一种多功能白及医用材料及其制备方法与应用

1.本发明涉及一种多功能白及医用材料及其制备方法与应用。


背景技术：

2.生物医学材料指的是一类具有特殊性能、特种功能，用于人工器官、外科修复等而不会对人体组织产生不良影响的材料。目前国内创伤治疗及临床手术中应用的医用材料部分具有免疫原性、机械性较差、使用不方便等缺点。国外市场上销售的同类产品价格高，性价比较低，难以在国内推广使用。因此目前市场依然需求质优价廉的医用材料。同时，随着白及快速繁殖技术的突破，人工栽培白及面积迅速扩大，白及产量不断增加，白及价格不断下降，利用白及制备天然医用材料已然可行。
3.白及(bletilla striata(thunb.)rchb.f.)为兰科白及属多年生药用草本植物，主要分布在我国的陕西、浙江、安徽、湖北、湖南、四川和贵州等地，是《中国药典》收载的常用中药之一，归肺经，具有收敛止血、消肿生肌的作用，常用于咯血、外伤出血、皮肤皲裂的治疗。白及的药效成分主要为多糖和醇提小分子物质，如联苄类、菲类等。联苄类和菲类化合物是白及块茎的主要活性成分，具有抑菌消炎等生物活性。白及多糖是白及块茎水提醇沉得到的强黏性葡萄甘露聚糖，由α
‑
甘露糖、β
‑
甘露糖、β
‑
葡萄糖以β
‑
1,4糖苷键连接聚合而成，约占白及质量的30％。因具有良好的吸水性、生物相容性、可降解性、可吸收性、止血性、促愈合等特性，白及多糖一直是最热门的天然医用研究材料之一。
4.发明专利cn 104436277 a从白及块茎中提取白及多糖经真空冷冻干燥制作成疏松多孔状海绵材料用于外伤止血。专利cn 107349460a在高膨胀海绵表面喷涂一层白及提取物白及多糖制备了一种麻醉科医用止血海绵。专利cn108606971a利用从白及中分离得到单体化合物白及苷制作止血片，用于口服、注射或外用止血。专利cn 106267317a将白及多糖、壳聚糖、醋酸溶液混合交联处理，经冷冻干燥制得高止血医用敷料。目前以白及为原料的医用材料普遍采用白及多糖制备，作用单一，白及药材也得不到充分利用。本发明采用白及多糖和白及小分子物质制备多功能的天然医用材料，既充分利用了白及药材，提高了白及药材的附加值与利用率，也增加了此类医用材料的综合药效，使此类医用材料的药效更佳。同时，白及药材利用率的提高使得制备此类医用材料的成本得以降低，从而使此类多功能的天然医用材料具有较高的性价比和市场竞争优势。


技术实现要素：

5.为了解决现有技术中以白及为原料的医用材料普遍存在的白及多糖作用单一、药材无法充分利用的问题，本发明提供一种多功能白及医用材料的制备方法及其应用，它具有止血、抗炎、抑菌、促进伤口愈合特别是糖尿病足溃疡创面的愈合等功效。此类多功能医用材料蓬松柔软，生物相容性好，细胞毒性低，无免疫原性，可用于制作各类医用敷料以及褥疮贴、牙科及伤口辅料填充条等。此类多功能白及医用材料能够吸收大量的伤口渗液,保持创面的湿润有利于表皮细胞的增殖和迁移,且海绵状的多孔结构有利于创面分泌物的排
除,避免细菌滋生能有效防止微生物对创面的感染，可以促进创面的愈合。同时，此类多功能白及医用材料也可用于制备具有生物相容性好、毒副作用小、热源性低、一定的透水性等优点的生物型皮肤敷料等产品，应用前景广泛。
6.为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
7.本发明提供一种多功能白及医用材料，包括白及醇提物小分子和白及多糖，所述白及多糖与白及醇提物小分子物质的质量比为1～10:1(优选3～10：1)，所述白及醇提物小分子的质量不低于所述多功能白及医用材料质量的0.24％；所述白及多糖以白及多糖提取物的形式加入，所述白及多糖以白及多糖提取物中测定所得白及多糖的含量计为白及多糖质量；所述白及醇提物小分子和白及多糖提取物按如下方法制备：
8.(1)取干燥的白及(bletilla striata(thunb.)reiehb.f)块茎，粉碎，过筛(优选10目筛)，得到白及粉粒；
9.(2)以体积分数为85
‑
95％(优选95％)的乙醇水溶液a为提取剂，取步骤(1)中所得的白及粉粒加热回流提取2～3次(优选2次)，每次加热回流1.5～2h，优选2h，取滤饼干燥，得含白及多糖的滤渣，合并滤液，得醇提滤液；每次加热回流所加入的乙醇水溶液a的体积以所述的白及粉粒的质量计为10～50l/kg；乙醇水溶液a的所述乙醇水溶液a就是乙醇水溶液，此处定义为乙醇水溶液a只是为了方便描述，没有任何特殊含义；
