治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物及其药剂和应用的制作方法

本发明涉及治疗疾病的中药技术领域，涉及一种中药组合物，具体涉及一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物及其药剂和应用。

背景技术：

2018年数据显示，东亚地区胃癌发病率接近东欧2倍，为世界最高。作为危害寿命的主要恶性肿瘤，胃癌在河北省标化死亡率为22.30/10万。

胃癌前病变(gastricprecancerouslesions，gpl)是指一类容易发生癌变的胃黏膜病理组织学变化，主要包括胃黏膜的中、重度肠上皮化生和上皮内瘤变，其年癌变率达0.25％-6％，多伴存于慢性萎缩性胃炎，是胃良性病变向恶性病变发展的过渡阶段。现代医学针对gpl至今尚缺乏相应药物，以对症治疗、定期随访为主要策略。中医药在改善gpl相关疾病症状、延缓病理进展甚至逆转病变方面独有特色。研究证实，基于辨证的个体化中药治疗方案可显著延缓gpl进展，且安全性良好。另发现，辨证治疗gpl可缓解患者不适症状，进而提升生活质量。中医治疗gpl效果肯定，但对辨证分型、病因病机理解、方药运用仍有不同认识。2017年《慢性萎缩性胃炎中西医结合诊疗共识意见》发布了6种主要的中医辨证分型(如血瘀、湿热、肝郁等)。此外，对gpl相关疾病还有络病、浊毒、本虚等不同的辨证与病因学术观点。

慢性胃炎患者多数并无症状，故难以获得精准、确切流行病学资料，目前我国基于内镜诊断的慢性胃炎患病率已接近90％，推测患者数以亿计。慢性胃炎具有一定的癌变风险，慢性胃炎患者的胃癌、肠道肿瘤、胰腺癌患病率均较一般人群有所增高。慢性胃炎伴上皮内瘤变是其典型代表，癌变率达0.25％-6％被视为胃恶性病变发展的关键过渡阶段，成为危害我国人民身体健康和降低生活质量的主要慢性疾病之一。现代医学对于该病主以对症治疗、定期随访为干预策略，中医药治疗在改善慢性胃炎相关疾病症状、延缓病理进展甚至逆转病变方面独有特色。有研究者基于络病学说对慢性胃炎非可控性炎症研究具有指导意义，另有研究者从瘤毒病机探讨逆转炎-癌转化的作用及机制，亦有学者以“脾虚寒热瘀毒互结”辨证治疗。可见，中医药诊治慢性胃炎形成了以理论化、区域化、流派化为主要代表特征的诸多辨证论治方案，成为“传承精华，守正创新”中的重要学术创新来源。

近年来，随着内窥镜技术的发展，我国慢性萎缩性胃炎检出率呈明显上升趋势，发病率约占总体受检人群的20％。目前国内外治疗慢性胃炎的药物很多，但是针对慢性萎缩性胃炎伴或伴有肠上皮化生和上皮内瘤变的药物很少。西医多为对症治疗，而中成药也数量不多，且效果多不确切。慢性胃炎年门诊量10万余人次，慢性萎缩性胃炎年门诊量约2万余人次。

随着人类疾病谱的改变和生存、工作环境的不断变化，原有的治法、方药已不能满足现阶段疾病的诊治，在临床中也发现，运用传统治疗方法，一些患者并不能得到明显的改善。目前现有的治疗药物一般只针对某一特定的胃部疾病，如慢性胃炎，极少有能同时对慢性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃癌前病变(如慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、上皮内瘤变)均有效果的药物，所以研发一种对胃部多种病症均有效的治疗药物就成为了目前迫切的需求。由于中药饮片在煎煮、服用、携带、储存等方便诸多不便，且费用相对较高，患者还迫切期望能有一种方便服用、携带、储存，且费用低廉的治疗药物。

技术实现要素：

针对现有技术中的缺陷，本发明提出了一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物及其药剂和应用，该中药组合物还能够治疗慢性萎缩性胃炎、胃癌前病变(如慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、上皮内瘤变)。本发明以创新的中医浊毒理论为指导，通过临床试验、动物实验、网络药理学实验、数据挖掘等结果证明所述中药组合物对胃部多种病症具有明确的疗效。

本发明提供一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物，其原料按重量份包括：藿香8-12份、黄连3-9份、麸炒白术9-15份、豆蔻3-9份、半枝莲12-18份、白花蛇舌草12-18份；其中，藿香和黄连为君药，麸炒白术、豆蔻、半枝莲、白花蛇舌草为臣药。

本发明还提供一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物，其原料由以下成分组成，按重量份计：藿香8-12份、黄连3-9份、麸炒白术9-15份、豆蔻3-9份、半枝莲12-18份、白花蛇舌草12-18份、当归9-15份、川芎6-12份、三七4-8份、茯苓12-18份、炒白芍12-18份、百合9-15份、麸炒枳实8-12份、醋香附6-12份、木香3-9份、砂仁3-9份、全蝎3-6份、醋延胡索8-12份。

