一种壳聚糖缓释钙制剂及其制备方法

1.本发明属于保健食品技术领域，涉及一种用于治疗和预防缺钙的补钙制剂，特别涉及一种能持久补钙、增加骨密度的壳聚糖缓释钙制剂及其制备方法。


背景技术：

2.骨质疏松症是一种以低骨量和骨组织微结构破坏为特征，导致骨骼脆性增加和易发生骨折的全身性疾病，是一种老年人的常见病。骨质疏松症危害着全球大约三分之一50岁以上的女性和五分之一50岁以上的男性。随着人口平均寿命的增加，骨骼疾病越来越威胁到人们的健康。
3.国内外医学界一致认为形成骨质疏松、骨质增生的主要原因是人体长期缺钙引起的，对于这种疾病，目前主要采用补钙方法进行预防和治疗。
4.国内市场上补钙产品众多，但多以无机补钙制剂为主，这些无机补钙制剂用于治疗骨质疏松、增生，存在不易被人体吸收的问题。如以牡蛎、蚌壳为原料，经高温灼烧制成钙混合物，其主要成份为氧化钙、氢氧化钙和少量碳酸钙，这些无机钙盐基本上微溶或不溶于水，不易被人体吸收，而且存在一定的毒性。
5.现有的补钙产品还有一些有机补钙制剂，这些有机补钙制剂中含有钙沉积素，能加速钙在骨骼上的沉积，但由于多数有机补钙制剂中含钙量较低，如葡萄糖酸钙含钙量为9％，乳酸钙为12％，难以使已经钙化的软组织恢复原状。加之，体内含有磷、硫、氯等酸性成分会和有机钙结合，一般的有机补钙成分进入体内突释严重，无法维持体内钙浓度持续高位水平，导致补钙效果不明显。


技术实现要素：

6.本发明的目的旨在于克服现有技术的缺陷，提供了一种壳聚糖缓释钙制剂及其制备方法。
7.本发明所述的壳聚糖缓释钙制剂，主要含有如下重量份的组分：
8.牦牛壮骨粉0.1-30份、葡萄糖酸钙10-60份、盐酸氨基葡萄糖1-20份、软骨素10-60份、盐酸赖氨酸1-20份、壳聚糖钙缓释微球10-90份、辅料0.1-100份；
9.其中，壳聚糖钙缓释微球是将1-30份的壳聚糖与无水乙醇按一定重量比混合，加入0.1-10份的香草醛，搅拌均匀后再加入含醋酸0.1-15份的2wt％醋酸水溶液，完全反应得到香草醛改性壳聚糖；将10-60份的葡萄糖酸钙与无水乙醇溶液混合得到葡萄糖酸钙乙醇溶液，再与香草醛改性壳聚糖混合均匀、加热60℃反应2小时，即得香草醛壳聚糖钙缓释微球混悬液，再与含海藻酸钠1-10份的2wt％海藻酸钠水溶液混合后，添加含氯化钙0.1-10份的2wt％氯化钙水溶液，混合均匀，反应完成后去除溶剂，形成沉淀，经抽滤并干燥得到。
10.本发明所述的制剂为片剂、包衣片剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂或口服液剂。
11.本发明的壳聚糖缓释钙制剂的功效说明：
12.本发明的壳聚糖缓释钙制剂中的葡萄糖酸钙、壳聚糖钙缓释微球和牦牛壮骨粉，
是作为治疗和预防缺钙的补钙剂。其中葡萄糖酸钙是能溶于热水的有机钙盐，与同类有机补钙产品相比较，葡萄糖酸钙含钙量相对较高，水溶性最好，且化学性质稳定，它在胃肠道中呈离子状态，水溶液接近中性，不刺激肠胃，形成的离子钙能很快被人体吸收，从而有利于增加骨密度。壳聚糖钙缓释微球是负载葡萄糖酸钙这一水溶性钙的载体，实现缓慢释放钙离子的作用。牦牛壮骨粉作为有机钙的辅助钙源，是以牛骨髓为原料经加工制成，可以补充体内所需要的软骨素、维生素、卵磷脂等物质，从而达到增强骨骼、调理肠胃、提高免疫力的功效。
13.本发明选用壳聚糖钙缓释微球作为葡萄糖酸钙的缓释载体，是基于以下几点考虑：壳聚糖是自然界中存在的唯一碱性多糖，本身具有抗癌、提高免疫力的功效。此外一方面壳聚糖分子链上含有氨基可以与作为食用香精的香草醛上的醛基形成交联网络结构，将水溶性葡萄酸钙包裹起来而延缓其释放；另一方面壳聚糖上带有正电荷氨基与海藻酸钠带有的负电荷羧基间通过静电相互作用形成复凝聚物，促使水溶性葡萄糖酸钙镶嵌在凝聚物网络空隙中。壳聚糖钙缓释微球在这两种交联网络的叠加作用下，可对钙离子形成优良的缓释效果。
