一种用于治疗肺癌的中药口服液的制备方法及其质量控制方法与流程

1.本发明涉及一种用于治疗肺癌的中药口服液的制备方法其及质量控制方法， 属于医药技术领域。


背景技术：

2.人参为五加科植物人参panaxginseng c.a.mey.的干燥根和根茎，具有大补元 气、复脉固脱、补脾益肺、生津养血、安神益智之功效。用于体虚欲脱，肢冷脉 微，脾虚食少，肺虚喘咳，津伤口渴，内热消渴，久病虚赢，惊悸失眠，阳痿宫 冷。《神农本草经》记载人参补五脏，安精神，止惊悸，除邪气，明目，开心益 智”。现代药理研究发现，人参含有多种化学成分，有人参皂苷、参多糖、多肽、 脂肪酸、氨基酸、聚乙炔醇类等，具有增强免疫力、抗疲劳、抗病毒、辅助治疗 恶性肿瘤等功效。
3.以人参为原料，采用渗漉法提取有效成分制成人参口服液，具人参特异香气， 味微苦。具有大补元气、生津止渴的功效。用于体虚所致的身倦乏力、食欲不振、 心悸气短、失眠健忘等气虚症。
4.人参具有抗疲劳作用和增强免疫作用。王嵘等研究复方人参提取物缓解体力 疲劳的作用。通过对小鼠负重游泳时间、血清尿素、肝糖原、血乳酸的含量影响， 观察复方人参提取物缓解体力疲劳的作用。结果实验组的小鼠负重游泳时间明显 长于对照组，具有统计学意义(p＜0.05)。说明人参提取物可明显增强机体对运动 负荷的适应能力，抵抗疲劳的产生。周娅红研究显示，人参总皂苷(spg)120mg/kg 和240mg/kg剂量组可提高免疫低下小鼠脾指数和胸腺指数，其中高剂量的spg 能够对机体细胞免疫和体液免疫功能起到很好的保护。如spg两个剂量组可显著 提高环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠网状内皮系统的吞噬能力和单核
‑
巨噬细胞的 吞噬能力，对免疫低下小鼠的非特异性免疫功能有促进作用。
5.人参皂苷对恶性肿瘤的辅助治疗作用。邢建华等进行了人参皂苷诱导直肠癌 细胞凋亡的临床观察。结果治疗组用药后临床症状好转，23例(65.7％)可见大 部分癌细胞的超微结构形态与对照组相似，但在癌细胞间明显可见凋亡的癌细胞。 对照组临床症状无明显改善，电镜下可见坏死的癌细胞，未观察到凋亡的癌细胞。 提示人参皂苷对诱导直肠癌细胞凋亡有较好辅助作用。陈明伟等观察了人参皂苷 20(r)
‑
rg3对肺癌的临床辅助疗效。治疗组化疗同时服用人参皂苷20(r)
‑
rg3, 20mg,每日2次；对照组仅采用化疗，观察6～8周。结果治疗组有效率明显高 于对照组，生活质量有明显改善，体重增加，且心、肝、肾功能无明显变化。提 示人参皂苷20(r)
‑
rg3对肺癌有较好的辅助疗效。
6.薏苡仁，俗称薏米，薏米的干燥成熟种仁。薏米是一年生或多年生草本植物， 禾本科，是我国古老的药食两用珍贵品种，早在2002年就列入卫生部公布的食 品和药品的87种物质之一。李时珍在《本草纲目》中云：“消渴饮水，薏苡仁煮 粥食之。”又：“薏苡仁粥除湿热、利肠胃”。清
·
陈士铎《本草新编》记载薏苡仁， 味甘，气微寒，无毒。对于久病体虚、产后恢复期、老人、幼儿等用薏苡仁煮粥 服食，颇有裨益。薏苡仁具有利水渗湿、健脾止泻、除
痹、排脓、解毒散结的功 效，可用于水肿，脚气，小便不利，脾虚泄泻，湿痹拘挛，肺痈，肠痈，敖疣， 癌肿等症。薏苡仁含有多糖类化合物、酯类化合物及三萜类化合物等功能性成分， 具有抗肿瘤、抗炎、提高免疫力、降糖等药理作用。
7.薏苡仁具有提高免疫力的作用，叶敏研究薏苡仁水提液对环磷酰胺所致的免 疫低下小鼠进行免疫调节功能的研究，发现薏苡仁水提液能提高环磷酰胺所致免 疫低下小鼠的免疫器官重量指数、提升免疫抑制小鼠的白细胞数量及腹腔巨噬细 胞吞噬百分率和吞噬指数、增加血清溶血素含量及增加免疫抑制小鼠t淋巴细胞 酯酶阳性率，提示薏苡仁水提液能提高机体体液免疫和细胞免疫功能；苗明三观 察薏苡仁多糖对小鼠免疫功能的影响，对环磷酰胺建立免疫低下模型小鼠后灌胃 给予不同浓度薏苡仁多糖，结果显示，薏苡仁多糖可提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞 噬百分率和吞噬指数，促进溶血素及溶血空斑形成，促进淋巴细胞转化；周岩飞 等探讨薏苡仁油对小鼠免疫功能的影响，发现薏苡仁油高剂量能显著增强脾淋巴 细胞增值能力和迟发性变态反应，升高小鼠血清溶血素水平，增强小鼠抗体生成 能力和nk细胞活性，具有增强免疫作用。