优选地，一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物，其原料按重量份具体包括：藿香10份、黄连6份、麸炒白术12份、豆蔻6份、半枝莲15份、白花蛇舌草15份；其中，藿香和黄连为君药，麸炒白术、豆蔻、半枝莲、白花蛇舌草为臣药。

优选地，一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物，其原料具体由以下成分组成，按重量份计：藿香10份、黄连6份、麸炒白术12份、豆蔻6份、半枝莲15份、白花蛇舌草15份、当归12份、川芎9份、三七6份、茯苓15份、炒白芍15份、百合12份、麸炒枳实10份、醋香附9份、木香6份、砂仁6份、全蝎3份、醋延胡索10份。

所述中药组合物中的藿香芳香化浊，和胃降逆，黄连清热解毒，厚肠胃，清浊毒，共为君药；麸炒白术、豆蔻健脾化浊和胃，半枝莲、白花蛇舌草清热解毒，共为臣药；当归、川芎、三七活血止痛，茯苓健脾渗湿，炒白芍养血缓中，百合养阴安神，麸炒枳实、醋香附、木香行气和胃，消胀除痞，砂仁化浊开胃，全蝎解毒散结，醋延胡索行气活血止痛。

其中，君药藿香和黄连的配比至关重要，改变配比就不能够达到同时对慢性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃癌前病变、慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生均有效果。另外，臣药中麸炒白术和豆蔻健脾化浊和胃，对于整个中药组合物的疗效有巨大的贡献作用。

本发明还提供一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的颗粒剂，所述颗粒剂包含所述的中药组合物和制剂辅料；所述制剂辅料为填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂和薄膜包衣材料中的一种或多种。

本发明还提供一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的口服液，所述口服液包含所述的中药组合物和制剂辅料；所述制剂辅料为溶剂、芳香剂、矫味剂、澄清剂和防腐剂中一种或多种。

本发明还提供一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的片剂，所述片剂包含所述的中药组合物和制剂辅料；所述制剂辅料为稀释剂、粘合剂、润滑剂和崩解剂中一种或多种。

本发明还提供一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的胶囊，所述胶囊包含所述的中药组合物和制剂辅料；所述制剂辅料为硬胶囊壳或软胶囊壳。

本发明还提供一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的散剂，所述散剂包含所述的中药组合物。

本发明的药物组合物制备成颗粒剂、口服液、片剂、胶囊和散剂更方便服用、携带和储存。

本发明还提供所述的中药组合物在制备治疗慢性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃癌前病变、慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、上皮内瘤变药物中的应用。

综上，与现有技术相比，本发明达到了以下技术效果：

1.本发明的中药组合物在临床症状、组织病理、分子水平显示出对慢性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃癌前病变(如慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、上皮内瘤变)具有明确疗效。

2.本发明的中药组合物可以制备为散剂、口服液、颗粒剂、片剂或浸膏剂，相比传统中药煎煮更方便服用、携带和储存。

3.本发明的药物组合物中无非常名贵且昂贵的药材，制备费用低廉，便于大规模推广。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为京津冀地区萎缩性胃炎患者≥5的药物隐结构模型；

图2为本发明的中药组合物与慢性胃炎重合的靶点韦恩图；

图3为本发明的中药组合物的活性成分-靶点图；

图4为本发明的中药组合物与慢性胃炎蛋白质相互作用核心网络图；

图5为本发明的中药组合物主要作用靶点的bp柱状图及气泡图；

图6为本发明的中药组合物主要作用靶点cc柱状图及气泡图；

图7为本发明的中药组合物主要作用靶点mf柱状图及气泡图；

图8为本发明的中药组合物作用靶点-通路图。

具体实施方式

为了使本技术领域的人员更好地理解本发明方案，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分的实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。

本发明的药物组合物是基于第三届国医大师李佃贵教授研究团队浊毒理论，结合课题组前期隐结构模型研究基础，见图1，以及现阶段慢性胃炎病例特点和临床特征组方而成。以前的组方多通过健脾、清热利湿来治疗，本方差别为化浊解毒。本组方由藿香、黄连、白术、豆蔻、半枝莲、白花蛇舌草、当归、川芎、三七、茯苓、白芍、百合、枳实、香附、木香、砂仁、全蝎、延胡索组成，具有化浊解毒、和胃降逆之功，用于胃脘痞闷、疼痛、嗳气、纳呆、口干口苦、大便粘腻不爽等。临床实验已证实，该组方对慢性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃癌前病变、慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生以上症候者均具有很好的临床疗效，具体临床实施例参见后文。