10.(3)取步骤(2)所述醇提滤液旋蒸除去乙醇，得浸膏状小分子物质，55℃真空干燥得所述白及醇提物小分子；
11.(4)取步骤(2)所述的含白及多糖的滤渣加入蒸馏水a，回流条件下提取1～3次(优选2
‑
3次)，提取液过滤，收集合并滤液(每次提取1.5～2h)，得含白及多糖的滤液；每次加热回流所加入的蒸馏水a的体积以所述的滤渣的质量计为10～50l/kg；所述蒸馏水a就是蒸馏水，此处定义为蒸馏水a只是为了方便描述，没有任何特殊含义；
12.(5)取步骤(4)所述含白及多糖的滤液，旋蒸浓缩，得到浓缩液，所述浓缩液在65℃下的相对密度为1.05g/ml
‑
1.25g/ml(优选1.10g/ml)，加入3～4倍(优选3倍)所述浓缩液体积的体积分数为75％～95％(优选95％)的乙醇水溶液b，4～8℃(优选4℃)静置过夜，离心，所得沉淀干燥即为白及多糖粗提物；所述乙醇水溶液b就是乙醇水溶液，此处定义为乙醇水溶液b只是为了方便描述，没有任何特殊含义；
13.(6)取步骤(5)中所述白及多糖经去杂质处理得所述白及多糖提取物。
14.具体地，一种多功能白及医用材料，所述的多功能白及医用材料由白及醇提物小分子、白及多糖及人体可接受的医用辅料组成，所述白及多糖与白及醇提物小分子的质量比为1～10:1；基于所述的多功能白及医用材料，白及醇提物小分子的质量不低于0.24％。除了白及醇提物小分子和白及多糖两种主要成分，还可以在所述多功能白及医用材料中加入甘油、吐温
‑
80、卡波姆940、壳聚糖、丹参提取物、纤维素等一种或多种人体可接受的辅料，以使敷料具备抗菌、抗炎及稳定性好等特性。
15.进一步，步骤(6)所述去杂质处理为：将所述白及多糖粗提物加蒸馏水b溶解后旋蒸浓缩至无乙醇味，即得所述白及多糖提取物；所述蒸馏水b就是蒸馏水，此处定义为蒸馏水b只是为了方便描述，没有任何特殊含义；加水再浓缩的目的是为了除去多糖中残留的醇；白及多糖的含量可以采用苯酚硫酸法测定。
16.另外，步骤(6)所述去杂质处理还可以为：向所述白及多糖粗提物中加蒸馏水c使
所述白及多糖粗提物溶解，重复加入氯仿和正丁醇的混合溶剂、充分震摇、离心、去除蛋白沉淀和下层有机相的操作1～3次(优选3次)后，将水相旋蒸浓缩，即得所述白及多糖提取物；所述蒸馏水c的体积以所述白及多糖粗提物的质量计为5
‑
6l/kg；所述氯仿和正丁醇混合溶剂中，氯仿与正丁醇的体积比为4:1，每次加入的氯仿和正丁醇混合溶剂与蒸馏水c的体积比为1：4～5，优选1：4。所述蒸馏水c就是蒸馏水，此处定义为蒸馏水c只是为了方便描述，没有任何特殊含义。这样经过去蛋白处理后得到的白及多糖纯度更高，且可避免由蛋白导致的免疫排斥反应。
17.优选地，一种上述多功能白及(海绵型)医用材料，所述多功能白及医用材料按如下方法制备：
18.a取白及醇提物小分子与白及多糖提取物配制成混合水溶液，所述混合水溶液中白及多糖的浓度为0.24～1.44％；白及多糖与白及醇提物小分子的质量比为1～10：1(优选3～10：1，更优选3:1)；所述白及多糖以白及多糖提取物中测定所得白及多糖的含量计为白及多糖质量；所述白及醇提物小分子与白及多糖提取物可按前述方法制得。
19.b将步骤a中所述的白及多糖和醇提小分子混合水溶液置于
‑
80～
‑
30℃下冷冻(8～24小时)成固形物；
20.c再将步骤b所得固形物置于真空条件下冷冻干燥至恒重，即得所述多功能白及医用材料，其是一种疏松多孔的多功能天然医用材料。
21.进一步将步骤c所得固形物置于气压1.0
×
102～1.2
×
102pa(优选1.0
×
102pa)的真空条件下，在
‑
80℃～
‑
45℃(优选
‑
45℃)冷冻干燥12～36小时(优选24小时)，使其水分子在不影响白及多糖和小分子分布状态的情况下完全挥发，则最终所获得的多功能天然医用敷料密度适中，小分子和多糖分散均匀，止血、抗炎、抑菌、促进伤口愈合效果明显。
22.优选地，上述多功能白及(凝胶型)医用材料，所述多功能白及凝胶型医用材料按如下方法制备：
23.1)取白及醇提物小分子与白及多糖提取物溶解于蒸馏水d中，加入甘油和吐温80，得反应溶液a；白及多糖与白及醇提物小分子的质量比为1～10：1(优选10：1)；所述白及多糖以白及多糖提取物中测定所得白及多糖的含量计为白及多糖质量；所述蒸馏水d就是蒸馏水，此处定义为蒸馏水d只是为了方便描述，没有任何特殊含义。所述白及醇提物小分子与白及多糖提取物可按前述方法制得。