8.薏苡仁具有缓解体力疲劳的作用。肖志勇为观察薏苡仁多糖的抗体力疲劳作 用，给予小鼠不同剂量薏苡仁多糖后，对小鼠进行负重游泳试验及血清尿素、血 乳酸和肝糖原的测定，结果薏苡仁多糖能延长小鼠负重游泳时间，降低运动时小 鼠血清尿素的产生、增加小鼠肝糖原的含量，提示薏苡仁多糖有提高机体对运动 负荷的适应能力，在延缓体力疲劳的产生和加速疲劳的消除方面有明显作用。
9.康莱特注射液是运用现代科学技术从中国传统中药薏苡仁中提取分离出的 一种抗癌活性化合物，具有利水渗透湿、健脾补肺、清热除痹、解毒散结之功效。 通过给与患者康莱特注射液，30天为一个疗程，治疗后观察患者血常规、kps评 分、t细胞亚群变化等变化。结果32例患者pr 9例，pd 13例，nc 10例。 kps评分从治疗前的平均52分改善至74分，12例疼痛患者中9例有所缓解， 2例完全缓解，总有效率75％。治疗前后肝肾功能无明显变化。治疗后t细胞 亚群变化显著。是目前肿瘤综合治疗中较为理想的抗肿瘤药物之一，值得进一步 研究和推广使用。
10.肺癌属于中医的咳嗽、肺痈、咯血、胸痛等范畴，古代文献有“肺积、息贲
”ꢀ
等称谓。《难经》言“肺咳之状咳而喘息，甚至唾血
……
而面浮气逆”。又云“肺之 积，名日息贲，在右胁下，复大如杯，久不已，令人洒淅寒热，喘咳，发肺壅”。 痰与饮同类异名，稠浊者为痰清稀者为饮，均由湿聚而成。但湿又源于脾，故有 脾为生痰之源，肺为储痰之器的说法。因此治疗痰病时，不宜单攻其痰，应重视 治其生痰之本。人参补脾益肺，生津养血，薏苡仁利水渗湿、健脾止泻。二者合 用，对于年老体弱、肺脾具虚的肺癌患者具有一定的疗效。
[0011]“用于治疗肺癌的中药组合物”由人参和薏苡仁二味药组成，其功能与主治为： 健脾益肺。用于肺癌属气虚诸症患者化疗时合并用药。可改善体虚乏力，气短自 汗，食欲不振等症。公开号为cn 1615917 a的专利申请公开了一种癌症晚期或 化疗时的合并用药及其制备方法，它涉及一种药物，由人参和薏苡仁两种组份组 成，两种组份的重量分数为人参一份，薏苡仁4
‑
6份。然而该发明中，用于治疗 肺癌的中药组合物加水配剂后，有明显量的油状物，呈黄色，且状态略粘，普通 过滤无法截留，严重影响了成品外观状态，浑浊不澄清。其制备方法采用将原料 粉碎成粗粉，加水煎煮。采用直接提取的方法，水液不能充分浸润内部，提取不 够充分。
[0012]
为此，本发明提出了一种用于治疗肺癌的中药组合物的制备方法及其质量控 制方法，本发明通过采用三相分离法，不仅稳定去除了油状成分，而且清除了较 多小颗粒固体残渣，大大减轻了后续的过滤负担，增加了过滤速度。通过膜分离 技术，去除了溶液中的微生物、蛋白等大分子杂质，大大提高了产品的质量和稳 定性。解决了原有工艺中药液浑浊、易沉淀的问题，优化了产品的工艺。其次， 本发明采用浸泡后提取的方式进行投料生产。提取液浓缩膏数量明显升高，有效 物质成分增加。


技术实现要素：

[0013]
本发明的目的是提供一种用于治疗肺癌的中药口服液的制备方法及其质量 控制方法。
[0014]
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
[0015]
本发明的一种用于治疗肺癌的中药口服液的制备方法，包括以下步骤：
[0016]
(1)低温粉碎、称量：
[0017]
将人参、薏苡仁在0
‑
15℃下进行低温粉碎成粗粉，过20
‑
100目筛，按照人 参0.5～3重量份，薏苡仁1～9重量份的比例称取药材粗粉；
[0018]
(2)煎煮、过滤：
[0019]
将粉碎后的药材分别用滤布包裹后浸泡于水中，然后加水煎煮两次，第一次 加两味药总重量11
‑
13倍量的水，煎煮1
‑
2h，第二次加加两味药总重量7
‑
9倍量 的水，煎煮0.5
‑
1.5h，合并煎液，滤过；
[0020]
(3)浓缩、回收乙醇：
[0021]
滤液浓缩至50℃时相对密度为1.18
‑
1.22，加浓缩后药液2倍体积量的乙醇， 静置10
‑
12小时，取上清液，回收乙醇至无醇味；
[0022]
(4)三相分离：
[0023]
加水至处方量，采用三相蝶式分离机进行三相分离，取重相液体，备用；