本发明的中药组合物主要包括以下组分，按重量份计：藿香8-12份、黄连3-9份、麸炒白术9-15份、豆蔻3-9份、半枝莲12-18份、白花蛇舌草12-18份。

进一步优选，本发明的中药组合物可由以下成分组成，按重量份计：藿香8-12份、黄连3-9份、麸炒白术9-15份、豆蔻3-9份、半枝莲12-18份、白花蛇舌草12-18份、当归9-15份、川芎6-12份、三七4-8份、茯苓12-18份、炒白芍12-18份、百合9-15份、麸炒枳实8-12份、醋香附6-12份、木香3-9份、砂仁3-9份、全蝎3-6份、醋延胡索8-12份。

所述中药组合物中的藿香芳香化浊，和胃降逆，黄连清热解毒，厚肠胃，清浊毒，共为君药。君药是方剂中针对主证起主要治疗作用的药物，是必不可少的，其药味较少，药量根据药力相对较其他药大；麸炒白术、豆蔻健脾化浊和胃，半枝莲、白花蛇舌草清热解毒，共为臣药。臣药协助君药，以增强治疗作用；当归、川芎、三七活血止痛，茯苓健脾渗湿，炒白芍养血缓中，百合养阴安神，麸炒枳实、醋香附、木香行气和胃，消胀除痞，砂仁化浊开胃，全蝎解毒散结，醋延胡索行气活血止痛，共为佐药。佐药是协助君药治疗兼证或次要症状，或抑制君、臣药的毒性和峻烈性，或为其反佐。

其中，君药藿香和黄连的配比至关重要，改变配比就不能够达到同时对慢性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃癌前病变、慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生均有效果。另外，臣药中麸炒白术和豆蔻健脾化浊和胃，对于整个中药组合物的疗效有巨大的贡献作用。

浊毒的含义有广义和狭义之分，广义的浊毒泛指一切对人体有害的不洁物质，而狭义的浊毒既是致病因素，又是病理产物。浊毒既是一种对人体造成严重损害的致病因素，同时也是蕴积体内而化生的病理产物。

浊毒病邪胶结作用于人体，导致人体细胞、组织和器官的浊化，即致病过程；浊化的结果导致细胞、组织和器官的浊变，即形态结构的改变，包括现代病理学中的肥大、增生、萎缩、化生和癌变，以及炎症、变性、凋亡和坏死等变化。浊变的结果是毒害细胞、组织和器官，使之代谢和机能失常，乃至机能衰竭。

浊毒为病理产物之一，同时又为致病因素，与脾胃病关系甚为密切。湿浊之邪致病，有内外之分，外感湿浊由外受湿邪所引起，内生湿浊由脾胃功能减退或失调，不能正常运化以致湿浊从中生。内外湿浊之邪相互关联，外感湿浊困脾，必致脾失健运，胃失和降；内生湿浊停滞，又常易招致外感湿浊侵袭。胃属阳土，胃病易于化热化火，即阳道实；或初为湿盛，湿盛则浊聚，久郁化热，湿浊化热蕴毒，故毒由温热转化而来，亦可由湿浊演变而生，即热为毒之渐，毒为热之极，毒寓于热，热由毒生，变由毒起。因此认为浊毒是脾胃病的主要病机之一，并以此为理论依据，制定了以“化浊”、“解毒”为主治疗脾胃病的一整套严谨的治则、治法。

浊毒证是指以浊毒为病因使机体处于浊毒状态从而产生特有临床表现的一组或几组征候群。浊有浊质，毒有毒性。浊质粘腻导致浊邪为病，多易结滞脉络，阻塞气机，缠绵耗气。胶着不去而易酿毒性；而毒邪伤人，其性烈善变，损害气血营卫。两者相合则因毒借浊质，浊挟毒性，多直伤脏腑经络。浊毒可侵犯上中下三焦，但以中焦最为常见，在中焦中以脾胃最为常见。

本发明的技术路线为：

(1)通过浊毒理论筛选具有化浊解毒的中药组方；

(2)通过网络药理学构建“疾病-活性成分-靶点-药物”多层生物信息网络，揭示疾病-药物隐性关系；

(3)以大鼠为材料进行动物实验，检测慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织hippo/taz信号通路相关蛋白转录共激活因子pdz结合基序(taz)、肿瘤抑制激酶(lats2)、哺乳动物不育系20样激酶(mst1)表达的变化；

(4)通过人体试验验证本发明的药物组合物对慢性萎缩性胃炎的疗效。

其中，网络药理学集合整体、动态、分析于一体，是融合系统生物学、药理学、中药药理学、分子生物学、计算机学为一体的新兴交叉学科，可构建“疾病-活性成分-靶点-药物”多层生物信息网络，揭示疾病-药物隐性关系。对于中药复方可提供多层次、多成分、多靶点的研究视角，为中医药经验医学的可视化、数据化研究提供了新的方法和范式。本发明采用网络药理学技术，搜索本发明的药物组合物的化合物和靶标蛋白，构建与分析靶标网络，筛选核心靶标，进行功能富集，探讨本发明的药物组合物防治慢性胃炎潜在分子机制，为本发明的药物组合物制成的药物的临床实践提供部分可视化数据支持。

