TRPA1离子通道作为药物靶点在酰胺类除草剂中毒中的应用

本发明属于生物医药领域，涉及一种trpa1离子通道作为药物靶点在酰胺类除草剂中毒中的应用。

背景技术：

1、酰胺类除草剂是一类含有典型苯环结构的除草农药，主要包括敌稗、异丙草胺、异丙甲草胺、甲草胺、乙草胺、丙草胺和丁草胺等亲电有机小分子化合物，在我国年产量高达十万吨以上，具有高效、高选择性的除草效果得到广泛应用。酰胺类除草剂易在环境中发生迁移和富集，环境残留量高，水解半衰期长，可以通过食物链传递进入人体，干扰内分泌功能甚至导致肺肝等癌变，威胁人类健康和生态安全，但目前尚无应对酰胺类除草剂中毒的特效解毒药物。因而探究酰胺类除草剂的中毒机制，研发酰胺类除草剂靶点治疗药物对酰胺类除草剂中毒救治具有重要意义。

技术实现思路

1、一些实施方案中，本发明提供了一种以trpa1作为药物作用靶点的药物在制备预防或治疗酰胺类化合物中毒引起的病症的药物中的应用。

2、一些实施方案中，所述病症包括肺损伤、肝损伤、甲状腺损伤、免疫毒性、或胚胎发育毒性等症状，但又不限于此。

3、一些实施方案中，所述的肺损伤包括肺泡上皮细胞损伤。

4、一些实施方案中，所述肺泡上皮细胞损伤包括细胞活力降低、细胞毒性增加、细胞钙内流增加。

5、一些实施方案中，所述的酰胺类化合物为酰胺类除草剂。

6、一些实施方案中，所述的酰胺类化合物包括敌稗、异丙草胺、异丙甲草胺、甲草胺、乙草胺、丙草胺、丁草胺、扑草胺、乙氧苯草胺、双苯酰草胺、萘草胺、吡氟酰草胺、二甲噻草胺、萘氧丙草胺、敌草胺、稗草胺、萘丙酰草胺、克草胺、苯噻草胺、吡草胺、溴丁酰草胺、氟噻草胺、烯草胺、唑草胺、甲氧噻草胺、氟丁酰草胺、二甲噻草胺、高效二甲噻草胺、氟吡草胺、异噁草胺、高效异丙甲草胺、高效麦草伏甲酯或高效麦草伏丙酯，但又不限于此。

7、一些实施方案中，所述以trpa1作为药物作用靶点的药物包括抑制trpa1基因、trpa1mrna或trpa1蛋白质的抑制剂。

8、一些实施方案中，所述抑制剂包括抑制trpa1离子通道功能的抑制剂。

9、瞬时受体电位离子通道(transient receptor potential ion channels,trps)是近年来发现存在于细胞膜或胞内细胞器膜上的非选择性阳离子通道，对ca2+等阳离子具有高通透性，与化学物质所诱导的痛觉或瘙痒有关。其中瞬时受体电位阳离子通道亚家族a成员1(transient receptor potential cation channel subfamily a member 1,trpa1)广泛分布于肺、脑等器官细胞膜或细胞器膜上，被认为是“化学开关”，可以被肉桂醛、大蒜素、甲醛、丙烯醛、异硫氰酸烯丙酯等多种现有化合物激活，引起钙离子内流，产生炎症或疼痛反应。本发明提供trpa1作为酰胺类除草剂中毒诊断和防治新靶点的用途。本发明的研究结果显示，trpa1与酰胺类除草剂中毒均密切相关，抑制或敲除trpa1靶点均能够通过降低酰胺类除草剂引起的trpa1表达增加及钙离子内流，最终降低酰胺类除草剂引起的肺泡上皮细胞毒性。因此，本发明为酰胺类除草剂中毒诊断和基于trpa1靶点的药物研发提供了广谱性治疗手段的新思路。

10、一些实施方案中，所述的抑制剂选自抑制trpa1活性的物质、降解trpa1的物质、降低trpa1水平的基因工具组成的群组中的至少一种。

11、一些实施方案中，所述的抑制剂包括化合物、肽类拮抗剂、特异性针对trpa1的第二种抗体、sirna或特异性针对trpa1的反义分子。

12、一些实施方案中，所述抑制或降解trpa1的物质包括蛋白或化合物。

13、一些实施方案中，所述的降低trpa1水平的基因工具包括rna干扰、microrna、基因编辑或基因敲除材料。

14、一些实施方案中，所述基因编辑或基因敲除使用的是crispr-cas9基因敲除技术。

15、一些实施方案中，所述的抑制剂包括trpa1离子通道阻断剂或豆蔻明。

16、一些实施方案中，所述的trpa1离子通道阻断剂包括hc-030031、a-967079、tcs5861528、或chembridge-5861528中的至少一种。

