用于治疗性递送的组合物和方法与流程

背景技术：

技术实现思路

1、在一些方面，本文描述了一种去核细胞，所述去核细胞包含：单结构域抗体或其片段，所述单结构域抗体或其片段结合免疫检查点分子；和一个或多个细胞内细胞器，所述一个或多个细胞内细胞器被配置为翻译编码所述单结构域抗体或其片段的外源信使核糖核酸(mrna)分子。在一些实施方案中，所述单结构域抗体或其片段包含在所述去核细胞中。在一些实施方案中，所述单结构域抗体或其片段被所述去核细胞释放。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含细胞膜，其中所述单结构域抗体或其片段在所述细胞膜的质膜外侧上表达。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含细胞膜，其中所述细胞膜包含与所述单结构域抗体或其片段偶联的跨膜部分。在一些实施方案中，所述跨膜部分包含跨膜多肽。在一些实施方案中，所述单结构域抗体或其片段与所述跨膜多肽的n末端或c末端偶联。在一些实施方案中，所述单结构域抗体或片段与偶联至所述去核细胞的细胞表面的锚分子偶联，其中所述锚分子包含糖基磷脂酰肌醇、法尼基、棕榈酸酯、肉豆蔻酸酯或其任何组合。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含被配置为将所述单结构域抗体或其片段从所述去核细胞转移至另一个细胞的融合蛋白。在一些实施方案中，所述单结构域抗体或其片段与细胞毒性药物偶联。在一些实施方案中，所述免疫检查点分子包括程序性细胞死亡蛋白1(pd-1或pdcd-1)、程序性死亡配体1(pd-l1)、细胞毒性t淋巴细胞相关蛋白4(ctla-4，也称为分化簇152或cd152)、t细胞活化的v结构域ig抑制因子(vista)、程序性细胞死亡1配体2(pdcd1lg2，也称为分化簇273或cd273)、b7同源物3(b7-h3，也称为分化簇276或cd276)、腺苷a2a受体(a2ar)、分化簇27(cd27)、淋巴细胞活化基因3(lag3)、含t细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域的蛋白3(tim-3，也称为甲型肝炎病毒细胞受体2或havcr2)、具有ig和itim结构域的t细胞免疫受体(tigit)、分化簇73(cd73)、cd94/nk组2成员a(nkg2a，也称为分化簇159或cd159)、含脊髓灰质炎病毒受体相关免疫球蛋白结构域的分子(pvrig)、脊髓灰质炎病毒受体相关分子2(pvrl2)、癌胚抗原相关细胞粘附分子1(ceacam1)、癌胚抗原相关细胞粘附分子5(ceacam5)、癌胚抗原相关细胞粘附分子6(ceacam6)、黏着斑激酶(fak)、c-c趋化因子受体2型(ccr-2)、趋化因子(c-c基序)配体2(ccl-2)、白血病抑制因子(lif)、分化簇47(cd47)、信号调节蛋白α(sirpα)、巨噬细胞集落刺激因子(m-csf)、集落刺激因子1受体(csf-1r)、白介素3(il-3)、白介素-1受体辅助蛋白(il-1rap)、白介素8(il-8)、轴突导向蛋白-4d(sema4d)、血管生成素-2、clever-1、酪氨酸蛋白激酶受体ufo(axl)、磷脂酰丝氨酸或其片段。在一些实施方案中，所述免疫检查点分子包括pd-l1。在一些实施方案中，所述免疫检查点分子包括ctla-4。在一些实施方案中，所述免疫检查点分子包含与seq id no:155-164、203、204、315-322、511、531-535、551-554、571、594、611-619或711中的任一个具有大于或等于约80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述单结构域抗体或其片段由与seq id no:801具有大于或等于约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的脱氧核糖核酸(dna)序列编码。在一些实施方案中，所述单结构域抗体或其片段包含与seq id no:851具有大于或等于约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述单结构域抗体或其片段由与seq id no:901具有大于或等于约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的dna序列编码。在一些实施方案中，所述单结构域抗体或其片段包含与seq id no:951具有大于或等于约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含靶向部分。在一些实施方案中，所述靶向部分包含对于由肺组织中的细胞表达的配体具有特异性的归巢受体。在一些实施方案中，所述靶向部分包含抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段不同于所述单结构域抗体或其片段。在一些实施方案中，所述靶向部分包含趋化因子受体。在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。在一些实施方案中，所述癌细胞是非小细胞肺癌(nsclc)、小细胞肺癌(sclc)、腺癌、鳞癌、大细胞(未分化)癌、大细胞神经内分泌癌、腺鳞癌或肉瘤样癌的细胞。在一些实施方案中，所述癌细胞是良性肺肿瘤的细胞。在一些实施方案中，所述癌细胞是错构瘤的细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含治疗剂。在一些实施方案中，所述治疗剂包含白介素12(il-12)。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含免疫逃逸部分，所述免疫逃逸部分包含分化簇(cd47)、pd-l1、i类主要组织相容性复合体e(hla-e)、i类主要组织相容性复合体g(hla-g)、其片段或其组合。在一些实施方案中，所述去核细胞具有包括在约1微米(μm)至约100μm之间的直径。在一些实施方案中，所述直径包括在约5μm至25μm之间。在一些实施方案中，所述直径包括在约8μm至12μm之间。在一些实施方案中，所述去核细胞表现出相对于在其他方面相同的有核细胞减小的直径，其中所述直径减小大于或等于约50％。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含外源肿瘤坏死因子(tnf)超家族成员多肽或其催化活性片段。在一些实施方案中，所述外源tnf超家族成员多肽或其催化活性片段在水性条件中是可溶的。在一些实施方案中，所述外源tnf超家族成员多肽包含肿瘤坏死因子超家族成员14(light)或其催化活性片段。在一些实施方案中，所述去核细胞从亲本细胞获得，其中所述亲本细胞包含干细胞。在一些实施方案中，所述干细胞包含诱导多能干细胞(ipsc)、成体干细胞、间充质基质细胞、胚胎干细胞或成纤维细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞是经纯化的。在一些实施方案中，所述去核细胞是经冻干的。