[0024]
(5)过滤：
[0025]
取重相液体，采用微滤机进行过滤，滤液采用截留分子量为30kda
‑
80kda中 空纤维陶瓷膜进行超滤，滤液备用；
[0026]
(6)灌封，灭菌：
[0027]
取步骤(5)得到的滤液，灌封，灭菌，即得。
[0028]
其中，优选的，按照人参1重量份，薏苡仁4～6重量份的比例称取药材粗 粉，更优选的，按照人参1重量份，薏苡仁5重量份的比例称取药材粗粉。
[0029]
其中，优选的，所述的三相蝶式分离机的生产能力为50～150l/h，温度为 20
‑
30℃，料进口压力为0
‑
0.1mpa，料出口压力为0～0.3mpa。
[0030]
其中，优选的，所述的微滤机的微滤膜孔径为0.2
‑
1.0μm，工作压力为 0.10
‑
0.6mpa，流速为5
‑
30t/h，温度为20
‑
60℃。
[0031]
其中，优选的，所述的超滤的跨膜压差为0.1
‑
0.5mpa，流速为1.0
‑
5.0m/s，温 度为50
‑
80℃。
[0032]
其中，优选的，所述的处方量为5重量份。
[0033]
其中，优选的，所述的制备方法还包括对制备得到的中药口服液进行质量控 制的
步骤，包括：
[0034]
(1)对照品溶液的制备：
[0035]
精密称取人参皂苷rg1、人参皂苷re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml 含人参皂苷rg10.5mg或人参皂苷re 0.4mg的对照品溶液，摇匀，即得；
[0036]
(2)供试品溶液的制备：
[0037]
精密量取制备得到的中药口服液20ml，置分流漏斗中，加10ml水，用三氯 甲烷提取2次，每次10ml，弃去三氯甲烷液，水溶液用饱和的正丁醇提取4次， 每次25ml，超声处理60min，过滤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；
[0038]
(3)测定：
[0039]
分别吸取两种对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，色 谱条件如下：
[0040]
填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；
[0041]
流动相：以体积比为99：400的乙腈
‑
0.05％磷酸溶液为流动相；
[0042]
检测波长：200～250nm；
[0043]
理论板数：按人参皂苷re峰计算应不低于2500。
[0044]
其中，优选的，步骤(3)中的检测波长为203nm。
[0045]
其中，优选的，所述的制备方法还包括对制备得到的中药口服液进行鉴别的 步骤，包括：
[0046]
(1)对人参的标志性成分人参皂苷re进行薄层鉴别，步骤如下：
[0047]
1)供试品溶液制备：
[0048]
取制备得到的中药口服液10ml，加水10ml，置分液漏斗中，用三氯甲烷提 取2次，每次10ml，弃去三氯甲烷液，水溶液用水饱和的正丁醇提取2次，每次 30ml，合并正丁醇液，加氨试液30ml，摇匀，放置分层，分取正丁醇液用水洗涤2次，每次40ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试 品溶液；
[0049]
2)对照品制备：另取人参皂苷re对照品，加甲醇制成每1ml含2ml的溶液， 作为对照品溶液；
[0050]
3)鉴别方法：
[0051]
按照薄层色谱法试验，吸取供试品和对照品溶液各5ul，分别点于同一硅胶g 薄层板上，以体积比为15：40：22：10的三氯甲烷
‑
乙酸乙酯
‑
甲醇
‑
水溶液10℃ 以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在 105℃加热至斑点显色清晰，分别在日光及365nm紫外光下检视，供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的斑点或萤火斑点；
[0052]
(2)对薏苡仁的标志性成分甘油三油酸酯进行了鉴别，步骤如下：
[0053]
1)对照品溶液的制备：
[0054]
取甘油三油酸酯对照品10mg，精密称定，置于10ml量瓶中，加石油醚制 成1ml含1mg的甘油三油酸酯的溶液，即得；
