人参皂苷Ro防治心血管疾病的新用途的制作方法

本发明涉及生物医药领域，具体地说是人参皂苷ro防治心血管疾病的新用途。

背景技术：

1、心血管疾病，是全球死亡和致残的主要原因。急性心肌梗死(acutemyocardialinfarction，ami)多继发于多种因素引起的冠状动脉粥样硬化的斑块破裂，发生出血或诱发急性闭塞性血栓，堵塞冠脉，使局部心肌细胞供血急剧减少或完全中断，发生急性、持续性缺血缺氧，导致局部心肌坏死，最终发展为心衰。急性心梗是心血管疾病致死的主要原因，其发病迅速、死亡率高且预后不良，严重威胁人们的健康。因此，寻找防治急性心梗改善心血管疾病的药物具有重要意义。

2、为此，本领域技术人员提出了人参皂苷ro用于预防、缓解和/或治疗急性心梗等心血管疾病。

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本发明提供人参皂苷ro防治心血管疾病的新用途，以解决背景技术中提出的问题。

2、人参皂苷ro防治心血管疾病的新用途，包括：

3、实验对象：雄性c57bl/6j小鼠；

4、分组：将实验对象分为假手术组、假手术+人参皂苷ro组、模型组、人参皂苷ro低剂量组、人参皂苷ro中剂量组、人参皂苷ro高剂量组、阳性药卡托普利组，共7组，每组12只；

5、给药：假手术组于术前2h灌胃等量生理盐水，1次；假手术+人参皂苷ro组于术前2h灌胃人参皂苷ro80mg/kg，1次；模型组于术前2h灌胃等量生理盐水1次；人参皂苷ro低剂量组于术前2h灌胃人参皂苷ro20mg/kg，1次；人参皂苷ro中剂量组于术前2h灌胃人参皂苷ro40mg/kg，1次；人参皂苷ro高剂量组于术前2h灌胃人参皂苷ro80mg/kg，1次；阳性药卡托普利组于术前2h腹腔注射卡托普利160mg/kg，1次；

6、模型制备：腹腔注射实验对象3％戊巴比妥钠，麻醉后仰卧位固定，连接人工呼吸机，剪去实验对象胸部的毛，碘伏消毒，在胸骨左侧作一纵行切口，钝性分离胸大肌，暴露第四根肋骨，用止血钳将胸腔打开并撕开心包，暴露心脏，轻压胸廓将心脏挤出胸腔外，用丝线在冠状动脉左前降支下方3mm处和线穿过的心肌组织一起结扎，将心脏迅速放回胸腔，并将胸腔空气完全挤出后缝合；

7、各组实验对象分别在结扎后24h后取血和心脏组织。

8、其中，测定心肌梗死面积的方法为：摘取心脏，置于-20℃冰箱冷冻6h后，从心尖开始，迅速1mm左右的薄片，共取5片，再将切片置于含1％ttc，ph7.4染液的6孔细胞培养板中，37℃孵育箱中避光孵育20min后取出，吸去多余的染液，并记录，采用图像分析系统imagej测量心肌梗死面积，计算其占心脏面积百分比，再统计分析。

9、其中，检测血清肌钙蛋白ctnt以及肌酸激酶同工酶ck-mb的方法为：各组小鼠造模24h后，进行眼眶取血；室温静置30min后，以3500rpm离心10min，取上清并分装保存并检测。

10、其中，对心脏组织病理损伤的检测方法为：各组小鼠取血后摘取心脏，在预冷pbs溶液中挤出残留血液，滤纸吸干残液，使用4％多聚甲醛溶液固定心脏组织24h，采用石蜡包埋，进行he和masson染色。

11、其中，所有数据采用graphpadprism8软件统计，以mean±sem表示，两组间的比较用students't检验，三组或三组以上比较用单因素方差分析，用dunnett's检验。

12、其中，人参皂苷ro在防治心血管疾病中的医药用途。

13、其中，所述心血管疾病包括急性心梗，因冠状动脉血流急性受阻导致心肌严重缺血坏死，临床多表现为恶性心率失常、心源性休克，继而诱发心力衰竭。

14、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

15、本发明通过人参皂苷ro用于治疗急性心梗相关疾病，具有心脏保护效应，预给药人参皂苷ro2h后采用冠脉结扎诱导急性心肌梗死小鼠模型，通过测定心脏梗死面积、血清肌钙蛋白ctnt含量以及肌酸激酶同工酶ck-mb活性、心脏组织病理损伤等指标，其有效减少冠脉结扎诱导的急性心梗小鼠的心脏梗死面积，降低血清中肌钙蛋白ctnt以及肌酸激酶同工酶ck-mb活性，显著减轻心梗小鼠心脏组织病理损伤，证实人参皂苷ro具有显著改善心肌缺血诱导的急性心梗的作用，证实人参皂苷ro可用于防治急性心梗，有效剂量低，具有广阔的应用前景。

技术特征：

1.人参皂苷ro防治心血管疾病的新用途，其特征在于，包括：

2.如权利要求1所述人参皂苷ro防治心血管疾病的新用途，其特征在于：测定心肌梗死面积的方法为：摘取心脏，置于-20℃冰箱冷冻6h后，从心尖开始，迅速1mm左右的薄片，共取5片，再将切片置于含1％ttc，ph7.4染液的6孔细胞培养板中，37℃孵育箱中避光孵育20min后取出，吸去多余的染液，并记录，采用图像分析系统image j测量心肌梗死面积，计算其占心脏面积百分比，再统计分析。

3.如权利要求1所述人参皂苷ro防治心血管疾病的新用途，其特征在于：检测血清肌钙蛋白ctnt以及肌酸激酶同工酶ck-mb的方法为：各组小鼠造模24h后，进行眼眶取血；室温静置30min后，以3500rpm离心10min，取上清并分装保存并检测。

4.如权利要求1所述人参皂苷ro防治心血管疾病的新用途，其特征在于：对心脏组织病理损伤的检测方法为：各组小鼠取血后摘取心脏，在预冷pbs溶液中挤出残留血液，滤纸吸干残液，使用4％多聚甲醛溶液固定心脏组织24h，采用石蜡包埋，进行he和masson染色。

5.如权利要求2-4任一所述人参皂苷ro防治心血管疾病的新用途，其特征在于：所有数据采用graphpad prism 8软件统计，以mean±sem表示，两组间的比较用students't检验，三组或三组以上比较用单因素方差分析，用dunnett's检验。

6.如权利要求1所述人参皂苷ro防治心血管疾病的新用途，其特征在于：人参皂苷ro在防治心血管疾病中的医药用途。

7.如权利要求6所述人参皂苷ro防治心血管疾病的新用途，其特征在于：所述心血管疾病包括急性心梗，因冠状动脉血流急性受阻导致心肌严重缺血坏死，临床多表现为恶性心率失常、心源性休克，继而诱发心力衰竭。

技术总结
本发明涉及生物医药领域，提供了人参皂苷Ro防治心血管疾病的新用途，本发明发现人参皂苷Ro可显著减少冠脉结扎诱导的急性心梗AM I小鼠心脏梗死面积，降低血清肌钙蛋白cTnT含量以及肌酸激酶同工酶CK‑MB活性，显著减轻心梗小鼠心脏组织病理损伤，具有有效剂量低、起效快等优势，根据结果，人参皂苷Ro可用于防治心血管疾病。

技术研发人员：刘金成,屈素君,柯清华
受保护的技术使用者：荆门市中心医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15