2、在一些方面，本文描述了多个细胞，其包含：多个去核细胞，所述多个去核细胞包含：单结构域抗体或其片段，所述单结构域抗体或其片段结合免疫检查点分子；和一个或多个细胞内细胞器，所述一个或多个细胞内细胞器被配置为翻译编码所述单结构域抗体或其片段的外源信使核糖核酸(mrna)分子。

3、在一些方面，本文描述了一种药物配制品，其包含：去核细胞，所述去核细胞包含：单结构域抗体或其片段，所述单结构域抗体或其片段结合免疫检查点分子；和一个或多个细胞内细胞器，所述一个或多个细胞内细胞器被配置为翻译编码所述单结构域抗体或其片段的外源信使核糖核酸(mrna)分子；以及药学上可接受的赋形剂、载剂或稀释剂。

4、在一些方面，本文描述了一种将去核细胞递送至对象的方法，所述去核细胞包含：单结构域抗体或其片段，所述单结构域抗体或其片段结合免疫检查点分子；和一个或多个细胞内细胞器，所述一个或多个细胞内细胞器被配置为翻译编码所述单结构域抗体或其片段的外源信使核糖核酸(mrna)分子，所述方法包括：向所述对象递送本文所述的去核细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞是自体细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞是同种异体细胞。在一些实施方案中，所述施用通过全身施用进行。在一些实施方案中，在所述施用后，所述去核细胞在所述对象中存活少于或等于5天。

5、在一些方面，本文描述了一种治疗对象的癌症的方法，所述方法包括：向所述对象施用治疗有效量的去核细胞或本文所述的药物配制品，从而治疗所述对象的所述癌症，所述去核细胞包含：单结构域抗体或其片段，所述单结构域抗体或其片段结合免疫检查点分子；和一个或多个细胞内细胞器，所述一个或多个细胞内细胞器被配置为翻译编码所述单结构域抗体或其片段的外源信使核糖核酸(mrna)分子。在一些实施方案中，所述去核细胞是自体细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞是同种异体细胞。在一些实施方案中，所述施用通过全身施用进行。在一些实施方案中，在所述施用后，所述去核细胞在所述对象中存活少于或等于5天。