24.2)将卡波姆940加入蒸馏水e中，静置至充分溶胀后，搅拌下加入氢氧化钠调节ph至6.5，得卡波姆凝胶基质溶液；所述醇提物小分子、甘油、吐温80与卡波姆940的用量比为0.24g：10
‑
20g:1
‑
2ml：0.05
‑
0.1g(优选0.24g：10g:1ml：0.05g)；
25.3)将步骤1)所述的反应溶液a搅拌下加入步骤2)所述卡波姆凝胶基质溶液，加纯化水搅拌均匀，得所述多功能白及医用材料；所述多功能白及医用材料中加入所述纯化水后醇提物小分子的浓度不低于0.24g/g(优选0.0024g/g)。另外，本发明还提供所述多功能白及医用材料在制备抗炎、抑菌、止血和促进皮肤溃烂(尤其是糖尿病病人的皮肤溃烂)愈合的药物中的应用。
26.与此同时，本发明还提供所述多功能白及医用材料在医用器材上的应用。
27.与现有技术相比，本发明有益效果主要体现在：
28.(1)采用本发明的多功能白及医用材料制备方法，由于分别采用白及醇提与水提
来提取白及的醇提小分子与多糖，因此可以提高白及药材的利用率，提高药效，降低多功能天然医用材料的制备成本；
29.(2)采用本发明制备的多功能白及医用材料，由于同时含有白及多糖与醇提小分子，因此具有止血、抗炎、抑菌、促进伤口愈合等功效。
30.(3)本发明采用的白及提取方法简单高效，每100g白及能够提取出11.75g多糖；白及醇提小分子能溶于水，与水提多糖在水里能混溶。
附图说明
31.图1为大鼠断尾止血实验结果；
32.图2为各类白及海绵对s.aureus和b.subtilis抑菌圈直径结果；
33.图3为小鼠背部伤口愈合率结果；
34.图4为小鼠背部伤口皮肤组织切片。
具体实施方式
35.下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：
36.实施例1白及醇提物小分子的制备方法
37.1)取干燥的白及(bletilla striata(thunb.)reiehb.f)块茎100g，粉碎成其粒度大小能通过10目网筛的白及粉粒95g，备用；
38.2)取步骤1)所得全部白及粉粒，加热回流提取2次，每次2h，过滤两次，每次加入体积为1.5l体积分数为95％乙醇水溶液，干燥保存滤渣84g；
39.3)取步骤2)所得滤液2.86l，旋转浓缩除去乙醇(至无乙醇味)，得浸膏状小分子物质10ml；
40.4)取步骤3)所得浸膏状小分子物质，55℃真空干燥得粉末状小分子物质3.47g
41.实施例2白及多糖制备方法
42.1)取实例1步骤2)所得滤渣，加热回流提取2次，每次2h，每次加入1.5l蒸馏水，合并两次过滤的滤液2.8l；
43.2)取步骤1)所得滤液，旋蒸浓缩至1l,相对密度为1.17g/ml(65℃)，加入3l体积分数为95％的乙醇水溶液，沉淀静置，4200rmp离心15min，55℃烘干得到粗提物17.8g，加100ml蒸馏水溶解得到粗多糖溶液；
44.3)取步骤2)所得粗多糖溶液，加入体积比为4：1的氯仿
‑
正丁醇溶液25ml，充分振摇，离心取其水相，重复3次，得到去蛋白的白及多糖溶液75ml；
45.4)取步骤3)所得白及多糖溶液旋蒸浓缩至50ml,相对密度为1.2g/ml(65℃)，使用苯酚硫酸法测定白及多糖的含量为24％。
46.实施例3不同比例白及多糖/醇提物小分子复合医用敷料的制备方法
47.1)按下述表格分别取实例2步骤4)中所得白及多糖溶液和水，标为a、b、c、d、e、f、g、h组；
48.2)取实例1步骤4)所得醇提物小分子6份，各0.24g，一次加入步骤2)所得b、c、d、f、g、h组溶液中，充分混匀；得到以下混合水溶液：
[0049][0050]
3)将步骤2)所得水溶液置于
‑
80℃温度冷冻成固形物；
[0051]
4)再将步骤3)所得固形物置于气压1.0
×
102pa的真空条件下，在
‑