实施例1一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物

其原料按重量份包括：藿香8份、黄连3份、麸炒白术9份、豆蔻3份、半枝莲12份、白花蛇舌草12份；其中，藿香和黄连为君药，麸炒白术、豆蔻、半枝莲、白花蛇舌草为臣药。

实施例2一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物

其原料按重量份包括：藿香12份、黄连9份、麸炒白术15份、豆蔻9份、半枝莲18份、白花蛇舌草18份；其中，藿香和黄连为君药，麸炒白术、豆蔻、半枝莲、白花蛇舌草为臣药。

实施例3一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物

其原料按重量份包括：藿香10份、黄连6份、麸炒白术12份、豆蔻6份、半枝莲15份、白花蛇舌草15份。

实施例4一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物

其原料由以下成分组成，按重量份计：藿香8份、黄连3份、麸炒白术9份、豆蔻3份、半枝莲12份、白花蛇舌草12份、当归9份、川芎6份、三七4份、茯苓12份、炒白芍12份、百合9份、麸炒枳实8份、醋香附6份、木香3份、砂仁3份、全蝎3份、醋延胡索8份。

实施例5一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物

其原料由以下成分组成，按重量份计：藿香12份、黄连9份、麸炒白术15份、豆蔻9份、半枝莲18份、白花蛇舌草18份、当归15份、川芎12份、三七8份、茯苓18份、炒白芍18份、百合15份、麸炒枳实12份、醋香附12份、木香9份、砂仁9份、全蝎6份、醋延胡索12份。

实施例6一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的中药组合物

其原料由以下成分组成，按重量份计：藿香10份、黄连6份、麸炒白术12份、豆蔻6份、半枝莲15份、白花蛇舌草15份、当归12份、川芎9份、三七6份、茯苓15份、炒白芍15份、百合12份、麸炒枳实10份、醋香附9份、木香6份、砂仁6份、全蝎3份、醋延胡索10份。

实施例7收集、筛选本发明的药物组合物中的主要化合物

根据本发明的药物组合物的处方组成与《中国药典》2015版的药物规范名称，本发明的药物组合物由藿香(pogostemonisherba)、黄连(coptidisrhizoma)、白术(atractylodismacrocephalaerhizoma)、豆蔻(amomifructusrotundus)、半枝莲(scutellariaebarbataeherba)、白花蛇舌草(hedyotisdiffusawilld)、当归(angelicaesinensisradix)、川芎(chuanxiongrhizoma)、三七(notoginsengradixetrhizoma)、茯苓(poria)、白芍(paeoniaeradixalba)、百合(liliibulbus)、枳实(aurantiifructusimmaturus)、香附(cyperirhizoma)、木香(aucklandiaeradix)、砂仁(amomifructus)、全蝎(scorpio)、延胡索(corydalisrhizoma)组成。检索tcmsp(traditionalchinesemedicinesystemspharmacologydatabaseandanalysisplatform)数据库(http://ibts.hkbu.edu.hk/lsp/tcmsp.php)数据库收集本发明的药物组合物主要化学成分，按照口服生物利用度(oralbioavail-ability，ob)≥30％，类药性(drug-likeness，dl)≥0.18，药物半衰期(half-life，hl)≥8(百合和砂仁为≥6)为条件从上述数据库中筛选出具有较高活性且可能入血的成分。

基于ob≥30％，dl≥0.18，hl≥8(百合、砂仁为hl≥6)作为条件对方中药物进行活性成分筛选(全蝎、当归未检索到相关结果或检索出的结果不符合条件)，得到59个活性成分。

实施例8本发明的药物组合物靶点的预测筛选及中药活性成分-靶点网络构建

将分析筛选的活性入血成分，利用tcmsp数据库化合物关联靶点，对药物活性成分进行逐一配对潜在靶点，无当归和全蝎2种药材资料；利用tcmsp数据库中的relatedtargets预测成分相关靶点；通过uniprot数据库(https://www.uniprot.org/)预处理靶点名称，得到最终中药活性成分相关靶点；利用genecards数据库(https://www.genecards.org/)对慢性胃炎相关靶点筛选，映射疾病相关靶点与药物活性成分相关靶点，中和靶点即为本发明的药物组合物活性成分作用于慢性胃炎的靶点。

从tcmsp数据库中的relatedtargets预测得到232个成分相关靶点，从genecards数据库中检索“慢性胃炎”相关靶点，得到1139个疾病相关靶点。然后将232个成分靶点与1139个慢性胃炎靶点进行韦恩图绘制，见图2；计中和靶点101个，见图3。