6、在一些方面，本文描述了一种去核细胞，所述去核细胞包含：单结构域抗体或其片段，所述单结构域抗体或其片段结合结缔组织生长因子(ctgf)；和一个或多个细胞内细胞器，所述一个或多个细胞内细胞器被配置为(i)翻译编码所述单结构域抗体或其片段的外源mrna分子，和(ii)从所述去核细胞中释放所述单结构域抗体或其片段。在一些实施方案中，所述单结构域抗体或其片段包含与seq id no:1701具有大于或等于约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的多肽序列。在一些实施方案中，所述单结构域抗体或其片段与ctgf的氨基酸序列结合，其中所述ctgf的氨基酸序列包含seq id no:1601或seq id no:1602。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含对于由肺组织中的细胞表达的配体具有特异性的靶向部分。在一些实施方案中，所述靶向部分包含对于由肺组织中的所述细胞表达的所述配体具有特异性的归巢受体。在一些实施方案中，所述细胞是肺泡上皮细胞(aec)。在一些实施方案中，所述细胞是支气管细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含免疫逃逸部分，其包含cd47、pd-l1、hla-e、hla-g、其片段或其任何组合。在一些实施方案中，所述靶向部分包含趋化因子受体。在一些实施方案中，所述靶向部分包含粘附分子。在一些实施方案中，所述靶向部分包含抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段不同于所述单结构域抗体或其片段。在一些实施方案中，所述去核细胞具有包括在约1微米(μm)至约100μm之间的直径。在一些实施方案中，所述直径是在约5μm至25μm之间。在一些实施方案中，所述直径包括在约8μm至12μm之间。在一些实施方案中，所述去核细胞表现出相对于在其他方面相同的有核细胞减小的直径，其中所述直径减小大于或等于约50％。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含外源肿瘤坏死因子(tnf)超家族成员多肽或其催化活性片段。在一些实施方案中，所述外源tnf超家族成员多肽或其催化活性片段在水性条件中是可溶的。在一些实施方案中，所述外源tnf超家族成员多肽包含light或其催化活性片段。在一些实施方案中，所述去核细胞从亲本细胞获得，其中所述亲本细胞包含干细胞。在一些实施方案中，所述干细胞包含诱导多能干细胞(ipsc)、成体干细胞、间充质基质细胞、胚胎干细胞或成纤维细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞是经纯化的。在一些实施方案中，所述去核细胞是经冻干的。

7、在一些方面，本文描述了多个细胞，其包含：多个去核细胞，所述多个去核细胞包含：单结构域抗体或其片段，所述单结构域抗体或其片段结合结缔组织生长因子(ctgf)；和一个或多个细胞内细胞器，所述一个或多个细胞内细胞器被配置为(i)翻译编码所述单结构域抗体或其片段的外源mrna分子，和(ii)从所述去核细胞中释放所述单结构域抗体或其片段。

8、在一些方面，本文描述了一种药物配制品，其包含：去核细胞，所述去核细胞包含：单结构域抗体或其片段，所述单结构域抗体或其片段结合结缔组织生长因子(ctgf)；和一个或多个细胞内细胞器，所述一个或多个细胞内细胞器被配置为(i)翻译编码所述单结构域抗体或其片段的外源mrna分子，和(ii)从所述去核细胞中释放所述单结构域抗体或其片段；以及药学上可接受的赋形剂、载剂或稀释剂。

9、在一些方面，本文描述了一种将去核细胞递送至对象的方法，所述方法包括：向所述对象递送所述去核细胞或本文所述的药物配制品，所述去核细胞包含：单结构域抗体或其片段，所述单结构域抗体或其片段结合结缔组织生长因子(ctgf)；和一个或多个细胞内细胞器，所述一个或多个细胞内细胞器被配置为(i)翻译编码所述单结构域抗体或其片段的外源mrna分子，和(ii)从所述去核细胞中释放所述单结构域抗体或其片段。在一些实施方案中，所述去核细胞是自体细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞是同种异体细胞。在一些实施方案中，所述施用通过全身施用进行。在一些实施方案中，在所述施用后，所述去核细胞在所述对象中存活少于或等于5天。

10、在一些方面，本文描述了一种治疗有需要的对象的特发性肺纤维化(ipf)的方法，所述方法包括：向所述对象施用治疗有效量的去核细胞或本文所述的药物配制品，所述去核细胞包含：单结构域抗体或其片段，所述单结构域抗体或其片段结合结缔组织生长因子(ctgf)；和一个或多个细胞内细胞器，所述一个或多个细胞内细胞器被配置为(i)翻译编码所述单结构域抗体或其片段的外源mrna分子，和(ii)从所述去核细胞中释放所述单结构域抗体或其片段。在一些实施方案中，所述去核细胞是自体细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞是同种异体细胞。在一些实施方案中，所述施用通过全身施用进行。在一些实施方案中，在所述施用后，所述去核细胞在所述对象中存活少于或等于5天。

11、在一些方面，本文描述了一种治疗有需要的对象的疾病或病症的方法，所述方法包括：向患有与所述对象的靶细胞相关联的疾病或病症的所述对象施用治疗有效量的去核细胞，所述去核细胞包含：单结构域抗体或其片段，所述单结构域抗体或其片段结合结缔组织生长因子(ctgf)；和一个或多个细胞内细胞器，所述一个或多个细胞内细胞器被配置为(i)翻译编码所述单结构域抗体或其片段的外源mrna分子，和(ii)从所述去核细胞中释放所述单结构域抗体或其片段，其中外源tnf超家族成员多肽或其催化活性片段使与所述疾病或病症相关联的脉管系统正常化，并且其中与没有使所述脉管系统正常化的相当方法的治疗功效相比，使所述脉管系统正常化增加治疗所述疾病或病症的治疗功效。

