技术特征：
1.一种核酸载体，所述核酸载体包含与seq id no:1-3中的任一个具有至少85％序列同一性的多核苷酸。2.如权利要求1所述的核酸载体，其中所述多核苷酸与seq id no:1具有至少85％序列同一性。3.如权利要求1所述的核酸载体，其中所述多核苷酸与seq id no:2具有至少85％序列同一性。4.如权利要求1所述的核酸载体，其中所述多核苷酸与seq id no:3具有至少85％序列同一性。5.如权利要求1-4中任一项所述的核酸载体，其中所述多核苷酸可操作地连接至转基因。6.如权利要求5所述的核酸载体，其中所述转基因是异源转基因。7.如权利要求5或6所述的核酸载体，其中所述转基因编码治疗性蛋白质、短干扰rna(sirna)、反义寡核苷酸(aso)、核酸酶，或者是微小rna。8.如权利要求5-7中任一项所述的核酸载体，其中所述多核苷酸能够指导所述转基因在哺乳动物ohc中的耳蜗外毛细胞(ohc)特异性表达。9.如权利要求8所述的核酸载体，其中所述哺乳动物ohc是人ohc。10.如权利要求7-9中任一项所述的核酸载体，其中所述治疗性蛋白质选自由以下组成的组：肌动蛋白γ1(actg1)、成束蛋白肌动蛋白集束蛋白2、视黄醛(fscn2)、根蛋白(rdx)、pou 4类同源框3(pou4f3)、trio和f-肌动蛋白结合蛋白(triobp)、taperin(tprn)、含xin肌动蛋白结合重复序列的2(xirp2)、atonal bhlh转录因子1(atoh1)、非生长因子依赖性1转录阻遏蛋白(gfi1)、胆碱能受体烟酸α9亚基(chrna9)、胆碱能受体烟酸α10亚基(chrna10)、钙和整联蛋白结合家族成员3(cib3)、钙粘素23(cdh23)、原钙粘附蛋白15(pcdh15)、kinocilin(kncn)、pejvakin(dfnb59)、耳畸蛋白(otoferlin)(otof)、mkrn2相反链(mkrn2os)、lim同源框蛋白3(lhx3)、跨膜通道样1(tmc1)、肌球蛋白15(myo15)、肌球蛋白7a(myo7a)、肌球蛋白6(myo6)、肌球蛋白iiia(myo3a)、肌球蛋白iiib(myo3b)、含谷氧还蛋白结构域的富半胱氨酸蛋白1(grxcr1)、蛋白酪氨酸磷酸酶受体型q(ptprq)、晚期角质化包膜蛋白6a(lce6a)、含脂氧合酶同源结构域的蛋白1(loxhd1)、adp-核糖转移酶1(art1)、atp酶质膜ca2+转运2(atp2b2)、钙和整联蛋白结合家族成员2(cib2)、钙电压门控通道辅助亚基α2δ4(cacna2d4)、钙结合蛋白2(cabp2)、表皮生长因子受体途径底物8(eps8)、eps8样2(eps8l2)、espin(espn)、espin样(espnl)、外周蛋白2(prph2)、硬纤毛蛋白(strc)、溶质载体家族8成员a2(slc8a2)、含cchc型锌指的蛋白12(zcchc12)、含富亮氨酸跨膜和o-甲基转移酶结构域的蛋白质(lrtomt2、lrtomt1)、ush1蛋白网络组分和谐素(ush1c)、溶质载体家族26成员5(slc26a5)、压电型机械敏感离子通道组分2(piezo2)、含细胞外富亮氨酸重复序列和纤连蛋白iii型结构域的1(elfn1)、三十四肽重复蛋白24(ttc24)、肌营养不良蛋白(dytn)、kielin/腱蛋白样蛋白(kcp)、卷曲螺旋富谷氨酸蛋白2(ccer2)、含富亮氨酸重复序列和跨膜结构域的蛋白质2(lrtm2)、钾电压门控通道亚家族a成员10(kcna10)、clarin 1(clrn1)、clarin 2(clrn2)、ski家族转录辅阻遏蛋白1(skor1)、含tctex1结构域的蛋白1(tctex1d1)、fc受体样b(fcrlb)、溶质载体家族17成员8(slc17a8)、含谷氧还蛋白结构域的富半胱氨酸蛋白2(grxcr2)、脑源性神经营养因子(bdnf)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)家
族e成员3(serpine3)、无义螺旋环螺旋1(nhlh1)、热激蛋白70(hsp70)、热激蛋白90(hsp90)、转录激活因子6(atf6)、真核翻译起始因子2α激酶3(perk)、丝氨酸/苏氨酸-蛋白激酶/内切核糖核酸酶ire1(ire1)、whirlin(whrn)、癌调蛋白(ocm)、lim同源框1(isl1)、神经营养蛋白3(ntf3)、含跨膜和三十四肽重复序列的4(tmtc4)和结合免疫球蛋白蛋白质(bip)。11.如权利要求1-10中任一项所述的核酸载体，其中所述核酸载体选自由以下组成的组：病毒载体、质粒、粘粒或人工染色体。12.如权利要求11所述的核酸载体，其中所述核酸载体是选自由腺相关病毒(aav)、腺病毒和慢病毒组成的组的病毒载体。13.如权利要求12所述的核酸载体，其中所述病毒载体是aav载体。14.如权利要求13所述的核酸载体，其中所述aav载体具有aav1、aav2、aav2quad(yf)、aav3、aav4、aav5、aav6、aav7、aav8、aav9、aav10、rh10、rh39、rh43、rh74、anc80、anc80l65、dj/8、dj/9、7m8、php.b、php.eb或php.s衣壳。15.一种组合物，所述组合物包含如权利要求1-14中任一项所述的核酸载体。16.如权利要求15所述的组合物，所述组合物还包含药学上可接受的赋形剂。17.一种可操作地连接至转基因的多核苷酸，所述多核苷酸与seq id no:1-3中的任一个具有至少85％序列同一性。18.如权利要求17所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸与seq id no:1具有至少85％序列同一性。19.如权利要求17所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸与seq id no:2具有至少85％序列同一性。