14.本发明的壳聚糖缓释钙制剂中的盐酸氨基葡萄糖，能促进人体粘多糖的合成，提高关节骨液的黏性，改善关节软骨的代谢；通过剌激粘多糖的生化合成及增加骨骼钙质的摄取量，提高软骨组织的代谢功能与营养，亦能改善及增强滑膜液的粘稠度，增加滑膜液合成，增强关节润滑功能，可以治疗风湿性关节炎引起的骨关节病变。
15.本发明的壳聚糖缓释钙制剂中的软骨素，是连接在蛋白质上的形成蛋白聚糖的一类糖胺聚糖，和盐酸氨基葡萄糖配合使用具有一定的止痛、促进软骨再生的功效，能够减少骨关节炎患者的疼痛，改善关节功能、减轻关节肿胀和积液，能够把水分吸收到蛋白多糖的分子内，使得软骨变厚并增加关节内的滑膜液合成量，从而保护软骨并减轻软骨的磨损和退变。
16.本发明的壳聚糖缓释钙制剂中的盐酸赖氨酸，作为人体必需氨基酸，可以促进蛋白质的合成，促进钙的吸收和利用，具有提高智力、促进生长、增加体重，帮助产生抗体、提高免疫力的功效。
17.并且通过体外钙离子缓释实验、骨密度实验、急性毒性试验以及30天喂养实验可知，本发明的壳聚糖缓释钙制剂的功效确切、安全无毒，可以长期服用，持久补钙。
18.综上所述，本发明的壳聚糖缓释钙制剂是由牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素硫酸盐或盐酸盐、盐酸赖氨酸、壳聚糖钙缓释微球为主要原料制成的具有治疗和预防缺钙的产品。其中，葡萄糖酸钙是常用的补钙剂，可以直接补充钙；壳聚糖钙缓释微球与葡萄糖酸钙配伍，通过持久缓慢释放钙离子来维持体内钙浓度持续高位水平，来促进钙吸收、减少钙流失，有效提升补钙效果；牦牛壮骨粉是协同补钙；盐酸氨基葡萄糖能够改善骨代谢和骨营养；软骨素硫酸盐或盐酸盐具有运送材料或支撑材料形成骨骼的重要作用；盐酸赖氨酸能提高钙的吸收及其在体内的积累，增强骨密度。从而本发明通过直接补充钙、持久缓慢释放钙离子来促进钙吸收、减少钙流失、以及改善骨代谢和骨营养等多种手段并用，实现治疗和预防缺钙的作用，增强补钙效果。
19.本发明所述的壳聚糖缓释钙制剂的制备方法，包括如下步骤：
20.过筛：常温常压下将牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨
酸及辅料分别过设计目数的筛网；
21.称量、混合:将筛分后的牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨酸，按照设计的重量进行称重并混合均匀得a粉；
22.壳聚糖钙缓释微球制备：将设计重量份的壳聚糖与无水乙醇按一定重量比混合，加入设计重量份的香草醛，搅拌均匀后再加入设计重量份的醋酸水溶液，完全反应得到香草醛改性壳聚糖；将设计重量份的葡萄糖酸钙与无水乙醇溶液混合得到葡萄糖酸钙乙醇溶液，再与香草醛改性壳聚糖混合均匀、加热60℃反应2小时，即得香草醛壳聚糖钙缓释微球混悬液，再与设计重量份的海藻酸钠水溶液混合后，添加设计重量份的氯化钙水溶液，混合均匀，反应完成后去除溶剂，形成沉淀，经抽滤并干燥，即得壳聚糖钙缓释微球b粉；
23.将所得的a粉和b粉制成相应的剂型。
24.本发明的壳聚糖缓释钙制剂的制备工艺简单易行、不同剂型产品间制备工序基本相同，方便同时开展多种剂型产品的批量生产。
附图说明
25.图1为本发明提供的模拟人工肠液中钙离子的缓释曲线示意图。
具体实施方式
26.下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。
27.本说明书中，除非特别指明，否则所用技术术语均为本领域中的普通技术人员常用术语；本说明书中未注明具体条件的实验方法是按常规实验方法；本说明书中所用的试验材料如无特别说明均为市售购买产品。