12、在一些方面，本文描述了一种治疗对象的特征至少部分在于异常脉管系统的疾病或病症的方法，所述方法包括：向患有所述疾病或病症的所述对象施用去核细胞，所述去核细胞包含：单结构域抗体或其片段，所述单结构域抗体或其片段结合结缔组织生长因子(ctgf)；和一个或多个细胞内细胞器，所述一个或多个细胞内细胞器被配置为(i)翻译编码所述单结构域抗体或其片段的外源mrna分子，和(ii)从所述去核细胞中释放所述单结构域抗体或其片段，其中由所述去核细胞合成或释放的外源肿瘤坏死因子(tnf)超家族成员多肽或其催化活性片段对于使所述对象的所述异常脉管系统正常化是治疗有效的。

13、在一些实施方案中，本文提供了去核细胞，其包含抗体，诸如单结构域抗体。还提供了将本文所述的去核细胞递送至对象，例如像以治疗所述对象的疾病或病症的方法。所述去核细胞和含有此类去核细胞的药物组合物及其使用方法提供了优于先前基于细胞的治疗剂的若干益处，包括安全性、限定的有效期、没有向宿主转移核编码基因的风险以及甚至在全身施用时也能将治疗性货物有效递送至靶细胞或组织。

14、本文公开的方面提供了从具有细胞核的亲本细胞获得的去核细胞，所述去核细胞包含：用于在所述细胞核不存在的情况下合成外源单结构域抗体或其片段的一个或多个细胞内细胞器。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段被包封在所述去核细胞中。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段在所述去核细胞的细胞膜的质膜外侧上由所述一个或多个细胞内细胞器表达。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段在所述去核细胞的细胞膜的胞质侧上由所述一个或多个细胞内细胞器表达。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段与跨膜部分复合。在一些实施方案中，所述跨膜部分包含跨膜多肽。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段与所述跨膜多肽的n末端复合。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段与所述跨膜多肽的c末端复合。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段相对于在其他方面相同的参考单结构域抗体或其片段包含修饰，其中所述修饰将所述外源单结构域抗体或其片段锚定至所述去核细胞的细胞膜的质膜外侧或胞质侧。在一些实施方案中，所述修饰包括将所述外源单结构域抗体或其片段与糖基磷脂酰肌醇、法尼基、棕榈酸酯、肉豆蔻酸酯或其组合复合。在一些实施方案中，通过从所述去核细胞分泌所述外源单结构域抗体或其片段，所述外源单结构域抗体或其片段由所述去核细胞释放。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段在所述去核细胞死亡时被释放。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段在所述去核细胞破裂时被释放。在一些实施方案中，通过将所述去核细胞与另一个细胞融合，所述外源单结构域抗体或其片段从所述去核细胞转移至所述另一个细胞。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段与细胞毒性药物缀合。在一些实施方案中，所述去核细胞包含具有编码所述外源单结构域抗体或其片段的多肽序列的外源核苷酸。在一些实施方案中，所述多肽序列包含在seq id no:1-36、101-111、121-123、165-192、195、205、206、211-213、221-231、241-245、325-331和401-404中提供的序列。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于由seq id no:131-134、142-152、201-202、301-312、501、521-526、541-545、561、584、591-601和701-705中的至少一种核酸编码的抗原具有特异性。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于包含编码pd-l1的肽序列的抗原具有特异性。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于包含seqid no:155-164、203、204、315-322、511、531-535、551-554、571、594、611-619和711中的至少一种肽序列的抗原具有特异性。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于与表1中的至少一种病原体相关联的抗原具有特异性。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于包含编码结缔组织生长因子(ctgf)，也称为细胞通信网络因子2(ccn2)的肽序列的抗原具有特异性。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于包含seq id no:1601和1602中的至少一种肽序列的抗原具有特异性。

