改善糖尿病的大鼠的凝血功能。
表2各组大鼠凝血指标的比较
注：与正常对照组比较，*p<0.05；与模型对照组比较，△p<0.05
2.3炎症因子检测
各组大鼠的炎症因子见表3。与正常对照组比较，模型对照组一大鼠的icam-1、vcam-1、hscrp、il-6、tnf-α明显升高，差异有统计学意义(p<0.05)。模型对照组二(五神汤)，本发明组一，本发明组二，本发明组三与模型对照组一比较，模型对照组二(五神汤)，本发明组一，本发明组二，本发明组三大鼠的icam-1、vcam-1、hscrp、il-6、tnf-α明显降低，差异有统计学意义(p<0.05)。本发明组一，本发明组二，本发明组三优于模型对照组二(五神汤)。本发明能改善了糖尿病的大鼠的炎症状况。
表3各组大鼠炎症因子比较
注：与正常对照组比较，*p<0.05；与模型对照组比较，△p<0.05
2.4免疫组化检测
各组大鼠的vwf和tf见表4。与正常对照组比较，模型对照组一大鼠的vwf和tf水平显著升高，差异有统计学意义(p<0.05)。
模型对照组二(五神汤)，本发明组一，本发明组二，本发明组三与模型对照组一比较，模型对照组二(五神汤)，本发明组一，本发明组二，本发明组三大鼠的vwf和tf水平显著降低，差异有统计学意义(p<0.05)。本发明组一，本发明组二，本发明组三优于模型对照组二(五神汤)。本发明能改善糖尿病的大鼠的凝血功能。
表4各组大鼠的免疫组化检测
注：与正常对照组比较，*p<0.05；与模型对照组比较，△p<0.05
由以上实验结果可见，本发明对糖尿病下肢血管病变有明显的治疗作用，因此可用于制备防治糖尿病下肢血管病变相关疾病的药物。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。