牦牛血浆外泌体在制备抗缺氧损伤药物中的应用

本发明属于生物，涉及一种牦牛血浆外泌体在制备抗缺氧应激损伤药物和食品中的应用。

背景技术：

1、高原地区海拔高，是指海拔高度在1000米以上，相对高度500米以上的地区，地势相对平坦或者有一定起伏的广阔地区，具有寒冷干燥，低大气压，氧气含量少，高辐射等气候特征，可引起由低海拔平原地区进入高原人员机体缺氧，引发氧化应激反应，组织缺氧从而引起急性或慢性高原病，严重影响人类健康。而人脑是机体对缺氧最敏感的器官，海马是脑内对缺氧较敏感的部位之一。

2、外泌体是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构，内部包裹了蛋白、mrna和microrna等物质。包括肿瘤细胞在内的几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。外泌体由细胞分泌释放出来，在括血液、唾液、尿液和母乳等体液内传播，最后又可被其他细胞吞噬，是细胞间通讯的重要介质。外泌体由于自身脂质包裹体及表达特异的靶标肽的特殊结构，不仅可以保护内部包裹的核酸和蛋白不受外界体液环境影响，而且还通过靶标肽与靶细胞受体的结合达到精准调控的作用。外泌体通过上述途径参与了多种疾病的发生和发展。比如：khan等发现研究鼠胚胎干细胞分泌的外泌体，可以显著降低小鼠的心肌梗死面积；又比如，最近vicencio等通过将健康人和健康大鼠的血浆外泌体通过尾静脉注射的方式注入心肌梗死模型大鼠中，显著提高了心肌耐缺血能力。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种牦牛血浆外泌体在制备抗缺氧应激损伤药物和/或保健食品中的应用。

2、为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、1.牦牛血浆外泌体在制备预防和/或治疗缺氧损伤的药物中的应用。

4、进一步所述牦牛血浆外泌体的应用中，所述应用具体为牦牛血浆外泌体降低细胞缺氧时的mda含量。

5、进一步所述牦牛血浆外泌体的应用中，所述应用具体为牦牛血浆外泌体提高细胞缺氧时的sod活力。

6、进一步所述牦牛血浆外泌体的应用中，所述应用具体为牦牛血浆外泌体降低细胞缺氧时的活性氧。

7、进一步所述牦牛血浆外泌体的应用中，所述应用具体为牦牛血浆外泌体抑制炎症因子il1-β的表达。

8、2、牦牛血浆外泌体在制备预防和/或治疗缺氧损伤的保健食品中的应用。

9、具体的，应用时，牦牛血浆外泌体降低细胞缺氧时的mda含量和细胞缺氧时的活性氧，提高细胞缺氧时的sod活力。

10、具体的，应用时，牦牛血浆外泌体还抑制炎症因子il1-β的表达。

11、上述牦牛血浆外泌体的制备方法为：

12、(1)取牦牛血浆样本在冰上融化，3000g离心30min 4℃，取上清；

13、(2)按每300μl血浆加入3μl凝血酶，快速颠倒混匀；

14、(3)37℃孵育5min后血浆变浑浊，离心取上清；

15、(4)再加入63μl exoquick试剂，混匀后4℃静止30min；

16、(5)1500g离心30min，弃上清；

17、(6)再次1500g离心30min，弃残液；

18、(7)加pbs重悬沉淀后用0.22μm滤膜过滤即可。

19、本发明的有益效果在于：本发明所提取的牦牛血浆外泌体含有多种基因的表达调控物质，可靶向介导的细胞生物功能，使机体组织具有良好的缺氧适应机制。从而通过外源性补充含有牦牛血浆外泌体的药物或者保健食品，降低细胞缺氧时的mda含量和ros，提高缺氧后细胞sod活力，继而达到调控机体内于高原适应/高原急病相关基因表达的作用，使得快速促进高原适应成为可能。

技术特征：

1.牦牛血浆外泌体的应用，其特征在于，所述牦牛血浆外泌体在制备预防和/或治疗缺氧损伤的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述牦牛血浆外泌体的应用，其特征在于，所述应用具体为牦牛血浆外泌体降低细胞缺氧时的mda含量。

3.根据权利要求1所述牦牛血浆外泌体的应用，其特征在于，所述应用具体为牦牛血浆外泌体提高细胞缺氧时的sod活力。

4.根据权利要求1所述牦牛血浆外泌体的应用，其特征在于，所述应用具体为牦牛血浆外泌体降低细胞缺氧时的活性氧。

5.根据权利要求1所述牦牛血浆外泌体的应用，其特征在于，所述应用具体为牦牛血浆外泌体抑制炎症因子il1-β在脑组织中的表达。

6.根据权利要求1所述牦牛血浆外泌体的应用，其特征在于，所述应用具体为牦牛血浆外泌体提高脑组织中还原型谷胱甘肽的含量。

7.根据权利要求1所述牦牛血浆外泌体的应用，其特征在于，所述牦牛血浆外泌体的制备方法为：

8.牦牛血浆外泌体的应用，其特征在于，所述牦牛血浆外泌体在制备预防和/或治疗缺氧损伤的保健食品中的应用。

9.根据权利要求7所述牦牛血浆外泌体的应用，其特征在于，所述应用具体为牦牛血浆外泌体提高细胞缺氧时的sod活力。

10.根据权利要求7所述牦牛血浆外泌体的应用，其特征在于，所述应用具体为牦牛血浆外泌体降低细胞缺氧时的活性氧。

技术总结
本发明涉及一种牦牛血浆外泌体在制备预防和/或治疗缺氧损伤药物中的应用。本发明提取的牦牛血浆外泌体含有多种调控基表达因的活性物质，可靶向介导的细胞生物功能，使机体组织具有良好的缺氧适应能力。通过外源性补充含有牦牛血浆外泌体的药物或者保健食品，降低细胞缺氧时的MDA和ROS含量，提高缺氧后细胞SOD活力；并抑制缺氧后小鼠脑组织炎症因子IL1‑β的表达，同时提高小鼠脑组织中还原型谷胱甘肽(GSH)的含量，从而达到抗缺氧效应。

技术研发人员：孙滨达,高钰琪,张二龙,刘宝,陈建,徐刚,吴刚,赵文琦
受保护的技术使用者：中国人民解放军陆军军医大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15