28.实施例1颗粒剂
29.[0030][0031]
制备方法：1)过筛：常温常压下将牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨酸、安赛蜜、淀粉分别过100目筛；2)称量、混合：将筛分后的牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨酸，按照上述配方进行称重，放入三维运动混合机中进行混合30分钟以上，混合均匀得a粉；3)壳聚糖钙缓释微球制备：将80.0g的壳聚糖与无水乙醇按一定重量比混合，加入10.0g的香草醛，搅拌均匀后再加入含醋酸15.0g的2wt％醋酸水溶液，完全反应得到香草醛改性壳聚糖；将200.0g的葡萄糖酸钙与无水乙醇溶液混合得到葡萄糖酸钙乙醇溶液，再与香草醛改性壳聚糖混合均匀、加热60℃反应2小时，即得香草醛壳聚糖钙缓释微球混悬液，再与含海藻酸钠15.0g的2wt％海藻酸钠水溶液混合后，添加含氯化钙10.0g的2wt％氯化钙水溶液，混合均匀，反应完成后去除溶剂，形成沉淀，经抽滤并干燥，得到壳聚糖钙缓释微球b粉；4)颗粒剂制备：将安赛蜜8.0g和a粉、b粉等进行充分混合；加10wt％淀粉浆制软材，制湿颗粒，80
±
l0℃干燥，整粒，分装，即得颗粒剂。
[0032]
使用方法：口服，每次每日3次，每次0.9g，饭后服用。
[0033]
适宜人群：中老年人及预防缺钙人群。
[0034]
实施例2片剂
[0035]
[0036][0037]
制备方法：1)过筛：常温常压下将牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨酸、硬脂酸镁、淀粉分别过100目筛；2)称量、混合：将筛分后的牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨酸，按照上述配方进行称重并放入三维运动混合机中进行混合30分钟以上，混合均匀得a粉；3)壳聚糖钙缓释微球制备：将170.0g的壳聚糖与无水乙醇按一定重量比混合，加入10.0g的香草醛，搅拌均匀后再加入含醋酸30.0g的2wt％醋酸水溶液，完全反应得到香草醛改性壳聚糖；将200.0g的葡萄糖酸钙与无水乙醇溶液混合得到葡萄糖酸钙乙醇溶液，再与香草醛改性壳聚糖混合均匀、加热60℃反应2小时，即得香草醛壳聚糖钙缓释微球混悬液，再与含海藻酸钠20.0g的2wt％海藻酸钠水溶液混合后，添加含氯化钙10.0g的2wt％氯化钙水溶液，混合均匀，反应完成后去除溶剂，形成沉淀，经抽滤并干燥，得到壳聚糖钙缓释微球b粉；4)片剂的制备：将a粉和b粉在三维运动混合机中进行混合30分钟，得总混c粉；用8.0g淀粉制成10wt％淀粉浆作润湿剂制软材，将软材过筛，湿法制粒得湿颗粒，于80
±
l0℃烘箱干燥，整粒得颗粒d；加入102.0g硬脂酸镁混合后，经旋转式压片机压片即得片剂。
[0038]
使用方法：口服，每次每日3次，每次2.1g，饭后服用。
[0039]
适宜人群：中老年人及预防缺钙人群。
[0040]
实施例3软胶囊剂
[0041][0042]
