一种新型盐制知母的炮制工艺方法

1.本发明涉及中药炮制加工领域，具体是一种新型盐制知母的炮制工艺方法。


背景技术：

2.知母是一种百合科植物知母anemarrhena asphodeloides bge.的干燥根茎(按照药典来源)，功能为清热泻火，滋阴润燥。常用饮片规格有生知母和盐知母，生知母常用于用于外感热病，高热烦渴，肺热燥咳，骨蒸潮热，内热消渴，肠燥便秘。知母盐炙后可引药入肾，增强知母滋肾阴、泻相火的作用。
3.根据2015年版《中国药典》规定，知母饮片的制备方法为知母除去须根和泥沙，或除去外皮，晒干后，洗净，润透，切厚片，干燥，去毛屑。盐知母为知母饮片的盐炙品，其操作方法为取知母待炮炙品，加盐水拌匀，闷透，置炒制容器内，以文火加热，炒至规定的程度时，取出，放凉。由此可见，无论生知母或盐知母，须根均作为非药用部位去除。
4.中药非药用部位通常为具有毒副作用或质重效差的部位，知母须根在知母根茎中的占比比较大，其须根量占根茎采收量的30％左右，但有研究表明须根中化学成分种类和主根基本相同，总黄酮和总皂苷在须根和主根中都具有很高含量且具有很好的药理作用。同时，具有滋阴作用的芒果苷甚至高于主根。由此可见，知母须根不属于典型质重效差的部分，作为非药用部位除去是一种资源浪费，但将须根直接作为饮片使用影响饮片的外观性状。