45℃的温度下冷冻干燥24小时，即得到多功能白及海绵医用材料a组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:0:50)0.2g、b组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:1:50)0.43g、c组(多糖:小分子:蒸馏水＝2:1:50)0.65g、d组(多糖:小分子:蒸馏水＝3:1:50)0.90g、e组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:0:100)0.21g、f组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:1:100)0.45g、g组(多糖:小分子:蒸馏水＝2:1:100)0.65g、h组(多糖:小分子:蒸馏水＝3:1:100)0.89g。
[0052]
实施例4多功能白及医用材料对大鼠断尾创口的止血作用
[0053]
1)实验目的：采用大鼠断尾止血实验，测定止血时间，来判断此类不同配比的天然医用材料对大鼠断尾止血的效果。
[0054]
2)实验对象：正常大鼠
[0055]
3)实验分组及给药：取7周龄的健康雄性sd大鼠54只，随机分为9组，每组6只，依次为各类白及海绵状医用材料的a组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:0:50)、b组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:1:50)、c组(多糖:小分子:蒸馏水＝2:1:50)、d组(多糖:小分子:蒸馏水＝3:1:50)、e组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:0:100)、f组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:1:100)、g组(多糖:小分子:蒸馏水＝2:1:100)、h组(多糖:小分子:蒸馏水＝3:1:100)(下同)以及模型对照组，用苦味酸法标记。实验前，各类无菌白及海绵状医用材料裁剪成2cm*2cm大小干燥备用，大鼠断尾前使用2％的戊巴比妥钠溶液对大鼠腹腔注射(40mg/kg)进行麻醉。在距大鼠尾部约2cm处用手术剪剪断鼠尾，建立大鼠断尾出血模型。大鼠尾部出血后立即给与各组相应材料进行止血并用胶夹夹闭1min后，观察各组的止血效果(如未止血继续夹闭3min，再观察出血情况)，记录各组大鼠止血情况。
[0056]
4)实验结果：如图1所示，模型对照组在夹闭1min后均不能有效止血，继续夹闭3min仍未止血；a组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:0:50)与e组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:0:100)平均止血时间在46s和43s左右，而b
‑
d组及f
‑
h组随着小分子的加入，平均止血时间在30s左右，明显优于纯多糖组，且f
‑
h止血时间较稳定，可能是由于100ml水制备出的海绵孔隙较大，吸水性能较高，所以止血效果较好。
[0057]
实施例5多功能白及医用材料对几种常见细菌的抑菌作用
[0058]
1)实验目的：考察此类不同配比的天然医用材料对几种常见细菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)生长的抑制作用。
[0059]
2)实验对象：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌
[0060]
3)实验分组及给药：将金黄色葡萄球菌、和枯草芽孢杆菌活化分离后分别挑取单个菌落配置0.5麦氏浊度的菌液，将菌液均匀涂布于制作好的m
‑
h培养基。再分别将直径为6mm的各类白及海绵状医用材料、明胶止血海绵放入已经接种各类细菌的m
‑
h培养基上，于37℃恒温培养箱中培养24h，测量并记录培养基中各类材料的抑菌圈直径。每种材料样品平行做四次，取平均值。
[0061]
4)实验结果：如图2所示，a组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:0:50)与e组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:0:100)对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌抑制作用非常有限，随着敷料中加入小分子后，对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌抑菌效果明显，其中最好的是d组(多糖:小分子:蒸馏水＝3:1:50)。
