僵尸化巨噬细胞在炎性疾病靶向药物递送载体中的应用

本发明属于药物，更具体地，本发明涉及一种僵尸化巨噬细胞在炎性疾病靶向药物递送载体中的应用、一种炎性疾病靶向药物递送载体、以及一种治疗炎性疾病的药物及其制备方法。

背景技术：

1、近年来，细胞介导的药物递送系统在疾病治疗中增强疗效的特异性和功效已经受到相当大的关注。巨噬细胞作为天然免疫细胞具有较长的血液半衰期，并可被特异性招募到疾病的炎症部位。此外，巨噬细胞可以吞噬自然界中的外来颗粒，可以直接吞噬药物，继而将药物输送到疾病部位。因此，研究人员寻求利用活的巨噬细胞作为药物的仿生递送载体，有研究者利用活的巨噬细胞将化疗药物靶向递送到肿瘤中使药物在肿瘤中的蓄积显著增加。活的巨噬细胞作为药物递送载体，与血液中的其他细胞如红细胞、中性粒细胞相比，具有一样长的血液循环周期，同时也能通过巨噬细胞的α4和β1整合素与炎症病变部位的血管细胞粘附分子-1(vcam-1)结合。

2、尽管巨噬细胞介导的仿生给药系统已被广泛应用，但活的巨噬细胞介导的药物靶向递送方法在治疗炎症性疾病方面收效甚微。主要原因是巨噬细胞可以被炎症部位的细胞因子(如ifn-γ和tnf-α)或细菌脂多糖(lps)识别并诱导为促炎m1型巨噬细胞，这反过来又导致了炎症性疾病中活的巨噬细胞作为药物载体的缺陷。它们还存在着易被肿瘤微环境驯化为促进肿瘤的m2型巨噬细胞发挥促进肿瘤病理进程的作用。目前已有将巨噬细胞作为临床药物的靶向递送载体策略被试验，并且在小鼠实验上也取得了一定的治疗效果。但是这些策略依旧存在一定的局限性，没有从根本上解决细胞被驯化的问题。

3、因此，寻找新的、具有炎症病灶归巢以及驻留的、可以避免巨噬细胞被疾病微环境驯化的巨噬细胞仿生递送载体策略将会为炎症性疾病的治疗提供新的靶向递送方式和希望。

技术实现思路

1、基于此，本发明的目的在于提供一种僵尸化巨噬细胞在炎性疾病靶向药物递送载体中的应用、一种炎性疾病靶向药物递送载体、以及一种治疗炎性疾病的药物及其制备方法。

2、实现上述发明目的的技术方案包括如下。

3、本发明的第一方面，提供了僵尸化巨噬细胞在炎性疾病靶向药物递送载体中的应用，所述应用包括以下步骤：将抗炎药物或封装有抗炎药物的纳米颗粒与巨噬细胞共孵育；再置于细胞冻存液中，-196±4℃的液氮中常压冻存10h～15h；再于37℃～42℃恒温解冻至细胞冻存液完全溶解。

4、本发明的第二方面，提供了一种炎性疾病靶向药物递送载体，其是通过以下方法制备而得：将抗炎药物或封装有抗炎药物的纳米颗粒与巨噬细胞共孵育；再置于细胞冻存液中，-196±4℃的液氮中常压冻存10h～15h；再于37℃～42℃恒温解冻至细胞冻存液完全溶解。

5、本发明的第三方面，提供了一种治疗炎性疾病的药物，所述药物是通过以下方法制备而得：将抗炎药物或封装有抗炎药物的纳米颗粒与巨噬细胞共孵育；再置于细胞冻存液中，-196±4℃的液氮中常压冻存10h～15h；再于37℃～42℃恒温解冻至细胞冻存液完全溶解。