[0055]
2)供试品溶液的制备：
[0056]
取用于制备所述中药口服液的薏苡仁原料，粉碎，称取粉末1g，加石油醚 10ml，超
声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚1ml使之溶解，作为 供试品溶液；
[0057]
3)对照品药材溶液的制备：
[0058]
精密称取薏苡仁对照药材1g，加石油醚10ml，超声处理30min，滤过，滤 液蒸干，残渣加石油醚1ml使之溶解，作为薏苡仁对照药材溶液；
[0059]
4)鉴别方法：
[0060]
采用薄层色谱法，选择硅胶g为固定相，用0.5％w/w羧甲基纤维素钠溶液 为黏合剂，分别吸取甘油三油酸酯对照品溶液、供试品溶液、对照药材溶液各10 ul，点于硅胶g板上，用体积比为25：5：1的石油醚—乙酸乙酯—冰醋酸为展 开剂，展开至15cm，取出，晾干，喷以0.5％香草醛—98％浓硫酸乙醇溶液，在 105℃加热5min，置365nm紫外灯下检视，斑点应清晰可见，薏苡仁样品与对照 品及对照药材色谱在相应的位置上，显示相同的荧光斑点。
[0061]
进一步的，本发明还提出了按照以上任一项所述的方法制备得到的中药口服 液。以及
[0062]
所述的中药口服液在制备治疗肺癌及/或降低体重的药物中的应用。
[0063]
相较于现有技术，本发明的有益效果在于：
[0064]
1、传统中药注射液，由于机体对药物过敏、成分本身稳定性不佳、药物刺 激、输液操作不当，会产生一定的不良反应。本发明产品作为口服液制剂，安全 无毒副作用，且服用方法简单，是肺癌辅助治疗较好的药剂。
[0065]
2、本发明只选用人参、薏苡仁两味中药，通过煎煮、滤过、浓缩、醇沉、 配制、三相分离、滤过等步骤制得成品。所用原料少，工艺操作简单，适合工业 化生产。
[0066]
3、本发明产品健脾益肺，用于肺癌属气虚证患者化疗时合并用药，可明显 改善体虚乏力、气短自汗，食欲不振等症，无毒副作用，益于推广应用。
[0067]
4、本发明通过采用膜分离技术，增加超滤工艺，获得了澄清透明的液体， 去除了溶液中的微生物、蛋白等大分子杂质，大大提高了产品的质量和稳定性。 解决了原有工艺中药液浑浊、易沉淀的问题，优化了产品的工艺。改善了产品口 感。
具体实施方式
[0068]
为了更清楚地说明本发明实施过程中的技术方案，下面结合实施例对本发明 做进一步详细说明，所述实施例是对本发明的解释，而不是对本发明保护范围的 限制。
[0069]
实施例1用于治疗肺癌的中药口服液的制备
[0070]
(1)低温粉碎、称量：
[0071]
将人参、薏苡仁在5℃下进行低温粉碎成粗粉，过80目筛，按照人参1重量 份，薏苡仁5重量份的比例称取药材粗粉；
[0072]
(2)煎煮、过滤：
[0073]
将粉碎后的药材分别用滤布包裹后浸泡于水中，然后加水煎煮两次，第一次 加两味药总重量12倍量的水，煎煮1.5h，第二次加加两味药总重量8倍量的水， 煎煮1h，合并煎液，滤过；
[0074]
(3)浓缩、回收乙醇：
[0075]
滤液浓缩至50℃时相对密度为1.2，加浓缩后药液2倍体积量的乙醇，静置12小时，
取上清液，回收乙醇至无醇味；
[0076]
(4)三相分离：
[0077]
加水至处方量(5重量份)，采用三相蝶式分离机(生产能力100l/h，温度 20℃，料进口压力0.1mpa，料出口压力0.3mpa)进行三相分离，取重相液体， 备用；
[0078]
(5)过滤：
[0079]
取重相液体，采用微滤机进行过滤(微滤膜孔径在1.0μm，工作压力0.10mpa， 流速15t/h，温度50℃)，滤液采用截留分子量为50kda中空纤维陶瓷膜进行超滤 (跨膜压差0.3mpa，流速1.0m/s，温度50℃)，滤液备用；
[0080]
(6)灌封，灭菌：
[0081]
取步骤(5)得到的滤液，按照10ml/支灌封，灭菌，即得。
[0082]
实施例2用于治疗肺癌的中药口服液的制备
[0083]
(1)低温粉碎、称量：
[0084]
将人参、薏苡仁在10℃下进行低温粉碎成粗粉，过50目筛，按照人参2重 量份，薏苡仁5重量份的比例称取药材粗粉；
[0085]
(2)煎煮、过滤：
[0086]