制备方法：1)过筛：常温常压下将牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨酸分别过100目筛；2)称量、混合：将筛分后的牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨酸，按照上述配方进行称重并放入三维运动混合机中进行混合30分钟以上，混合均匀得a粉；3)壳聚糖钙缓释微球制备：将120.0g的壳聚糖与无水乙醇按一定重量比混合，加入20.0g的香草醛，搅拌均匀后再加入含醋酸30.0g的2wt％醋酸水溶液，完全反应得到香草醛改性壳聚糖；将500.0g的葡萄糖酸钙与无水乙醇溶液混合得到葡萄糖酸钙乙醇溶液，再与香草醛改性壳聚糖混合均匀、加热60℃反应2小时，即得香草醛壳聚糖钙缓释微球混悬液，再与含海藻酸钠20.0g的2wt％海藻酸钠水溶液混合后，添加含氯化钙10.0g的2wt％氯化钙水溶液，混合均匀，反应完成后去除溶剂，形成沉淀，经抽滤并干燥，得到的壳聚糖钙缓释微球b粉；4)软胶囊剂的制备：将a粉和b粉等在三维运动混合机充分混合30分钟后再与500.0g的peg400在制浆锅中搅拌混合20分钟，再加入羟苯乙酯8.0g混合均匀，即得软胶囊内容物c液，采用滴制法将c液滴至明胶、甘油和水的混悬液中冷却成胶丸、干燥即得软胶囊剂。
[0043]
使用方法：口服，每次每日3次，每次2.0g，饭后服用。
[0044]
适宜人群：中老年人及预防缺钙人群。
[0045]
实施例4包衣片剂
[0046][0047]
制备方法：1)过筛：常温常压下将牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨酸、微晶纤维素、硬脂酸镁分别过100目筛；，2)称量、混合：将筛分后的牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨酸，按照上述配方进行称重并放入三维运动混合机中进行混合30分钟以上，混合均匀得a粉；3)壳聚糖钙缓释微球制备：将80.0g的壳聚糖与无水乙醇按一定重量比混合，加入30.0g的香草醛，搅拌均匀后再加入含醋酸20.0g的2wt％醋酸水溶液，完全反应得到香草醛改性壳聚糖；将300.0g的葡萄糖酸钙与无水乙醇溶液混合得到葡萄糖酸钙乙醇溶液，再与香草醛改性壳聚糖混合均匀、加热60℃反应2小时，即得香草醛壳聚糖钙缓释微球混悬液，再与含海藻酸钠20.0g的2wt％海藻酸钠水溶液混合后，添加含氯化钙10.0g的2wt％氯化钙水溶液，混合均匀，反应完成后去除溶剂，形成沉淀，经抽滤并干燥，得到的壳聚糖钙缓释微球b粉；4)包衣片剂的制备：将a粉和b粉等进行充分混合；添加微晶纤维素混合均匀后干法制粒；再添加硬脂酸镁混匀，经旋转压片机压制得素片；将含10.0g聚维酮k30用体积浓度为65％的乙醇制备成浓度为8wt％的包衣液，控温65℃，将素片放在包衣锅里喷洒包衣液3遍以上，外观均匀、包衣膜成型完整，晾干，即得包衣片。
[0048]
使用方法：口服，每次每日3次，每次1.5g，饭后服用。
[0049]
适宜人群：中老年人及预防缺钙人群。
[0050]
实施例5硬胶囊剂
[0051][0052][0053]
制备方法：1)过筛：常温常压下将牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨酸、微晶纤维素分别过100目筛；2)称量、混合：将筛分后的牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨酸，按照上述配方进行称重并放入三维运动混合机中进行混合30分钟以上，混合均匀得a粉；3)壳聚糖钙缓释微球制备：将80.0g的壳聚糖与无水乙醇按一定重量比混合，加入40.0g的香草醛，搅拌均匀后再加入含醋酸10.0g的2wt％醋酸水溶液，完全反应得到香草醛改性壳聚糖；将380.0g的葡萄糖酸钙与无水乙醇溶液混合得到葡萄糖酸钙乙醇溶液，再与香草醛改性壳聚糖混合均匀、加热60℃反应2小时，即得香草醛壳聚糖钙缓释微球混悬液，再与含海藻酸钠20.0g的2wt％海藻酸钠水溶液混合后，添加含氯化钙10.0g的2wt％氯化钙水溶液，混合均匀，反应完成后去除溶剂，形成沉淀，经抽滤并干燥，得到的壳聚糖钙缓释微球b粉；4)硬胶囊剂的制备：将a粉、b粉与30.0g微晶纤维素进行充分混合，采用干法制粒，将得到的颗粒装入胶囊壳中，即得硬胶囊剂。