6、本发明的第四方面，提供了一种治疗炎性疾病的药物的制备方法，包括以下步骤：将抗炎药物或封装有抗炎药物的纳米颗粒与巨噬细胞共孵育；再置于细胞冻存液中，-196±4℃的液氮中常压冻存10h～15h；再于37℃～42℃恒温解冻至细胞冻存液完全溶解。

7、本发明的发明人发现，载药巨噬细胞被僵尸化后，能够避免被炎症因子驯化为m1型巨噬细胞，且依旧保留了大部分活细胞所表达的蛋白，仍然具有炎症部位的归巢以及驻留能力，因此，僵尸化巨噬细胞是潜在的作为治疗炎症性疾病药物的靶向递送载体，对于巨噬细胞作为药物载体的递送策略将会提供更加广阔的应用前景，将会更加有利于巨噬细胞作为药物仿生递送载体的发展。

技术特征：

1.僵尸化巨噬细胞在炎性疾病靶向药物递送载体中的应用，其特征在于，所述应用包括以下步骤：将抗炎药物或封装有抗炎药物的纳米颗粒与巨噬细胞共孵育；再置于细胞冻存液中，-196±4℃的液氮中常压冻存10h～15h；再于37℃～42℃恒温解冻至细胞冻存液完全溶解。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述炎性疾病为动脉粥样硬化或炎症性肠病。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗炎药物为阿托伐他汀、辛伐他汀或卡托普利。

4.根据权利要求1～3任一项所述的应用，其特征在于，所述液氮温度为-196±1℃；和/或所述冻存时间为12h～14h。

5.根据权利要求1～3任一项所述的应用，其特征在于，所述解冻温度为37℃～38℃。

6.根据权利要求1～3任一项所述的应用，其特征在于，所述巨噬细胞为raw264.7或小鼠骨髓原代巨噬细胞bmdms。

7.根据权利要求1～3任一项所述的应用，其特征在于，所述纳米颗粒为ros响应型纳米颗粒。

8.一种炎性疾病靶向药物递送载体，其特征在于，其是通过以下方法制备而得：将抗炎药物或封装有抗炎药物的纳米颗粒与巨噬细胞共孵育；再置于细胞冻存液中，-196±4℃的液氮中常压冻存10h～15h；再于37℃～42℃恒温解冻至细胞冻存液完全溶解。

9.一种治疗炎性疾病的药物，其特征在于，所述药物是通过以下方法制备而得：将抗炎药物或封装有抗炎药物的纳米颗粒与巨噬细胞共孵育；再置于细胞冻存液中，-196±4℃的液氮中常压冻存10h～15h；再于37℃～42℃恒温解冻至细胞冻存液完全溶解。

10.权利要求9所述的治疗炎性疾病的药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将抗炎药物或封装有抗炎药物的纳米颗粒与巨噬细胞共孵育；再置于细胞冻存液中，-196±4℃的液氮中常压冻存10h～15h；再于37℃～42℃恒温解冻至细胞冻存液完全溶解。

技术总结
本发明公开了僵尸化巨噬细胞在炎性疾病靶向药物递送载体中的应用，所述应用包括以下步骤：将抗炎药物或封装有抗炎药物的纳米颗粒与巨噬细胞共孵育；再置于细胞冻存液中，‑196±4℃的液氮中常压冻存10h～15h；再于37℃～42℃恒温解冻至细胞冻存液完全溶解。本发明的发明人发现，载药巨噬细胞被僵尸化后，能够避免被炎症因子驯化为M<subgt;1</subgt;型巨噬细胞，且依旧保留了大部分活细胞所表达的蛋白，仍然具有炎症部位的归巢以及驻留能力，因此，僵尸化巨噬细胞是潜在的作为治疗炎症性疾病药物的靶向递送载体，对于巨噬细胞作为药物载体的递送策略将会提供更加广阔的应用前景，将会更加有利于巨噬细胞作为药物仿生递送载体的发展。

技术研发人员：郭伟圣,姚玉莹,陈浩庭
受保护的技术使用者：广州医科大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14