15、在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段由与seq id no:801具有大于或等于约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的核酸序列编码。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段包含与seq id no:851具有大于或等于约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的多肽序列。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段由与seq id no:901具有大于或等于约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的核酸序列编码。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段包含与seq id no:951具有大于或等于约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的多肽序列。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段包含与seq id no:1701具有大于或等于约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的多肽序列。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于由肺组织中的癌细胞表达的抗原具有特异性。在一些实施方案中，由肺组织中的所述癌细胞表达的所述抗原是pd-l1。在一些实施方案中，由肺组织中的所述癌细胞表达的所述抗原是ctgf。在一些实施方案中，所述癌细胞是非小细胞肺癌(nsclc)细胞。在一些实施方案中，所述癌细胞是腺癌、鳞癌、大细胞(未分化)癌、大细胞神经内分泌癌、腺鳞癌或肉瘤样癌的细胞。在一些实施方案中，所述癌细胞是小细胞肺癌(sclc)的细胞。在一些实施方案中，所述癌细胞是肺类癌瘤的细胞。在一些实施方案中，所述癌细胞是腺样囊性癌的细胞。在一些实施方案中，所述癌细胞是淋巴瘤的细胞。在一些实施方案中，所述癌细胞是肉瘤的细胞。在一些实施方案中，所述癌细胞是良性肺肿瘤的细胞。在一些实施方案中，所述癌细胞是错构瘤的细胞。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于由与特发性肺纤维化相关联的细胞表达的抗原具有特异性。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于由与特发性肺纤维化相关联的细胞表达的抗原具有特异性，所述细胞是肺细胞。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于由与特发性肺纤维化相关联的细胞表达的抗原具有特异性，所述细胞是免疫细胞。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于由与特发性肺纤维化相关联的细胞表达的抗原具有特异性，所述细胞是肺泡细胞。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于由与特发性肺纤维化相关联的细胞表达的抗原具有特异性，所述细胞是肺泡上皮细胞(aec)。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于由与特发性肺纤维化相关联的细胞表达的抗原具有特异性，所述细胞是支气管细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含至少一种额外的外源治疗剂。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含促融合部分。在一些实施方案中，所述促融合部分包含病毒促融合部分。在一些实施方案中，所述促融合部分包含真核促融合部分。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含免疫逃逸部分。在一些实施方案中，所述免疫逃逸部分包含cd47、pd-l1、hla-e、hla-g、其片段或其组合。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含靶向部分。在一些实施方案中，所述靶向部分靶向癌细胞的生物标志物。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段对于由癌细胞表达的抗原具有特异性，并且其中所述生物标志物是与被所述外源单结构域抗体或其片段靶向的抗原分开且不同的实体。在一些实施方案中，所述靶向部分靶向肿瘤微环境内的免疫细胞的生物标志物。在一些实施方案中，所述生物标志物在所述免疫细胞的表面上表达。在一些实施方案中，所述生物标志物由所述免疫细胞释放。在一些实施方案中，所述靶向部分包含趋化因子。在一些实施方案中，所述靶向部分包含趋化因子受体。在一些实施方案中，所述靶向部分包含粘附分子。在一些实施方案中，所述靶向部分包含抗原。在一些实施方案中，所述靶向部分包含与由所述癌细胞表达的抗原分开且不同的抗原。在一些实施方案中，所述靶向部分包含不由所述癌细胞表达的抗体。在一些实施方案中，所述靶向部分包含膜结合抗体。在一些实施方案中，所述膜结合抗体是膜结合单结构域抗体。在一些实施方案中，所述去核细胞具有包括在约1微米(μm)至约100μm之间的直径。在一些实施方案中，所述直径包括在约1μm至约10μm之间。在一些实施方案中，所述直径包括在约10μm至约100μm之间。在一些实施方案中，所述直径是至少或约1μm、5μm、8μm、10μm、20μm、30μm、40μm、50μm、60μm、70μm、80μm、90μm或100μm。在一些实施方案中，所述直径包括约8μm。在一些实施方案中，所述去核细胞表现出与有核的亲本细胞相比小至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％的直径。在一些实施方案中，所述亲本细胞选自：干细胞、诱导多能干细胞(ipsc)、成体干细胞、间充质基质细胞、胚胎干细胞、成纤维细胞和来自细胞系的细胞。在一些实施方案中，所述亲本细胞是间充质基质细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞在低温休眠之后表现出生存力。在一些实施方案中，所述去核细胞在低温休眠后表现出的如在低温休眠后24小时测量的生存力等于或大于未低温休眠的相当去核细胞的生存力。在一些实施方案中，所述去核细胞在冷冻保存之后表现出生存力。在一些实施方案中，所述去核细胞在冷冻保存后表现出的如在冷冻保存后24小时测量的生存力等于或大于未冷冻保存的相当去核细胞的生存力。在一些实施方案中，所述去核细胞是经分离的。在一些实施方案中，所述去核细胞是经纯化的。在一些实施方案中，所述去核细胞是经冻干的。在一些实施方案中，所述去核细胞包含包括中和抗体的外源单结构域抗体或其片段。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段结合vegf。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段结合vegf-a。在一些实施方案中，所述去核细胞包含靶向内皮细胞生物标志物的靶向部分。在一些实施方案中，所述内皮细胞生物标志物由脉管系统细胞表达。在一些实施方案中，所述内皮细胞生物标志物由血管细胞表达。在一些实施方案中，所述内皮细胞生物标志物由淋巴管细胞表达。在一些实施方案中，所述去核细胞包含至少一种额外的外源剂，所述外源剂包含包括肿瘤坏死因子(tnf)超家族成员多肽或其催化活性片段的多肽。在一些实施方案中，所述tnf超家族成员多肽或其催化活性片段在水性条件中是可溶的，其中溶解度通过浊度溶解度测定或热力学溶解度测定在体外测量。在一些实施方案中，所述tnf超家族成员多肽包含肿瘤坏死因子超家族成员14(tnfsf14，也称为light)。在一些实施方案中，所述tnf超家族成员多肽包含可溶性light。在一些实施方案中，所述至少一种额外的外源剂包含免疫检查点分子。在一些实施方案中，所述至少一种额外的外源剂包含免疫检查点抑制剂分子。在一些实施方案中，所述至少一种额外的外源剂包含血管生成抑制剂。在一些实施方案中，所述血管生成抑制剂包括vegf/vegfr抑制剂。在一些实施方案中，所述vegf/soc抑制剂包括vegf-a抑制剂。