将粉碎后的药材用滤布包裹后浸泡，加水煎煮两次，第一次加两味药总重量 11倍量的水，煎煮2h，第二次加两味药总重量7倍量的水，煎煮1.5h，合并煎 液，滤过；
[0087]
(3)浓缩、回收乙醇：
[0088]
滤液浓缩至50℃时相对密度在1.18
‑
1.22，加浓缩后药液2倍体积量的乙醇， 静置12小时，取上清液，回收乙醇至无醇味；
[0089]
(4)三相分离：
[0090]
加水至处方量(5重量份)，采用三相蝶式分离机进行三相分离(生产能力 100l/h，温度20℃，料进口压力0.1mpa，料出口压力0.3mpa)，取重相液体，备 用。
[0091]
(5)过滤：
[0092]
取重相液体，采用微滤机进行过滤(微滤膜孔径在1μm，工作压力0.10mpa， 流速15t/h，温度50℃)，滤液采用截留分子量为30kda中空纤维陶瓷膜进行超滤(跨膜压差0.3mpa，流速1.0m/s，温度50℃)，滤液备用。
[0093]
(6)灌封，灭菌：
[0094]
取上述滤液，按照10ml/支灌封，灭菌，即得。
[0095]
实施例3用于治疗肺癌的中药口服液的制备
[0096]
(1)低温粉碎、称量：
[0097]
将人参、薏苡仁在8℃下进行低温粉碎成粗粉，过100目筛，按照人参1.5 重量份，薏苡仁6重量份的比例称取药材粗粉；
[0098]
(2)煎煮、过滤：
[0099]
将粉碎后的药材用滤布包裹后浸泡，加水煎煮两次，第一次加两味药总重量 12倍量的水，煎煮1.5h，第二次加两味药总重量8倍量的水，煎煮1.0h，合并煎 液，滤过；
[0100]
(3)浓缩、回收乙醇：
[0101]
滤液浓缩至50℃时相对密度在1.18
‑
1.22，加乙醇2倍量，静置12小时，取 上清液，回收乙醇至无醇味；
[0102]
(4)三相分离：
[0103]
加水至处方量(5重量份)，采用三相蝶式分离机进行三相分离(速度120l/h， 温度20℃，料进口压力0.1mpa，料出口压力0.3mpa)，取重相液体，备用。
[0104]
(5)过滤：
[0105]
取重相液体，采用微滤机进行过滤(微滤膜孔径在0.45μm，工作压力0.10mpa， 流速10t/h，温度40℃)，滤液采用截留分子量为50kda中空纤维陶瓷膜进行超滤 (跨膜压差0.35mpa，流速2.0m/s，温度60℃)，滤液备用。
[0106]
(6)灌封，灭菌：
[0107]
取上述滤液，按照10ml/支灌封，灭菌，即得。
[0108]
实施例4用于治疗肺癌的中药口服液的制备
[0109]
(1)低温粉碎、称量：
[0110]
将人参、薏苡仁在10℃下进行低温粉碎成粗粉，过60目筛，按照人参2重 量份，薏苡仁7重量份的比例称取药材粗粉；
[0111]
(2)煎煮、过滤：
[0112]
将粉碎后的药材用滤布包裹后浸泡，加水煎煮两次，第一次加两味药总重量 12倍量的水，煎煮1.5h，第二次加两味药总重量8倍量的水，煎煮1h，合并煎 液，滤过。
[0113]
(3)浓缩、回收乙醇：
[0114]
滤液浓缩至50℃时相对密度在1.18
‑
1.22，加浓缩后药液2倍体积量的乙醇， 静置12小时，取上清液，回收乙醇至无醇味。
[0115]
(4)三相分离：
[0116]
加水至处方量(5重量份)，采用三相蝶式分离机进行三相分离(速度100l/h， 温度20℃，料进口压力0.05mpa，料出口压力0.2mpa)，取重相液体，备用。
[0117]
(5)过滤：
[0118]
取重相液体，采用微滤机进行过滤(微滤膜孔径在1μm，工作压力0.10mpa， 流速10t/h，温度60℃)，滤液采用截留分子量为80kda中空纤维陶瓷膜进行超滤 (跨膜压差0.4mpa，流速3.0m/s，温度50℃)，滤液备用。
[0119]
(6)灌封，灭菌：
[0120]
取上述滤液，按照10ml/支灌封，灭菌，即得。
[0121]
实施例5用于治疗肺癌的中药口服液的制备
[0122]
(1)低温粉碎、称量：
[0123]
将人参、薏苡仁在10℃下进行低温粉碎成粗粉，过80目筛，按照人参2.5 重量份，薏苡仁9重量份的比例称取药材粗粉；
[0124]
(2)煎煮、过滤：
[0125]
将粉碎后的药材用滤布包裹后浸泡，加水煎煮两次，第一次加两味药总重量 13倍量的水，煎煮1.5h，第二次加两味药总重量8倍量的水，煎煮1h，合并煎 液，滤过。