17、一些实施方案中，所述的药物还包括药学上可接受的辅料和/或载体。

18、一些实施方案中，所述药物的剂型包括干粉针、注射剂、片剂、胶囊。

19、一些实施方案中，本发明提供了一种组合物在制备预防或治疗酰胺类化合物中毒引起的病症的药物中的用途，其特征在于，所述组合物包含有效量的药物，所述药物为以trpa1作为药物作用靶点的药物。

20、一些实施方案中，所述病症包括肺损伤、肝损伤、甲状腺损伤、免疫毒性、或胚胎发育毒性等症状，但又不限于此。

21、一些实施方案中，所述的肺损伤包括肺泡上皮细胞损伤。

22、一些实施方案中，所述肺泡上皮细胞损伤包括细胞活力降低、细胞毒性增加、细胞钙内流增加。

23、一些实施方案中，所述的酰胺类化合物为酰胺类除草剂。

24、一些实施方案中，所述的酰胺类化合物包括敌稗、异丙草胺、异丙甲草胺、甲草胺、乙草胺、丙草胺、丁草胺、扑草胺、乙氧苯草胺、双苯酰草胺、萘草胺、吡氟酰草胺、二甲噻草胺、萘氧丙草胺、敌草胺、稗草胺、萘丙酰草胺、克草胺、苯噻草胺、吡草胺、溴丁酰草胺、氟噻草胺、烯草胺、唑草胺、甲氧噻草胺、氟丁酰草胺、二甲噻草胺、高效二甲噻草胺、氟吡草胺、异噁草胺、高效异丙甲草胺、高效麦草伏甲酯或高效麦草伏丙酯中的至少一种。

25、一些实施方案中，所述以trpa1作为药物作用靶点的药物包括抑制trpa1基因、trpa1mrna或trpa1蛋白质的抑制剂。

26、一些实施方案中，所述抑制剂包括抑制trpa1离子通道功能的抑制剂。

27、一些实施方案中，所述的抑制剂选自抑制trpa1活性的物质、降解trpa1的物质、降低trpa1水平的基因工具组成的群组中的至少一种。

28、一些实施方案中，所述化合物、肽类拮抗剂、特异性针对trpa1的第二种抗体、sirna或特异性针对trpa1的反义分子。

29、一些实施方案中，所述抑制或降解trpa1的物质包括蛋白或化合物。

30、一些实施方案中，所述的降低trpa1水平的基因工具包括rna干扰、microrna、基因编辑或基因敲除材料。

31、一些实施方案中，所述基因编辑或基因敲除使用的是crispr-cas9基因敲除技术。

32、一些实施方案中，所述的抑制剂包括trpa1离子通道阻断剂或豆蔻明。

33、一些实施方案中，所述的trpa1离子通道阻断剂包括hc-030031、a-967079、tcs5861528、或chembridge-5861528中的至少一种。

34、一些实施方案中，所述的药物还包括药学上可接受的辅料和/或载体。

35、一些实施方案中，所述药物的剂型包括干粉针、注射剂、片剂、胶囊。

36、一些实施方案中，本发明提供了一种trpa1的检测试剂在制备检测酰胺类化合物中毒的诊断试剂中的应用。

37、一些实施方案中，所述检测试剂为检测trpa1的基因表达量。

38、一些实施方案中，所述检测试剂为检测trpa1的mrna表达量。

39、一些实施方案中，所述检测试剂为检测trpa1蛋白的表达量。

40、一些实施方案中，所述检测试剂包括荧光定量pcr染料、荧光定量pcr引物、荧光定量pcr探针、抗体、抗体功能性片段和偶联抗体中的一种或多种。

41、在一些实施方案中，当怀疑患者农药或除草剂中毒、尤其是酰胺类除草剂中毒时，可以采用trpa1检测试剂进行检测，如检测到trpa1提高的表达量，则提示上述除草剂中毒的可能性大。在一些实施方案中，当怀疑或确认患者为酰胺类除草剂中毒时，可以施用trpa1抑制剂进行治疗。在一些实施方案中，当怀疑患者除草剂中毒、尤其是酰胺类除草剂中毒时，可以先进行trpa1检测，当结果显示出提高的trpa1表达量时，施用trpa1抑制剂。