[0062]
实施例6多功能白及医用材料对小鼠耳廓炎症的抗炎作用
[0063]
1)实验目的：采用二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀模型来考察此类不同配比的天然医用材料的抗炎作用。
[0064]
2)实验对象：正常小鼠
[0065]
3)实验分组及给药：选取50只健康且活动情况相似的雄性icr小鼠，随机分为10组，每组5只，分别为模型对照组(生理盐水)、阳性对照组(布洛芬混悬液)、各类白及海绵状医用材料a～h组。适应性培养一周后对每组小鼠右耳正反两面均匀涂抹二甲苯20μl致炎。涂抹二甲苯30min后在小鼠右耳炎症部位分别使用生理盐水、布洛芬混悬液、各类制备白及医用材料的原液，1次/d，连续7d。末次给药后30min将小鼠脱颈椎处死，沿耳廓线剪下双耳；用6mm直径打孔器分别在双耳同一部位处打下圆耳片称重。计算并记录肿胀度及肿胀度抑制率，肿胀度＝右耳质量
‑
左耳质量；肿胀度抑制率＝(模型组平均肿胀度
‑
给药组平均肿胀度)/模型组平均肿胀度
×
100％。
[0066]
4)实验结果：与模型对照组相比较，c、d、h组均能够明显抑制小鼠耳廓肿胀，差异有统计学意义(p<0.05)，表明50/100ml水中多糖与小分子质量比例为3:1与50ml水中多糖与小分子质量比例为2:1组能够很好地抑制二甲苯致小鼠耳廓的肿胀，其中50ml水，多糖与小分子质量比例为3:1组效果最佳(表1)。
[0067]
表1白及海绵状医用敷料对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(n＝8)
[0068][0069]
注:
△
与模型对照组比较，p＜0.05；
*
与阳性对照组比较，p＜0.05。
[0070]
实施例7多功能白及医用材料对小鼠背部伤口的促进愈合效果作用
[0071]
1)实验目的：采用小鼠背部伤口模型，根据第3、6、9、12天小鼠背部伤口的愈合率考察此类天然医用材料的促进伤口愈合作用。
[0072]
2)实验对象：正常小鼠
[0073]
3)实验分组及给药：选取45只健康且活动情况相似的雄性icr小鼠，并随机分为9组，每组5只，分别为模型对照组、各类白及海绵状医用材料a～h组。适应性培养一周后剪去小鼠背部毛发，随后涂抹脱毛膏刮去毛，然后用无菌手术剪剪去直径约1.5cm的圆形皮肤，伤口深至筋膜。手术完成后在伤口处使用相应的材料，单笼饲养，次日更换材料。每日观察小鼠伤口情况，计算伤口愈合率(％)＝(用药前的伤口面积
‑
用药后的伤口面积)/用药前伤口面积
×
100％。待12d后处死小鼠，切取小鼠背部伤口皮肤进行组织切片苏木精
‑
伊红(he)染色和胶原染色，观察伤口局部新生血管与肉芽组织的形成，局部成纤维细胞与炎性细胞的数量，胶原纤维的增殖情况。
[0074]
4)实验结果：f组和h组在第3天时长出肉芽组织，而模型对照组未见明显肉芽组织。与模型对照组比较，白及海绵状医用材料能够加快结痂的速度，能较好地吸收渗出物，保持伤口表面干燥。如图3所示，使用白及海绵状医用材料的小鼠，在第3，9，12天的伤口愈合率，均高于空白对照组。除c组外，开始愈合时间均早于模型对照组。结果表明白及海绵状医用材料能够在伤口恢复时期促进痂块生成，缩短伤口愈合时间，以e组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:0:100)和h组(多糖:小分子:蒸馏水＝3:1:100)促进伤口愈合效果最佳。
[0075]
he染色(图4)中e组(多糖:小分子:蒸馏水＝1:0:100)的炎症细胞数量较少，模型对照组鳞状上皮未长完整。胶原染色看出模型对照组皮肤血管明显扩张，充血。与模型对照组比较，h组(多糖:小分子:蒸馏水＝3:1:100)的胶原呈深蓝色，粗大，排列较整齐的条状，皮肤已经愈合完全。而模型对照组的胶原颜色较浅，数量较少，呈细小条状。
[0076]
实施例8多功能白及凝胶型医用材料制备方法
[0077]