16、本文公开的方面提供了一种细胞系，其包含本文所述的去核细胞。

17、本文公开的方面提供了多个细胞，其包含本文所述的去核细胞。

18、本文公开的方面提供了药物组合物，其包含：本文所述的去核细胞；以及药学上可接受的：赋形剂、载剂或稀释剂。在一些实施方案中，所述药物组合物包含单位剂型。在一些实施方案中，所述药物组合物被配制用于鞘内、眼内、玻璃体内、视网膜、静脉内、肌内、心室内、脑内、小脑内、脑室内、脑实质、皮下、肿瘤内、肺内、气管内、腹膜内、膀胱内、阴道内、直肠内、口服、舌下、透皮、通过吸入、通过吸入雾化形式、通过管腔内-gi途径或其组合施用于有需要的对象。在一些实施方案中，所述药物组合物被配制用于静脉内施用。在一些实施方案中，所述药物组合物被配制用于肿瘤内施用。在一些实施方案中，所述药物组合物被配制用于肺内施用。在一些实施方案中，所述药物被配制用于气管内施用。在一些实施方案中，所述药物组合物被配制用于通过吸入雾化形式施用。在一些实施方案中，所述药物组合物包含至少一种额外的活性剂。在一些实施方案中，所述至少一种额外的活性剂包括细胞因子、生长因子、激素、抗体、酶、小分子、化合物或其组合。

19、本文公开的方面提供了试剂盒，其包括：本文所述的去核细胞、本文所述的细胞系、本文所述的多个细胞或本文所述的药物组合物；以及容器。

20、本文公开的方面提供了治疗有需要的对象的疾病或病症的方法，所述方法包括：向患有与所述对象的靶细胞相关联的疾病或病症的所述对象施用治疗有效量的本文公开的细胞或本文公开的药物组合物，从而治疗所述对象的所述疾病或病症，其中外源单结构域抗体或其片段与由所述对象的所述靶细胞表达的抗原结合。在一些实施方案中，所述去核细胞是自体细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞是同种异体细胞。在一些实施方案中，所述抗原包括肿瘤相关抗原(taa)。在一些实施方案中，所述抗原包括肿瘤特异性抗原(tsa)。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段与所述抗原的结合直接杀死癌细胞。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段与所述抗原的结合破坏癌细胞的细胞周期信号传导。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段与所述抗原的结合破坏癌细胞的血管生成信号传导。在一些实施方案中，所述外源单结构域抗体或其片段与所述抗原的结合将免疫细胞募集至癌细胞。在一些实施方案中，所述免疫细胞是t细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞或所述药物组合物鞘内、眼内、玻璃体内、视网膜、静脉内、肌内、心室内、脑内、小脑内、脑室内、脑实质、皮下、肿瘤内、肺内、气管内、腹膜内、膀胱内、阴道内、直肠内、口服、舌下、透皮、通过吸入、通过吸入雾化形式、通过管腔内-gi途径或其组合施用于所述对象。在一些实施方案中，所述去核细胞或所述药物组合物静脉内施用。在一些实施方案中，所述去核细胞或所述药物组合物肿瘤内施用。在一些实施方案中，所述去核细胞或所述药物组合物肺内施用。在一些实施方案中，所述去核细胞或所述药物组合物气管内施用。在一些实施方案中，所述去核细胞或所述药物组合物通过吸入雾化形式施用。在一些实施方案中，在向所述对象施用所述去核细胞或所述药物组合物后，所述去核细胞在对象中存活少于或等于14天。在一些实施方案中，在向所述对象施用所述去核细胞或所述药物组合物后，所述去核细胞在对象中存活少于或等于4天。在一些实施方案中，所述靶细胞是癌细胞。在一些实施方案中，所述疾病或病症是癌症或赘生物。