实施例9靶点蛋白互作网络构建及关键靶点筛选

利用string在线数据库(https://string-db.org/)分析靶点的蛋白间相互作用(proteinproteininteraction，ppi)，靶点信息录入数据库，物种选择“homosapiens”，筛选蛋白互作综合得分＞0.4作为筛选条件得到ppi信息，将信息导入cytoscape软件，得到ppi可视化网络图。

根据药物中筛选的活性成分和作用于疾病的相关靶点，利用cytoscape软件构建药物活性成分-靶点网络，见图3。药物活性成分中“degree”值排前7的分别是：槲皮素(quercetin，mol00098)、木犀草素(luteolin，mol000006)、山柰酚(kaempferol，mol000422)、汉黄芩素(wogonin，mol000173)、黄芩素(baicalein，mol002714)、川陈皮素(nobiletin，mol005828)、柚皮素(naringenin，mol004328)。

实施例10靶点基因本体论(geneontology，go)和kegg通路富集分析

利用cytoscape软件cluego插件对中和靶点进行go和kegg富集分析，保留p≤0.05结果，得到可视化图片，运用cytoscape软件构建靶点-信号通路网络图，进一步说明基于靶点和信号通路的本发明的药物组合物治疗慢性胃炎的可能作用机制。

基于string在线数据平台上输入疾病-处方101个中和靶点，分析后得到ppi网络图，如图4所示，图中含有101个靶蛋白和1783条互作边。

作用靶点的go(geneontology)富集分析包含生物过程(biologicalprocess，bp)、细胞组成(cellularcom-ponent，cc)、分子功能(molecularfunction，mf)。利用cytoscape软件中的cluego插件对101个共同作用靶蛋白进行go生物功能注释，根据保留p≤0.01的结果，并分别对前20个数据进行可视化分析，得到(bp，cc，mf)柱状图和气泡图，其中纵坐标表示富集条目，横坐标表示富集个数，见图5、6、7。图5示疾病-处方共同作用靶点在bp中，主要富集条目为对金属离子的反应(responsetometalion)、对氧化应激的反应(responsetooxidativestress)、脂多糖应答(responsetolipopolysaccharide)、对细菌来源分子的反应(responsetomoleculeofbacterialorigin)及对抗生素的反应(responsetoantibiotic)等。图6示疾病-处方共同作用靶点在cc中，主要富集条目为囊腔(vesiclelumen)、分泌颗粒腔(secretorygranulelumen)、细胞质囊腔(cytoplasmicvesiclelumen)、膜筏(membraneraft)、膜微区(membranemicrodomain)等。见图7示疾病-处方共同作用靶点在mf中，主要富集条目为磷酸酶结合(phosphatasebinding)、蛋白磷酸酶结合(proteinphosphatasebinding)、泛素样蛋白连接酶结合(ubiquitin-likeproteinligasebinding)、抗氧化活性(antioxidantactivity)、支架蛋白结合(scaffoldproteinbinding)等。

将得到的通路条目、靶点信息导入cytoscape软件，绘制得到靶点-通路图，见图8所示，其中三角代表通路，方块代表靶点，形状越大代表富集越显著。体现了本发明的药物组合物多成分、多靶点多通路对慢性胃炎起到综合治疗作用。

实施例11动物实验验证本发明的药物组合物的疗效

一、实验方法

(1)健康清洁级sd大鼠，雄性，体重250-300g，共70只，购自河北医科大学动物实验中心，动物生产许可证号：scxk(冀)2018-1-003，于河北医科大学动物室喂养，自由进食水，适应性饲养7天后开始实验。

(2)实验药物自河北省中医院中药房购得，由河北省中医院煎药室煎煮，4倍体积蒸馏水煎煮，2次各50min煎液混匀浓缩至含生药量2.8g/ml备用。

(3)主要药品、试剂与仪器：

mlv反转录试剂盒：美国fementas，批号：k1622；

trizol，美国invitrogen，批号：15596018；

pcr引物合成：美国invitrogen，批号：a13838；

光学显微镜：日本olympus-bx63公司；

image-proplus：美国mediacybernetics公司；

实时荧光定量pcr仪：型号abi7500，美国lifetech公司。

(4)分组、造模、给药与取材

将大鼠随机分为4组：正常组、模型组、化浊解毒组、维酶素组。按联合造模法诱导萎缩性胃炎大鼠模型。正常组、模型组予10ml/kg/d蒸馏水灌胃，化浊解毒组按10ml/kg实施例6的中药组合物的药汤28g/kg灌胃，维酶素组予0.06g/kg混悬溶液灌胃，治疗疗程12周。最后一次灌胃后48小时，10％水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉后处死并取材。

二、实验结果

(1)胃黏膜组织lats2、mst1蛋白westernblot检测结果

用westernblot检测慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织hippo/taz信号通路相关蛋白转录共激活因子pdz结合基序(taz)、肿瘤抑制激酶(lats2)、哺乳动物不育系20样激酶(mst1)表达的变化。