20.如权利要求17所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸与seq id no:3具有至少85％序列同一性。21.如权利要求17-20中任一项所述的多核苷酸，其中所述转基因是异源转基因。22.如权利要求21所述的多核苷酸，其中所述转基因编码治疗性蛋白质、sirna、aso、核酸酶，或者是微小rna。23.如权利要求22所述的多核苷酸，其中所述治疗性蛋白质选自由以下组成的组：actg1、fscn2、rdx、pou4f3、triobp、tprn、xirp2、atoh1、gfi1、chrna9、chrna10、cib3、cdh23、pcdh15、kncn、dfnb59、otof、mkrn2os、lhx3、tmc1、myo15、myo7a、myo6、myo3a、myo3b、grxcr1、ptprq、lce6a、loxhd1、art1、atp2b2、cib2、cacna2d4、cabp2、eps8、eps8l2、espn、espnl、prph2、strc、slc8a2、zcchc12、lrtomt2、lrtomt1、ush1c、slc26a5、piezo2、elfn1、ttc24、dytn、kcp、ccer2、lrtm2、kcna10、clrn1、clrn2、skor1、tctex1d1、fcrlb、slc17a8、grxcr2、bdnf、serpine3、nhlh1、hsp70、hsp90、atf6、perk、ire1、whrn、ocm、isl1、ntf3、tmtc4和bip。24.一种细胞，所述细胞包含如权利要求17-23中任一项所述的多核苷酸或如权利要求1-14中任一项所述的核酸载体。25.如权利要求24所述的细胞，其中所述细胞是哺乳动物ohc。26.如权利要求25所述的细胞，其中所述哺乳动物ohc是人ohc。27.一种在哺乳动物ohc中表达转基因的方法，所述方法包括使所述哺乳动物ohc与如
权利要求1-14中任一项所述的核酸载体或权利要求15或16所述的组合物接触。28.如权利要求27所述的方法，其中所述转基因基本上不在不是ohc的内耳细胞中表达。29.一种治疗患有听力损失或有发展听力损失的风险的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求1-14中任一项所述的核酸载体或权利要求15或16所述的组合物。30.如权利要求29所述的方法，其中所述听力损失是遗传性听力损失。31.如权利要求30所述的方法，其中所述遗传性听力损失是常染色体显性听力损失、常染色体隐性听力损失或x连锁性听力损失。32.如权利要求29所述的方法，其中所述听力损失是获得性听力损失。33.如权利要求32所述的方法，其中所述获得性听力损失是噪声引起的听力损失、年龄相关的听力损失、疾病或感染相关的听力损失、头部创伤相关的听力损失或耳毒性药物引起的听力损失。34.一种促进有需要的受试者的ohc再生的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1-14中任一项所述的核酸载体或如权利要求15或16所述的组合物。35.一种预防或减少有需要的受试者中耳毒性药物引起的ohc损伤或死亡的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1-14中任一项所述的核酸载体或如权利要求15或16所述的组合物。36.如权利要求33或35所述的方法，其中所述耳毒性药物选自由以下组成的组：氨基糖苷、抗肿瘤药、依他尼酸、呋塞米、水杨酸盐和奎宁。37.一种治疗患有耳鸣或发展耳鸣风险的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1-14中任一项所述的核酸载体或如权利要求15或16所述的组合物。38.一种预防或减少有需要的受试者的ohc损伤或死亡的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1-14中任一项所述的核酸载体或如权利要求15或16所述的组合物。39.一种增加有需要的受试者的ohc存活的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1-14中任一项所述的核酸载体或如权利要求15或16所述的组合物。40.如权利要求29-39中任一项所述的方法，其中所述方法还包括在施用所述核酸载体或组合物之前评价所述受试者的听力。41.如权利要求29-40中任一项所述的方法，其中所述方法还包括在施用所述核酸载体或组合物之后评价所述受试者的听力。42.如权利要求29-41中任一项所述的方法，其中所述核酸载体或组合物局部施用。43.如权利要求29-42中任一项所述的方法，其中所述核酸载体或组合物以足以预防或减少听力损失、预防或减少耳鸣、延迟听力损失的发展、减缓听力损失的进展、改善听力、改善毛细胞功能、预防或减少毛细胞损伤、预防或减少毛细胞死亡、促进或增加毛细胞存活或增加毛细胞数量的量施用。44.如权利要求29-43中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。45.一种药盒，所述药盒包括如权利要求1-14中任一项所述的核酸载体或如权利要求
15或16所述的组合物。
技术总结
本公开提供了含有外毛细胞特异性启动子的多核苷酸，以及含有所述多核苷酸的载体，所述多核苷酸能够用于促进转基因在外毛细胞中的特异性表达。本文所述的多核苷酸可以可操作地连接至转基因，诸如编码治疗性蛋白质的转基因，以便促进所述转基因的外毛细胞特异性表达。本文所述的多核苷酸可以可操作地连接至治疗性转基因，并且用于治疗患有听力损失或有此风险的受试者。风险的受试者。
技术研发人员：J
受保护的技术使用者：分贝治疗公司
技术研发日：2020.11.04
技术公布日：2022/9/16