[0126]
(3)浓缩、回收乙醇：
[0127]
滤液浓缩至50℃时相对密度在1.18
‑
1.22，加浓缩后药液2倍体积量的乙醇， 静置12小时，取上清液，回收乙醇至无醇味。
[0128]
(4)三相分离：
[0129]
加水至处方量(5重量份)，采用三相蝶式分离机进行三相分离(速度100l/h， 温度20℃，料进口压力0.1mpa，料出口压力0.3mpa)，取重相液体，备用。
[0130]
(5)过滤：
[0131]
取重相液体，采用微滤机进行过滤(微滤膜孔径在1μm，工作压力0.10mpa， 流速10t/h，温度60℃)，滤液采用截留分子量为30kda中空纤维陶瓷膜进行超滤 (跨膜压差0.4mpa，流速3.0m/s，温度60℃)。
[0132]
(6)灌封，灭菌：
[0133]
取上述滤液，按照10ml/支灌封，灭菌，即得。
[0134]
实施例6方法的优化及建立
[0135]
1.原料粉碎条件的选择
[0136]
用于治疗肺癌的中药口服液，所用原料人参和薏苡仁需进行粉碎处理。根据 不同粉碎方式下，粗粉中人参皂苷含量(人参皂苷rg1、人参皂苷re)的比较， 选择合适的粉碎条件，实验结果如下所示。
[0137]
表1不同粉碎方式对产品的影响
[0138][0139]
结论：从实验结果来看，与常温粉碎比较，低温粉碎条件下的有效成分人参 皂苷rg1和人参皂苷re的含量更高。由此说明低温粉碎优于常温粉碎。由于常 温粉碎存在粉碎效率低、软化、易挥发组分损失、氧化等问题，本发明采用低温 粉碎技术可以避免上述缺陷，保持药物的有效成分和组分不变，同时提高物料的 使用质量和效率。
[0140]
2.原料投料方式的选择
[0141]
用于治疗肺癌的中药组合物，采用药材粉碎成粗粉，水煎提取。根据不同投 料方式下，成品的浓缩膏重量，选择合适条件，实验结果如下所示。
[0142]
表2不同投料方式对产品的影响
[0143][0144][0145]
第一种：将药粉直接投入冷水中，再加热，静置提取。
[0146]
第二种：将罐中水放出部分，取适当容器，将药粉投入水中，充分搅拌后， 再静置浸泡固定时间后，将药液复投入多功能提取罐中进行加热提取。
[0147]
结论：从实验结果来看，第一种投料方式，提取液浓缩膏数量较低，可能是 由于药粉吸水后聚集成团，水液不能充分浸润内部，导致提取不够充分。第二种 方式，提取液浓缩膏数量明显升高，有效物质成分增加。因此选择浸泡后提取的 方式进行投料生产。
[0148]
本发明通过对比散煎和包煎两种提取方式的对比，选择将粉碎后的药材用滤 布包裹后浸泡，加水煎煮。实验结果如下所示。
[0149]
表3不同煎煮方式对产品的影响
[0150]
实验序号12处方量20kg20kg提取方式散煎提取包煎提取成品相对密度1.0141.014成品ph值5.615.60成品含量4.0mg/10ml4.1mg/10ml浓缩膏重23.0kg23.8kg状态提取液粘稠，不易过滤提取液澄清，易过滤
[0151]
第一种：将粉碎后药材投入水中，充分搅拌后，再静置浸泡固定时间后，将 药液复投入多功能提取罐中进行加热提取。
[0152]
第二种：将粉碎后的药材用滤布包裹，再静置浸泡固定时间后，复投入多功 能提取罐中进行加热提取。
[0153]
结论：从实验结果来看，采用滤布包煎提取，提取液浓缩膏数量和有效物质 含量略高一些。产品散煎提取后，汤液粘稠，采用纱布包煎即可阻挡粘液透出， 使汤液澄清，利于下一步过滤和浓缩操作。因此综合考虑选择包煎方式提取。
[0154]
3.三相分离工艺
[0155]
药物粗粉提取浓缩后加水，有明显量的油状物，呈黄色，且状态略粘，普通 过滤无法截留，严重影响了成品外观状态，浑浊不澄清。因此采用蝶式分离机， 增加了三相分离(液
‑
液
‑
固)工艺，调节速度50～150l/h，温度20
‑
30℃，料进口 压力0.05
‑
0.1mpa，料出口压力0.05～0.3mpa，实验结果如下所示：
[0156]
表4三相分离实验结果
[0157]
实验序号相对密度ph含量(mg/10ml)(rg1+re)11.0145.64.021.0116.03.9
[0158]
结论：两批样品质量指标均符合质量标准。通过采用三相分离，不仅稳定去 除了油状成分，而且清除了较多小颗粒固体残渣，大大减轻了后续的过滤负担， 增加了过滤速度。
