本发明涉及一种西兰花提取物的制备方法及其在防治白细胞减少症中的用途。
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：近年来，随着人们饮食及生活习惯的改变，大气及水质等污染的加重，白细胞减少症的发病率逐步升高，越来越受到临床医生的关注。可引起白细胞减少的病因有很多，包括细菌、病毒感染，药物因素(如化疗药物及丙硫氧嘧啶等抗甲状腺药物)，结缔组织病(系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征等)，消化系统疾病(肝硬化、脾功能亢进、肝炎等)，以及血液系统疾病(恶性血液病、再生障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等)。其中，白细胞减少症在肿瘤化疗过程中尤为常见，其主要发病机制是由于抗肿瘤药物缺乏特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时，也对正常细胞尤其是增殖旺盛的骨髓造血细胞造成严重损伤，导致血细胞数目下降。临床常因白细胞减少而继发严重感染等影响化疗顺利进行，从而导致抗肿瘤药物临床疗效降低，患者的生存质量下降。因此，预防和减轻化疗后骨髓抑制，促进骨髓造血功能恢复，升高外周血白细胞，已成为保证化疗顺利完成、提高抗肿瘤药物临床疗效的关键。西兰花(brassicaoleraceavar.italia)主要含有蛋白质、碳水化合物、脂肪、矿物质、维生素c和胡萝卜素等多种营养成分。营养成分不仅含量高，而且十分全面，其中维生素c含量高于同属于十字花科的菜花20％左右，是洋白菜的2-3倍，是番茄的5-6倍；胡萝卜素的含量是菜花的30多倍；叶酸含量是菜花的2倍；蛋白质含量是菜花的3倍，是番茄的4倍。此外，西兰花中矿物质成分比其它蔬菜更全面，钙、磷、铁、钾、锌、锰等含量都很丰富，比同科属的菜花高出很多，被誉为“蔬菜皇冠”。西兰花具有多种生理功能，其中西兰花的抗癌作用是近些年来西方及日本科学家研究的重要内容。日本国家癌症研究中心公布的抗癌蔬菜排行榜上，西兰花名列前茅。美国《营养学》杂志上，也刊登了西兰花能够有效预防前列腺癌的研究成果。西兰花中含有硫代葡萄糖苷，其在黑芥子酶的催化下水解为萝卜硫素，这是西兰花中具有抗癌作用的关键物质。除了硫代葡萄糖苷以外，西兰花还含有丰富的维生素c，能增强肝脏的解毒能力，提高机体免疫力；另外，还含有丰富的类黄酮物质，对高血压、心脏病有预防和调节的功效。此外，西兰花属于高纤维蔬菜，能有效降低肠胃对葡萄糖的吸收，进而降低血糖，有效控制糖尿病患者的病情。西兰花相关产品在防治白细胞减少症方面未见报道。本发明提供了一种西兰花提取物的制备方法及其在防治白细胞减少症中的用途。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种西兰花提取物的制备方法及其在防治白细胞减少症中的用途。本发明涉及的西兰花提取物可用于防治白细胞减少症。环磷酰胺主要通过dna烷基化破坏dna的合成而非特异性地杀伤白细胞使动物白细胞降低。本发明通过环磷酰胺对balb/c小鼠造模，然后通过实验检测balb/c小鼠的白细胞数目，考察环磷酰胺(模型组)、芪胶升白胶囊(阳性药)、西兰花蛋白粉(市售)和本发明制备的西兰花提取物对小鼠白细胞数目的影响。实验结果表明，西兰花提取物在第二次造模后对小鼠白细胞数目有明显的提升作用，且药效和同剂量的芪胶升白胶囊相当。随着白细胞的进一步降低，西兰花提取物组仍有明显升白细胞作用的功效。