21、本文所述的方面提供了一种从具有细胞核的亲本细胞获得的去核细胞，所述去核细胞包含：用于在所述细胞核不存在的情况下合成外源多肽的一个或多个细胞内细胞器，所述外源多肽包括肿瘤坏死因子(tnf)超家族成员多肽或其催化活性片段。在一些实施方案中，所述去核细胞包含至少一种外源靶向部分。在一些实施方案中，所述外源多肽在水性条件下具有至少0.0001mg/ml、0.0005mg/ml、0.001mg/ml、0.005mg/ml、0.01mg/ml、0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.5mg/ml、1.0mg/ml、5.0mg/ml、10mg/ml、50mg/ml、100mg/ml、500mg/ml、1,000mg/ml、5,000mg/ml、10,000mg/ml、50,000mg/ml或100,000mg/ml的溶解度，其中溶解度通过浊度溶解度测定或热力学溶解度测定测量。在一些实施方案中，所述外源多肽在所述去核细胞的细胞膜的质膜外侧上由所述一个或多个细胞内细胞器表达。在一些实施方案中，所述外源多肽由所述去核细胞释放。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含编码所述外源多肽的外源多核苷酸。在一些实施方案中，所述外源多肽包含与seq id no:1501-1511具有至少75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的序列。在一些实施方案中，所述外源多肽包含与seq id no:1511具有至少75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的序列。在一些实施方案中，所述tnf超家族成员多肽是light。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含第二外源多肽。在一些实施方案中，所述第二外源多肽包含抗体、免疫检查点分子或其片段。在一些实施方案中，所述第二外源多肽包含抗体或其抗原结合片段或单结构域抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段或所述单结构域抗体或其抗原结合片段是中和抗体或其中和抗原结合片段。在一些实施方案中，所述中和抗体或其中和抗原结合片段靶向免疫检查点分子。在一些实施方案中，所述中和抗体或其中和抗原结合片段靶向血管生成素-1、血管生成素-2、内皮抑素、fgf、mmp、dii4、3类轴突导向蛋白、fgf、vegfr、nrp-1、pdgf(bb-同源二聚体)、pdgfr、tgf-β、内皮联蛋白、tgf-β受体、ccl2、整合素αvβ3、αvβ5或α5β1、ve-钙黏着蛋白、cd31、肝配蛋白、纤溶酶原激活物、纤溶酶原激活物抑制剂-1、enos、cox-2、ac133、id1/id3、3类轴突导向蛋白或nogo-a。在一些实施方案中，所述中和抗体或其中和抗原结合片段靶向vegf。在一些实施方案中，所述中和抗体或其中和抗原结合片段靶向vegf-a。在一些实施方案中，所述免疫检查点分子包括pd-1、pd-l1、ctla-4、vista、pdcd1lg2(cd273)、b7-h3(也称为cd276)、a2ar、cd27、lag3、tim-3、具有ig和itim结构域的t细胞免疫受体(tigit)、cd73、nkg2a、pvrig、pvrl2、ceacam1、ceacam5、ceacam6、fak、ccr-2、ccl-2、lif、cd47、sirpα、m-csf、csf-1r、il-3、il-1rap、il-8、sema4d、血管生成素-2、clever-1、axl、磷脂酰丝氨酸或其片段。在一些实施方案中，所述至少一种外源靶向部分包含抗体或其抗原结合片段或单结构域抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段或所述单结构域抗体或其抗原结合片段包括外源单结构域抗体或其片段。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段或所述单结构域抗体或其抗原结合结构域靶向癌细胞标志物。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段或所述单结构域抗体或其抗原结合片段靶向内皮细胞生物标志物。在一些实施方案中，所述内皮细胞生物标志物由脉管系统细胞表达。在一些实施方案中，所述内皮细胞生物标志物由血管细胞表达。在一些实施方案中，所述内皮细胞生物标志物由淋巴管细胞表达。