[0159]
4.超滤工艺
[0160]
药物粗粉提取液经过三相分离(液
‑
液
‑
固)工艺，得重相液体，采用微滤机 进行过滤(微滤膜孔径在0.45μm，工作压力0.10mpa，流速10t/h，温度40℃)， 制得淡黄色澄清透明液体。备用。
[0161]
取上述滤液，分别经过10kda、30kda、50kda、80kda、100kda的中空纤维 陶瓷膜进行膜分离过滤(跨膜压差0.35mpa，流速2.0m/s，温度70℃)，收集滤 液。测定不同截留分子量膜分离后药液中活性成分的含量。
[0162]
表5不同截留分子量对膜分离后药液的影响
[0163][0164]
结论：从以上结果可以看出，随着截留分子量的增加，药液中含固量逐渐增 加，但样品中人参皂苷rg1和人参皂苷re含量变化不大，这说明膜分离后，去 除了溶液中大部分杂质。从表中可以看出，当截留分子量低于30kda，有效成分 含量下降较多，截留分子量在100kda，固形物含量与对照组相差不大，因此选 择截留分子量30kda
‑
80kda的中空纤维陶瓷膜进行超滤。通过超滤工艺，获得了 澄清透明的液体，去除了溶液中的微生物、蛋白等大分子杂质，大大提高了产品 的质量和稳定性。解决了原有工艺中药液浑浊、易沉淀的问题，优化了产品的工 艺，改善了产品口感。
[0165]
实施例7质量控制方法
[0166]
1、用于治疗肺癌的中药口服液含量测定
[0167]
对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷rg1、人参皂苷re对照品适量，加 甲醇分制成每1ml含人参皂苷rg10.5mg、人参皂苷re0.4mg的溶液，摇匀，即 得。
[0168]
供试品溶液的制备：精密量取制备得到的中药口服液20ml，置分液漏斗中， 加10ml水，用三氯甲烷提取2次，每次10ml,弃去三氯甲烷液，水溶液用饱和的 正丁醇提取4次，每次25ml，超声处理60min，过滤，正丁醇液燕干，残渣加甲 醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
[0169]
测定：吸取上述两种对照品溶液与供试品溶液各10ul,注入液相色谱仪，测定， 色谱条件如下：
[0170]
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－0.05％磷酸溶液(99:400)为流 动相；检测波长为203mm。理论板数按人参皂苷re峰计算应不低于2500。
[0171]
本品每10ml含人参皂苷rg1(c42h72o14)和人参皂苷re(c48h82o18)的总 量不少于2.5mg。
[0172]
2、超声处理方法
[0173]
供试品溶液的制备中，水溶液用饱和的正丁醇提取4次。本发明同时对正丁 醇提取的不同处理方法进行比较，实验结果如下，
[0174]
表6超声处理实验结果
[0175][0176]
结论：通过实验结果比较，采用了超声处理，该方法提高了人参皂苷的得率， 确保了产品的检验准确性。
[0177]
3、一种用于治疗肺癌的中药口服液的鉴别
[0178]
对人参的标志性成分人参皂苷re进行了薄层鉴别，方法如下：
[0179]
供试品溶液的制备：取制备得到的中药口服液10ml，加水10ml，置分液漏 斗中，用三氯甲烷提取2次，每次10ml，弃去三氯甲烷液，水溶液用水饱和的正 丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，加氨试液30ml，摇匀，放置分层， 分取正丁醇液用水洗涤2次，每次40ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇 1ml使溶解，作为供试品溶液。
[0180]
对照品溶液的制备：另取人参皂苷re对照品，加甲醇制成每1ml含2ml的 溶液，作为对照品溶液。
[0181]
鉴别方法：照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅 胶g薄层板上，以三氯甲烷
‑
乙酸乙酯
‑
甲醇
‑