与正常组相比，模型组lats2、mst1表达水平降低。与模型组比较，化浊解毒组和维酶素组均能提高大鼠胃黏膜组织lats2和mst1含量，且以化浊解毒组作用最为明显。见表1。

表1萎缩性胃炎大鼠胃黏膜组织中lats2、mst1蛋白表达水平

(2)胃黏膜组织taz蛋白和基因表达结果

与正常组相比，模型组taz表达水平升高。与模型组比较，化浊解毒组和维酶素组均能降低大鼠胃黏膜组织taz蛋白和基因表达水平，且以化浊解毒组作用最为显著。见表2。

表2萎缩性胃炎大鼠胃黏膜组织中taz蛋白和基因表达

综上，本发明的中药组合物在大鼠模型中可通过下调胃黏膜组织中taz蛋白和基因表达水平，上调lats2、mst1蛋白和基因的表达水平而起作用，28g/kg化浊解毒组能显著改善胃黏膜病理情况，在hippo/taz信号通路的调节过程中，下调taz蛋白和基因，上调lats2、mst1均优于维酶素组。

实施例12人体试验验证本发明的药物组合物对慢性萎缩性胃炎的疗效

一、材料和方法

(1)一般资料

收集2019年1月-2020年1月期间河北省中医院脾胃病科门诊及病房收治的慢性萎缩性胃炎伴低级别上皮内瘤变或肠上皮化生患者86例，均符合知情同意和自愿原则，采取随机数字表法将其分为观察组与对照组，每组43例。其中观察组男23例，女20例，年龄45-68岁，平均(56.5±6.2)岁，病程6个月～13年；对照组男21例，女22例，年龄43-67岁，平均(55.0±5.7)岁，病程5个月～12年。两组患者一般资料、疾病程度及病程长短等方面差异无统计学意义(p>0.05)。

(2)纳入标准

①慢性萎缩性胃炎伴低级别上皮内瘤变西医诊断符合《中国慢性胃炎共识意见(2017年，上海)》中相关诊疗标准；②年龄35-70岁；③服从实验安排；④患者及家属签署知情同意书。

(3)排除标准

①年龄＜35岁或＞70岁者；②患有严重心、脑、肝、肾等基础疾病，或精神障碍患者；③长期服用抗凝药物，或对本实验所用药物过敏者；④妊娠期妇女或哺乳期妇女；⑤依从性较差，不能坚持者。本发明符合医院伦理委员会要求并批准通过。

(4)治疗方法

对照组给予中成药胃复春片(杭州胡庆余堂药业有限公司，国药准字z20040003，0.36g/片，4片/次，3次/天)口服，观察组给予本发明的实施例6的中药组合物，处方：藿香10g、黄连6g、麸炒白术12g、豆蔻6g、半枝莲15g、白花蛇舌草15g、当归12g、川芎9g、三七6g、茯苓15g、炒白芍15g、百合12g、麸炒枳实10g、醋香附9g、木香6g、砂仁6g、全蝎3g、醋延胡索10g。随证加减。3个月为1个疗程，连续治疗2个疗程。

(5)观察指标

a)中医证候疗效评价：观察两组患者治疗前后中医证候积分，中医证候积分评定参照《慢性萎缩性胃炎中西医结合诊疗共识意见(2017年)》，对患者胃脘疼痛、饱胀、痞闷、暖气4项主症，疲乏及寐差、嘈杂、反酸4项次症进行评分，主次症分为无、轻、中、重四个等级，主症记0、2、4、6分，次症记0、1、2、3分。中医证候疗效判定标准：①痊愈(疗效指数改善≥95％)；②显效(疗效指数改善70％-95％)；③有效(疗效指数改善30％-70％)；④无效(疗效指数改善<30％)。

疗效指数＝(治疗前积分治疗后积分)/治疗前积分×100％。

总有效率＝(痊愈例数+显效例数+有效例数)/总例数×100％。

b)胃黏膜组织病理学疗效评价：根据病理结果将慢性萎缩性胃炎萎缩程度按无、轻、中、重分级，分别标记0、1、2、3分，萎缩程度以胃黏膜固有腺体减少各1/3计算，轻度：固有腺体减少<1/3；中度：固有腺体减少1/3～2/3；重度：固有腺体减少>2/3。低级别上皮内瘤变以无、轻度异型增生、中度异型增生分别标记0、2、4分。

c)安全性评估。治疗前、治疗两个疗程后行肝肾功能、凝血功能检查，记录患者恶心呕吐、腹痛、腹泻、皮疹等相关药物不良反应情况。

d)处理采用spss15.0统计学软件进行处理，计量资料以(x-±s)表示，符合正态分布的样本均数间比较采用t检验，计数资料以率表示，组间比较采用卡方检验，以p<0.05为差异有统计学意义。

