一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球及其制备方法与应用

本发明涉及功能材料领域，特别是涉及一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球及其制备方法与应用。

背景技术：

1、肺癌是全球最常见最致命的恶性肿瘤之一，其中非小细胞肺癌(nsclc)约占所有新诊断肺癌的85％。肺癌首选治疗方案为手术切除，但由于60％肺癌患者确诊时已进入进展期，手术切除率不及半数，而传统的放、化疗手段有效率较低。目前，传统的铂类化疗方案的研究和临床应用进入了瓶颈期，单纯的化疗有效率低，随着治疗周期的增长，毒副作用不断累积。除传统治疗手段外，还有介入治疗，免疫治疗等新兴的治疗手段，但均有各自的不足与局限性。

2、近年来，肺癌靶向治疗发展迅速，己有相当数量的靶向抑制剂上市，用于临床治疗研究，但现有技术中，此类靶向制剂在取得良好临床效果的同时也存在着一些不可避免的问题，例如患者长期使用egfr-tki类药物后均会产生耐药性，同样针对alk基因的靶向药物也具有耐药性等。

3、因此，如何提供一种新型靶向制剂系统用于肺癌的治疗是本领域技术人员亟需解决的技术问题。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球及其制备方法与应用，以解决上述现有技术存在的问题，为抗肺癌药物的制备提供新的思路。

2、为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

3、一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球的制备方法，包括以下步骤：

4、(1)大豆分离蛋白微球的制备：

5、将大豆分离蛋白溶于缓冲溶液中，调节ph＝10，搅拌反应6h后逐滴加入溴酸钠溶液，避光继续搅拌反应60min，然后利用煮好的(蒸馏水煮沸30min)透析袋透析三天，再将透析袋中所得溶液冷冻干燥，即得大豆分离蛋白微球；

6、(2)偶联大豆分离蛋白-羟基喜树碱微球的制备：

7、将所述大豆分离蛋白微球溶于有机溶剂中超声分散，再边搅拌边向其中滴入羟基喜树碱溶液后，依次进行高压均质、旋转蒸发、冷冻干燥，得到偶联大豆分离蛋白-羟基喜树碱微球；

8、(3)绿原酸偶联大豆分离蛋白-羟基喜树碱微球的制备：

9、将所述偶联大豆分离蛋白-羟基喜树碱微球加入绿原酸甲醇溶液中，匀浆搅拌后依次进行高压均质、旋转蒸发、冷冻干燥，即得绿原酸偶联大豆分离蛋白-羟基喜树碱微球。

10、有益效果：大豆分离蛋白作为fda批准的gras级辅料，由于其成本低、生物相容性良好，是一种理想的微球载体材料。其作为一种天然的两亲性分子材料，与其他蛋白质相比，具有较大比例的亲水性氨基酸，通过适当氧化剂和偶联剂作用，能够包裹疏水性药物，组装成稳定的微球粒，适合包载疏水性药物分子。

11、绿原酸是一种生物活性多酚类化合物，主要存在于植物中，具有效抗病毒，抗真菌抗氧化和抗肿瘤特性。在严格控制抗菌药物和多药耐药盛行的今天，广泛应用于呼吸系统感染性疾病。另外，绿原酸可以被肺组织大量摄取，在肺组织浓度高，且肺癌组织中具有绿原酸受体，经过绿原酸修饰的微球具有良好的肺靶向性，为肺癌化疗药物靶向治疗提供了方向。