水(15：40：22：10)10℃以下放置 的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加 热至斑点显色清晰，分别在日光及紫外光(365nm)下检视。供试品色谱中，在 与对照品色谱相应的位置上，相同颜色的斑点或萤火斑点。
[0182]
对薏苡仁的标志性成分甘油三油酸酯进行了鉴别，方法如下：
[0183]
对照品溶液的制备：取甘油三油酸酯对照品10mg，精密称定，置于10ml 量瓶中，加石油醚制成1ml含1mg的甘油三油酸酯的溶液，即得。
[0184]
供试品溶液的制备：取薏苡仁样品，粉碎，称取粉末1g，加石油醚10ml， 超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚1ml使之溶解，作为薏苡仁 对照药材溶液。
[0185]
对照品药材溶液的制备：精密称取薏苡仁对照药材1g，加石油醚10ml，超 声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚1ml使之溶解，作为供试品溶 液。
[0186]
鉴别方法：采用薄层色谱法。选择硅胶g为固定相，用0.5％羧甲基纤维素 钠溶液为黏合剂，分别吸取甘油三油酸酯对照品溶液、供试品溶液、对照药材溶 液各10l，点于硅胶g板上，用石油醚—乙酸乙酯—冰醋酸(25：5：1)为展开 剂，展开至15cm，取出，晾干，喷以0.5％香草醛—浓硫酸乙醇溶液。在105℃ 加热5min，置紫外灯(365nm)下检视，斑点清晰可见，薏苡仁样品与对照品及 对照药材色谱在相应的位置上，显示相同的荧光斑点。
[0187]
实施例8临床试验
[0188]
一、一般资料
[0189]
选取2018年7月至2019年7月底收治的肺癌患者60例，随机分为对照组 与实验组各30例。对照组男20例，女10例，年龄40～75岁；实验组男18例， 女12例，年龄40～77岁。
[0190]
二、实验方法
[0191]
对照组病例给予单纯常规化疗，实验组在常规化疗的基础上同时服用实施例 1制
备得到的中药口服液，每次1支(10ml)，一日3次，口服。两组采取随机原 则抽取病例。两组每月为一疗程，观察2个疗程。
[0192]
三、观测指标
[0193]
观察对比两组治疗总有效率，不良反应发生率，临床治疗有效率根据wto 规定的评定标准进行评价，即完全缓解、部分缓解、稳定、进展。
[0194]
总有效率＝完全缓解率+部分缓解率
[0195]
四、观察结果
[0196]
结果如表7和表8所示：
[0197]
表7两组患者治疗总有效率比较
[0198]
组别例数完全缓解部分缓解稳定进展有效率实验组3011106370％对照组30879650％
[0199]
表8两组患者不良反应发生率比较
[0200]
组别例数白细胞下降肝功能异常恶心呕吐发生率实验组300000％对照组301213％
[0201]
结论：实验组临床有效率明显高于对照组，治疗中未发现毒副作用和不良反 应。说明本发明产品是肺癌辅助治疗的较好的药剂。
[0202]
实施例9人体试验
[0203]
一、受试者入选标准：单纯性肥胖人群，成人bmi大于等于30，或总脂肪 百分率达到男大于25％，女大于30％的自愿受试者。排除标准：(1)合并有心、 肝、肾和造血系统等严重疾病，精神病患者；(2)短期内服用与受试功能有关的药 品或食品，影响结果判断者；(3)未按规定食用受试样品，无法判断功效或资料不 全影响功效或安全性判断者。
[0204]
二、试验方法：纳入受试者60例，试食组30例，对照组30例，受试者试 验前血常规、尿常规、大便常规、肝肾功能、胸透、心电图等检查，均在正常范 围内，实施前两组患者年龄、性别、体胖时间、体重指数和百分率指数均无明显 差异(p>0.05)；试食组给予实施例1制备得到的中药口服液，每次1支(10ml)， 一日3次，口服，时间60天，对照组给予空白对照。按照双盲法进行试食试验。
[0205]
表9两组试食前后体重变化
[0206]
组别例数试食前(kg)试食后(kg)试食组3086.56
±
8.1979.60
±
7.78对照组3084.78
±
10.7984.65
±
9.79
[0207]
试验结论：临床试验表明，本发明制剂具有很好的降低体重的作用，能够在 临床中应用于肥胖患者。