[0054]
使用方法：口服，每次每日3次，每次1.0g，饭后服用。
[0055]
适宜人群：中老年人及预防缺钙人群。
[0056]
实施例6口服液剂
[0057]
[0058][0059]
制备方法：1)过筛：常温常压下将牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素、盐酸赖氨酸分别过100目筛；2)称量、混合：将筛分后的牦牛壮骨粉、葡萄糖酸钙、盐酸氨基葡萄糖、软骨素硫酸盐和盐酸赖氨酸按照上述配方进行称重并放入三维运动混合机中进行混合30分钟以上，混合均匀得a粉；3)壳聚糖钙缓释微球制备：将70.0g壳聚糖与无水乙醇按一定重量比混合，加入10.0g香草醛，搅拌均匀后再加入含10.0g醋酸的2wt％醋酸水溶液，完全反应得到香草醛改性壳聚糖；将300.0g葡萄糖酸钙与无水乙醇溶液混合得到葡萄糖酸钙乙醇溶液，再与香草醛改性壳聚糖混合均匀、加热60℃反应2小时，即得香草醛壳聚糖钙缓释微球混悬液，再与含海藻酸钠10.0g的2wt％海藻酸钠水溶液混合后，添加含氯化钙10.0g的2wt％氯化钙水溶液，混合均匀，反应完成后去除溶剂，形成沉淀，经抽滤并干燥，即得壳聚糖钙缓释微球b粉；4)口服液剂的制备：将a粉、蜂蜜、甘露醇溶于纯化水10000ml，过0.45微米微孔滤膜后得a液，之后将a液和含聚维酮10.0g的2wt％聚维酮水溶液混合均匀后，加入壳聚糖钙缓释微球b粉，充分搅拌得粘稠的混悬液体，灌装于瓶子中，灭菌后即得口服液剂。
[0060]
使用方法：口服，每日3次，每次10ml，饭后服用。
[0061]
适宜人群：中老年人及预防缺钙人群。
[0062]
体外钙离子缓释试验
[0063]
1.样品：按实施例1所述配方及工艺制备的样品。
[0064]
2.体外钙离子缓释试验
[0065]
配置ph值＝9.5的nh3-nh4缓冲溶液，在此弱碱性环境下，钙离子与偶氮胂iii形成1：2蓝色络合物，采用紫外分光光度法，在最大吸收650nm波长处，进行钙离子标准曲线的绘制。依据比耳定律和标准曲线，反推人工肠液中溶出的钙离子的浓度，绘制出图1，图1为本
发明提供的模拟人工肠液中钙离子的缓释曲线示意图。
[0066]
3.体外钙离子缓释试验结果
[0067]
由图1可以看出，在初始阶段壳聚糖钙缓释微球处在溶胀的阶段，钙离子向外释放速度较慢，但是经过2小时后，壳聚糖钙缓释微球网络结构出现结构溶蚀，钙离子向外释放的速度会变快。但整个释放过程，体外钙离子累积释放度的线性关系比较好，具有优良的肠缓释给药特性。颗粒剂因壳聚糖钙缓释微球的存在，钙离子释放速度变慢，这是壳聚糖分子链上氨基和香草醛分子中醛基反应生成西佛碱结构，阻止了钙离子从微球内部向外释放，进而起到缓释作用。
[0068]
下面依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)，对本发明的壳聚糖缓释钙制剂在食用安全性及增加骨密度功能上进行试验。
[0069]
急性毒性试验
[0070]
1.样品：按实施例1所述配方及工艺制备的样品。
[0071]
2.动物实验：实验用icr小鼠。
[0072]
3.小鼠经口急性毒性试验(mtd)：选用20-22g小鼠20只，雌雄各半，进行试验，以20.0g/kg
·
bw的剂量经口二次灌胃，给药后连续观察14天。记录中毒表现及死亡情况。
[0073]
4.结果：以20.0g/kg
·
bw的剂量灌胃两种性别的小鼠，给药后连续观察14天。实验期间未见明显的中毒表现，观察期内无死亡。受试物对两种性别的小鼠的急性经口毒性(mtd)均大于20.0g/kg