12、优选的，步骤(1)中所述缓冲溶液为na2co3-nahco3缓冲溶液，且ph＝9.6；

13、所述溴酸钠溶液的质量浓度为1.8％，且滴加速度为5-60滴/min；

14、所述大豆分离蛋白、缓冲溶液和溴酸钠溶液的添加量之比为50mg:20ml:5ml；

15、所述调节ph为利用浓度为1mol/l的碳酸钠进行调节；

16、所述透析袋分子量为3500，所述透析介质为蒸馏水。

17、优选的，步骤(1)中所述搅拌速率为100r/min；

18、所述继续搅拌速率为200r/min；

19、所述冷冻干燥具体包括以下步骤：

20、将透析袋中所得溶液加入到冻干瓶中，在-40℃条件下预冻2小时，之后在-64℃条件下冷冻干燥48小时。

21、优选的，步骤(2)中所述有机溶剂为氯仿和无水乙醇的混合溶剂，其中氯仿和无水乙醇的体积比为7:3；

22、所述大豆分离蛋白微球在所述有机溶剂中的浓度为50-200mg/ml；

23、所述羟基喜树碱溶液浓度为2.3mg/ml。

24、优选的，步骤(2)中所述超声功率为5kw，超声时间为5-10min；

25、所述搅拌速率为200r/min，搅拌时间为50min；

26、所述高压均质压力为3kpa；

27、所述冷冻干燥具体包括以下步骤：

28、将旋转蒸发后得到的水分散液在-40℃的条件下预冻2小时，之后在-60℃的条件下冷冻干燥64小时。

29、优选的，步骤(3)中所述绿原酸溶液为浓度166.9mg/400ml的绿原酸甲醇溶液。

30、优选的，步骤(3)中所述匀浆搅拌速率为200r/min，匀浆时间为50min；

31、所述冷冻干燥为在-10℃下冷冻干燥64小时。

32、优选的，步骤(2)和(3)中所述旋转蒸发转速为80-940r/min。

33、一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球的制备方法制备得到的羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球。

34、一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球在抗肺部肿瘤药物的制备中的应用。

35、本发明公开了以下技术效果：本发明提供的靶向微球具有能够延长血液循环时间、改善药物溶解性、改变药物的给药途径、控制药物的释放等优点，并能通过增强的渗透性和保留(epr)效应积聚于肿瘤组织中，其作为肿瘤等重大疾病的新治疗手段，在提高药效及降低毒性方面具有独特性质和优势。其次，本发明中的大豆分离蛋白由于其良好生物相容性、无毒、体内生物降解性和自组装能力，为微球药物输送系统的理想载体。本发明中使用大豆分离蛋白与其他蛋白质相比，具有较大比例的亲水性氨基酸，这使其能够包裹绿原酸并组装成稳定的微球，进而能够为肺癌的靶向治疗提供新的途径。此外，本发明提供的制备方法简便，利于放大生产。

技术特征：

1.一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球的制备方法，其特征在于：

3.根据权利要求1所述的一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球的制备方法，其特征在于：

4.根据权利要求1所述的一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球的制备方法，其特征在于：

5.根据权利要求1所述的一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球的制备方法，其特征在于：

6.根据权利要求1所述的一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述绿原酸溶液为浓度166.9mg/400ml的绿原酸甲醇溶液。

7.根据权利要求1所述的一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述匀浆搅拌速率为200r/min，匀浆时间为50min；

8.根据权利要求1所述的一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球的制备方法，其特征在于：步骤(2)和(3)中所述旋转蒸发转速为80-940r/min。

9.一种如权利要求1-8任一所述的羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球的制备方法制备得到的羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球。

10.一种如权利要求9所述的羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球在抗肺部肿瘤药物的制备中的应用。

技术总结
本发明公开一种羟基喜树碱恶性肿瘤靶向微球的制备方法，属于功能材料技术领域，包括以下步骤：(1)大豆分离蛋白微球的制备；(2)偶联大豆分离蛋白‑羟基喜树碱微球的制备；(3)绿原酸偶联大豆分离蛋白‑羟基喜树碱微球的制备。同时本发明中还公开了上述制备方法制备得到的靶向微球以及该靶向微球在抗肺部肿瘤药物的制备中的应用。本发明提供的靶向微球具有能够延长血液循环时间、改善药物溶解性、改变药物的给药途径、控制药物的释放等优点，本发明中使用大豆分离蛋白与其他蛋白质相比，具有较大比例的亲水性氨基酸，能够包裹绿原酸并组装成稳定的微球。此外，本发明提供的制备方法简便，利于放大生产。

技术研发人员：杜会强,郑新华,李玖零,毛冬雪,何佩娜
受保护的技术使用者：平顶山学院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13