二、实验结果

(1)两组患者治疗前后中医证候疗效比较

结果如表3所示，观察组总有效率显著高于对照组(p<0.05)。

表3两组患者治疗前后中医证候疗效比较[n(％)]

注：与对照组比较，^#p<0.05

(2)两组患者治疗前后中医证候积分比较

结果如表4所示，治疗前两组患者中医证候(主症和次症)积分差异无统计学意义(p>0.05)。与治疗前比较，治疗后两组患者各项中医证候积分均显著降低(p<0.05)，且观察组各项中医证候积分显著低于对照组(p<0.05)。

表4两组患者治疗前后中医证候积分比较(分，n＝43)

注：与本组治疗前比较，^*p<0.05；与对照组治疗后比较，^#p<0.05

(3)两组患者治疗前后组织病理学疗效比较

结果如表5所示，治疗前两组患者组织病理学积分差异无统计学意义(p>0.05)。与治疗前比较，治疗后两组患者组织学积分均显著降低(p<0.05)，且观察组组织病理学积分显著低于对照组(p<0.05)。

表5两组胃粘膜组织病理学疗效比较(分)

注：与本组治疗前比较，^*p<0.05；与对照组治疗后比较，^#p<0.05

(4)两组患者治疗前后sf-36生活质量量表评分比较

结果如表6所示，治疗前两组患者sf-36生活质量量表各指标评分差异无统计学意义(p>0.05)。与治疗前比较，治疗后两组患者sf-36生活质量量表各指标评分均显著升高(p<0.05)，且观察组sf-36生活质量量表各指标评分显著高于对照组(p<0.05)。

表6两组患者治疗前后sf-36生活质量量表评分比较(x±s，n＝43)

注：与本组治疗前比较，^*p<0.05；与对照组治疗后比较，^#p<0.05

(5)两组患者不良反应比较

治疗后两组患者复查检验指标，均未出现肝肾功能及凝血功能异常，观察组出现恶心呕吐1例，腹泻2例，皮疹1例，不良应发生率9.30％：对照组出现恶心呕吐1例，腹痛2例，腹泻2例，皮疹2例，不良反应发生率16.28％。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(p>0.05)。

在本研究中，观察组患者使用本发明的中药组合物，对照组患者使用中成药胃复春进行治疗，通过对比可以发现，两组在治疗过程中出现的不良反应差异无统计学意义，说明两组的治疗方法的安全性是一致的，通过治疗两组患者均有临床症状好转的趋势，但观察组患者病情好转程度显著高于对照组(p<0.05)。

中医治疗慢性胃炎效果独特，在改善炎-癌相关疾病症状、延缓病理进展甚至逆转病变方面独有特色。有研究者从“瘤毒”论治，认为中药可有效抑制黏膜腺体萎缩；还有发现，内镜下胃黏膜糜烂、萎缩征象可在“健脾化瘀解毒”治疗后显著改善。部分药品药效物质基础有待明确，制约了中药创新发展，如何快速、有效明确慢性胃炎中药药效物质基础，成为中医药有效治疗慢性胃炎亟待解决的科学问题之一。网络药理学作为药理学、计算机学、中医学、分子生物学的交叉学科，可以部分解决这个问题，成为分析药物可能靶点的方法学之一。部分临床验方验药已被医药研究者进行了网络药理学或分子对接预测研究，发现多种可能靶点与信号通路，明确了药物药效物质基础。近年来，运用信息科学手段进行名家诊疗经验分析和学习是中医传承现代化的重要研究方向之一，相关数据分析方法已在理法方药研究领域得以广泛应用，挖掘数据内的隐性规律和隐藏特征，被视为研究中医证治规律的全新有效手段。本发明的药物组合物制成的药物作为基于机器学习与名老中医经验总结的慢性胃炎验方，目前还未见到相关研究报道。

本发明在前期研究中发现运用化浊解毒法能改善慢性胃炎中医证候疗效，提高患者生活质量，影响血清肿瘤特异性生长因子、胃癌单抗mg7相关抗原，降低血清炎症因子水平，并在此基础上运用隐结构模型，结合名老中医经验，总结出本发明所述的中药组合物，借助网络药理学对其作用机制进行探索性研究，结论如下：

筛选出59种主要活性成分和101个成分靶点。最主要的活性成分为槲皮素(quercetin，qt)、木犀草素(luteolin，lut)、山柰酚(kaempferol，kae)、汉黄芩素(wogonin)、黄芩素(baicalein)、川陈皮素(nobiletin)、柚皮素(naringenin)。qt作为一种天然饮食类黄酮，富含于绝大多数植物类中药中，具有明显的抗氧化、抗炎作用。有研究者发现，qt可通过c-jun/atf2/bcl-xl途径增强5-氟尿嘧啶对胃癌细胞线粒体途径凋亡的诱导活性；另有研究者发现，qt可能通过cav-1表达下降，对胃癌细胞的增殖及侵袭有一定的抑制作用。lut是主要存在于中药中的天然黄酮类化合物，有一定的免疫调节、抗癌、抗氧化作用。有学者发现，lut可能通过线粒体途径诱导胃癌细胞mgc803发生g2期阻滞、凋亡；kae是一种富含在化湿类中药中的黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗病毒等功效。有研究者发现，kae可促进胃癌细胞凋亡，抑制癌细胞恶性增殖；还有研究者发现，kae可有效松弛大鼠结肠纵行肌。