技术实现要素：

5.本发明提供一种充分利用知母须根的盐知母炮制方法。该方法不影响饮片的外观性状，可以大大增加活性成分芒果苷、总黄酮和总皂苷的含量，且不增加盐知母的炮制工序。
6.本发明上述目的通过以下方案实现如下：
7.一种提高盐知母有效成分芒果苷和总黄酮含量的新型工艺方法，包括如下步骤：
8.(1)选用新鲜的知母药材，知母主根与须根分离
9.(2)取知母须根3.5g，加入50ml去离子水，榨汁得到约36ml的汁液，每36ml汁液中加入食盐0.36g溶解，得到须根盐汁液，待用。
10.(3)取步骤1的主根，切厚片(2-4mm)
11.(4)将适量步骤2的须根盐汁液浸泡步骤3的知母厚片，每10g知母厚片加入12ml须根盐汁液，待汁液吸尽后，放入热锅中炒制，文火炒干，热锅的设定参数为入锅温度100℃，炒制功率400w，时间350s。即可得到新型的盐知母饮片。
12.(5)将制得的步骤4的新型盐知母饮片放于干燥器中备用。
13.以下通过实验数据说明本发明的有益效果为：本发明将知母须根的汁液来浸泡主根的厚片，能够充分利用资源，提高知母须根的利用率，避免资源的浪费；同时提高了盐知母饮片的有效成分芒果苷、总皂苷和总黄酮的含量，最大程度地
保留了知母根茎的有效成分；得到的新型盐知母饮片质量稳定，新型炮制工艺操作步骤简单方便，便于产业化生产。
附图说明
22.图1为芒果苷标准品hplc图谱。
23.图2为传统盐知母芒果苷hplc图谱。
24.图3为新型盐知母芒果苷hplc图谱。
25.图4为芒果苷标准曲线
26.图5为知母皂苷a-iii标准曲线
具体实施方式
27.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
28.实施例1：传统盐知母饮片制备工序
29.取知母根茎，除去须根和泥沙，晒干后，称取主根，切厚片，在34℃烘箱中，20h烘干，取出来晾凉，得到生知母饮片。取0.14g食盐，加入到3ml水中，即得盐水。取6g生知母饮片与所得的盐水混合均匀，待盐水被吸尽后，放入热锅中用文火炒制，热锅的参数为100℃，炒制功率400w，时间500s，炒至表面微黄，取出，晾干，称重，
30.实施例2：新型盐知母饮片制备工序
31.将知母根的主根与须根分离，称取须根3.5g，加入50ml水，用榨汁机榨汁，取得36ml汁液，在得到的汁液中加入0.23g食盐，得到须根的盐汁液。将知母主根切成厚片(2-4mm)，取10g的知母厚片，浸泡到12ml的须根盐汁液中，待汁液吸尽后，放入热锅中炒制，文火炒干，热锅的设定参数为入锅温度100℃，炒制功率400w，时间350s，炒至表面颜色加深，取出，晾干，称重即得。
32.芒果苷含量测定
33.(1)对照品溶液的制备：
34.取芒果苷对照品适量，精密称定，加稀乙醇(50ml纯乙醇、50ml去离子水混匀)制成每1ml含50μg的溶液，即得。
35.(2)供试品的制备：
36.精密称取传统盐知母和新型盐知母饮片样品粉末各0.1g，加入25ml容量瓶，用稀乙醇定容至刻度，超声处理(功率400w，频率40khz)30min，过滤，取续滤液5ml，作为供试液。
37.(3)色谱条件及系统适应性：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.2％冰醋酸水溶液(15∶85)为流动相；检测波长为258nm。
38.将上述制备好的对照品溶液(芒果苷标准品)、传统盐知母溶液和新型盐知母溶液。分别按上述色谱条件进行芒果苷含量测定，所得hplc图谱分别见图1、图2、图3。
39.(4)标准曲线：
40.精密吸取对照品溶液2.5ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、8.0ml分别置于10ml容量瓶中，用70％的乙醇稀释至刻度，定容，摇匀。分别取以上所述溶液，在紫外分光光度计258nm下测定其紫外吸收，以溶液浓度与吸收度比值进行回归，得到回归方程为：y＝0.0752x+0.011，r2＝0.9998，说明芒果苷的浓度在2.75μg/ml～8.8μg/ml范围内线性关系较好。标准曲线见图4。
41.总黄酮含量测定
42.(1)知母总黄酮供试液的制备：
43.精密称取知母主根待测样品粉末0.5006g，加入100ml容量瓶，用70％乙醇定容至刻度，超声处理30min，过滤，用1000μl移液枪吸取续滤液(前3ml不取)500μl，加入10ml容量瓶，用70％乙醇定容至刻度，摇匀，作为供试液。
44.(2)芒果苷对照品溶液的制备：精密称取芒果苷标准品0.00011g，加入100ml容量瓶，用70％的乙醇定容至刻度摇匀即可。
45.(3)测定波长
46.知母总黄酮及芒果苷对照品的最大吸收波长的选择258nm，分别取供试液和对照品溶液进行紫外全波长扫描，知母总黄酮的最大吸收波长为258nm，芒果苷的紫外最大吸收波长为258nm。
47.(4)含量测定方法
48.分别取供试品溶液和对照品溶液，在258nm下测定溶液的紫外吸收。
49.(5)标准曲线
50.精密吸取对照品溶液2.5ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、8.0ml分别置于10ml容量瓶中，用70％的乙醇稀释至刻度，定容，摇匀。分别取以上所述溶液，在紫外分光光度计258nm下测定其紫外吸收，以溶液浓度与吸收度比值进行回归，得到回归方程为：y＝0.0752x+0.011，r2＝0.9998，说明芒果苷的浓度在2.75μg/ml～8.8μg/ml范围内线性关系较好。标准曲线见图4。
51.总皂苷含量测定：
52.(1)知母皂苷aiii对照品溶液的制备：
53.精密称取知母皂苷aiii标准品0.00011g，加入100ml容量瓶，用70％乙醇定容，摇匀，即为对照品溶液。
54.(2)供试品溶液的制备：
55.精密称取知母主根粉末0.5006g，加入100ml容量瓶，用70％乙醇定容至刻度，超声处理30min，过滤，取续滤液，用移液管移取25ml，置入50ml圆底烧瓶，在旋转蒸发仪上50℃水浴减压挥去乙醇，加10ml去离子水溶解，用水饱和正丁醇20ml(100ml正丁醇、50ml去离子水加入分液漏斗摇匀，静置分层，下层水，上层为水饱和正丁醇)萃取三次(上层为正丁醇提取液倒入100ml圆底烧瓶，下层继续萃取)，在旋转蒸发仪上70℃水浴减压挥去正丁醇，用少量甲醇溶解，定容至10ml容量瓶中，即为供试品溶液。
56.(3)测定方法：
57.用移液枪吸取100μl供试品溶液置于试管，在70℃水浴锅中挥去甲醇，加入浓硫酸2ml，然后在80℃水浴锅中加热30min，立即放入冰水浴，加入8ml甲醇缓慢摇匀，放置30min，
做为待测液，用紫外分光光度计在279nm下测定其吸光度。
58.(4)标准曲线：
59.精密吸取对照品溶液600μl、1000μl、1200μl、1400μl、1600μl分别置于试管中，在70℃水浴锅中挥去甲醇，加入浓硫酸2ml，然后在80℃水浴锅中加热30min，立即放入冰水浴，加入8ml甲醇缓慢摇匀，放置30min后，用紫外分光光度计在279nm下测定这五份待测液的紫外吸收。以溶液浓度与吸收度比值进行回归，得到回归方程为：y＝0.0297x-0.0255，r2＝0.9992，说明知母皂苷a-iii的浓度在12μg/ml～32μg/ml范围内线性关系较好，见图5。
60.上述发明内容中的含量测定方法，测定各实施例中芒果苷、总黄酮和总皂苷的含量，均采用同一批生知母进行炮制。每组数值为个样的平均值，测定分析对比结果见下表
61.表1 芒果苷、总黄酮和总皂苷的含量
[0062][0063]
从上述实验表格数据，可以得出相比于传统的盐知母，新型盐知母的总黄酮、总皂苷和芒果苷含量都在很大程度上提高了。通过本发明所述炮制方法，提高知母须根的利用率，避免资源的浪费。
[0064]
以上所揭露的仅为本发明实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，本领域普通技术人员可以理解实现上述实施例的全部或部分流程，并依本发明权利要求所作的等同变化，仍属于发明所涵盖的范围。