·
bw，根据《食品安全性毒理学评价程序和方法》(2003年版)急性毒性分级，属无毒级。
[0074]
表1小鼠急性毒性试验结果
[0075][0076]
30天喂养试验
[0077]
1.样品：按实施例1所述配方及工艺制备样品。人拟用量为15g/60kg
·
bw
·
日。
[0078]
2.实验动物：选用体重55-80g，spf级wistar大鼠80只，雌雄各半，
[0079]
3.试验方法：剂量设计为：5.00、10.00、15.00g/kg
·
bw(分别相当与人拟用量的25倍、50倍、100倍)。将大鼠随机分为三个受试物组及对照组，每组20只，雌雄各半。对照组喂饲正常基础饲料，受试物组则喂饲掺入不同剂量样品。动物单笼喂养，自由饮食，连续观察30天。
[0080]
4.观察指标及结果
[0081]
4.1生化指标测定：
[0082]
测定血清丙氨酸氨基转移酶(alt)、天门冬氨酸转移酶(ast)、尿素氮(bun)、胆固醇(cho)、甘油三酯(tg)、血糖(glu)、总蛋白(tp)、白蛋白(alb)、肌酐(cre)。实验末期试验动物各项生化指标均正常，各组动物学生化指标与对照组相比均无统计学差异(p》0.05)。
[0083]
4.2大体观察及病理组织检查：
[0084]
试验末期颈椎脱臼处死动物，观察各主要脏器及胸、腹腔大体病理改变。取出全部动物的肝脏、肾脏、脾脏、睾丸，称重并计算脏器系数。各主要脏器均未见有意义的病理改变。
[0085]
毒理试验结果表明本品属于无毒级，可以长期服用。
[0086]
骨密度试验
[0087]
1.样品：按实施例1所述配方及工艺制备样品
[0088]
2.试验动物：4周断乳sd雄性大鼠，体重60-80g，每组10只。用含有胆固醇的饲料喂养动物形成脂代谢紊乱动物模型。
[0089]
3.剂量选择：试验设计低、中、高(500、1000、1500mg/kg
·
bw)三个剂量组和低钙对照组(100mg/kg
·
bw)和标准无机钙碳酸钙对照组(1500mg/kg
·
bw)。给予三个月对比试验，观察如下指标。
[0090]
4.结果：
[0091]
表2对大鼠骨密度和骨钙含量的影响
[0092]
组别中点骨密度远端骨密度骨质疏松点骨密度低钙对照组0.02
±
0.010.04
±
0.010.02
±
0.01碳酸钙对照组0.18
±
0.010.20
±
0.010.09
±
0.01低剂量组0.08
±
0.010.18
±
0.010.03
±
0.01中剂量组0.10
±
0.010.17
±
0.010.05
±
0.01高剂量组0.20
±
0.010.27
±
0.010.10
±
0.01
[0093]
由表2可以看出，将低、中、高剂量组与低钙对照组进行比较发现，中点骨密度和远端骨密度具有显著性差异，高剂量组骨质最疏松点骨密度与低钙对照组比较有显著性差异(p≦0.01)。中剂量组骨质最疏松点骨密度与低钙对照组比较有显著性差异(p≦0.05)。将低、中、高剂量组与碳酸钙对照组比较发现，高剂量组增加骨密度功效高于碳酸钙的效果。
[0094]
由上述功能实验结果判断，骨钙含量及骨密度均显著高于低钙对照组，可判定本品具有增加骨密度的功能。
[0095]
以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的相对好的实施例，并不用于限制本发明。对于本领域技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原理之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的权利要求范围之内。