通过靶点ppi网络分析及关键靶点的筛选，发现度值较高的靶点为mapk3、mapk1、akt1、bal、il、bad、ikbkb、nfkbia、jun、casp9等，从不同方面与炎症反应存在一定关系，且与其他报道的中药复方治疗慢性胃炎的关键靶点吻合。研究表明，akt/mapk途径是保护胃黏膜的重要潜在机制，对消化道炎-癌转化进展至关重要。目前证据证实，mapk3、mapk1、mapk14可以通过促炎反应导致细胞变异，akt1是pi3k的靶向基因，活性成分可通过akt1途径增强胃癌细胞体外增殖及侵袭力，进一步证实akt1在胃癌的发生发展过程中的潜在作用。可以预测：本发明的药物组合物制成的药物中qt、lut、kae、wogonin等可能作用于mapk、akt1、bal、il而发挥药理作用，为继续研究、探讨本发明的中药组合物治疗慢性胃炎鸡胃癌前病变，延缓炎癌转化提供新思路。

通过对本发明的药物组合物制成的药物治疗慢性胃炎靶点go与kegg富集分析，结果主要集中在炎症反应等方面，主要涉及调节免疫、氧化还原等生物过程，可推断本发明的中药组合物的治疗作用，以及炎症、蛋白多糖、转录和胆碱代谢失调通路相关靶点对慢性胃炎的调控机制。根据分析预测结果，与团队前期动物实验发现合并分析，组方通过下调慢性胃炎大鼠模型胃黏膜组织中taz蛋白和基因表达水平，上调lats2、mst1蛋白和基因表达水平而起作用，上述基因、蛋白与炎症、蛋白多糖、转录和胆碱代谢关系密切，表明本发明的药物组合物制成的药物可能是通过调节以上关键基因蛋白表达，或调控以上信号转导通路，改善慢性胃炎相关症状，延缓、阻断炎-癌转化。

综上所述，本发明基于隐结构模型和网络药理学分析所述的药物组合物，并结合动物实验预测、验证治疗慢性胃炎活性化合物、作用靶点、信号通路与疾病潜在关系和作用机制做了初步有益探索，本发明的药物组合物制成的药物治疗慢性胃炎是多靶点、多成分、多通路的复杂过程，能够有效治疗慢性胃炎伴低级别上皮内瘤变，改善中医证候疗效，提高生活质量，影响lats2、mst1、taz表达水平，安全性较好，值得在临床范围内推广使用。

本发明还提供一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的颗粒剂，所述颗粒剂包含所述的中药组合物和制剂辅料；所述制剂辅料为填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂和薄膜包衣材料中的一种或多种。通过对中药进行提取后浓缩制粉，并添加缓释助剂进行揉和制粒，得到的中药颗粒能够对中药成分进行高效高质释放，提高药效和治疗效果。

本发明还提供一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的口服液，所述口服液包含所述的中药组合物和制剂辅料；所述制剂辅料为溶剂、芳香剂、矫味剂、澄清剂和防腐剂中一种或多种。

本发明还提供一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的片剂，所述片剂包含所述的中药组合物和制剂辅料；所述制剂辅料为稀释剂、粘合剂、润滑剂和崩解剂中一种或多种。

本发明还提供一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的胶囊，所述胶囊包含所述的中药组合物和制剂辅料；所述制剂辅料为硬胶囊壳或软胶囊壳。

本发明还提供一种治疗慢性胃炎及胃癌前病变的散剂，所述散剂包含所述的中药组合物。

本发明的药物组合物制备成颗粒剂、口服液、片剂、胶囊和散剂更方便服用、携带和储存。

由以上结果可知，本发明中所述的中药组合物在临床症状、组织病理、分子水平显示出对慢性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃癌前病变(慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、上皮内瘤变)具有明确疗效。其中，君药藿香和黄连的配比至关重要，改变配比就不能够达到同时对慢性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃癌前病变(慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、上皮内瘤变)均有效果。另外，臣药中麸炒白术和豆蔻健脾化浊和胃，对于整个中药组合物的疗效有巨大的贡献作用。将所述的中药组合物按照药学常规工艺，加入药学上的常规辅料，制成药学上可接受的剂型，如颗粒剂、口服液、片剂、胶囊、散剂等，方便服用、携带、储存，且费用低廉。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。