1)取实例1步骤4)所得醇提物小分子0.24g，加入10ml蒸馏水，充分混匀，得混合液a备用；
[0078]
2)取实例2步骤4)中所得白及多糖溶液10ml、甘油10g、吐温80 1ml加入到步骤1所得醇提物小分子溶液中，搅拌混合均匀得混合液；
[0079]
3)取0.5g卡波姆940均匀地铺撒于100ml水面上，静置24h使之充分溶胀，然后在搅
拌状态下加入氢氧化钠调节ph至6.5，制备成0.5％凝胶基质108ml；取10ml待用，
[0080]
4)取步骤2)所得混合液在搅拌状态下加入步骤3)10ml待用得凝胶基质中，再加纯化水至100ml，搅拌均匀，即得多功能天然医用材料98.7g；
[0081]
实施例9白及凝胶型医用材料对糖尿病大鼠皮肤溃烂的愈合作用
[0082]
1)实验目的：采用糖尿病大鼠皮肤溃烂模型，根据第3、6、9、12天糖尿病大鼠皮肤溃烂的愈合率，考察此类天然医用材料对糖尿病皮肤溃烂的愈合作用。
[0083]
2)实验对象：正常sd大鼠
[0084]
3)实验分组及给药：sd大鼠适应性饲养3d后，随机分为4组，每组5只，分别为空白组、模型组、白及凝胶组(实施例8制备的多功能天然医用材料)、阳性对照组(康复新液
‑
四川好医生攀西药业有限责任公司)。以梓檬酸缓冲液(浓度0.1mol/l,ph4.2
‑
4.5)溶解链脲佐菌素(stz),制成1％溶液；将大鼠一次性腹腔注射stz溶液(55mg/kg)。72小时后随机血糖浓度>16.7mmol/l时，视为糖尿病模型建立成功、并于注射stz 1天、3天后再次测定大鼠随机血糖。按剂量20mg/kg于股部肌肉注射氢化可的松注射液，1天1次，共3天。剪去小鼠背部毛发，随后涂抹脱毛膏刮去毛，然后用无菌手术剪剪去直径约1.5cm的圆形皮肤，伤口深至筋膜。手术完成后在伤口处涂抹相应的材料，单笼饲养，次日更换材料。每日观察大鼠创面情况，计算创面愈合率(％)＝(用药前的创面面积
‑
用药后的创面面积)/用药前创面面积
×
100％。待12d后处死大鼠，切取大鼠背部伤口皮肤进行免疫组化实验，检测皮肤组织中炎症因子il
‑
6、tnf
‑
α的表达情况。
[0085]
4)实验结果：给药3d、6d、9d、12d，模型组创面愈合率均明显低于空白组(p<0.01)，白及凝胶组和阳性对照组组创面愈合率均高于模型组(p<0.01)，实验结果表明此类白及医用材料对糖尿病大鼠皮肤溃疡具有明显地促进愈合作用。12d后经免疫组织化学染色方法检测il
‑
6和tnf
‑
α的表达显示：空白组的il
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6、tnf
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α表达率在几组中为最低，阳性对照组和模型组il
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6、tnf
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α的阳性表达率相对较高。与空白组比较，模型组显著增高，差异具有统计学意义(p<0.01)；与模型组相比较，白及凝胶组和阳性对照组差异均具有统计学意义(p<0.01)，结果表明，多功能白及医用材料能明显抑制炎症因子il
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6、tnf
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α的表达，从而降低创面炎症反应促进糖尿病溃疡的愈合。
[0086]
综合上述实验结论，证实了此类多功能白及医用材料对大鼠断尾模型的出血有明显的止血作用；对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的生长也有较为明显的抑制作用；对二甲苯导致的小鼠耳廓肿胀有较好的抗炎作用；对小鼠背部伤口以及糖尿病大鼠的皮肤溃疡也有较好的促进愈合作用。
[0087]
最后，应当指出，以上实例仅是本发明较有代表性的例子。显然，本发明的技术方案并不限于上述实例，还可以有许多变形，本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。