22、本文提供的方面是一种治疗对象的特征至少部分在于异常脉管系统的疾病或病症的方法，所述方法包括：向患有所述疾病或病症的所述对象施用包含一个或多个细胞内细胞器的去核细胞，所述去核细胞在细胞核不存在的情况下合成或释放包括肿瘤坏死因子(tnf)超家族成员多肽或其催化活性片段的外源多肽，其中由所述细胞合成或释放的所述外源多肽对于使所述对象的所述异常脉管系统正常化是治疗有效的。在一些实施方案中，所述外源多肽包括可溶性tnf超家族成员多肽。在一些实施方案中，所述外源多肽由所述去核细胞释放。在一些实施方案中，所述外源多肽包含与seq id no:1501-1511具有至少75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的多肽序列。在一些实施方案中，所述外源多肽包含与seq id no:1508具有至少75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的多肽序列。在一些实施方案中，所述外源多肽包含与seq id no:1511具有至少75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性的多肽序列。在一些实施方案中，所述tnf超家族成员是light。在一些实施方案中，所述去核细胞还包含至少一种外源靶向部分，其包含抗体或其抗原结合片段或单结构域抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段或所述单结构域抗体或其抗原结合片段包括外源单结构域抗体或其片段。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段或所述单结构域抗体或其抗原结合片段靶向癌细胞标志物。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段或所述单结构域抗体或其抗原结合片段靶向内皮细胞生物标志物。在一些实施方案中，所述内皮细胞生物标志物由脉管系统细胞表达。在一些实施方案中，所述内皮细胞生物标志物由血管细胞表达。在一些实施方案中，所述内皮细胞生物标志物由淋巴管细胞表达。在一些实施方案中，所述去核细胞将所述外源多肽递送至所述对象的所述异常脉管系统内的细胞。在一些实施方案中，所述去核细胞包含至少一种额外的外源剂。在一些实施方案中，所述至少一种额外的外源剂包含免疫检查点分子。在一些实施方案中，所述至少一种额外的外源剂包含免疫检查点分子抑制剂。在一些实施方案中，所述至少一种额外的外源剂包含血管生成抑制剂。在一些实施方案中，所述血管生成抑制剂包括vegf/vegfr抑制剂。在一些实施方案中，所述vegf/soc抑制剂包括vegf-a抑制剂。在一些实施方案中，所述至少一种外源剂杀死所述异常脉管系统内的癌症。在一些实施方案中，所述至少一种外源剂将外源免疫细胞募集至所述异常脉管系统以杀死所述异常脉管系统内的癌症。在一些实施方案中，所述去核细胞鞘内、眼内、玻璃体内、视网膜、静脉内、肌内、心室内、脑内、小脑内、脑室内、脑实质、皮下、肿瘤内、肺内、气管内、腹膜内、膀胱内、阴道内、直肠内、口服、舌下、透皮、通过吸入、通过吸入雾化形式、通过管腔内-gi途径或其组合施用于所述对象。在一些实施方案中，在向所述对象施用所述去核细胞后，所述去核细胞在对象中存活少于或等于14天。在一些实施方案中，在向所述对象施用所述去核细胞后，所述去核细胞在对象中存活少于或等于4天。在一些实施方案中，所述疾病或病症是癌症或赘生物。在一些实施方案中，所述异常脉管系统是在所述对象的肺中。在一些实施方案中，所述方法还包括向所述对象施用cpi-006、莫那利珠单抗(monalizumab)、com701、cm24、neo-201、地法替尼(defactinib)、pf-04136309、msc-1、hu5f9-g4(5f9)、alx148、tti-662、rrx-001、拉妥珠单抗(lacnotuzumab，mcs110)、ly3022855、sndx-6352、依米妥珠单抗(emactuzumab，rg7155)、培西达替尼(pexidartinib，plx3397)、can04、卡那单抗(canakinumab，acz885)、bms-986253、派比奈单抗(pepinemab，vx15/2503)、曲巴那尼(trebananib)、fp-1305、纬恩泊妥单抗(enapotamabvedotin，enav)、巴维妥昔单抗(bavituximab)或其组合。

23、通过引用并入

24、本说明书中提到的所有出版物、专利和专利申请都通过引用并入本文，其并入程度如同每个单个的出版物、专利或专利申请被明确且单个地指示通过引用并入。就通过引用并入的出版物和专利或专利申请与本说明书中包含的公开内容相矛盾而言，本说明书旨在取代和/或优先于任何这种矛盾的材料。