目前市场上销售的西兰花蛋白粉没有相关作用。本发明还涉及上述西兰花提取物的制备方法，其步骤包括：(1)将西兰花的茎、叶和花球三种器官中的至少一种进行粉碎；(2)粉碎后的西兰花经过内源酶系统酶解；(3)酶解后的西兰花加入溶剂提取并过滤得滤液；(4)滤液干燥后得到西兰花提取物。上述步骤(2)所述内源酶系统酶解条件如下：时间60±20分钟；温度为30±10℃。步骤(3)所述溶剂为水、乙醇或两者的混合物。步骤(4)所述的干燥方法为减压浓缩、冷冻干燥或喷雾干燥等。以下实施例是对本发明的进一步说明但不限制本发明。具体实施方式实施例1西兰花提取物的制备1用粉碎机将整株西兰花打碎，然后取1kg于30℃放置60分钟，加入2倍体积的水搅拌30分钟，用纱布过滤得滤液1.0l，滤液通过冷冻干燥得到28g西兰花提取物1。实施例2西兰花提取物的制备2用粉碎机将1kg西兰花茎叶打碎，然后30℃放置60分钟后，加入2倍体积的水搅拌30分钟，用纱布过滤得滤液1.0l，滤液通过冷冻干燥得到25g西兰花提取物2。实施例3西兰花提取物的制备3用粉碎机将整株西兰花打碎，然后取1kg于30℃放置60分钟后，加入2倍体积的乙醇搅拌30分钟，用纱布过滤得滤液1.0l，滤液使用真空浓缩得到30g西兰花提取物3。实施例4西兰花提取物升白实验通过环磷酰胺对balb/c小鼠造模，使其白细胞数目下降，然后考察芪胶升白胶囊、西兰花蛋白粉(浙江天莱生物科技有限公司)和本发明制备的西兰花提取物(实施例1和2)对小鼠白细胞数目的影响。(1)造模每天腹腔注射50mg/kg环磷酰胺一次，,连续2天，每周造模1次，连续造模3周。正常组腹腔注射生理盐水；模型组、阳性对照组以及受试物组腹腔注射环磷酰胺。(2)动物分组和给药balb/c小鼠，spf级，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，balb/c小鼠72只，19-21g，雄性，随机分成6组，每组12只(见下表)。表1动物分组和给药组别剂量(mg/kg)给药体积给药途径给药周期正常对照组-20灌胃21天模型组-20灌胃21天芪胶升白胶囊60020灌胃21天西兰花蛋白粉60020灌胃21天西兰花提取物160020灌胃21天西兰花提取物260020灌胃21天西兰花提取物360020灌胃21天(3)测定第二周造模后的第5天，用血细胞分析仪(麦道尼克血细胞分析仪)检测小鼠尾静脉血的白细胞数；第三周造模后的第5天，用血细胞分析仪检测小鼠尾静脉血的白细胞数。(4)统计学方法实验所得的数据均以(mean±sd)表示，用t检验比较组间差异。(5)实验结果表2西兰花提取物对第二周造模后小鼠白细胞的影响(mean±sd)经t检验，结果显示，第二周造模后模型组小鼠的白细胞数目和正常组比较，有显著性差异，###p<0.001，说明造模成功；芪胶升白胶囊、西兰花提取物1、2和3中小鼠的白细胞数目与模型组比较有显著差异，**p<0.01，说明芪胶升白胶囊、西兰花提取物1、2和3均能提高小鼠的白细胞数目，且药效相近。西兰花蛋白粉没有相关作用。表3西兰花提取物对第三周造模后小鼠白细胞的影响(mean±sd)经t检验，结果显示，第三周造模后模型组小鼠的白细胞数目和正常组比较，有显著性差异，###p<0.001，说明造模成功；西兰花提取物1、2和3中小鼠的白细胞数目与模型组比较均有显著差异，**p<0.01，***p<0.001，说明西兰花提取物1、2和3均有提高免疫低下小鼠白细胞数目的作用，且其药效优于芪胶升白胶囊，西兰花蛋白粉没有相关作用。当前第1页12